Skaitymo laikas 63 minutės

Atnaujinta - vasario 18, 2023

Šis tinklaraštis bus nutrauktas. Svetainė "Corona" dienoraštis 2023 m. nagrinėja žinomus atvejus, ypač farmacijos pramonės ir sveikatos priežiūros institucijų tarptautiniu lygmeniu.

Duomenų atnaujinimas čia visada yra svarbiausias prioritetas - toliau pateikiami straipsniai įvairiomis temomis žemiau šio skirsnio. Naujausias pranešimas yra viršuje ir pažymėtas raudona antrašte.

Kadangi kai kurie atnaujinimai nebuvo atlikti dėl laiko stokos, toliau pateikiama atitinkamų duomenų vaizdo animacija nuo pirmojo užregistruoto pranešimo apie nepageidaujamą reakciją iki šiol pateikiama chronologine tvarka, pirmiausia naujausi duomenys. (Šaltinis: EMA / EMA duomenų analizės programavimas).

• Perikarditas

• Creutzfeldto-Jakobo liga

• Miokarditas

• Menstruacijų sutrikimas

• Guillain-Barre sindromas

• Bell's paralyžius

• Miego sutrikimas

• Haliucinacijos

• Trombocitopenija

• Savaiminis abortas

• Akių skausmas

• Sąmonės praradimas

• Narkolepsija

• Limfadenopatija

• Padidėjęs širdies susitraukimų dažnis

• Galvos skausmas

• Smegenų trombozė

• Smegenų venų sinuso trombozė

• Smegenų venų trombozė

• Giliųjų venų trombozė

• Mezenterinės venos trombozė

• Vartų venos trombozė

• Viršutinio sagitalinio sinuso trombozė

• Pūslelinė (Herpes zoster)

• Trombozė

• Venų trombozė

• Venų trombozė galūnė

• Spengimas ausyse

• Staigi mirtis

• Tarpmenstruacinis kraujavimas

• Vėluojančios menstruacijos

• Nereguliarios menstruacijos

• Dilgėlinė

---

Šis skyrius nebebus atnaujinamas. EMA duomenų kūrimas bus pakeistas pirmiau pateiktais vaizdo įrašais!

Duomenų atnaujinimas - EMA - VAERS - PSO - Pranešimai apie nepageidaujamas reakcijas

^* Padidinti nuo 2021 11 13 - 2021 12 03 adresu 368.653 Žinutės

Iš viso pranešimų: EMA 1 254 029 (+ 90 673^*) / KAS 2 706 410 (+206 529^*) / CDC/FDA 951857 (+71.451^*)

Simptomas: Bell's palsy (veido paralyžius) - Registruoti pranešimai

Padidėjimas nuo 2021 12 30 - 2022 01 15 / 2021 12 17 - 2022 01 07 iki 6.620 Atvejai

Šaltiniai: adrreports.eu (EMA) / vigiaccess.org (PSO) - Statusas 2021 12 10
Šaltinis: vaers.hhs.gov (CDC / FDA) - Statusas 03.12.2021

Simptomas: Menstruacijų sutrikimai - Registruoti pranešimai

Šaltiniai: adrreports.eu (EMA) / vigiaccess.org (PSO) - nuo 2021 m. lapkričio 13 d.
Šaltinis: vaers.hhs.gov (CDC / FDA) - Statusas 05.11.2021

Simptomas: Abortas savaiminis - Registruoti pranešimai

Šaltiniai: adrreports.eu (EMA) / vigiaccess.org (PSO) - nuo 2021 m. lapkričio 13 d.
Šaltinis: vaers.hhs.gov (CDC / FDA) - Statusas 05.11.2021

Simptomas: limfadenopatija - Registruoti pranešimai

^* Padidinti nuo 2021 12 18 - 2021 12 24 / 2021 12 10 - 2021 12 17 adresu 713 Atvejai

Šaltiniai: adrreports.eu (EMA) / vigiaccess.org (PSO) - Statusas 2021-12-24
Šaltinis: vaers.hhs.gov (CDC / FDA) - Statusas 2021-12-17

Simptomas: Mirtis - Registruoti pranešimai

Dabartiniai duomenys apie Mirtingumo perviršis visose amžiaus grupėse atnaujinami kasdien. čia.

Diagramos sudarytos remiantis 29 dalyvaujančių šalių duomenimis: Airija, Belgija, Danija, Estija, Graikija, Graikija, Ispanija, Izraelis, Italija, Jungtinė Karalystė (Anglija), Belgija, Danija, Estija, Jungtinė Karalystė (Berlynas), Jungtinė Karalystė (Šiaurės Airija), Jungtinė Karalystė (Škotija), Jungtinė Karalystė (Škotija), Jungtinė Karalystė (Velsas), Izraelis, Italija, Liuksemburgas, Malta, Nyderlandai, Norvegija, Portugalija, Prancūzija, Slovėnija, Suomija, Švedija, Šveicarija, Vengrija, Vokietija, Suomija, Švedija, Vokietija ir Ukraina.
Ukraina, Vokietija (Berlynas) ir Vokietija (Hesenas) į jungtinius duomenis nebuvo įtrauktos.
(Šaltinis: Euromomo)

^* Padidinti nuo 2022 03 16 - 2022 03 26 / 2022 03 05 - 2022 03 18 adresu 2.595 Mirties atvejai
(dvigubai daugiau nei 15/03 / 04/03)

Šaltiniai: adrreports.eu (EMA) - 2022 m. kovo 26 d. / vigiaccess.org (PSO) - Statusas 2022 03 26
Šaltinis: vaers.hhs.gov (CDC / FDA) - Statusas 2022-03-18

Simptomas: miokarditas (širdies raumens uždegimas) - Registruoti pranešimai

^* Padidinti nuo 2021 11 19 - 2021 12 03 / 2021 11 12 - 2021 11 29 adresu 2.088 Žinutės

Šaltiniai: adrreports.eu (EMA) / vigiaccess.org (PSO) - nuo 2021 m. lapkričio 19 d.
Šaltinis: vaers.hhs.gov (CDC / FDA) - Nuo 2021 m. lapkričio 12 d.

Simptomas: Perikarditas (perikardo uždegimas) - Registruoti pranešimai

^* Padidinti nuo 2021 12 10 iki 2021 12 24 10.367 Žinutės

Šaltiniai: adrreports.eu (EMA) / vigiaccess.org (PSO) - Statusas 2021-12-24
Šaltinis: vaers.hhs.gov (CDC / FDA) - Statusas 2021-12-17

Simptomas: Herpes Zoster - Registruoti pranešimai

Šaltiniai: adrreports.eu (EMA) / vigiaccess.org (PSO) - nuo 2021 m. lapkričio 13 d.
Šaltinis: vaers.hhs.gov (CDC / FDA) - Statusas 05.11.2021

Simptomas: trombozė - Registruoti pranešimai

Šaltiniai: adrreports.eu (EMA) / vigiaccess.org (PSO) - nuo 2021 m. lapkričio 13 d.
Šaltinis: vaers.hhs.gov (CDC / FDA) - Statusas 05.11.2021

Simptomas: staigi mirtis - Registruoti pranešimai

Šaltiniai: adrreports.eu (EMA) / vigiaccess.org (PSO) - nuo 2021 m. lapkričio 13 d.
Šaltinis: vaers.hhs.gov (CDC / FDA) - Statusas 05.11.2021

---

RT-qPCR metodo tinkamumo įvertinimas
Galimos infekcijos nustatymas ir
Asmenų užkrečiamumas SARS-CoV-2

Dabartinė eksperto nuomonė Dr. rer. biol. hum. Ulrike Kämmerer

Ekspertų nuomonė yra tokia. čia iš Svetainė . Gydytojai ir mokslininkai už sveikatą, laisvę ir demokratiją, e.V. arba saugomi čia parsisiunčiama.

Klaidingai teigiamų PGR tyrimų rezultatų patikrinimas

Portugalijos Algarvės universiteto mokslininkai Leslie C. Woodcockas, P. Stallinga ir Igoris Chmelinskis 2021 m. lapkritį žurnale "The Lancet Respiratory Medicine" paskelbtame straipsnyje praneša, kad Egzosomų vaidmuo atliekant klaidingai teigiamus kovid-19 PGR tyrimus apie savo tyrimų rezultatus, kurie yra Nuoroda galima atsisiųsti.

Duomenų atnaujinimas - EMA - VAERS - PSO - Pranešimai apie nepageidaujamas reakcijas

Portugalijos Algarvės universiteto mokslininkai Leslie C. Woodcockas, P. Stallinga ir Igoris Chmelinskis 2021 m. lapkritį žurnale "The Lancet Respiratory Medicine" paskelbtame straipsnyje praneša, kad Egzosomų vaidmuo atliekant klaidingai teigiamus kovid-19 PGR tyrimus apie savo tyrimų rezultatus, kurie yra Nuoroda galima atsisiųsti.

Pranešimų apie nepageidaujamas reakcijas į vakcinas palyginimas iš 1000 atvejų

Pagrindinių teisių apribojimas

2021 m. gruodžio 11 d. Federalinio įstatymų leidinio I dalis Nr. 83 Įstatymas, kuriuo siekiama sustiprinti
Vakcinacijos nuo Covid-19 prevencija ir kitų taisyklių, susijusių su 2021 m. gruodžio 10 d. Covid-19 pandemija, keitimas pagrindinės teisės

• fizinis vientisumas
• asmens laisvė
• susirinkimų laisvė
• judėjimo laisvė
• namų neliečiamybė

RESTRICTED (PDF parsisiųsti):

Šie pakeitimai įsigalios 2021 m. lapkričio 25 d:

16 straipsnis - Vokietijos socialinio kodekso dvyliktosios knygos "142 skirsnis Pereinamojo laikotarpio reglamentas dėl bendrų pietų neįgaliesiems dėl Covid-19 pandemijos; įgaliojimas priimti potvarkius" pakeitimas.

17 straipsnis - Federalinio pensijų įstatymo pakeitimas

18 straipsnis - Prieglobsčio prašytojų įstatymo pakeitimas

Šie pakeitimai įsigalios 2022 01 01:

12a straipsnis - Socialinio kodekso trečiosios knygos pakeitimas

"109 straipsnio 5 dalies 3 sakinyje žodžiai "2021 m. gruodžio 31 d." pakeičiami žodžiais "2022 m. kovo 31 d.".

"421c skirsnis iš dalies keičiamas taip: "aa) sakinio dalyje prieš 1 numerį žodžiai "iki 2021 m. gruodžio 31 d." pakeičiami žodžiais "nuo 2022 m. sausio 1 d. iki 2022 m. kovo 31 d.". bb) Sakinio dalyje po 2 numerio išbraukiami žodžiai "jeigu teisė į sutrumpinto darbo laiko išmoką atsirado iki 2021 m. kovo 31 d. ir"."

2023 01 01 įsigalioja šie pakeitimai:

2 straipsnis - Kiti Infekcijų apsaugos įstatymo pakeitimai

"Infekcijų apsaugos įstatymas, kuris paskutinį kartą buvo iš dalies pakeistas šio įstatymo 1 straipsniu, iš dalies keičiamas taip:

1. §§ 20a ir 20b atšaukiami.
2. § 73 iš dalies keičiamas taip:
   a) 1a dalies 7e-7h punktai panaikinami
   b) 2 dalyje žodis "7h" pakeičiamas žodžiu "7d".
   
   
   
   

Interviu apie privalomą skiepijimą nuo koronaviruso: privalumai ir trūkumai - MDR

Antradienis, 2021 11 23 06:50 - Trukmė 06:50 min.

Svetainė MDR interviu Toliau pateikiamas nuorašas, kuris čia skelbiamas kaip Garso parsisiuntimas galima įsigyti. Pranešėjas Timas Deisingeris, jo partneriai diskusijoje - Erlangeno Niurnbergo universiteto teologijos profesorius Peteris Dabrockas ir Miuncheno pediatras, Miuncheno universiteto valdybos narys Steffenas Rabe. Gydytojai, priimantys individualius sprendimus dėl skiepijimo e. V. (ÄIIE).

• Vedėjas Timas Deisingeris:

Didysis tabu - visuotinis privalomas skiepijimas - jau nebėra tabu, ir daugelis žmonių pasisako už jį. Šį rytą norime atidžiau pažvelgti į šį klausimą ir sužinoti jūsų nuomonę apie tai, daugiau apie tai - po akimirkos. Pirmiausia, taip sakant, tam tikras pagrindas diskusijai. Norime išgirsti dvi nuomones.

Antrasis bus pediatras. Pirmasis dabar yra Peteris Dabrockas, Erlangeno Niurnbergo universiteto teologijos profesorius, kuris iki 2020 m. buvo Vokietijos etikos tarybos pirmininkas. Pone Dabrockai, ką manote? Visuotinis privalomas skiepijimas, taip ar ne?

• Prof. Peteris Dabrokas: 

Todėl pripažįstu, kad laikui bėgant mano pozicija dėl privalomo skiepijimo keitėsi, ir todėl mes taip pat suprantame, kad šiais klausimais nėra vieno sprendimo, kurį priimtumėte vieną kartą ir visada jo laikytumėtės, bet turite jį pritaikyti prie aplinkybių. Daugelį mėnesių praleidau agituodamas už tai ir taip pat tikėjausi, kad žmonės supras, jog tai tik minimali rizika jums ir didelė nauda jums ir kitiems.

ir kad žmonės skiepijasi dėl savisaugos, tiesioginės apsaugos nuo kitų ir solidarumo. Taip nebuvo, ir kai išgirdau, kad tai tapo labai griežta, prieš tris savaites buvo atlikta atitinkama apklausa. Mano pozicija taip pat pasikeitė, todėl dabar linkstu prie pozicijos, kad reikia kuo greičiau įvesti visuotinį privalomą skiepijimą. 

