Mikroskopia tmavého poľa (DFM)

Čas čítania 4 zápisnice

DFM je technika analýzy zložiek krvi a mikroorganizmov, ktorá je známa už od 17. storočia.

Klinicky sa používa na diagnostiku Spirochetes (gramnegatívne, špirálovité, aktívne sa pohybujúce Baktérie, ako Leptospíry, Treponemy) a Plasmodium species (Parazity malárie), ako aj na detekciu E.coli vo vzorkách vody a patogén malárie.

Ďalšou aplikáciou, ktorá nie je vedecky podložená, je tzv. Analýza vitálnej krvi / mikroskopia v tmavom poli podľa Enderleina.

V nasledujúcom texte bude predstavená história DFM, oblasti použitia vedecky preukázané štúdiami, ako aj Enderleinova teória Pleomorfizmus a súvisiace informácie.

História

Antoni van Leeuwenhoek (1632 - 1723, holandský prírodovedec a najvýznamnejší mikroskopista), Robert Hooke (1635 - 1703, anglický polyhistor) a Christiaan Huygens (1629 - 1695, holandský astronóm, matematik a fyzik) už používal DFM.

Postupom času sa optika a techniky ďalej vyvíjali, takže DFM je teraz k dispozícii aj pre stereomikroskopiu a skenovaciu elektrónovú mikroskopiu.

V porovnaní s bežnou mikroskopiou (Jasné polemikroskopia), pri ktorej sa skúmaný objekt nachádza pred svetlým pozadím, sa DFM používa na kontrastné (bez použitia farbiacich techník) zobrazovanie priehľadných objektov vrátane živých objektov pred tmavým pozadím.

V tomto prípade sa cez šošovku k oku diváka dostáva len svetlo, ktoré je objektom odrazené alebo rozptýlené, takže sú viditeľné aj tie najmenšie častice. Predpokladom je absolútne čisté sklíčko, aby sa zabránilo rozptylu svetla spôsobenému nečistotami, a tým skresleniu skutočne pozorovaného objektu.

Štúdie o vedecky uznávanom použití mikroskopie tmavého poľa

Diagnostika syfilisu (primárny syfilis)

Je mikroskopia v tmavom poli stále užitočná na primárnu diagnostiku syfilisu v 21. storočí?

Z 806 vzoriek bolo 53,2% (429) pozitívnych na DFM. Zo 429 pacientov malo 48% negatívne sérologické testy, čo ukazuje, že DFM jeden Včasná detekcia stále umožňuje pred pozitívnymi sérologickými testami.

Molekulárna mikroskopia vs. mikroskopia tmavého poľa pri syfilise

Testy na molekulárnu a priamu detekciu Treponema pallidum poddruhu pallidum: Prehľad literatúry, 1964-2017

U pacientov s primárnym syfilisom bola senzitivita a špecificita DFM v porovnaní s klinickou diagnózou a laboratórnymi nálezmi 75-100%, resp. 94-100%. Pri sekundárnom syfilise bola citlivosť 58-71% so špecificitou 100%.

Detekcia malárie pomocou mikroskopie v tmavom poli

Mikroskopia tmavého poľa na detekciu malárie v nezafarbených krvných filmoch

V rôznych Druhy rodu Plasmodium pigment vykazuje rozptyl svetla pri prezeraní krvných náterov pomocou DFM. Táto technika ponúka Výhody rýchlej diagnostiky, zvýšená citlivosť a Prispôsobivosť pre prácu v teréne.

Diagnostika leptospirózy

Hodnotenie mikroskopie v tmavom poli, kultivácie a komerčných sérologických súprav pri diagnostike leptospirózy

Žiadna z klinických vzoriek nepreukázala pozitívnosť DFM. Zo štúdie vyplýva, že DFM a kultúra majú obmedzený prínos s . Diagnostika leptospirózy pričom základom zostáva sérológia.

Diagnostika kampylobakterovej enteritídy

Mikroskopia ľudských výkalov v tmavom poli na predpokladanú diagnostiku enteritídy spôsobenej Campylobacter fetus subsp. jejuni

V 1 377 vzorkách stolice bola senzitivita, špecificita a prediktívna hodnota pozorovania motility kampylobaktérií 36%, 99% a 62%. . Citlivosť bola najvyššia, keď vzorky do 2 hodín (50%) v porovnaní so stavom po 2 hodinách (28%).

Vizualizácia bakteriálnych bičíkov

Skúmanie bakteriálnej bičíkovitosti pomocou mikroskopie tmavého poľa

Metóda vizualizácie nefarbených baktérií Bičíky je opísaná pomocou DFM. Keďže možno vidieť jednotlivé vlákna, rod ako napr. Salmonella (peritrichálne bičíkaté) sa ľahko odlišujú od polárnych bičíkatých rodov, ako sú napr. Pseudomonas možno rozlíšiť.

Vizualizácia krvných ciev v patológii

Mikroskopia v tmavom poli zlepšuje viditeľnosť farbenia endotelu CD31

Viditeľnosť Zrážanie bielkovín DAB indukované peroxidázou možno zosilniť pomocou techniky DFM vďaka jeho schopnosti rozptyľovať svetlo, čo uľahčuje jeho detekciu.

