Tumšā lauka mikroskopija (DFM)

Lasīšanas laiks 4 protokols

DFM ir asins komponentu un mikroorganismu analīzes metode, kas pazīstama jau kopš 17. gadsimta.

To klīniski izmanto, lai diagnosticētu Spirochetes (gramnegatīvs, spirālveida, aktīvi kustīgs) Baktērijas, kā Leptospiras, Treponēmas) un Plasmodium sugas (Malārijas parazīti), kā arī lai noteiktu E.coli ūdens paraugos un malārijas patogēnā.

Vēl viens pielietojums, kas nav zinātniski pamatots, ir tā sauktā. Dzīvības asins analīze / tumšā lauka mikroskopija pēc Enderleina metodes.

Turpmāk tiks izklāstīta DFM vēsture, ar pētījumiem zinātniski pierādītās pielietojuma jomas, kā arī Enderleina teorija par DFM. Pleomorfisms un saistīto informāciju.

Vēsture

Antonijs van Līvenhūks (1632 - 1723, holandiešu dabaszinātnieks un nozīmīgākais mikroskopists), Roberts Hūks (1635-1703, angļu polimāts) un Kristiāns Hīgenss (1629 - 1695, holandiešu astronoms, matemātiķis un fiziķis) jau izmantoja DFM.

Laika gaitā optika un metodes ir pilnveidotas tā, ka DFM tagad ir pieejama arī stereo un skenēšanas elektronu mikroskopijai.

Salīdzinot ar parasto mikroskopiju (Spilgts lauksmikroskopija), kurā pētāmais objekts atrodas uz gaiša fona, DFM izmanto caurspīdīgu objektu, tostarp dzīvu objektu, attēlveidošanai uz tumša fona ar palielinātu kontrastu (neizmantojot krāsošanas metodes).

Caur lēcu uz skatītāja aci tiek novadīta tikai tā gaisma, ko objekts atstaro vai izkliedē, padarot redzamas pat vismazākās daļiņas. Priekšnoteikums ir absolūti tīrs priekšmetstikliņš, lai novērstu gaismas izkliedi, ko rada piemaisījumi, un tādējādi novērstu faktiski apskatāmā objekta izkropļojumus.

Pētījumi par zinātniski atzītu tumšā lauka mikroskopijas izmantošanu

Sifilisa diagnostika (primārais sifiliss)

Vai tumšā lauka mikroskopija joprojām ir noderīga primārai sifilisa diagnostikai 21. gadsimtā?

No 806 paraugiem 53,2% (429) bija pozitīvi uz DFM. No 429 pacientiem 48% bija negatīvi seroloģiskie testi, kas norāda, ka DFM viens Agrīna atklāšana joprojām ļauj pirms seroloģiskie testi kļūst pozitīvi.

Molekulārā un tumšā lauka mikroskopija sifilisa gadījumā

Treponema pallidum pasugas pallidum molekulārās un tiešās noteikšanas testi: Literatūras apskats, 1964-2017

Pacientiem ar primāro sifilisu DFM jutīgums un specifiskums salīdzinājumā ar klīniskajām diagnozēm un laboratoriskajiem rezultātiem bija attiecīgi 75-100% un 94-100%. Sekundārā sifilisa gadījumā jutīgums bija 58-71% un specifiskums 100%.

Malārijas noteikšana, izmantojot tumšā lauka mikroskopiju

Tumšā lauka mikroskopija malārijas noteikšanai nekrāsotās asins plēvēs

Dažādos Plasmodium sugas pigmentam ir redzama gaismas izkliedēšana, kad asins uztriepes tiek apskatītas, izmantojot DFM. Šī metode piedāvā Ātras diagnostikas priekšrocības, paaugstināta jutība un Pielāgošanās spējas lauka darbam.

Leptospirozes diagnostika

Tumšā lauka mikroskopijas, kultūras un komerciālo seroloģisko komplektu novērtējums leptospirozes diagnostikā

Nevienā no klīniskajiem paraugiem DFM neuzrādīja pozitīvu rezultātu. Pētījumā secināts, ka DFM un kultūra ir ierobežots ieguvums ar . Leptospirozes diagnostika seroloģija joprojām ir galvenais pamats.

Kampilobaktēriju enterīta diagnostika

Cilvēka izkārnījumu tumšā lauka mikroskopija Campylobacter fetus subsp. jejuni enterīta paredzamajai diagnostikai

1377 izkārnījumu paraugos Campylobacter motilitātes novērošanas jutīgums, specifiskums un prognozējošā vērtība bija attiecīgi 36%, 99% un 62%. . Jutīgums bija augstākais, kad paraugi 2 stundu laikā (50%), salīdzinot ar 2 stundu laikā (28%).

Baktēriju bārkstiņu vizualizācija

Baktēriju bārkstiņu izmeklēšana ar tumšā lauka mikroskopiju

Nekrāsotu baktēriju vizualizācijas metode Flagella apraksta DFM. Tā kā var redzēt atsevišķus pavedienus, tad ģints, piemēram, DFM Salmonella (peritrihiski bārkstiņbiksīšu dzimtas) ir viegli atšķirami no polārbiksīšu ģintīm, piem. Pseudomonas var atšķirt.

Asinsvadu vizualizācija patoloģijā

Tumšā lauka mikroskopija uzlabo CD31 endotēlija krāsojuma redzamību

Redzamība Peroksidāzes izraisīta DAB proteīnu nogulsnēšanās var pastiprināt, izmantojot DFM metodi, jo tā spēj izkliedēt gaismu, tādējādi padarot to viegli atklājamu.