• Vedėjas Timas Deisingeris:

Bet ar suprantate tuos, kurie nenori skiepytis arba dar nenori skiepytis?

• Prof. Peteris Dabrokas: 

Taigi, žinoma, apie tai galvojate, ypač kai jaučiate tokį didžiulį pasipriešinimą vaikštant, ir visada girdite du argumentus, kad tai iš tikrųjų proporcinga ir kad tai nėra problema.

fizinio vientisumo pažeidimas. Šie du dalykai taip pat yra susiję, ir aš norėčiau pasakyti, kad, pirma, kalbant apie fizinę neliečiamybę, kiekvienas, kuris nepritaria privalomam skiepijimui, turi suvokti, kad žala organizmui, jei jūs susirgsite šia liga arba jei ja susirgs kiti, bus daug didesnė. Visas rimtas mokslas teigia, kad liekamoji rizika yra akivaizdžiai minimali, tačiau nauda yra žymiai didesnė.

Kitas dalykas - fizinis neliečiamumas niekada neturi būti absoliutus pagrindinių teisių požiūriu, bet turi būti praktiškai suderintas su kitomis pagrindinėmis teisėmis, ir jei visų kitų žmonių laisvė masiškai ribojama dėl to, kad nedidelė grupė užtikrina, jog virusas ir toliau plis tokiu būdu, tuomet fizinis neliečiamumas, kurį iš pirmo žvilgsnio galiu suprasti, neturi būti absoliutus.

• Vedėjas Timas Deisingeris:

Buvusio Vokietijos etikos tarybos pirmininko Peterio Daboko nuomonė. O dabar norėtume išgirsti gydytojo pediatro ir paauglių gydytojo, Gydytojų asociacijos už individualius sprendimus dėl skiepų valdybos atstovo spaudai Steffeno Raabe's nuomonę. Ar vis dar suprantate pono Darbroko argumentus?

• Dr. Steffenas Rabe

Ne, man visiškai nesuprantamas argumentas už privalomą skiepijimą, ypač Covid vakcinų atveju. O kai klausausi pono Darbrocko ir jis argumentuoja netiesiogine kitų asmenų apsauga, tai, žinoma, yra esminis kliuvinys. Tik toks argumentas gali pateisinti privalomo skiepijimo svarstymą, o būtent šio aspekto Covid vakcinos neapima. Covid vakcinos suteikia tiems, kurie nori apsisaugoti, laikiną apsaugą nuo sunkių atvejų. Tačiau jos nesuteikia jokios svarbios išorinės apsaugos.

Tai pašalina bet kokius argumentus privalomo skiepijimo naudai. O jei jis kalba apie mažą ir minimalią skiepų riziką, tai tiesiog neteisinga. Būdamas pediatras, susiduriu su 16-18 metų jaunuoliais, kuriems turiu pasakyti, kad jei jie pasiskiepys "Biontech", vienintele šiuo metu rekomenduojama ir patvirtinta vakcina, rizika susirgti miokarditu kaip tiesiogine šios vakcinacijos pasekme yra bent jau 1:5000. Pone Deisinger, mes nežinome jokio kito vaisto. Per 30 metų nesu matęs jokios kitos vakcinos, kurioje tokia rimta liga kaip miokarditas būtų derinama su tokia dramatiškai didele rizika. Šis privalomas skiepijimas nėra nei teisiškai, nei morališkai, nei mediciniškai protingas, bet, kaip teisingai pasakė Hans-Jürgen Pape, yra bejėgiškumo ir bejėgiškumo išraiška.

• Vedėjas Timas Deisingeris:

Tada paimkime bejėgiškumą, jei pažvelgsime į situaciją intensyviosios terapijos skyriuose ar ligoninėse apskritai, tai yra dar vienas argumentas, kad ten yra kritinė situacija ir nėra kitos išeities, kaip tik privalomas skiepijimas.

• Dr. Steffenas Rabe

Tačiau, pone Deisingeri, privalomas skiepijimas nėra neatidėliotina priemonė. Teisinis pasiruošimas, politinis įgyvendinimas ir medicininis veiksmingumas - meluotume sau, jei per dvi tris savaites intensyviosios terapijos skyriuose pamatytume kokį nors poveikį. Turime pagaliau nustoti retinti intensyviosios terapijos skyrius ir mažinti intensyviosios terapijos lovų skaičių. Užuot privertę slaugytojus pasitraukti iš profesijos, nustatydami privalomą skiepijimą, turime pagaliau parodyti jiems reikiamą įvertinimą, kad jie liktų dirbti savo profesijoje. Ir štai kur politikai per dvejus metus visiškai žlugo. ši nelaimė yra nelaimė su pranešimu, pone Deisingeri. Mes žinojome, kad šis ruduo bus dar vienas iššūkis, taip pat ir ligoninėms bei intensyviosios terapijos skyriams, ir atmerktomis akimis sumažinome tūkstančius intensyviosios terapijos lovų. Ir tai dabar turėtų būti naudojama kaip argumentas kištis į vieną iš pagrindinių pagrindinių teisių, ir čia aš griežtai nesutinku su ponu Dabrocku, teisę į fizinę neliečiamybę, ypač tokioje šalyje kaip Vokietija, kuri turi tokią liūdną praeitį, taip pat ir medicinos srityje su šiomis intervencijomis, turėtume būti labai, labai atsargūs ir labai, labai atsargiai mąstyti.

Pagalbinės medžiagos ALC-0315 ir ALC-0159 "tik moksliniams tyrimams"

Pagalbinės medžiagos, esančios Pfizer/BioNTech Comirnaty ALC-0315  [(4-hidroksibutil)azanediil]di(heksan-6,1-diil)bis(2-heksildekanoatas) (CAS 2036272-55-4) ir ALC-0159 2-[(polietilenglikolis)-2000]-N,N-ditetradecilacetamidas (CAS 1849616-42-7) yra pagal gamintojo ABP Biosciences skirtas naudoti tik mokslinių tyrimų tikslais.

Šiuo metu turimi šių pagalbinių medžiagų tyrimai:

• http://www.eurannallergyimm.com/cont/journals-articles/1043/volume-potential-culprits-immediate-hypersensitivity-reactions-4579allasp1.pdf (PDF-atsisiųsti) 29.04.2021

• https://www.cell.com/molecular-therapy-family/molecular-therapy/fulltext/S1525-0016(21)00064-2?_returnURL=https%3A%2F%2Flinkinghub.elsevier.com%2Fretrieve%2Fpii%2FS1525001621000642%3Fshowall%3Dtrue (PDF-atsisiųsti) 04.02.2021
  
  
  
  

Federalinės vyriausybės interneto svetainėje - išbrauktas teiginys "Ar bus teisinė prievolė skiepytis - NE".

Versija iš 17.11.2021 00:39:55 vis dar buvo

Versija iš 19.11.2021 16:44:31 dabar yra (čia galima rasti originale):

Pirmiau pateiktas nuorodas galima rasti per "WayBackMachine" (https://web.archive.org) apsaugoti archyvo puslapiai.

Stebina tai, kad "vakcinos ir toliau stebimos ir tikrinamos net ir po to, kai jos buvo patvirtintos...". "Leidimai" yra tik sąlyginiai leidimai, kurie turi būti kasmet atnaujinami iki galutinio patvirtinimo (žr. toliau).

Sąlyginių leidimų prekiauti Covid-19 vakcinomis galiojimo pratęsimas

Atitinkamus toliau nurodytus dokumentus, kuriuos galima atsisiųsti, rasite skyriuje "Europos Komisijos procedūros" per atitinkamą nuorodą "Komisijos įgyvendinimo sprendimas" ZIP failo pavidalu, paspaudus atitinkamą Dokumento piktograma dešiniajame stulpelyje.

Pirmasis simbolis reiškia "Sprendimai" (ZIP failas prasideda "dec", antrasis - "Priedai", atitinkantis "anx". Išpakuotų failų pavadinimo galūnė reiškia kalbos santrumpą (de - vokiečių kalba)

(Antrame) stulpelyje "Procedūros tipas", pavyzdžiui, yra įrašų apie "Mėnesio atnaujinimas" (gamintojo atnaujinta informacija apie preparatą, šalutinį poveikį ir kt.), "Klaidų ištaisymas" (vertimo pataisymai), "Taisomasis sprendimas" (sprendimai dėl komercializavimo apsaugos, jos pratęsimo) ir "Metinis atnaujinimas" (sąlyginio leidimo pratęsimas).

Kompanija - "BionTech/Pfizer

2021 m. lapkričio 3 d. Europos Komisija Briuselyje paskelbė dokumentą C(2021) 7992 (galutinis). Komisijos įgyvendinimo sprendimas nuo 2021 11 03, "dėl Sprendimu C(2020) 9598(galutinis) suteikto sąlyginio leidimo prekiauti žmonėms skirtu vaistu "Comirnaty - Tozinameran, COVID-19 mRNA vakcina (modifikuota nukleozidais)" metinio pratęsimo ir to sprendimo pakeitimo", su: "2020 m. gruodžio 21 d. Sprendimu C(2020) 9598(galutinis) suteiktas sąlyginis leidimas pratęsiamas.“

Spikevax - Moderna

2021 m. spalio 4 d. Europos Komisija Briuselyje paskelbė dokumentą C(2021) 7305 (galutinis). Komisijos įgyvendinimo sprendimas nuo 2021 10 04, "dėl Sprendimu C(2020) 94(galutinis) suteikto sąlyginio leidimo prekiauti žmonėms skirtu vaistu "Spikevax - COVID-19 mRNA vakcina (modifikuota nukleozidais)" metinio pratęsimo ir to sprendimo pakeitimo", su: "2021 m. sausio 6 d. Sprendimu C(2021) 94(galutinis) suteiktas sąlyginis leidimas pratęsiamas.“

Vakszevira - AstraZeneca

2021 m. lapkričio 9 d. Europos Komisija Briuselyje paskelbė dokumentą C(2021) 8206 (galutinis). Komisijos įgyvendinimo sprendimas nuo 2021 11 09, "dėl Sprendimu C(2020) 698(galutinis) suteikto sąlyginio leidimo prekiauti žmonėms skirtu vaistu "Vaxzevira - COVID-19 mRNA vakcina (modifikuota nukleozidais)" metinio pratęsimo ir to sprendimo pakeitimo", su: "2021 m. sausio 29 d. Sprendimu C(2021) 698(galutinis) suteiktas sąlyginis leidimas pratęsiamas.“

Covid-19 vakcina - Janssen

Šiuo metusu dokumentu C(2021) 1763 (galutinis) tik Komisijos įgyvendinimo sprendimas dėl sąlyginio leidimo naudoti vakciną nuo 2021 m. kovo 11 d.

Svetainėje 4 straipsnis teigiama: "Leidimas galioja vienerius metus nuo pranešimo apie šį sprendimą dienos."

Paulio Erlicho instituto (PEI) apibrėžimai dėl COVID-19 vakcinų

Nuorodos į 2021 08 15 ir 2021 09 07 versijas pateikiamos per "WayBackMachine" (https://web.archive.org) išsaugoti archyvo puslapiai, o dabartinė versija nuo 23/09/2021 * per nuorodą į Originalus puslapis PEI. Čia taip pat skelbiami farmacijos bendrovių išleisti "Raudonieji laiškai", taip pat čia galima atsisiųsti.

Visas išvardytas interneto svetaines galima atsisiųsti iš čia esančių PDF formato dokumentų.

15.08.2021 - "COVID-19 vakcinos apsaugo nuo "užsikrėtimo SARS-CoV-2 virusu." (Interneto svetainė kaip PDF parsisiųsti)

07.09.2021 - "COVID-19 vakcinos apsaugo nuo sunkios SARS-CoV-2 viruso infekcijos eigos.“ (Svetainė kaip PDF parsisiųsti)

23.09.2021 * - "COVID-19 vakcinos skirtos aktyviai imunizacijai, siekiant išvengti SARS-CoV-2 viruso sukeltos COVID-19 ligos.“ (Svetainė kaip PDF parsisiųsti)

Mūsų pasaulis duomenyse - Covid-19, skiepai, mirtys

Svetainėje Mūsų pasaulis duomenyse Džono Hopkinso universiteto oficialiai surinktus duomenis įvairiomis temomis visame pasaulyje, įskaitant šiuos Vokietijos statistinius duomenis:

Nuoroda į statistiką - Asmenų, gavusių bent vieną COVID-19 vakcinos dozę, dalis

Nuoroda į statistiką - Bendras patvirtintų COVID-19 atvejų skaičius milijonui gyventojų

Nuoroda į statistiką - Bendras COVID-19 mirčių skaičius milijonui gyventojų

Europos Tarybos rezoliucija 2361/2021

Savo rezoliucijoje "Dėl Kovid-19 vakcinos: etiniai, teisiniai ir praktiniai aspektai rekomendacijas, kuriose, be kita ko, kalbama apie sąžiningą vakcinų paskirstymą, savanorišką skiepijimo pobūdį ir žmonių, kurie dėl kokių nors priežasčių nesirenka skiepytis, nediskriminavimą.

"7.3.1. užtikrinti, kad piliečiai būtų informuoti, jog skiepijimas nėra privalomas
ir kad niekam nebūtų daromas politinis, socialinis ar kitoks spaudimas skiepytis.
jei jis pats nenori to daryti".

"7.3.2 užtikrinti, kad niekas nebūtų diskriminuojamas dėl to, kad nebuvo paskiepytas, dėl galimo pavojaus sveikatai arba dėl to, kad nenori būti skiepijamas".

Kadangi Europos Taryba neturi teisėkūros įgaliojimų, šios rekomendacijos nėra teisiškai privalomos nė vienai valstybei narei.

