Donkerveldmicroscopie (DFM)

Leestijd 4 minuten

DFM is een techniek voor het analyseren van bloedbestanddelen en micro-organismen die al bekend is sinds de 17e eeuw.

Het wordt klinisch gebruikt voor de diagnose van Spirocheten (gramnegatief, spiraalvormig, actief bewegend bacteriën, hoe Leptospiren, Treponemas) en Plasmodium-soorten (Malaria parasieten), evenals voor de detectie van E.coli in watermonsters en de malariapathogeen.

Een andere toepassing, die wetenschappelijk niet houdbaar is, is de zogenaamde. Analyse van vitaal bloed / donkerveldmicroscopie volgens Enderlein.

Hierna wordt de geschiedenis van DFM gepresenteerd, de toepassingsgebieden die wetenschappelijk zijn aangetoond aan de hand van studies en Enderleins theorie van de DFM. Pleomorfisme en gerelateerde informatie.

geschiedenis

Antoni van Leeuwenhoek (1632 - 1723, Nederlandse natuurwetenschapper en belangrijkste microscopist), Robert Hooke (1635 - 1703, Engels polymath) en Christiaan Huygens (1629 - 1695, Nederlands astronoom, wiskundige en natuurkundige) gebruikten de DFM al.

In de loop der tijd zijn de optiek en de technieken verder ontwikkeld, zodat DFM nu ook beschikbaar is voor stereo- en rasterelektronenmicroscopie.

Vergeleken met normale microscopie (Helder veldmicroscopie), waarbij het te onderzoeken object zich voor een lichte achtergrond bevindt, wordt DFM gebruikt voor contrastversterkte (zonder gebruik van kleurtechnieken) beeldvorming van transparante objecten, inclusief levende objecten, voor een donkere achtergrond.

Alleen het licht dat door het object wordt afgebogen of verstrooid, wordt door de lens naar het oog van de kijker geleid, waardoor zelfs de kleinste deeltjes zichtbaar worden. De eerste vereiste is een absoluut schoon objectglaasje om lichtverstrooiing door onzuiverheden en dus vervorming van het werkelijk bekeken object te voorkomen.

Studies over het wetenschappelijk erkende gebruik van donkerveldmicroscopie

Syfilisdiagnostiek (primaire syfilis)

Is donkerveldmicroscopie nog bruikbaar voor de primaire syfilisdiagnose in de 21e eeuw?

Van de 806 monsters waren 53,2% (429) positief voor DFM. 48% van de 429 patiënten hadden negatieve serologische tests, wat aantoont dat DFM een Vroege opsporing maakt het nog steeds mogelijk voordat serologische tests positief worden.

Moleculaire versus donkerveldmicroscopie bij syfilis

Moleculaire en directe detectietests voor Treponema pallidum subspecies pallidum: Een literatuuroverzicht, 1964-2017

Bij patiënten met primaire syfilis waren de sensitiviteit en specificiteit van DFM vergeleken met klinische diagnoses en laboratoriumbevindingen respectievelijk 75-100% en 94-100%. Bij secundaire syfilis was de sensitiviteit 58-71% met 100% specificiteit.

Malaria opsporen met donkerveldmicroscopie

Donkerveldmicroscopie voor de detectie van malaria in niet-gekleurde bloedfilms

De in verschillende Plasmodium soorten pigment lichtverstrooiing vertoont wanneer bloeduitstrijkjes met DFM worden bekeken. De techniek biedt de Voordelen van snelle diagnose, verhoogde gevoeligheid En Aanpassingsvermogen voor veldwerk.

Leptospirose diagnostiek

Een evaluatie van donkerveldmicroscopie, kweek en commerciële serologische kits bij de diagnose van leptospirose

Geen van de klinische monsters vertoonde positiviteit bij DFM. Het onderzoek concludeert dat DFM en cultuur een beperkt voordeel bij de Diagnose van leptospirose waarbij serologie de belangrijkste pijler blijft.

Campylobacter-diagnostiek

Donkerveldmicroscopie van menselijke feces voor de voorlopige diagnose van Campylobacter foetus subsp. jejuni enteritis

In 1.377 ontlastingmonsters waren de sensitiviteit, specificiteit en voorspellende waarde van de waarneming van Campylobacter motiliteit respectievelijk 36%, 99% en 62%. De Gevoeligheid was hoogste, wanneer monsters binnen 2 uur (50%) vergeleken met na 2 uur (28%).

Visualisatie van bacteriële flagellen

Onderzoek van bacteriële flagellatie door donkerveldmicroscopie

Een methode voor de visualisatie van ongekleurde bacteriën Flagella wordt beschreven door DFM. Omdat individuele filamenten te zien zijn, kan een geslacht als Salmonella (peritrich gevlagd) zijn gemakkelijk te onderscheiden van genera met polaire flagellen zoals Pseudomonas kunnen worden onderscheiden.

Bloedvatvisualisatie in de pathologie

Donkerveldmicroscopie verbetert de zichtbaarheid van CD31 endotheelkleuring

De zichtbaarheid van de Peroxidase-geïnduceerde DAB-eiwitneerslag kan worden versterkt met de DFM-techniek omdat het licht kan verstrooien, waardoor het gemakkelijk te detecteren is.