Kožná mikrocirkulácia pomocou bočného zobrazovania tmavého poľa

Zobrazovanie tmavého poľa bočným prúdom: vývoj vizualizácie kožnej mikrocirkulácie v reálnom čase a jej potenciálne využitie v dermatológii

Bočný prúd Dark Field (SDF) Zobrazovanie je najnovším nástrojom pre Výskum mikrocirkulácie. Predstavuje jednoduchú a neinvazívnu zobrazovaciu techniku s nízkymi nákladmi, dobrá prenosnosť a vysoká citlivosť ktorý poskytuje jemné, dobre definované obrazy

Mikroskopia tmavého poľa podľa Enderleina

Hypotéza ...

Günther Enderlein (1872 - 1968, nemecký zoológ a entomológ) publikoval viac ako 500 článkov o výskume hmyzu a získal si medzinárodné uznanie.

Antoine Béchamp (1816 - 1908, francúzsky chemik, lekár a farmaceut) už predtým vypracoval hypotézu o Fleomorfizmus(mnohotvárnosť). Napadlo ho, že všetky živočíšne a rastlinné bunky obsahujú drobné granule (mikrozýmy), z ktorých sa za určitých okolností môžu vyvinúť patogénne baktérie.

Počas prvej svetovej vojny sa Enderlein touto hypotézou zaoberal. Porovnávacie morfologické štúdie baktérií viedli k publikovaniu jeho hlavného bakteriologického diela v roku 1925 Cyklogenéza baktérií ako pokus o definovanie novej klasifikácie baktérií na tomto základe.

Na základe Enderleinovej myšlienky, že parazity, vírusy a baktérie, ako aj ich ďalší vývoj závisia od hodnoty pH krvi, založil tzv. Cyklogenéza baktérií (zmena tvaru baktérií v závislosti od pH). Celý proces vývoja označil termínom „cyklus“.

a rozpor

Enderleinova hypotéza bola popretá už počas jeho života. Takže v roku 1931 od Emmy Klieneberger (1892 - 1985, nemecko-britský mikrobiológ - spoluobjaviteľ Mycoplasma) .
Napísala:

„G. Enderlein vytvoril systematický model bakteriálneho vývojového cyklu, ktorý nie je založený na skutočných pozorovaniach, ale skôr na teoretických špekuláciách. Enderleinove špekulácie sa preto musia úplne odmietnuť, pretože nemajú žiadny základ v realite„.

Ferdinand Cohn (1828 - 1898, nemecký bakteriológ a botanik - objaviteľ endospór u baktérií) sa považuje za zakladateľa modernej bakteriológie a systematickej klasifikácie baktérií okolo roku 1870. Monoforizmus, . Louis Pasteur (1822 - 1895, francúzsky biochemik, chemik, mikrobiológ a fyzik) a Robert Koch (1843 - 1910, nemecký bakteriológ a lekár) sú platné aj dnes.

Enderleinov terapeutický prístup

Enderlein vyvinul liečivé prípravky ako tzv. izopatické lieky, podobne ako v homeopatii „podobné s podobným“ (princíp simile), ktoré majú liečiť choroby spôsobené patogénmi pomocou rovnakého patogénu.

Terapia Sanum

V roku 1933 založil spoločnosť SANUM, dnes známu ako Sanum Kehlbeck obchodovanie. Svoju formu terapie nazval Terapia Sanum.
Spoločnosť Sanum-Kehlbeck distribuuje prípravky vyrobené podľa homeopatických princípov v potenciách D3 - D7 (desatinné riedenia; D7 = 1:10 000 000, čo zodpovedá 1 dielu východiskového materiálu na 99 999 999 dielov vody/alkoholu), ktoré sa môžu predávať bez dôkazu o účinnosti podľa právnych predpisov EÚ, vrátane ampuliek na injekciu, ktoré tiež nemajú povolenie na uvedenie na trh v súlade s nemeckým zákonom o liekoch (AMG).

Registrácia podľa AMG

Všetky prípravky sú k dispozícii len podľa § 38 AMG registrované, t. j. výrobca nevyžaduje dôkaz o terapeutickej účinnosti ani vyhlásenie o indikáciách (oblastiach použitia). Prípravky preto musia byť označené odtlačkom

„Registrovaný homeopatický liek,
preto bez uvedenia terapeutickej indikácie“

opotrebenie.

Povinnosť kontroly kvality

Za kontrolu kvality zodpovedá výrobca. V roku 2023 bola spoločnosť Sanum nútená 28. marca, 6. apríla a 14. apríla zastaviť výrobu rôznych injekčných roztokov z dôvodu kontaminácie viditeľnými časticami. stiahnuť. Verejné oznámenie bolo zverejnené 17.4.2023.

Nežiaduce účinky

Keďže však neexistujú žiadne dôkazy o terapeutických účinkoch (k 01.2026), boli zistené rôzne vedľajšie účinky:

• 70-ročná žena, ktorá užívala Notakehl D4 (3× 1 kapsula denne) počas 6 mesiacov, dostala akútnu intersticiálnu nefritídu so zlyhaním obličiek (Zdroj)
• 39-ročná žena s albuminúriou, hematúriou a horúčkou po aplikácii Notakehla (Zdroj)
• Ďalšie prípady podozrenia na pľúcne reakcie po užití liekov Mucokehl D5, Nigersan D5 a Notakehl D7 (zdroj ako predtým)