Iš šių rekomendacijų negalima daryti išvados nei apie privalomo skiepijimo draudimą, nei apie diskriminaciją, net jei tai būtų pageidautina dėl atsakingų piliečių interesų...

Marburgo virusas

Nuo 2021 m. pradžios skelbiama vis daugiau straipsnių apie Marburgo virusą. Pavyzdžiui, 2021 m. vasario 25 d. Leidinys iš Elsevier Inc. Nacionalinė medicinos biblioteka.

Praėjus mažiau nei dviem mėnesiams, 2021 m. balandžio 22 d., antraštė GAVI Vakcinų aljansas „Kita pandemija: Marburgas?“

Jau 2018 m. Primerdesign Ltd. PGR tyrimas "Virusinio baltymo 35 (VP35) geno Marburgo viruso genesig standartinis rinkinys„.

Nors Marburgo virusas, kuris pirmą kartą buvo 1967 m. aprašytan yra Ebolos viruso giminaitis, tuo metu nuo jo mirė 376 žmonės, o nuo 2005 m. - tik 16 žmonių.

Atsižvelgiant į tai, pernelyg didelis spaudimas sukurti vakciną, kuri būtų naudojama prieš Marburgo virusą, šiame kontekste atrodo nesuprantamas. RiVax® per Soligenix Inc.. Skubėjimas apeiti įprastus 1, 2 ir 3 bandymų etapus pagal FDA bandymų su gyvūnais gaires verčia susimąstyti.

2021 m. rugsėjo 22 d. Kieranas Morrissey, Dublinas, Airija, apibendrina savo mintis šia tema čia kartu.

Teisinė nuomonė dėl netiesioginio privalomo skiepijimo

111 puslapių Teisinė nuomonė 2021 m. spalio 4 d. Prof. Dr. Dietrich Murswiek, įvertinęs visus svarstytinus aspektus, priėjo prie tokios apibendrinančios išvados: "Neskiepytų asmenų diskriminacija pagal taisykles dėl galimybės dalyvauti viešajame gyvenime ir pagal karantino taisykles pažeidžia nukentėjusių asmenų pagrindines teises ir prieštarauja Konstitucijai."

Straipsnis_Li
Ligoninės turėtų samdyti, o ne atleisti slaugytojus, turinčius natūralų imunitetą

Vertimas į vokiečių kalbą

PAGAL MARTINAS KULLDORFFAS   2021 M. SPALIO 1 D.   ISTORIJA, POLITIKA, VIEŠOJI SVEIKATA, SOCIETY   4 MINUTĖS

Tarp daugybės netikėtų šios pandemijos įvykių labiausiai stulbinantis buvo natūraliai įgyto imuniteto po to, kai žmogus persirgo Covid liga, klausimas. 

Natūralų imunitetą suprantame bent jau nuo Atėnų maras 430 m. pr. m. e. Čia yra Tukididas:

"Vis dėlto daugiausia užuojautos ligoniai ir mirštantieji sulaukdavo iš tų, kurie pasveiko nuo ligos. Šie iš patirties žinojo, kas tai yra, ir nebijojo dėl savęs, nes tas pats žmogus niekada nebuvo užpultas du kartus - bent jau mirtinai. - Tukididas

Bent šimtą metų gyvenome su endeminiais koronavirusais, kuriems turime ilgalaikį natūralų imunitetą. Kaip ir tikėtasi, natūralų imunitetą turime ir po Covid-19 ligos, nes, nepaisant plačiai paplitusio viruso, pakartotinių užsikrėtimų, kurie sukeltų sunkias ligas ar mirtį, buvo itin mažai. 

Daugumai virusų natūralus imunitetas yra geresnis už vakcinomis sukeltą imunitetą, tai pasakytina ir apie Covid. Į geriausias iki šiol atliktas tyrimas, paskiepytieji maždaug 27 kartus dažniau sirgo simptomine liga nei turintieji natūralų imunitetą, o apskaičiuotas intervalas svyravo nuo 13 iki 57. Kovidų mirties atvejų nebuvo nė vienoje iš grupių, taigi tiek natūralus, tiek vakcininis imunitetas gerai apsaugo nuo mirties. 

Pastarąjį dešimtmetį glaudžiai bendradarbiauju su ligoninių epidemiologais. Gydytojų užduotis - gydyti pacientus ir užtikrinti, kad jie pasveiktų, o ligoninės epidemiologo užduotis - užtikrinti, kad pacientai, būdami ligoninėje, nesusirgtų, pavyzdžiui, neužsikrėstų mirtinu virusu nuo kito paciento ar slaugytojo. 

Šiuo tikslu ligoninės taiko įvairias priemones - nuo dažno rankų plovimo iki visiško infekcijų kontrolės regalijos slaugant Ebolos virusu sergantį pacientą. Skiepai yra pagrindinė šių kontrolės pastangų sudedamoji dalis. Pavyzdžiui, likus dviem savaitėms iki blužnies operacijos, pacientai skiepijami pneumokokinė vakcina siekiant sumažinti pooperacinių infekcijų skaičių, o dauguma klinikinio personalo kasmet skiepijami nuo gripo.

Infekcijų kontrolės priemonės ypač svarbios vyresnio amžiaus silpniems ligoninės pacientams, kurių imuninė sistema nusilpusi. Jie gali užsikrėsti ir mirti nuo viruso, kurį dauguma žmonių lengvai išgyventų. Pagrindinis slaugytojų ir gydytojų imunizacijos nuo gripo argumentas - užtikrinti, kad jie neužkrėstų tokių pacientų.  

Kaip ligoninės gali geriausiai apsaugoti savo pacientus nuo Covid ligos? Tai nepaprastai svarbus klausimas, taip pat aktualus slaugos namams. Yra keletas akivaizdžių standartinių sprendimų, pavyzdžiui, atskirti pacientus, sergančius Covid, nuo kitų pacientų, sumažinti darbuotojų rotaciją ir suteikti darbuotojams, kuriems pasireiškia į Covid panašūs simptomai, dideles nedarbingumo atostogas. 

Dar vienas tikslas - įdarbinti kuo stipresnį imunitetą Covid turinčius darbuotojus, nes jie rečiau užsikrečia ir platina ligą savo pacientams. Tai reiškia, kad ligoninės ir slaugos namai turėtų aktyviai stengtis įdarbinti darbuotojus, turinčius natūralų imunitetą prieš Covid ligą, ir naudoti tokius darbuotojus savo pažeidžiamiausiems pacientams. 

Todėl dabar vyksta arši konkurencija, kai ligoninės ir slaugos namai desperatiškai stengiasi įdarbinti žmones, turinčius natūralų imunitetą. Gerai, iš tikrųjų, ne. 

Vietoj to ligoninės atleidžia slaugytojus ir kitus darbuotojus, turinčius geresnį natūralų imunitetą, o tuos, kurių imunitetas yra silpnesnis, palieka dirbti. Taip jos išduoda savo pacientus, didindamos jų riziką užsikrėsti hospitalinėmis infekcijomis. 

Baltųjų rūmų vyriausiasis patarėjas medicinos klausimais daktaras Anthony Fauci, reikalaudamas įpareigojimo skiepytis, kvestionuoja natūralaus imuniteto egzistavimą po Kovido ligos. Taip jis seka CDC direktorės Rochelle Walensky pavyzdžiu, kuri 2020 m. suabejojo natūraliu imunitetu. Memorandumas išleido The Lancet. Universitetinės ligoninės, nustatydamos privalomą skiepijimą, dabar taip pat abejoja natūralaus imuniteto egzistavimu po Covid ligos. 

Tai stebina. 

Dirbu Brighamo ir moterų ligoninėje Bostone, kuri paskelbė, kad visos slaugytojos, gydytojai ir kiti sveikatos priežiūros paslaugų teikėjai bus atleisti iš darbo, jei nepasiskiepys Covid vakcina. Praėjusią savaitę kalbėjausi su viena iš mūsų slaugytojų. Ji sunkiai dirbo slaugydama "Covid" pacientus, net kai kai kurie jos kolegos pandemijos pradžioje išsigandę išvyko. 

Nenuostabu, kad ji užsikrėtė, bet pasveiko. Dabar ji turi stipresnį ir ilgiau išliekantį imunitetą nei skiepyti iš namų dirbantys ligoninės administratoriai, kurie atleidžia ją iš darbo už tai, kad nebuvo paskiepyta. 

Jei universitetinės ligoninės nesugeba teisingai pateikti medicininių duomenų apie pagrindinius imuniteto mokslinius dalykus, kaip galime jomis pasitikėti kitais mūsų sveikatos aspektais? 

Kas toliau? Universitetai klausia, ar žemė apvali, ar plokščia? Tai bent jau padarytų mažiau žalos.

Martin Kulldorff, Brownstone instituto vyresnysis mokslininkas, Harvardo medicinos mokyklos medicinos profesorius.
kulldorff@brownstone.org

Baudžiamieji kaltinimai ir skundas dėl nusikalstamos veikos "BioNTech" komplekse

Federaliniam generaliniam prokurorui prie Federalinio Aukščiausiojo Teismo Dr. Peteriui Frankui

2021 06 10 advokatų kontoros "Robert & Ulbrich" advokatas Tobias Ulbrichas, Otto Str. 12, 50859 Kelnas, pateikė minėtą baudžiamąjį skundą ir baudžiamąją bylą "visiems asmenims, kurie sukūrė ... mRNA eksperimentinę medžiagą iš "BioNTech/Pfizer", vadinamą "vakcina", ją gamino, platino, patvirtino ją skiepijimui ir suleido ją neišmanėliams. Ypač prieš:

1. Alexandra Knauer, "Knauer Wissenschaftliche Geräte GmbH", Hegauer Weg 38, 14163 Berlynas, (lipidų nanodalelių gamybos mašinų gamintojas) generalinis direktorius
2. Vasantas Nasasimhanas, "Novartis AG" generalinis direktorius (lipidinių nanodalelių patentų AC - 0135 ir AC 0159 turėtojas)
3 James Bradner, medicinos mokslų daktaras, "Novartis" Biomedicininių tyrimų instituto (NIBR) prezidentas, lipidų kūrėjas
4 Thomas D. Madden Ph.D. Bendrovės "Acuitas Therapeutics", gaminančios lipidus "Biontech", generalinis direktorius 5 Ying K. Tam, vyriausiasis mokslo darbuotojas Acuitas Therapeutics,
6-asis Seanas Semple'as, "Senio" direktorius prieš klinikinius tyrimus
7 Dr. Dietmaras Katingeris, generalinis direktorius Donaustraße 99, 3400 Klosterneuburg, Austrija, (Biontech SE produkcijos gamintojas ir kūrėjas)
8 Prof. Dr. Ugur Sahin, BioNTech SE generalinis direktorius, An der Goldgrube 12, 55131 Maincas
9 Šonas Maretas, "BioNTech SE" CBO ir CCO, ten pat.
10 Dr. Sierk Poetting, "BioNTech SE" finansų direktorius ir COO, ten pat.
11 PD Dr. Özlem Türeci, BioNTech SE CMO, ten pat.
12 Ryanas Richardsonas, "BioNTech SE" CSO, ten pat.
13 Karin Samusch, Dermapharm AG, Lil-Dagover-Ring 7, 82031 Grünwald (gamintojas)
14. Hilde Neumeyer, Dermapharm AG, Lil-Dagover-Ring 7, 82031 Grünwald (gamintojas) 15 Dr. Hans-Georg Feldmeier, Dermapharm AG, Lil-Dagover-Ring 7, 82031 Grünwald (gamintojas)
16 Dr. Jürgen Ott Dermapharm AG, Lil-Dagover-Ring 7, 82031 Grünwald (gamintojas) 17. Markas Pfisteris, "Biontech" gamybos vadybininkas "Novartis AG" Marburge (gamintojas) 18 Dr. Sabine Brand, Siegfried Hameln, Langes Feld 13, 31789 Hameln, Vokietija (Gamintojas)
19 Dr. Svenas Remmerbachas, "Baxter Oncology GmbH", Kantstrasse 2, 33790 Halė/Vestfalija (gamintojas)
20 Dr. Fabrizio Guidi, Pirmininkas; "Sanofi-Aventis Deutschland GmbH", Industriepark Höchst, K703, Brüningstr. 50, 65926 Frankfurtas (gamintojas)
21 Dr. Matthias Braun, Sanofi-Aventis Deutschland GmbH
22-oji Oliveris Coenenbergas, Sanofi-Aventis Deutschland GmbH,
23 Evelyne Freitag, Sanofi-Aventis Deutschland GmbH,
24 Prof. Dr. Jochenas Maasas, Sanofi-Aventis Deutschland GmbH,
25 Prof. Dr. CichutekPaul Ehrlich instituto prezidentas (pareigos kontroliuoti ir įspėti pažeidimas, leidimo nepanaikinimas)
26 Prof. Dr. ViethsPaul Ehrlich instituto viceprezidentas,
27 Dr. Keller-StanislawskiPaulio Erlicho instituto Vaistų ir medicinos prietaisų saugos departamentas.
28 Prof. Dr. Hildt, Paulio Erlicho instituto Virusologijos skyriaus vadovas
29 Prof. Dr. van Zandbergen, Paulo Erlicho instituto Imunologijos skyriaus vadovas
30. Dr. Hinz, Paulio Erlicho instituto 3 ir 4 terapinių vakcinų skyriaus vadovas 31 Matthias Groote, EMA atstovas Europos Parlamente, Bergmannstraße 37, 26789 Leer,
32. Karlas Broichas, Federalinio vaistų ir medicinos prietaisų instituto prezidentas ir EMA atstovas Vokietijoje, Kurt-Georg-Kiesinger-Alle 3, 53175 Bonna,
33. Ponia Emer Cooke, EMA prezidentas, Domenico Scarlattilaaan 6, 1083 HS Amsterdamas,
34. Federalinis sveikatos apsaugos ministras Jensas Spahnas, Rochusstraße 1, 53123 Bonna,
35. Prof. Dr. Lothar H. Wieler, kurį galima atsisiųsti iš Roberto Kocho instituto,
36. Prof. Dr. Christianas Drostenas, atsisiųsti iš Roberto Kocho instituto,
37 Billas ir Melinda Gatesai,
ir kt.

