Mörkfältsmikroskopi (DFM)

Lästid 4 minuter

DFM är en teknik för analys av blodkomponenter och mikroorganismer som har varit känd sedan 1600-talet.

Det används kliniskt för diagnos av Spiroketer (gramnegativ, spiralformad, aktivt rörlig bakterier, hur Leptospirer, Treponemas) och Plasmodium-arter (Malariaparasiter), samt för detektering av E.coli i vattenprover och malariapatogenen.

En annan tillämpning, som inte är vetenskapligt hållbar, är den så kallade. Vital blodanalys / mörkfältsmikroskopi enligt Enderlein.

I det följande kommer DFM:s historia att presenteras, de tillämpningsområden som vetenskapligt bevisats genom studier, samt Enderleins teori om Pleomorfism och relaterad information.

historia

Antoni van Leeuwenhoek (1632 - 1723, holländsk naturforskare och den mest betydande mikroskopisten), Robert Hooke (1635 - 1703, engelsk universalgeni) och Christiaan Huygens (1629 - 1695, holländsk astronom, matematiker och fysiker) använde sig redan av DFM.

Under årens lopp har optik och teknik vidareutvecklats så att DFM nu även är tillgängligt för stereo- och svepelektronmikroskopi.

Jämfört med normal mikroskopi (Ljust fältmikroskopi), där det objekt som ska undersökas befinner sig framför en ljus bakgrund, används DFM för kontrastförstärkt (utan användning av färgningstekniker) avbildning av genomskinliga objekt, inklusive levande objekt, framför en mörk bakgrund.

Endast det ljus som avböjs eller sprids av objektet kanaliseras genom linsen till betraktarens öga, vilket gör att även de minsta partiklarna blir synliga. Förutsättningen är ett absolut rent objektglas för att förhindra ljusspridning på grund av föroreningar och därmed förvrängningar av det objekt som faktiskt betraktas.

Studier av den vetenskapligt erkända användningen av mörkfältsmikroskopi

Diagnostik av syfilis (primär syfilis)

Är mörkfältsmikroskopi fortfarande användbart för den primära syfilisdiagnosen på 2000-talet?

Av 806 prover var 53,2% (429) positiva för DFM. 48% av de 429 patienterna hade negativa serologiska tester, vilket visar att DFM en Tidig upptäckt möjliggör fortfarande innan serologiska tester blir positiva.

Molekylär kontra mörkfältsmikroskopi vid syfilis

Molekylära och direkta detektionstester för Treponema pallidum underart pallidum: En genomgång av litteraturen, 1964-2017

Hos patienter med primär syfilis var sensitiviteten och specificiteten för DFM jämfört med kliniska diagnoser och laboratorieresultat 75-100% respektive 94-100%. Vid sekundär syfilis var sensitiviteten 58-71% med en specificitet på 100%.

Malariadetektion med mörkfältsmikroskopi

Mörkfältsmikroskopi för detektion av malaria i ofärgade blodfilmer

De i olika Plasmodium-arter pigment visar ljusspridning när blodutstryk betraktas med DFM. Tekniken erbjuder följande Fördelar med snabb diagnos, ökad känslighet och Anpassningsförmåga för fältarbete.

Diagnostik av leptospiros

En utvärdering av mörkfältsmikroskopi, odling och kommersiella serologiska kit vid diagnos av leptospiros

Inget av de kliniska proverna visade positiv DFM. Studien drar slutsatsen att DFM och kultur har ett begränsad förmån på de Diagnos av leptospiros med serologi som fortsatt grundpelare.

Diagnostik av enterit orsakad av Campylobacter

Mörkfältsmikroskopi av avföring från människa för presumtiv diagnos av enterit orsakad av Campylobacter fetus subsp. jejuni

I 1 377 avföringsprover var känsligheten, specificiteten och det prediktiva värdet för observationen av Campylobacters rörlighet 36%, 99% respektive 62%. Den Känslighet var högsta, när prover inom 2 timmar (50%) jämfört med efter 2 timmar (28%).

Visualisering av bakteriella flageller

Undersökning av bakteriell flagellation med mörkfältsmikroskopi

En metod för visualisering av ofärgade bakteriella Flagell beskrivs av DFM. Eftersom enskilda filament kan ses, kan ett släkte som t.ex. Salmonella (peritrikt flagellerade) är lätta att skilja från polärt flagellerade släkten som t.ex. Pseudomonas kan urskiljas.

Visualisering av blodkärl inom patologi

Mörkerfältsmikroskopi förbättrar synligheten av CD31-färgning av endotel

Synligheten för Peroxidasinducerad utfällning av DAB-protein kan förstärkas med DFM-tekniken på grund av dess förmåga att sprida ljus, vilket gör den lätt att detektera.