Microcirculatie van de huid met Sidestream Dark Field Imaging

Sidestream dark field imaging: de evolutie van real-time visualisatie van cutane microcirculatie en de potentiële toepassing in de dermatologie

Zijstroom Donkere Veld (SDF) Imaging is het nieuwste hulpmiddel voor de Microcirculatie onderzoek. Het is een eenvoudige en niet-invasieve beeldvormingstechniek met lage kosten, goede draagbaarheid en hoge gevoeligheid die fijne, goed gedefinieerde beelden levert

Donkerveldmicroscopie volgens Enderlein

De hypothese ...

Günther Enderlein (1872 - 1968, Duits zoöloog en entomoloog) publiceerde meer dan 500 artikelen over insectenonderzoek en kreeg internationale erkenning.

Antoine Béchamp (1816 - 1908, Frans scheikundige, arts en apotheker) had eerder de hypothese van de Phleomorfisme(veelvormigheid). Hij had het idee dat alle dierlijke en plantaardige cellen minuscule korreltjes (microzymen) bevatten waaruit zich onder bepaalde omstandigheden ziekteverwekkende bacteriën kunnen ontwikkelen.

Tijdens de Eerste Wereldoorlog nam Enderlein deze hypothese over. Vergelijkende morfologische studies op bacteriën leidden tot de publicatie van zijn belangrijkste bacteriologische werk in 1925 Bactieria cyclogenie als een poging om op basis hiervan een nieuwe bacteriële classificatie te definiëren.

Op basis van Enderleins idee dat parasieten, virussen en bacteriën, evenals hun verdere ontwikkeling, afhankelijk zijn van de pH-waarde van het bloed, richtte hij de zogenaamde Cyclogenie van bacteriën (pH-afhankelijke verandering in de vorm van de bacterie). Hij labelde het hele ontwikkelingsproces met de term „cyclus“.

en de tegenspraak

Enderleins hypothese werd al tijdens zijn leven tegengesproken. Dus in 1931 van Emmy Klieneberger (1892 - 1985, Duits-Britse microbioloog - mede-ontdekker van de Mycoplasma) .
Ze schreef:

„G. Enderlein heeft een systematisch model van een bacteriële ontwikkelingscyclus geconstrueerd dat niet gebaseerd is op waarnemingen, maar eerder op theoretische speculaties. Enderleins speculaties moeten daarom volledig worden verworpen, omdat ze geen enkele basis in de werkelijkheid hebben.„.

Ferdinand Cohn (1828 - 1898, Duits bacterioloog en botanicus - ontdekker van endosporen in bacteriën) wordt beschouwd als de grondlegger van de moderne bacteriologie en de systematische classificatie van bacteriën rond 1870. Monoformisme, de Louis Pasteur (1822 - 1895, Frans biochemicus, scheikundige, microbioloog en natuurkundige) en Robert Koch (1843 - 1910, Duits bacterioloog en arts) zijn vandaag de dag nog steeds geldig.

Enderleins therapeutische benadering

Enderlein ontwikkelde geneeskrachtige preparaten als zogenaamde isopathische middelen, vergelijkbaar met homeopathie „zoals met zoals“ (simulatieprincipe), die bedoeld zijn om ziekten veroorzaakt door ziekteverwekkers te genezen met behulp van dezelfde ziekteverwekker.

Sanum therapie

Hij richtte SANUM op in 1933, nu bekend als Sanum Kehlbeck handel. Hij noemde zijn vorm van therapie Sanum therapie.
Het bedrijf Sanum-Kehlbeck distribueert volgens homeopathische principes vervaardigde preparaten in potenties D3 - D7 (decimale verdunningen; D7 = 1:10.000.000, wat overeenkomt met 1 deel uitgangsmateriaal op 99.999.999 delen water/alcohol), die volgens de EU-wetgeving zonder bewijs van werkzaamheid mogen worden verkocht, inclusief ampullen voor injectie, waarvoor ook geen vergunning voor het in de handel brengen volgens de Duitse wet op geneesmiddelen (AMG) is verleend.

Registratie volgens AMG

Alle preparaten zijn alleen verkrijgbaar volgens § 38 AMG geregistreerd, d.w.z. dat de fabrikant geen bewijs van therapeutische werkzaamheid of een indicatie (toepassingsgebied) nodig heeft. De preparaten moeten daarom de opdruk

„Geregistreerd homeopathisch geneesmiddel,
daarom zonder indicatie van een therapeutische indicatie“

dragen.

Verplichting tot kwaliteitscontrole

De fabrikant is verantwoordelijk voor de kwaliteitscontroles. In 2023 moest Sanum op 28 maart, 6 april en 14 april stoppen met verschillende injectieoplossingen vanwege verontreiniging met zichtbare deeltjes. terugroep. De openbare aankondiging werd gedaan op 17.04.2023.

Bijwerkingen

Aangezien er echter geen bewijs is voor therapeutische effecten (per 01.2026), zijn er verschillende bijwerkingen geïdentificeerd:

• 70-jarige vrouw, nam 6 maanden lang Notakehl D4 (3×1 capsule per dag), ontwikkelde acute interstitiële nefritis met nierfalen (bron)
• 39-jarige vrouw met albuminurie, hematurie en koorts na toepassing van Notakehl (bron)
• Nog meer gevallen van vermoedelijke longreacties na inname van Mucokehl D5, Nigersan D5 en Notakehl D7 (bron als voorheen)