Be to, skiepijimo centruose yra visi neinformatyvūs skiepijimo specialistai, kurie suleido "vakciną", nesigilindami į patvirtinimo statusą ir skiepijimo pasekmes, kurios žemiau pasirašiusiajam nėra žinomos.

Už genocidą, pasikėsinimą įvykdyti genocidą, KrWKG 20 straipsnio pažeidimą, valstybės išdavystę prieš federalinę vyriausybę ir kt.„

Labai įdomus visas tekstas (194 puslapiai) čia ir, be kita ko, cituoja kaip liudytoją nurodytą istoriką Dr. Paulą Schreyerį, kuris "apibendrino pastarųjų 20 metų įvykius ir apibūdino NVO (nevyriausybinių organizacijų) įtaką pasirengimui pandemijai".

LUBECAVAX - Prof. Dr. Winfried Stöcker, Liubekas

Statusas 2021 m. rugpjūčio 31 d.

Winfriedas Stöckeris gimė 1947 m. Aukštutinėje Lužicoje. 1967-1973 m. studijavo mediciną Viurcburge, daktaro laipsnį įgijo 1976 m., nuo 1999 m. yra Tongji medicinos universiteto Vuhane profesorius, nuo 2011 m. - Liubeko universiteto garbės profesorius, įmonės įkūrėjas. EUROIMMUN Medizinische Labordiagnostika AG 1987 m. specializuojasi autoimuninės ir alergijos diagnostikos, infekcinės serologijos ir molekulinės genetikos srityse.

Prof. Dr. Stöckeris iš pat pradžių dalyvavo kuriant veiksmingą vakciną nuo SARS CoV2, iš pradžių ją išbandė pats, paskui skiepijo savo šeimos narius ir galiausiai savo sukurtą vakciną pateikė savo darbuotojams.

Jis aprašo veikimo būdą savo Tinklaraštis taip (Citata):

Darome prielaidą, kad vainikuotosios infekcijos galima veiksmingai išvengti skiepijant. . Liubeko skiepijimas naudojamas nedidelis, individualiai pritaikytas, genetiškai modifikuotas trivialus antigenas, kurio organizmui nereikia pačiam sintetinti, kaip tai daroma taikant genų pervežimo metodus. Jis skatina antikūnų susidarymą recipiento organizme būtent prieš tas viruso struktūras, kuriomis jis prisijungia prie neskiepytų žmonių endotelio ląstelių angiotenzino-2 receptorių. Dėl šios blokados antikūnai neleidžia ląstelėms užsikrėsti ir virusas negali įsitvirtinti.

Paprastai skiepijama tris kartus: pirmąją dieną, po maždaug 14 dienų ir dar kartą maždaug po keturių savaičių. Antikūnų koncentracija matuojama po 14 dienų, nes neturime oficialiai nustatyto pasitikėjimo, kad iki to laiko imuninė apsauga bus susiformavusi. Daugiau nei 95% pacientų pabaigoje nustatoma didelė IgG klasės imunoglobulinų klasės antikūnų koncentracija prieš vainikėlio smaigalio baltymus, todėl jie tikriausiai yra atsparūs vainikėliui. Imunokompromituoti pacientai vieną ar du kartus pakartotinai skiepijami dviguba doze - tai galima atpažinti tik ištyrus serumą - ir pusei jų vis tiek pasiekiamas aukštas titras. Be to, matavimai parodė, kad antikūnai galėjo neutralizuoti (nukenksminti) koronavirusus ir kad trims ketvirtadaliams atvejų išsivystė T ląstelių imunitetas.

Jis taip pat praneša apie vakcinų gamybą ir jų naudojimą gydytojams apskritai (Citata):

Tai reiškia, kad bet kuris gydytojas Vokietijoje gali sumaišyti antigeną su adiuvantu (tik dabar tai yra vakcina) ir teisėtai švirkšti arba individualiai skirti jį savo pacientams. Adiuvantas išlaiko antigeną ir pateikia jį imuninei sistemai. Be adiuvanto antigenas pasiskirstytų po visą organizmą ir taip būtų atskiedžiamas iki neveiksmingumo. Dėl funkcinių priežasčių abu komponentai turi būti laikomi atskirai ir šviežiai sumaišyti. Tačiau pagal įstatymus gydytojas negali savo paruoštos vakcinos perduoti (parduoti) tretiesiems asmenims.

Tiekimo šaltinis nurodytas jo tinklaraštyje:

medidoc GmbH
Jakob-Haringer-Strasse 1
5020 Zalcburgas
AUSTRIJA

El. paštas: info@medidoc.uk
Telefono numeris: +43 59333 2000

medidoc.uk
medidoc.us
medidoc.gmbh

UID: ATU33905904
Zalcburgo miesto mokesčių inspekcija 114/8583
Įmonės registras: 45971F
Komercinio registro teismas: Zalcburgo apygardos teismas

Problemą, kad šios vakcinos ES dar nepripažįsta (palyginti su skubiu mRNA ir vektorinių preparatų patvirtinimu), kompensuoja tai, kad ši vakcina sukelia panašų T ląstelių imunitetą kaip ir sveikstantiems žmonėms.

T ląstelių imunitetas nustatomas ir patvirtinamas tinkamai įrengtose laboratorijose. Šis sertifikatas yra teisiškai privalomas imuniteto įrodymas.

Kol pasveikusieji yra ir išliks lygiaverčiai su paskiepytaisiais dėl įvairių apribojimų ir (arba) sušvelninimų, ši vakcina yra dabar jau gerai išbandyta alternatyva, neturinti panašaus šalutinio poveikio kaip mRNA ar vektoriniai preparatai.

BNT162b2 vakcina: galimi kodono perskaitymo sutrikimai, baltymų sintezės klaidos ir alternatyvaus splaisingo anomalijos

Kira Smith

Mokslinėje Komentaras 2021 m. kovo 25 d., paskelbta AUTHOREA kaip išankstinis spaudinys, kurį galima atsisiųsti kaip PDF anglų kalba, pabrėžiamas galimas BioNTec/Pfizer vakcinos BNT162b2 šalutinis poveikis ir pateikiamas bendras mRNA vakcinų poveikis. Vertimas į vokiečių kalbą pateikiamas čia:

Abstraktus

BNT162b2 vakciną nuo Covid-19 sudaro RNR, kurią sudaro 4284 nukleotidai, suskirstyti į 6 sekcijas, suteikiančias informaciją, reikalingą S-spike baltymų, kuriuos Sars-CoV-2 (Covid-19) naudoja kaip šeimininkus, gamyklai sukurti. Šie baltymai nukreipiami už ląstelės ribų ir sukelia imuninį atsaką bei antikūnų gamybą.

Problema yra stipri mRNA modifikacija: siekiant apgauti imuninę sistemą, uracilas pakeičiamas Ψ (pseudouridinu); visų kodonų tripletų raidės pakeičiamos C arba G, kad labai padidėtų baltymų sintezės greitis; kai kurios aminorūgštys pakeičiamos prolinu; pridedama nežinomos modifikacijos seka (3′-UTR).

Šie sutrikimai gali kelti rimtų abejonių dėl kodonų naudojimo klaidų. Galimas klaidingas vertimas turi įtakos įvairių ligų patofiziologijai. Be to, įšvirkščiama mRNR yra pre-mRNR, iš kurios gali susidaryti kelios subrendusios mRNR; tai yra alternatyvaus splaisingo sutrikimai, kurie yra tiesioginis rimtos ilgalaikės žalos žmogaus sveikatai šaltinis.

Iš esmės tai, kas gaminama, gali būti ne identiška baltymo S smaigalys: tik vertimo dekodavimo klaida, neteisingai skaitant kodonus, gaminant skirtingas aminorūgštis, tada baltymai sukelti rimtą ilgalaikę žalą žmogaus sveikatai, nors DNR nėra modifikuota, bet branduolyje, o ne citoplazmoje, kur modifikuota mRNA atvyksta.

Tačiau šiuo atveju sintezės greičio ir baltymo raiškos koreliacija su sintezės klaidomis, taip pat mechanizmas, galintis turėti įtakos sekos vertimui, lieka neaiškūs, todėl dar neatlikta daug tyrimų.

Įvadas

Informacija apie vakcinos veikimo būdą

BioNTec/Pfizer vakcinos Sars-CoV-2 (Covid-19), vadinamos BNT162b2, bet dar vadinamos Tozinameran arba Comirnaty, sudėtyje yra apie 30 µg RNR, kuri įšvirkščiama į lipidinę sferą žmogaus organizme, ypač į ląstelių citoplazmą, bet ne į branduolį (kur yra DNR); ši RNR turi modifikuotą genetinę informaciją (todėl modRNA), t. y. mRNA (pasiuntinių RNR), kurioje yra instrukcijos, kaip sukurti baltymų fabriką, baltymo S smaigalio klonus, t. y. baltymą (ir tik baltymą, ne visą virusą), kurį Covid-19 naudoja įsiskverbti į šeimininką ir jį užkrėsti. Kai ribosomos juos serijiniu būdu pagamina, jie per lipidinį apvalkalą išnešami iš ląstelės; taip imuninė sistema šiuos baltymus identifikuoja kaip ląstelių užpuolikus ir puola juos gamindama antikūnus. Todėl neįmanoma įsivaizduoti, kad vakcina sukelia Covid-19 ar pakeičia žmogaus DNR.

Pastabos apie baltymų sintezę

Vertimas paprastai skirstomas į tris etapus: Vertimo pradžia, tęsinys ir pabaiga.

1. Ribosoma prisijungia prie mRNR ties pradžios kodonu;
2. Polipeptidinė grandinė paeiliui pridedant aminorūgščių pailgėja viena ribosomos judėjimo kryptimi;
3. Jei randamas stop kodonas, polipeptidas išsiskiria ir ribosoma atsiskiria.

Sekvencijos surinkimo ir vertimo klaidos

MRNR sekos pavertimas polipeptidu priklauso nuo perkėlimo RNR (tRNR), kuri perkelia aminorūgštis į ribosomą. Ribosomose tRNA poruojasi su mRNA, papildydama bazių poras tarp mRNA kodono nukleotidų ir tRNA antikodono nukleotidų. Kai teisinga tRNA susijungia su kodonu, ji perduoda savo aminorūgštį į augančios polipeptidinės grandinės galą.

Perdavimo RNR (tRNA) ribosomoje dekoduojant mRNR kodonus, vyksta Vatsono ir Kriko bazių poravimas.

Apskaičiuota, kad bendras genomo replikacijos klaidų lygis (maždaug 10-8) yra maždaug 10 000 kartų mažesnis nei baltymų sintezės klaidų lygis (maždaug 10-4), todėl daugeliu atvejų mRNA transliacija yra pagrindinis procesas, lemiantis ląstelės baltymo netikslumą. DNR replikacijos ir mRNR transliacijos klaidų skaičiaus neatitikimą iš dalies gali lemti tai, kad DNR replikacija vyksta pavienių nukleotidų lygmeniu (41 = 4 galimos permutacijos), o transliacijos mechanizmas interpretuoja mRNR kodonus į tripletus (43 = 64 galimos permutacijos)(1).

RNR dekodavimo mechanizmo veiksmingumą taip pat daugiausia lemia kodonų naudojimo šališkumas, kuriam būdingas per didelis arba per mažas sinoniminių kodonų skaičius. Todėl optimizavus tRNA bangavimą ir kodonų naudojimą mRNR, galima gerokai pagerinti vertimo efektyvumą ir tikslumą(1).

Transkripcijos ir potransliacinio apdorojimo metu prieš ar po RNR transliacijos gali netiesiogiai atsirasti baltymų sintezės klaidų. Tačiau transliacijos mechanizmas gali tiesiogiai prisidėti prie klaidingos transliacijos dėl tRNA klaidingo dekodavimo (dėl kurio atsiranda klaidinga inkorporacija arba stop kodono perskaitymas), tRNA klaidingo laciliavimo (dėl kurio atsiranda neteisingas tRNA ir aminorūgščių ryšys), kodonų perskirstymo arba ribosomų translokacijos sukeltų rėmų poslinkių(1).

Tyrimo metodas

Genetinės sekos analizė

Vakciną sudaro 4284 nukleotidai, suskirstyti į 6 dalis: Kap yra sekos pradžia, prasidedanti dviem GA nukleotidais, klaidingai nurodančiais, kad mRNA yra kilusi iš žmogaus ląstelės ir todėl priimtina; 5′ nurodo kryptį, kuria turi būti verčiama, o UTR nurodo sritį, kurioje turi ilsėtis ribosoma, kad būtų gaminami baltymai. Šioje dalyje uracilo U buvo pakeistas 1-metil-3′-pseudouridino molekule, paženklinta Ψ ženklu, kad būtų išvengta imuninės sistemos ir išvengta ką tik patekusios mRNA skilimo; tačiau tai yra veiksnys, dėl kurio gali atsirasti baltymų gamybos klaidų. Kelios Ψ-sintezės dalyvauja modifikuojant konkrečias pozicijas, o kelių iš jų defektai yra susiję su žmogaus ligomis(2).