Mikrocirkulation i huden med Sidestream Dark Field Imaging

Sidestream dark field imaging: utvecklingen av realtidsvisualisering av den kutana mikrocirkulationen och dess potentiella tillämpning inom dermatologi

Sidestream Dark Field (SDF) Imaging är det senaste verktyget för Forskning om mikrocirkulationen. Det är en enkel och icke-invasiv avbildningsteknik med låga kostnader, bra bärbarhet och hög känslighet som ger fina, väldefinierade bilder

Mörkfältsmikroskopi enligt Enderlein

Hypotesen ...

Günther Enderlein (1872 - 1968, tysk zoolog och entomolog) publicerade över 500 artiklar om insektsforskning och blev internationellt erkänd.

Antoine Béchamp (1816 - 1908, fransk kemist, läkare och apotekare) hade tidigare utvecklat hypotesen om Phleomorfism(mångformighet). Han hade en idé om att alla djur- och växtceller innehöll små granuler (mikrozymer) från vilka patogena bakterier kunde utvecklas under vissa omständigheter

Under första världskriget tog Enderlein upp denna hypotes. Jämförande morfologiska studier av bakterier ledde till publiceringen av hans bakteriologiska huvudverk 1925 Bactieria cyklogeni som ett försök att definiera en ny bakterieklassificering baserad på detta.

Baserat på Enderleins idé om att parasiter, virus och bakterier, liksom deras vidare utveckling, är beroende av blodets pH-värde, grundade han den så kallade Cyklogeni hos bakterier (pH-beroende förändring av bakteriernas form). Han benämnde hela utvecklingsprocessen med begreppet „cykel“.

och motsägelsen

Enderleins hypotes motsades redan under hans livstid. Så år 1931 från Emmy Klieneberger (1892 - 1985, tysk-brittisk mikrobiolog - medupptäckare av Mykoplasma) .
Hon skrev:

„G. Enderlein har konstruerat en systematisk modell av en bakteriell utvecklingscykel som inte bygger på verkliga observationer utan snarare på teoretiska spekulationer. Enderleins spekulationer måste därför helt förkastas, eftersom de saknar all verklighetsförankring.„.

Ferdinand Cohn (1828 - 1898, tysk bakteriolog och botanist - upptäckte endosporer hos bakterier) anses vara grundaren av den moderna bakteriologin och den systematiska klassificeringen av bakterier omkring 1870. Monoformism, den Louis Pasteur (1822 - 1895, fransk biokemist, kemist, mikrobiolog och fysiker) och Robert Koch (1843-1910, tysk bakteriolog och läkare) är fortfarande giltiga idag.

Enderleins terapeutiska förhållningssätt

Enderlein utvecklade läkande preparat som så kallade isopatiska medel, liknande homeopatin „lika med lika“ (simileprincipen), som är avsedda att bota sjukdomar som orsakas av patogener med samma patogen.

Sanum-terapi

Han grundade SANUM 1933, numera känt som Sanum Kehlbeck handel. Han kallade sin terapiform för Sanum-terapi.
Företaget Sanum-Kehlbeck distribuerar preparat som tillverkats enligt homeopatiska principer i styrkorna D3-D7 (decimalspädningar; D7 = 1:10 000 000, vilket motsvarar 1 del utgångsmaterial till 99 999 999 delar vatten/alkohol), som får säljas utan bevis på effekt enligt EU-rätten, inklusive ampuller för injektion, som inte heller har ett godkännande för försäljning enligt den tyska läkemedelslagen (AMG).

Registrering enligt AMG

Alla preparat är endast tillgängliga enligt § 38 AMG registreras, dvs. tillverkaren behöver varken bevisa terapeutisk effekt eller ange indikationer (användningsområden). Preparaten måste därför vara försedda med märkningen

„Registrerat homeopatiskt läkemedel,
därför utan uppgift om en terapeutisk indikation“

slitage.

Skyldighet att utföra kvalitetskontroll

Tillverkaren ansvarar för kvalitetskontrollen. Under 2023 tvingades Sanum att avbryta olika injektionslösningar den 28 mars, 6 april och 14 april på grund av kontaminering med synliga partiklar. återkallelse. Det offentliga tillkännagivandet gjordes den 17.04.2023.

Biverkningar

Men eftersom det inte finns några bevis för terapeutiska effekter (per 01.2026) har olika biverkningar identifierats:

• 70-årig kvinna, som tog Notakehl D4 (3×1 kapsel dagligen) i 6 månader, utvecklade akut interstitiell nefrit med njursvikt (källa)
• 39-årig kvinna med albuminuri, hematuri och feber efter applicering av Notakehl (källa)
• Ytterligare fall av misstänkta lungreaktioner efter intag av Mucokehl D5, Nigersan D5 och Notakehl D7 (källa som tidigare)