Ādas mikrocirkulācija ar sānstraumes tumšā lauka attēlveidošanu

Tumsas lauka attēlveidošana sānu straumē: ādas mikrocirkulācijas reāllaika vizualizācijas attīstība un tās potenciālais pielietojums dermatoloģijā

Sidestream Tumšais lauks (SDF) attēlveidošana ir jaunākais rīks, kas paredzēts Mikrocirkulācijas pētījumi. Tā ir vienkārša un neinvazīva attēlveidošanas metode ar zemām izmaksām, laba pārnēsājamība un augsta jutība kas nodrošina smalkus, labi definētus attēlus.

Tumšā lauka mikroskopija saskaņā ar Enderleinu

Hipotēze ...

Ginters Enderleins (1872-1968, vācu zoologs un entomologs) publicēja vairāk nekā 500 rakstu par kukaiņu pētniecību un ieguva starptautisku atzinību.

Antuāns Bešāns (Antoine Béchamp, 1816-1908, franču ķīmiķis, ārsts un farmaceits) jau iepriekš bija izstrādājis hipotēzi par Fleomorfisms(daudzveidība). Viņam radās ideja, ka visās dzīvnieku un augu šūnās ir sīkas granulas (mikroenzīmi), no kurām noteiktos apstākļos var attīstīties patogēnās baktērijas.

Pirmā pasaules kara laikā Enderleins izvirzīja šo hipotēzi. Baktēriju salīdzinošie morfoloģiskie pētījumi noveda pie viņa galvenā bakterioloģiskā darba publicēšanas 1925. gadā. Bactieria cikloģenēze kā mēģinājumu definēt jaunu baktēriju klasifikāciju, pamatojoties uz to.

Pamatojoties uz Enderleina ideju, ka parazīti, vīrusi un baktērijas, kā arī to turpmākā attīstība ir atkarīga no asins pH vērtības, viņš izveidoja t. s. Baktēriju cikloģenēze (no pH atkarīgas baktēriju formas izmaiņas). Visu attīstības procesu viņš apzīmēja ar terminu „cikls“.

un pretruna

Enderleina hipotēze tika noliegta jau viņa dzīves laikā. Tāpēc 1931. gadā no Emmy Klieneberger (1892-1985, vācu un britu mikrobiologs, viens no Mycoplasma) .
Viņa rakstīja:

„G. Enderleins ir izveidojis sistemātisku baktēriju attīstības cikla modeli, kas nav balstīts uz patiesiem novērojumiem, bet gan uz teorētiskām spekulācijām. Tāpēc Enderleina spekulācijas ir pilnībā jānoraida, jo tām nav nekāda pamatojuma.„.

Ferdinands Konns (1828 - 1898, vācu bakteriologs un botāniķis, baktēriju endosporu atklājējs) tiek uzskatīts par modernās bakterioloģijas un sistemātiskās baktēriju klasifikācijas pamatlicēju ap 1870. gadu. Monoforisms, . Luijs Pastērs (1822 - 1895, franču bioķīmiķis, ķīmiķis, mikrobiologs un fiziķis) un Roberts Kochs (1843 - 1910, vācu bakteriologs un ārsts) joprojām ir spēkā.

Enderleina terapeitiskā pieeja

Enderleins izstrādāja ārstnieciskos preparātus kā tā sauktos izopātiskos līdzekļus, kas līdzīgi kā homeopātijā „līdzīgs ar līdzīgu“ (līdzības princips) ir paredzēti patogēnu izraisītu slimību ārstēšanai, izmantojot vienu un to pašu patogēnu.

Sanum terapija

1933. gadā viņš nodibināja SANUM, kas tagad pazīstams kā Sanum Kehlbeck tirdzniecība. Savu terapijas veidu viņš nosauca par Sanum terapija.
Uzņēmums Sanum-Kehlbeck izplata preparātus, kas ražoti saskaņā ar homeopātiskiem principiem D3 - D7 potencēs (decimāldaļskaitlis; D7 = 1:10 000 000, kas atbilst 1 daļai izejvielas uz 99 999 999 daļām ūdens/spirta), kurus saskaņā ar ES tiesību aktiem var pārdot bez pierādījuma par iedarbīgumu, tostarp ampulas injekcijām, kurām arī nav tirdzniecības atļaujas saskaņā ar Vācijas Likumu par zālēm (AMG).

Reģistrācija saskaņā ar AMG

Visi preparāti ir pieejami tikai saskaņā ar § 38 AMG reģistrētas, t. i., ražotājs nepieprasa ne terapeitiskās efektivitātes pierādījumus, ne indikāciju (pielietojuma jomu) norādījumus. Tādēļ uz preparātiem jābūt uzrakstam

„Reģistrētas homeopātiskās zāles,
tāpēc bez norādes par terapeitiskām indikācijām“.“

valkāt.

Kvalitātes kontroles pienākums

Ražotājs ir atbildīgs par kvalitātes kontroli. 2023. gadā Sanum bija spiesta pārtraukt dažādu injekciju šķīdumu lietošanu 28. martā, 6. aprīlī un 14. aprīlī redzamu daļiņu piesārņojuma dēļ. atsaukt. Publisks paziņojums tika publicēts 17.04.2023.

Blakusparādības

Tomēr, tā kā nav pierādījumu par terapeitisko iedarbību (no 01.2026. gada), ir konstatētas dažādas blakusparādības:

• 70 gadus vecai sievietei, kas 6 mēnešus lietoja Notakehl D4 (3×1 kapsula dienā), attīstījās akūts intersticiāls nefrīts ar nieru mazspēju (Avots:)
• 39 gadus veca sieviete ar albumīnūriju, hematūriju un drudzi pēc Notakehl lietošanas (Avots:)
• Papildu gadījumi, kad pēc Mucokehl D5, Nigersan D5 un Notakehl D7 lietošanas radušās aizdomas par plaušu reakcijām (avots kā iepriekš).