Toliau yra "sig" dalis, vadinama išplėstine S-glikoproteino signalinio peptido pradžios seka, kurios informacija reikalinga naujai suformuotam baltymui išvesti iš ląstelės per endoplazminį tinklą; vėlgi, kad RNR priimtų imuninė sistema, atliekami nukleotidų tripletų pokyčiai, kai kurios informaciją sudarančios raidės "sukeičiamos" su kitomis (dažniausiai trečios pozicijos), iš pažiūros "nekenksmingais sinonimais" (daugiausia padidinant C ir G raidžių, koduojančių baltymų sintezės greitį, skaičių). Nors juose nurodytos identiškos aminorūgštys, šie du sinonimai nėra visiškai vienodi, bent jau vertimo požiūriu. Mechanistiniai tyrimai rodo, kad kiekvieno jų sąveika su atitinkama transfer RNR (tRNA) subtiliai, bet reikšmingai skiriasi, o šie skirtumai turi įtakos ir vertimo greičiui, ir tikslumui.3 Nors tiesa, kad 3 raidės sudaro kodoną ir daugiau nei vienas kodonas koduoja tą pačią aminorūgštį, tiesa ir tai, kad neproporcingai padidinus baltymų gamybos greitį gali kilti rimtų vertimo klaidų pavojus.

Be to, buvo modifikuoti su tikrojo smaigalio baltymo S protein_mut konstravimu susiję seką sudarantys simboliai, į juos įtraukiant daugiau C ir G, kuriuos galima pridėti, laikantis standartinėje genetinio kodo lentelėje pateiktų sinonimų, pakeičiant aminorūgštis liziną (AAA) ir valiną (GUU) prolinu (CUU), kad sukonstruotas baltymas nesuirtų. Šios sekos pabaigoje yra 2 stop kodonai. Nebuvo iki galo įrodyta, kad su šiuo pakeitimu susidaro tie patys elementai ir kad neatsiranda klaidingų interpretacijų.

3′-UTR (pirmoji 3 netransliuojama sritis): Tačiau daugelis jos funkcijų vis dar nežinomos, todėl neįmanoma patikrinti jos saugumo. Tai, kas yra žinoma, nurodo PSO ir pateikia tokį sakinį: "BioNTech/Pfizer" vakcinos 3′ UTR buvo paimtas iš "amino-terminalinio skilimo stiprintuvo (AES) mRNR ir mitochondrijų koduotos 12S ribosominės RNR".

poli(A): Tada pasiekiame sekos pabaigą ir susiduriame su 30 A, tada su 10 nukleotidų GCAUAUGACU jungtimi, po kurios seka dar 70 A, nes kiekvieną mRNA organizmas gali naudoti kelis kartus.
Kai A sunaudojama, mRNR suskaidoma.

Visa tai yra patentuotos modifikacijos, kuriomis siekiama padidinti baltymų raišką, tačiau nieko nežinoma apie tikrąją organizmo atliekamą transliaciją.

Anomalijos ir kitos alternatyvaus rišimo klaidos

Kita su tuo susijusi problema yra ta, kad iš tos pačios pre-mRNA gali susidaryti skirtingos subrendusios mRNA, taigi ir šiek tiek skirtingi baltymai (alternatyvaus splaisingo anomalijos). Nustatyta, kad baltymų sintezės proceso pokytis yra kai kurių vėžio ir kitų ligų vystymosi ir augimo priežastis, niekaip nekeičiant DNR.
Visi trijuose PHT serijos genuose nustatyti splaisingo atvejai susiję su pranešėjo sekos skaitymo rėmo praradimu ir priešlaikinio nutraukimo kodono (PTC) įvedimu, kuris visada yra daugiau kaip 50-55 nukleotidai prieš paskutinę egzono ir egzono jungtį alternatyviuose transkriptuose, priklausančiuose beprasmiško mRNR skaidymo (NMD) priežiūros sistemai. Žmogaus ir žiurkės slc15a4/PHT1 atveju tai buvo įrodyta NMD slopinimo eksperimentais su skirtingomis ląstelių linijomis, kuriose po slopinimo visada stabilizavosi kanoninių transkriptų alternatyvių variantų raiška(4).

Išvados

Galimas ilgalaikis pavojus žmonių sveikatai

Galima teigti, kad seka ne tik nėra optimizuota, bet ir kelia didelių abejonių dėl kodonų naudojimo klaidų. Galima kelti hipotezę, kad per didelė modifikacija, kuria siekiama itin padidinti baltymo raišką, gali būti mRNR geno sekos surinkimo klaidų šaltinis.

TRNA prieinamumo pokyčiai gali sukelti neurodegeneracines ligas (Ishimura ir kt., 2014), o specifinių tRNA reguliavimas skatina metastazes, nes didina transkriptų, kuriuose gausu jiems giminingų kodonų, stabilumą(5).

Klaidingos transliacijos turi labai rimtų pasekmių įvairių ligų, įskaitant išsėtinę sklerozę, neurodegeneraciją, mitochondrijų miopatiją, encefalopatiją, pieno rūgšties acidozę, į insultą panašius epizodus, Parkinsono ligą ir vėžį (genezė, augimo pagreitėjimas ir metastazės), patofiziologijai(6).

100 % padidėjusio baltymų sintezės greičio koreliacija su sekos vertimo klaidomis, taip pat mechanizmas, turintis įtakos aminorūgščių gamybai, kol kas lieka nežinioje, nes dar neatlikta daug eksperimentų.

Iš esmės galima teigti, kad visos sekos kodas yra iš esmės nesubalansuotas, pernelyg didelis, palyginti su natūraliu viruso analogu, ir pernelyg didelis, kad būtų galima teigti, jog žmogaus organizmas atkuria būtent S formos baltymus kaip tikslią kopiją, todėl kyla pavojus, kad, be netinkamos imunizacijos, ilgainiui gali būti padaryta didelė žala žmogaus sveikatai.

Tai, kas gaunama iš šios sekos, toli gražu nėra tiksliai apibrėžta, tačiau kiekvieno individo genuose per ribosominį profilį yra įrašyta, kaip jis verčiamas ir kas gaminama, taigi ir nauda ar žala.

Nuorodos

1. Ou X, Cao J, Cheng A, Peppelenbosch MP, Pan Q (2019) Transliacijos dekodavimo klaidos: tRNA svyravimas ar klaidinga inkorporacija? PLoS Genet 15(3): e1008017. https://doi.org/10.1371/journal.pgen.1008017
2 Biomolekulės 2020, 10(5),729; https://doi.org/10.3390/biom10050729
3 Robinson R (2014) Kuris kodono sinonimas yra geriausias? Tai gali priklausyti nuo to, kas yra meniu. PLoS Biol 12(12): e1002014. doi:10.1371/journal.pbio.1002014
4. Andries, O. (2015). mRNA modifikavimo ir pristatymo strategijos, siekiant sukurti saugios ir veiksmingos genų terapijos platformą. Gento universitetas. Veterinarinės medicinos fakultetas, Merelbeke, Belgija.
5. eLife 2019;8:e45396 DOI: 10.7554/eLife.45396
6 Mafalda Santos, Patricia M. Pereira, A. Sofia Varanda, Joana Carvalho, Mafalda Azevedo, Denisa D. Mateus, Nuno Mendes, Patricia Oliveira, Fábio Trindade, Marta Teixeira Pinto, Renata Bordeira-Carriço, Fátima Carneiro, Carl Rui Vitira .ino, Olive & Manuel AS Santos (2018) Codon misreading tRNAs promote tumour growth in mice, RNA Biology, 15:6, 773-786, DOI: 10.1080/15476286.2018.1454244

Tyrimai patvirtina imuninės sistemos perprogramavimą naudojant RNR ir vektorines vakcinas

Stephanie Seneff iš Masačusetso technologijos instituto ir Gregas Nighas iš Portlando Naturopatinės onkologijos klinikos, Helmholco infekcijų tyrimų centro, Hanoverio medicinos mokyklos, Bonos universiteto ir Roterdamo Erasmus medicinos centro gydytojai bei mokslininkai padarė tokias pačias išvadas.

Tyrimų esmė - mRNA medžiagų sukeltas žmogaus imuninės sistemos sumažėjimas, susijęs su vadinamaisiais į įrankius panašiais receptoriais. Šie receptoriai yra atsakingi už bakterijų ir virusinių patogenų struktūrų atpažinimą.
Tyrimas, kurį atliko Stephanie Seneff e.a. ir Helmholco instituto mokslinių tyrimų grupės galima atsisiųsti čia.

Taip pat PEI (Paul-Ehrlich-Institut) jau nurodo antikūnus, kurie didina viruso krūvį nuo 30.07.2020(!) (svetainė kaip PDF parsisiųsti):

"Infekciją stiprinantys antikūnai nesukelia viruso pašalinimo ar neutralizavimo, bet leidžia virusui prisijungti prie vadinamųjų Fcγ receptorių, kurie, be kita ko, yra ant specializuotų imuninių ląstelių (vadinamųjų fagocitų). Tai savo ruožtu sudaro sąlygas virusui patekti į šias ląsteles, kuriose virusai gali daugintis. Dėl šio proceso gali padidėti viruso krūvis."

Papildoma komplikacija yra padidėjusi trombozės rizika dėl mRNA ir vektorių medžiagų. Padidėjusios trombozės rizikos tikimybę galima įvertinti ir nustatyti mikroskopu, naudojant D-dimerų testą.
Suaugusiųjų pamatinė vertė yra 4,0 mg/l - kaip labai padidėjusios.

MIT tyrimas

- Santrauka (DE vertimas)

"Operacija "Warp Speed" Jungtinėse Amerikos Valstijose pristatė dvi mRNA vakcinas - "Pfizer" ir "Moderna". Preliminarūs duomenys rodė, kad šios dvi vakcinos yra labai veiksmingos, ir tai padėjo FDA įteisinti leidimą naudoti skubos tvarka (EUA).
EUA (skubaus naudojimo leidimas), išduotas FDA. Tačiau itin greitas šių vakcinų kūrimas atliekant kontroliuojamus bandymus ir masinis šių vakcinų naudojimas kelia daugybę saugumo problemų. Šioje apžvalgoje pirmiausia išsamiai aprašome šių vakcinų technologiją. Po to aptariame tiek šių vakcinų sudedamąsias dalis, tiek numatomą biologinį atsaką į šias vakcinas, įskaitant paties spyglio baltymo gamybą, ir jų galimą ryšį su įvairiomis ūmiomis ir ilgalaikėmis patologijomis, tokiomis kaip kraujo sutrikimai, neurodegeneracinės ligos ir autoimuninės ligos. Šių galimai sukeliamų patologijų kontekste aptariame aminorūgščių sekų, esančių spyglių baltyme ir susijusių su priono baltymu, svarbą. Taip pat trumpai apžvelgiame
Tyrimai, kurie parodė, kad baltymas gali "išsiskirti", t. y. baltymas gali pereiti iš paskiepyto žmogaus į neskiepytą.
neskiepytam asmeniui, o pastarajam sukelia simptomus. Galiausiai aptariame dažnai diskutuojamą klausimą, t. y. ar šios vakcinos gali pakeisti paskiepytųjų DNR. Nors nėra tyrimų, kurie tai galutinai įrodytų, pateikiame tikėtiną scenarijų, kurį patvirtina jau nustatyti genetinės medžiagos transformacijos ir pernešimo būdai, pagal kuriuos įšvirkšta mRNA galiausiai galėtų būti įtraukta į lytinių ląstelių DNR ir perduodama iš kartos į kartą. Pabaigoje pateikiame rekomendacijas dėl stebėsenos, kad būtų galima išsiaiškinti ilgalaikį šių eksperimentinių vaistų poveikį ir geriau įvertinti tikrąjį šių naujų technologijų rizikos ir naudos santykį.„

...

- Išvados (vertimas į vokiečių kalbą)

„Teigiama, kad eksperimentinės mRNA vakcinos gali būti labai naudingos, tačiau jos taip pat gali turėti tragiškų ir net katastrofiškų nenumatytų pasekmių. Vakcinos nuo SARS-CoV-2 buvo pristatytos su didelėmis fanfaromis, tačiau yra daug aspektų, kurie kelia susirūpinimą. Čia aptarėme kai kuriuos, bet ne visus iš jų, ir norėtume pabrėžti, kad šie rūpesčiai yra potencialiai rimti ir gali išryškėti tik po kelerių metų ar net kartų. Siekiant išvengti šiame dokumente aprašytos neigiamos rizikos, rekomenduojame atsižvelgti bent jau į toliau pateiktus mokslinių tyrimų rezultatus ir stebėsenos rekomendacijas:

• Nacionalinis išsamaus duomenų apie nepageidaujamus reiškinius, susijusius su mRNA vakcinomis, tyrimas, kuriam buvo skirta didelė finansinė parama ir kuris truko gerokai ilgiau nei pirmąsias savaites po vakcinacijos.
• Pakartotiniai vakcinuotos populiacijos autoantikūnų tyrimai. Ištirti autoantikūnai
  galėtų būti standartizuota ir turėtų būti pagrįsta anksčiau užfiksuotais antikūnais ir autoantikūnais, kuriuos gali sukelti spyglio baltymas. Tai yra autoantikūnai prieš fosfolipidus, kolageną, aktiną, tiroperoksidazę (TPO), bazinį mielino baltymą, audinių transglutaminazę, transglutaminazę ir atitinkamai kitus.
• Imunologinis profiliavimas, susijęs su citokinų pusiausvyra ir susijusiu biologiniu poveikiu. Tyrimai turėtų apimti bent IL-6, INF-α, D-dimerus, fibrinogeną ir C reaktyvųjį baltymą.
• Tyrimai, kurių metu buvo lyginamos mRNA vakcinomis skiepytos ir neskiepytos populiacijos, siekiant patvirtinti tikėtiną mažesnį infekcijos dažnį ir lengvesnius simptomus skiepytųjų grupėje, taip pat palyginti užregistruotų autoimuninių ligų dažnį.
• Tyrimai, kuriais siekiama įvertinti, ar neskiepytas asmuo gali užsikrėsti vakcinai būdingomis spyglių baltymų formomis iš arti esančio skiepyto asmens.
• In vitro tyrimai, kuriais siekiama išsiaiškinti, ar spermatozoidai gali pasisavinti mRNA nanodaleles ir paversti jas cDNA plazmidėmis.„
  
  

Tyrimas Helmholco institutas

- Santrauka (DE vertimas)

„"Pfizer/BioNTech" mRNA pagrindu sukurta BNT162b2 vakcina buvo pirmoji įregistruota COVID-19 vakcina, kurios veiksmingumas buvo įrodytas užkertant kelią SARS-CoV-2 infekcijoms iki 95 %.
Mažai žinoma apie platų naujos klasės mRNA vakcinų poveikį, ypač apie tai, ar jos kartu veikia įgimtą ir adaptyvų imuninį atsaką. Čia patvirtinome, kad sveikų asmenų skiepijimas BNT162b2 vakcina sukelia veiksmingą humoralinį ir ląstelinį imunitetą prieš kelis SARS-CoV-2 variantus. Tačiau įdomu tai, kad BNT162b2 vakcina taip pat moduliuoja uždegiminių citokinų gamybą po įgimtojo imuniteto ląstelių uždegiminių citokinų gamybos tiek stimuliuojant specifiniais (SARS-CoV-2), tiek nespecifiniais (virusiniais, mikotiniais ir bakteriniais) dirgikliais.
Po BNT162b2 vakcinacijos įgimtosios imuninės sistemos ląstelių atsakas į TLR4 ir TLR7/8 ligandus buvo silpnesnis, o grybelio sukeltas citokinų atsakas buvo stipresnis. Apibendrinant galima teigti, kad mRNA BNT162b2 vakcina lemia sudėtingą funkcinį įgimto imuninio atsako perprogramavimą, į kurį reikėtų atsižvelgti kuriant ir naudojant šios naujos klasės vakcinas.

...

Apibendrinant galima teigti, kad mūsų duomenys rodo, jog BNT162b2 vakcina veikia tiek adaptyviąją, tiek įgimtąją imuniteto grandis ir kad šis poveikis skirtingoms SARS-CoV-2 padermėms yra skirtingas.
Įdomu tai, kad BNT162b2 vakcina taip pat sukelia įgimto imuninio atsako perprogramavimą. Į tai reikėtų atsižvelgti: Kartu su stipriu adaptyviuoju imuniniu atsaku tai gali prisidėti prie labiau subalansuoto uždegiminio atsako COVID-19 infekcijos metu arba gali prisidėti prie sumažėjusio įgimto imuninio atsako į virusą. BNT162b2 vakcina aiškiai apsaugo nuo COVID-19, tačiau šios apsaugos trukmė dar nežinoma, todėl galima manyti, kad šios žinios galėtų būti įtrauktos į būsimas vakcinos kartas, siekiant pagerinti apsaugos mastą ir trukmę. Mūsų išvadas reikia patvirtinti atliekant didesnius kohortinius tyrimus su skirtingos kilmės gyventojų grupėmis, o tolesniuose tyrimuose tirti galimą BNT162b2 ir kitų vakcinų sąveiką.„

Raudonos rankos raidės

Farmacijos bendrovės išduoda "Raudonąsias raides", jei, be kita ko, atsirado anksčiau nežinomų vaistų pavojų arba jei vaistų partijos atšaukiamos dėl saugumo priežasčių.

Taip yra ir su visais COVID-19 vaistiniais preparatais (vakcinomis):

"BionTech/Pfizer

• 19.07.2021 - https://csiag.de/wp-content/uploads/2021/09/Rote-Hand-Moderna-BioNTech-19.07.2021.pdf

Janssen

• 26.04.2021 - https://csiag.de/wp-content/uploads/2021/09/Rote-Hand-Janssen-26.042021.pdf
• 19.07.2021 - https://csiag.de/wp-content/uploads/2021/09/Rote-Hand-Janssen-19.07.2021.pdf

"Astra Zeneca

• 24.03.2021 - https://csiag.de/wp-content/uploads/2021/09/Rote-Hand-AstraZeneca-24.03.2021.pdf
• 02.06.2021 - https://csiag.de/wp-content/uploads/2021/09/Rote-Hand-AstraZeneca-02.06.2021.pdf
• 23.06.2021 - https://csiag.de/wp-content/uploads/2021/09/Rote-Hand-AstraZeneca-23.06.2021.pdf

COVID vakcinų medicininė informacija / pakuotės lapelis

Prie kiekvienos vakcinų partijos pridedamas pakuotės lapelis ir informacinis lapelis. Prieš skiepijant skiepai turėtų būti pateikiami kaip informacijos pagrindas.

Gamintojo medicininė informacija pateikiama čia kaip EMA nuoroda ir kaip PDF atsisiuntimo nuoroda. Pakuotės lapeliai šiuo metu nėra arba nebėra prieinami internete.

• Kompanija - BioNTech
  • Pakuotės lapelis (PDF)
  • Medicininė informacija (I priedas - EMA). Informacija naudotojams - (PDF)
    
• "Johnson & Johnson" / "Janssen
  • Pakuotės lapelis (PDF)
  • Medicininė informacija (I priedas - EMA) - (PDF)
    
• Spikevax - Moderna
  • Pakuotės lapelis (PDF)
  • Medicininė informacija (I priedas - EMA) - (PDF)
    
• Vaxzevria - AstraZeneca
  • Pakuotės lapelis (PDF)
  • Medicininė informacija (I priedas - EMA). Medicininė informacija (gamintojas) - (PDF)
    

Minėtų gamintojų pateiktoje informacijoje vakcinos paskirtis dažniausiai apibrėžiama kaip "COVID ligos prevencija". Visiška apsauga nuo būsimo užsikrėtimo COVID vakcina negarantuojama.

"AstraZeneca" taip pat nurodo temą "Religiniai įsitikinimai":

"Kiekvienas turėtų pats nuspręsti, ar jo gydymas atitinka jo religinius įsitikinimus."

Asmens, mirusio netrukus po vakcinacijos BioNTech, skrodimo rezultatai

Pagal pavadinimą Pirmasis paciento, paskiepyto nuo SARS-CoV-2, pomirtinio tyrimo atvejis 2021 m. balandžio 16 d. paskelbti skrodimo, atlikto bendradarbiaujant su Bielefeldo universiteto ligoninės OWL patologijos institutu, Lipės universitetine ligonine, Röntgenstr. 18, D-32756 Detmoldas, ir KRH ligoninės Nordstadt patologijos institutu, Hanoveris, Vokietija, rezultatai. čia pateikiamas originalo PDF formatu.

Toliau pateikiamas visas tekstas išverstas į vokiečių kalbą:

Santrauka

Anksčiau besimptomiam 86 metų vyrui buvo suleista pirmoji BNT162b2 mRNA COVID-19 vakcinos dozė. Po 4 savaičių jis mirė nuo ūminio inkstų ir kvėpavimo nepakankamumo. Nors COVID-19 vakcinai būdingų simptomų jis neturėjo, prieš mirtį jo testas dėl SARS-CoV-2 buvo teigiamas. Antigeno surišimas su smaigalio baltymu (S1) parodė didelę imunoglobulino (Ig) G koncentraciją, o nukleokapsidinis IgG / IgM nebuvo sužadintas. Skrodimo metu mirties priežastimi buvo paskirta ūminė bronchopneumonija ir kanalėlių nepakankamumas, tačiau COVID-19 būdingų morfologinių požymių nepastebėjome. Po mirties atlikus molekulinį kartografavimą realaus laiko polimerazės grandininės reakcijos metodu, nustatyta, kad visuose tirtuose organuose (burnos ertmėje, uoslės gleivinėje, trachėjoje, plaučiuose, širdyje, inkstuose ir galvos smegenyse), išskyrus kepenis ir uoslės svogūnėlį, buvo nustatyti atitinkami SARS-CoV-2 ciklo slenksčiai. Šie rezultatai gali reikšti, kad pirmoji vakcinacija sukelia imunogeniškumą, bet ne sterilų imunitetą.

Pranešame apie 86 metų slaugos namų gyventoją vyrą, kuris buvo paskiepytas nuo SARS-CoV-2. Anksčiau sirgo sistemine arterine hipertenzija, lėtiniu venų nepakankamumu, demencija ir prostatos vėžiu. 2021 m. sausio 9 d. vyrui buvo suleista lipidinių nanodalelių formos, nukleozidais modifikuota RNR vakcina BNT162b2, kurios dozė buvo 30 μg. Šią dieną ir per kitas 2 savaites jam nepasireiškė jokių klinikinių simptomų (1 lentelė). 18 dieną jis buvo paguldytas į ligoninę dėl paūmėjusio viduriavimo. Kadangi jam nebuvo jokių klinikinių COVID-19 požymių, jis nebuvo izoliuotas specifinėje aplinkoje. Atlikus laboratorinius tyrimus nustatyta hipochrominė anemija ir padidėjęs kreatinino kiekis serume. Antigeno tyrimas ir polimerazės grandininė reakcija (PGR) dėl SARS-CoV-2 buvo neigiami.

Siekiant išsiaiškinti viduriavimo priežastį, buvo atlikta gastroskopija ir kolonoskopija. Atlikus kolonoskopiją buvo nustatytas opinis kairiojo storosios žarnos vingio pažeidimas, kuris histologiškai diagnozuotas kaip išeminis kolitas. Biopsijos mėginių PGR analizė pagal anksčiau aprašytą metodą (Kaltschmidt ir kt., 2021) buvo neigiama SARS-CoV-2. Gydymas buvo palaikomasis - mesalazinas ir intraveninis geležies papildas. Vėliau paciento būklė pablogėjo, išsivystė inkstų nepakankamumas. 24 dieną toje pačioje ligoninės palatoje, kaip ir mūsų atvejis, gulėjusio paciento tyrimas dėl SARS-CoV-2 buvo teigiamas. 25 dieną mūsų paciento SARS-CoV-2 tyrimas realaus laiko PGR (RT-PCR) buvo teigiamas, o žema ciklo riba (Ct) rodė didelį viruso krūvį. Atlikus tolesnę tepinėlio mėginio analizę, nebuvo nustatyta mutavusių SARS-CoV-2 variantų B.1.1.7, B.1.351 arba B.1.1.28.1. Apibendrinant galima teigti, kad pacientas užsikrėtė ligoninės palatoje. Dabar mūsų pacientui pasireiškė karščiavimas ir kvėpavimo sutrikimas, o plaučių auskultacija parodė traškesius. Nepaisant pradėto papildomo deguonies tiekimo (2 litrai per minutę) ir gydymo antibiotikais ceftriaksonu, kitą dieną pacientas mirė nuo ūminio inkstų ir kvėpavimo nepakankamumo.

Įvertinus imunogeniškumą nustatant antigeną surišančio imunoglobulino (Ig) G kiekį 25 dieną paimtuose serumo mėginiuose (S1), nustatyta antikūnų reakcija (8,7 U/ml, pamatinė vertė 1,0 U/ml; Roche ECLIA™). Šie rezultatai rodo, kad dėl vakcinacijos pacientui jau buvo išsivystęs atitinkamas imunogeniškumas.

Pomirtiniai tyrimai parodė ūminę abipusę bronchopneumoniją su abscesais, kartais apsuptais bakterijų kokų (1 pav.). Bendrai aprašytų su COVID-19 susijusio pneumonito požymių nenustatyta. Širdyje rasta dvikamerinė hipertrofija (svoris 580 g), histologiškai diagnozuota išeminė kardiomiopatija. Širdyje ir mažesniu mastu plaučiuose aptikome transtiretino tipo amiloidozę. Inkstuose buvo nustatytas lėtinis pažeidimas su arterioloskleroze ir intersticine fibroze bei ūminis inkstų nepakankamumas su hidropine kanalėlių degeneracija. Ištyrus smegenis, nustatyta kairiojo parietalinio pseudocistinio audinio nekrozė, kuri buvo diagnozuota kaip seno infarkto zona.

Pateikta iliustracija reiškia čia galima atsisiųsti didelės raiškos PDF formatu.

Atlikome 9 skirtingų formalinu fiksuotų, į parafiną įterptų audinių anatominių dalių molekulinį kartografavimą, kaip aprašyta anksčiau (Kaltschmidt ir kt., 2021). RNR iš parafininių pjūvių išskirta naudojant "Maxwell RSC" ("Promega", Madisonas, WI, JAV). Atliekant daugkartinę RT-PCR analizę buvo siekiama nustatyti 2 nepriklausomus SARS-CoV-2 genomo genus (rinkinys "Fluorotype SARS-CoV-2 plus"; HAIN/Bruker, Nehren, Vokietija): (1 taikinys) ir nukleopeptidą (2 taikinys). Neigiama ribinė vertė buvo Ct >45. Ištyrėme 9 skirtingus audinių mėginius dėl žinomų ir svarbių viruso plitimo žmogaus organizme kelių (1 pav.). Siekiant išvengti kryžminio užteršimo, kiekvienas mėginys buvo tiesiogiai įterptas į atskiras audinių kasetes ir atskirai fiksuotas 4% fosfatinio buferinio druskos tirpalo buferiniame formaline. Viruso RNR aptikome beveik visuose tirtuose organuose, išskyrus kepenis ir uoslės svogūnėlį (1 pav.).

Autorių žiniomis, nebuvo atliktas išsamus paciento, paskiepyto nuo SARS-CoV-2, skrodimo tyrimas, įskaitant molekulinį viruso kartografavimą, kai po skiepijimo SARS-CoV-2 testas buvo teigiamas. Manome, kad vienkartinis gydymas BNT162b2b2b2 RNR vakcina sukėlė reikšmingą imunogeniškumą, kurį atspindi pranešta apie neutralizuojančio IgG serume, pagrįsto baltymu spike. Nuo kelių savaičių iki vakcinacijos, per vakcinaciją (1 diena) iki pat mirties (24 diena) pacientas neturėjo klinikinių simptomų, paprastai priskiriamų COVID-19. Be to, atlikus kraujo tyrimus nenustatytas IgM titras, kuris paprastai pastebimas praėjus 7-14 dienų nuo simptomų pasireiškimo (Kim ir kt., 2020). Tačiau paciento testai dėl SARS-CoV-2 buvo teigiami. Tiek nosiaryklės tepinėliuose išmatuota ct vertė, tiek formalinu fiksuotuose, į parafiną įdėtuose skrodimo mėginiuose išmatuotos vertės rodo viruso krūvį ir rodo užkrečiamumą. Kadangi mūsų pacientas mirė praėjus maždaug 2 dienoms po pirmojo teigiamo SARS-CoV-2 tyrimo rezultato, keliame hipotezę, kad molekulinio kartografavimo duomenys atspindi ankstyvąją virusinės infekcijos stadiją. Ankstyva infekcijos stadija taip pat galėtų paaiškinti, kodėl įvairios sritys, pavyzdžiui, uoslės svogūnėlis ir kepenys, (dar) nebuvo paveiktos sisteminio viruso plitimo.

Kol kas nepastebėjome COVID-19 būdingų morfologinių požymių, apie kuriuos buvo pranešta išsamiuose morfologiniuose autopsijos tyrimuose (Schaller et al., 2020, Edler et al., 2020, Ackermann et al., 2020). Plaučiuose neradome tipiškų difuzinio alveolių pažeidimo požymių, tačiau nustatėme išplitusią ūminę bronchopneumoniją, galbūt bakterinės kilmės. Padarėme išvadą, kad pacientas mirė nuo bronchopneumonijos ir ūminio inkstų nepakankamumo.

Mūsų rezultatai atitinka ankstesnius gyvūnų modeliuose gautus duomenis, kad vakcinacija nuo SARS-CoV-2 sumažino patogenezės sunkumą, ypač sunkią plaučių ligą, o viruso RNR išliko nosies tepinėliuose (Van Doremalen ir kt., 2020, Vogel ir kt., 2021). Neseniai Amit et al. (2021) paskelbė sveikatos priežiūros darbuotojų klinikinio tyrimo, atlikto naudojant BNT162b2 vakciną, rezultatus, kurie parodė, kad po pirmosios vakcinos dozės suleidimo gerokai sumažėjo ankstyvas SARS-CoV-2 infekcijos ir simptominio COVID-19 atvejų skaičius.

Tarp pagrindinių šalutinių poveikių pacientams, paskiepytiems nuo SARS-CoV-2, vyrauja vietinis poveikis, o sunkios sisteminės reakcijos aprašomos retai (Yuan ir kt., 2020). Tačiau neseniai gauti pranešimai apie padidėjusią kraujo krešulių, ypač smegenų venų sinuso trombozės, riziką Oksfordo ir AstraZeneca vakcinos atveju (Mahase, 2021 m.) sukėlė diskusiją dėl COVID-19 vakcinos saugumo apskritai. Norint gauti išsamesnių įžvalgų apie mirtinus šalutinius poveikius ir mirtis, susijusias su skiepijimu, reikia atlikti išsamią autopsijos duomenų analizę.

Apibendrinant galima teigti, kad mūsų atlikto paciento, paskiepyto mRNA vakcina, atvejo tyrimo rezultatai patvirtina nuomonę, kad imunogeniškumą gali sukelti jau pirmoji vakcina nuo SARS-CoV-2, nors sterilus imunitetas nėra pakankamai išvystytas.

Padėkos

Norėtume padėkoti Ralfui Bode ir Nadine Weber (Bielefeldo universiteto universitetinė ligoninė OWL, Lipės miestelis, Detmoldas) už kvalifikuotą techninę pagalbą.

Nuorodos

1. Ackermann M., Verleden S.E., Kuehnel M., Haverich A., Welte T., Laenger F. Pulmonary vascular endothelialitis, trombozė ir angiogenezė Covid-19. N Engl J Med. 2020;383:120-128. doi: 10.1056/NEJMoa2015432. [PMC nemokamas straipsnis] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
2. Amit S., Regev-Yochay G., Afek A., Kreiss Y., Leshem E. Ankstyvas SARS-CoV2 infekcijos ir COVID-19 sumažėjimas tarp BNT162b2 vakcinos gavėjų. Lancet. 2021;397(10277):875-877. doi: 10.1016/S0140-6736(21)00448-7. [PMC nemokamas straipsnis] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
3. Edler C., Schröder A.S., Aepfelbacher M., Fitzek A., Heinemann A., Heinrich F. Mirtys nuo SARS-CoV2 infekcijos - pirmųjų iš eilės 80 atvejų Hamburge, Vokietijoje, autopsijos tyrimas. Int J Legal Med. 2020;134:1275-1284. doi: 10.1007/s00414-020-02336-7. [PMC nemokamas straipsnis] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
4. Kaltschmidt B., Fitzek A.D.E., Schaedler J., Förster C., Kaltschmidt C., Hansen T. Kepenų vaskulopatija ir kepenų regeneracinės reakcijos mirtinų COVID-19 atvejų atvejais. Clin Gastroenterol Hepatol. 2021 doi: 10.1016/j.cgh.2021.01.044. [PMC nemokamas straipsnis] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
5. Kim D.S., Rowland-Jones S., Gea-Mallorqui E. Ar užsikrėtimas SARS-CoV-2 sukels ilgalaikį apsauginį ar sterilizuojantį imunitetą? Poveikis vakcinų strategijoms. Front Immunol. 2020;11:571481. doi: 10.3389/fimmu.2020.571481.eCollection2020. [PMC nemokamas straipsnis] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
6. Mahase E. Covid-19: "AstraZeneca" vakcina nesusijusi su padidėjusia kraujo krešulių rizika, nustatė Europos vaistų agentūra. BMJ. 2021;372:n774. doi: 10.1136/bmj.n774. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
7. Schaller T., Hirschbühl K., Burkhardt K., Braun G., Trepel M., Märkl B. Pacientų, sergančių COVID19, pomirtiniai tyrimai. JAMA. 2020;323:2518-2520. doi: 10.1001/jama.2020.8907.PMC nemokamas straipsnis] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
8. Van Doremalen N., Lambe T., Spencer A., Belij-Rammersdorfer S., Purushotham J.N., Port J.R. ChAdOx1 nCoV-19 vakcina apsaugo nuo SARS-CoV-2 pneumonijos tarp rezus makakų. Gamta. 2020;586:578-582. doi: 10.1101/2020.05.13.093195. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
9. Vogel A.B., Kanevsky I., Che Y., Swanson K.A., Muik A., Vormehr M. Imunogeninės BNT162b vakcinos apsaugo rezus makakas nuo SARS-CoV-2. Gamta. 2021;592(7853):283-289. doi: 10.1101/2020.12.11.421008. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
10. Yuan P., Ai P., Liu Y., Ai Z., Wang Y., Cao W. COVID19 vakcinų saugumas, toleravimas ir imunogeniškumas: sisteminė apžvalga ir metaanalizė. medRxiv. 2020 doi: 10.1101/2020.11.03.20224998. Preprint. [CrossRef] [Google Scholar]
    
    
    

Kiaulpienių ekstrakto tyrimų rezultatai - slopina spyglių baltymų surišimą

Teksto ištrauka / vertimas iš straipsnio "Tyrimas: kiaulpienių lapų ekstraktas blokuoja spyglių baltymų prisijungimą prie ląstelių paviršiaus receptoriaus ACE2„:

SARS-CoV-2 baltymus gali paversti nekenksmingais įprasta "piktžolė", kurią kasmet draudžiama auginti vejose. Vokiečių Universitetinis tyrimas parodė, kad kiaulpienė (Taraxacum officinale) gali blokuoti spyglių baltymų prisijungimą prie ACE2 ląstelių paviršiaus receptorių žmogaus plaučių ir inkstų ląstelėse. Vandens pagrindu pagamintas kiaulpienių ekstraktas, gaunamas iš džiovintų augalo lapų, buvo veiksmingas prieš spyglių baltymą D614 ir įvairias mutantų atmainas, įskaitant D614G, N501Y, K417N ir E484K.

Čia pateikiamas originalaus tyrimo vertimas į vokiečių kalbą (PDF - Anglų kalba) :

Santrauka:

2020 m. kovo 11 d. Pasaulio sveikatos organizacija (PSO) paskelbė, kad 2019 m. koronavirusinė liga (COVID-19), kurią sukėlė SARS-CoV-2 virusas, yra pasaulinė pandemija. Iki šiol sparčiai plinta nauji "susirūpinimą keliantys" SARS-CoV-2 variantai - Jungtinės Karalystės (B.1.1.7), Pietų Afrikos (B.1.351) arba Brazilijos (P.1) variantas. Visuose juose, palyginti su originalia Wuhan seka, yra daugybė mutacijų ACE2 receptorių atpažinimo vietoje, kuri yra labai svarbi dėl savo potencialo imuninei gynybai. Čia pranešame apie kiaulpienės (Taraxacum officinale) veiksmingumą blokuojant spyglio S1 baltymo sąveiką su žmogaus ACE2 ląstelių paviršiaus receptoriumi. Tai pavyko įrodyti ne tik originalaus spyglio D614, bet ir jo mutavusių formų (D614G, N501Y ir K417N, E484K, N501Y mišinio) atveju žmogaus HEK293-hACE2 inkstų ir A549-hACE2-TMPRSS2 plaučių ląstelėse. Šį poveikį lemia vandens ekstrakte esantys didelės molekulinės masės junginiai. Ekstraktas veiksmingai apsaugojo plaučių ląsteles nuo SARS-CoV-2 smailių pseudotipinių lentivirusinių dalelių infekcijos ir viruso sukeltos prouždegiminės interleukino-6 sekrecijos. Šiuolaikinėse vaistažolių monografijose šio vaistinio augalo vartojimas laikomas saugiu. Todėl čia pateikti in vitro rezultatai turėtų paskatinti tolesnius klinikinės reikšmės ir ekstrakto, kaip SARS-CoV-2 infekcijos prevencijos strategijos, taikymo tyrimus.

Perduodant SARS-CoV-2 virusą tarp žmonių, jis nuolat mutuoja. Galiausiai dėl to virusas gali apeiti esamus gydymo ir profilaktikos metodus, kurie nukreipti į baltymą "spike". Nustatėme, kad paprastosios kiaulpienės (Taraxacum officinale) vandeniniai ekstraktai veiksmingai slopina žmogaus viruso patekimo į ląstelę receptoriaus ACE2 ir SARS-CoV-2 smaigalio baltymo sąveiką su baltymu, įskaitant penkias svarbias mutacijas. Tai buvo įrodyta in vitro, naudojant žmogaus inkstų (HEK293) ir plaučių (A549) ląsteles, kuriose yra perteklinės ACE2 ir ACE2/TMPRSS2 baltymų ekspresijos. Ekstraktas veiksmingai apsaugojo plaučių ląsteles nuo infekcijos pseudotipiniu lentivirusiniu SARS-CoV-2 virusu. Gauti rezultatai reikalauja išsamesnės kiaulpienių veiksmingumo SARS-CoV-2 prevencijai analizės ir patvirtinančių klinikinių įrodymų.

Iki šiol yra trys sparčiai plintantys nauji SARS-CoV-2 variantai, apie kuriuos pirmą kartą pranešta Jungtinėje Karalystėje (variantas B.1.1.7), Pietų Afrikoje (variantas B.1.351) ir Brazilijoje (variantas P.1), visi jie turi bendrą N501Y mutaciją smaigalio baltyme (5). Šiuo metu pasaulyje vyrauja SARS-CoV-2 variantai su D614G mutacija smaigalio baltyme. Be D614G, B.1.351 turi ir kitų smaigalio mutacijų, įskaitant tris mutacijas (K417N, E484K ir N501Y) RBD (6). Preliminarūs duomenys rodo galimą ryšį tarp pastebėto padidėjusio mirtingumo ir D614G mutacijos, ir keliama hipotezė, kad dyglio baltymo konformacijos pokytis lemia didesnį užkrečiamumą (7). N501Y ir K417N mutacijų sąveikos laisvosios energijos perturbacijų skaičiavimai tiek su ACE2 receptoriumi, tiek su antikūnu, gautu iš COVID-19 pacientų, kelia svarbių klausimų apie galimą žmogaus imuninį atsaką ir jau turimų vakcinų sėkmę (8). Be to, pranešta apie padidėjusį B.1.351 ir B.1.1.7 variantų atsparumą antikūnų neutralizacijai; B.1.351 atveju tai daugiausia lėmė E484K mutacija smaigalio baltyme (9).

Sąveikos tarp smaigalio S1 subvieneto ir AKE2 vietos sutrikdymas gali būti svarbus gydymo ar profilaktikos taikinys (10). Natūralios kilmės junginiai gali suteikti tam tikrą apsaugą nuo viruso invazijos į ląsteles, tuo pat metu turėdami nedidelį šalutinį poveikį arba visai jo neturėdami. Čia pranešame apie kiaulpienės slopinamąjį potencialą spyglio S1 baltymo RBD prisijungimui prie hACE2 ląstelių paviršiaus receptoriaus ir palyginome originalaus spyglio baltymo D614 poveikį su jo D614G, N501Y ir mišriomis (K417N, E484K, N501Y) mutacijomis .

Paprastoji kiaulpienė (Taraxacum officinale) priklauso astrinių (Asteraceae) šeimos augalų šeimai, Cichorioideae pošeimiui, kuriame yra daugybė veislių ir smulkesnių rūšių. Tai daugiametis žolinis augalas, kilęs iš šiaurinio pusrutulio šiltesnių vidutinių platumų zonų, augantis laukuose, pakelėse ir ruderalinėse vietose. T. officinale vartojamas kaip augalinis maistas, taip pat naudojamas Europos fitoterapijoje kepenų, tulžies pūslės, virškinamojo trakto ar reumatinėms ligoms gydyti. Šiuolaikinėse vaistažolių monografijose augalo vartojimas laikomas saugiu ir teigiamai įvertintas empirinis T. officinale vartojimas. T. officinale vartojimo indikacijos išvardytos Vokietijos E komisijos, Europos mokslinio fitoterapijos kooperatyvo (ESCOP) (11, 12) ir Didžiosios Britanijos vaistažolių asociacijos (13) monografijose. Augalas turi platų fitocheminių medžiagų spektrą, įskaitant terpenus (seskviterpeninius laktonus, pavyzdžiui, taraksino rūgštį ir triterpenus), fenolinius junginius (fenolines rūgštis, flavonoidus ir kumarinus) ir polisacharidus (14). Nustatyta, kad vyraujantis fenolinis junginys yra cikorino rūgštis (dikafeoilvyno rūgštis). Kitos buvo mono- ir dikafeoilchinino rūgštys, vyno rūgšties dariniai, flavonai ir flavonolio glikozidai. Be šių klasių junginių, šaknyse yra didelis kiekis inulino (15). Dozavimo formos - tai vandeninis nuoviras ir užpilas, pumpuojamos šviežios augalų sultys, hidroalkoholinė tinktūra ir dengtos tabletės iš sausų ekstraktų, kurie vartojami ne tik kaip monopreparatai (16), bet ir kaip sudėtinės vaistinių preparatų dalys. Mūsų tyrimai buvo atliekami su augalų lapų vandeniniais ekstraktais. Nustatėme, kad lapų ekstraktai veiksmingai blokuoja prieš inkubaciją arba po inkubacijos naudotą AKE2 receptoriaus baltymą arba jo mutantines formas ir kad šį poveikį lemia didelės molekulinės masės junginiai. To paties kamieno augalas (Cichorium intybus) galėjo turėti panašų poveikį, tačiau ne tokį stiprų. Žmogaus plaučių ląstelių A549-hACE2-TMPRSS2 užsikrėtimo pseudotipiniu lentivirusiniu SARS-CoV-2 virusu veiksmingai neleido ekstraktas.

Rezultatai

T. officinale slopina smaigalio S1 - ACE2 prisijungimą
Pirmiausia ištyrėme SARS-CoV-2 smaigalio baltymo RBD ir ACE2 sąveikos slopinimą T. officinale lapų ekstraktais. 1A paveikslėlyje parodytas nuo koncentracijos priklausomas smaigalio S1-ACE2 jungimosi slopinimas veikiant T. officinale ekstraktu (EC50 = 12 mg/ml). C. intybus ekstraktai taip pat parodė nuo koncentracijos priklausomą surišimo slopinimą, tačiau jis buvo silpnesnis nei T. officinale (EC50 = 30 mg/ml) ( 1B ). Tada paruošėme dvi frakcijas iš džiovintų T. officinale ir cikorijų lapų ir atskyrėme ekstraktus į didelės molekulinės masės (>5 kDa) ir mažos molekulinės masės (<5 kDa) frakcijas. Kaip parodyta 1C paveiksle, biologiškai aktyvių junginių daugiausia buvo HMW frakcijoje. LMW frakcijoje pastebėtas tik nedidelis aktyvumas.

.

T. officinale ir cikorijos poveikis Sars-CoV-2 spyglių - AKF 2 slopinimui.
A-B) Nuo koncentracijos priklausomas T. officinale (TO) ir C. intybus (CI) ekstrakto poveikis. C-D) TO ir CI lapų ekstrakto frakcijų poveikis. Ekstraktai buvo liofilizuoti ir po to suskirstyti į molekulinės masės frakcijas. Buvo nustatyta 5 kDa riba (HMW > 5 kDa, LMW < 5 kDa). H+L: HMW ir LMW frakcijos; 50 mg džiovintų lapų viename ml vandens buvo naudojami kaip etalonas. Naudoti HMW ir LMW frakcijų kiekiai, atitinkantys džiovintų lapų kiekį. Sujungimo slopinimas įvertintas naudojant ELISA metodą. Brūkšneliai yra vidurkiai + SD. Tirpiklio kontrolė: distiliuotas vanduo (a.d.).

Naudojant hACE2 ekspresiją turinčias HEK293 ląsteles, toliau buvo tiriamas T. officinale ir C. intybus ekstraktų potencialas blokuoti spyglių prisijungimą prie ląstelių. Kaip parodyta 2 paveiksle, išankstinis ląstelių inkubavimas su T. officinale 1 min. veiksmingai blokavo spyglių surišimą su ląstelėmis 76,67 % ± 2,9, o jų HMW frakcijos - 62,5 ± 13,4%, palyginti su vandens kontrole. Po 3 val. vis dar buvo slopinamas 50 ± 13,6 % T. officinale ekstrakto ir 35,0 ± 20 % T. officinale HMW frakcijos. Cikorijų ekstraktas šioje bandymo sistemoje buvo mažiau veiksmingas; po 1 min. nustatytas 37 ± 20 % ir 5,6 ± 9,9 % surišimo slopinimas.

S1 spyglio baltymo prisijungimo prie žmogaus HEK293-hACE2 ląstelių slopinimas iš anksto inkubuojant ekstraktą.
Ląstelės buvo iš anksto inkubuojamos 10 mg/ml T. officinale ekstrakto (TO), jo HMW frakcijos, lygios 10 mg/ml ekstrakto (HMW), ir 10 mg/ml C. intybus (CI) arba kontroliniu tirpikliu (ad), o po to 1 valandą 4 °C temperatūroje, neperplaunant, apdorotos HIS žymėtu S1 smailiuoju baltymu. Sujungimo slopinimas nustatytas srauto citometrijos metodu. N=3, stulpeliai yra vidurkiai + SD. Viršuje kairėje: HEK-hACE2 ląstelių citograma. Centre: ACE2 paviršiaus raiškos fluorescencijos intensyvumo histogramos. Viršuje dešinėje: tipinių fluorescencijos intensyvumo histogramų perdengimas, kai ekstraktai arba a.d. slopina smaigų surišimą; teigiama kontrolė: 20 µg/ml tirpaus hACE2. Ląstelės nudažytos monokloniniu antikūnu anti-His-tag Alexa Fluor 647 konjuguotu monokloniniu antikūnu.

Ląstelių apdorojimas vienodais D614 ir jo variantų D614G ir N501Y kiekiais patvirtino, kad D614G (maždaug 1,5 karto) ir N501Y (maždaug 3-4 kartus), palyginti su D614 spyglio baltymu, turi didesnį ryšį su HEK293 ląstelių ACE2 paviršiaus receptoriumi (3A pav.). Greitas išankstinis apdorojimas T. officinale (per 30 s) blokavo smaigalio prisijungimą prie ACE2 paviršiaus receptoriaus (3B-C pav.). Praėjus 30 s, tai buvo 58,2 ± 28,7% D614, 88,2 ± 4,6% D614G ir 88 ± 1,3% N501Y prisijungimo slopinimas T. officinale ekstraktu. Nors C. intybus ekstraktas slopino spyglių surišimą, jis buvo maždaug 30-70% mažesnis nei T. officinale, priklausomai nuo tirto spyglių baltymo. Kai surišimas buvo tiriamas ne 4 °C, o 37 °C temperatūroje, T. officinale rezultatai buvo panašūs, tačiau cikorijų ekstrakto rezultatai šioje ląstelių linijoje buvo dar silpnesni (3D pav.). T. officinale ir C. intybus ekstraktų spyglių surišimo slopinimas buvo atitinkamai 47,90 ± 14,72 ir 13,12 ± 12,37 (D614), 68,42 ± 14,53 ir 8,86 ± 15,29 (D614G), 71,66 ± 7,66 ir 37,56 ± 16,14 (N501Y). Taip pat klausėme, ar ekstraktai gali pakeisti smaigų prisijungimą prie žmogaus ląstelių ACE2 paviršiaus receptoriaus. Šiuo tikslu pirmiausia ląstelės buvo inkubuojamos su D614, D614G arba N501Y spyglio baltymu, o po to su ekstraktais. Kaip parodyta 3D paveiksle, T. officinale galėjo veiksmingai pašalinti spyglius nuo receptoriaus (vidutiniškai 50%); cikorija tuo metu buvo daug silpnesnė (vidutiniškai 25 %). Eksperimentus išplėtėme su žmogaus A549-hACE2-TMPRSS2 ląstelėmis ir galėjome patvirtinti HEK293-hACE2 ląstelėse stebėtus T. officinale rezultatus (3D-G pav.). Ši ląstelių linija buvo stabiliai transfekuota žmogaus ACE2 ir TMPRSS2 genais ir įdomu tai, kad C. intybus ekstraktas buvo veiksmingesnis, palyginti su HEK-hACE2 ląstelėmis. Po pirminio apdorojimo ekstraktu spyglių prisijungimo prie ląstelių slopinimas svyravo nuo 73,5% ± 5,2 (D614) iki 86,3% ± 3,23 (N501Y) T. officinale ekstrakto ir nuo 56,1% ± 5,28 (D614) iki 63,07% ± 14,55 (N501Y) C. intybus ekstrakto. Jau 0,6 mg/ml T. officinale reikšmingai blokavo prisijungimą prie D614G spyglio baltymo maždaug 40% (IC50 = 1,73 mg/ml). Kai ląstelės prieš apdorojimą ekstraktu buvo iš anksto inkubuojamos su spyglio baltymu, T. officinale ekstrakto D614 ir D614G rezultatai buvo panašūs, bet šiek tiek mažesni N501Y ( 3C - D ). Taip pat šioje aplinkoje buvo tiriamas ir spyglių mutantų N501Y, K417N ir E484K mišinys, ir vėlgi T. officinale ekstraktas blokavo surišimą 82,97 % ± 6,31 (ekstraktas prieš inkubavimą) ir 79,7 % ± 9,15 (ekstraktas po inkubacijos).

D614 ir jo mutantų D614G, N501Y arba mišinio (N501Y, K417N ir E484K) prisijungimo prie žmogaus HEK293-hACE2 ir A549-hACE2-TMPRSS2 ląstelių slopinimas ekstraktu prieš inkubaciją arba po jos.
A) nedažytų HEK ląstelių, dažymo kontrolės (anti-His-tag A647) ir ląstelių, inkubuotų su His-tag žymėtais spygliukais D614, D614G arba N501Y 1 valandą 4 °C temperatūroje, fluorescencijos intensyvumo histograma. B) Ląstelės, iš anksto 30-60 sekundžių inkubuotos su kontroliniu tirpikliu (ad), 10 mg/ml T. officinale (TO) arba 10 mg/ml C. intybus (CI), o po to 1 val. 4 °C temperatūroje, be plovimo etapo, apdorotos su His žymekliu žymėtu S1 . spike D614, D614G arba N501Y baltymu. D-G) Ekstrakto inkubacijos poveikis HEK arba A549 ląstelėms prieš arba po inkubacijos su His žymekliu žymėtais spike D614, D614G, N501Y arba mišriais baltymais (N501Y, K417N ir E484K) 37 °C temperatūroje. H) Augalų ekstraktai buvo inkubuojami 4 žmonių donorų seilėse 30 min. 37 °C temperatūroje. Po to ląstelės buvo iš anksto apdorotos 5 mg/ml ekstraktų 60 s 37 °C temperatūroje prieš inkubuojant su His žymekliu paženklintu spyglio D614 baltymu 0,5 val. 37 °C temperatūroje. Spyglio prisijungimo prie žmogaus ląstelių slopinimas buvo įvertintas naudojant srauto citometrinę ląstelių, nudažytų anti-His-tag Alexa Fluor 647 konjuguotu monokloniniu antikūnu, analizę. Brūkšneliai yra vidutinės vertės +SD.

Ekstraktai, inkubuoti žmogaus seilėse 30 min. 37 °C temperatūroje prieš apdorojant ląsteles, turėjo panašų poveikį D614G smaigų slopinimui (3H pav.), o tai rodo gerą biologiškai aktyvių junginių stabilumą seilėse.

Siekdami išsiaiškinti, ar T. officinale ekstraktas trikdo AKE2 receptoriaus katalitinį aktyvumą arba turi įtakos AKE2 baltymo raiškai, A549-hACE2-TMPRSS2 ląsteles apdorojome ekstraktu 1-24 val. prieš ląstelių lizavimą ir aptikimą. Po 84 val. poveikio ląstelėms su ekstraktu nepastebėta jokio ląstelių gyvybingumo sumažėjimo ( 4A ). Fermento aktyvumo susilpnėjimo nenustatyta nei po 1, nei po 24 h (4B). Po 6 val. smaigalys gerokai sumažino AKE2 baltymo kiekį (4C, juodi stulpeliai), ir tai taip pat buvo būdinga ekstraktui vienam (4C, balti stulpeliai) arba kartu su smaigaliais (juodi stulpeliai). Po 24 val. šis poveikis išnyko (4D).

T. officinale ekstrakto poveikis ACE2 fermento aktyvumui ir baltymų ekspresijai.
A) A549-hACE2-TMPRSS2 ląstelių gyvybingumas buvo nustatomas tripano mėlynuoju dažymu po 84 valandų poveikio ekstraktu. B) Ląstelės inkubuotos su TO ekstraktu arba 500 ng/ml S1 baltymo ir ištirtas fermentų aktyvumas naudojant fluorescencinį rinkinį. C-D) Ląstelės 6 val. arba 24 val. veikiamos ekstraktu be (balti stulpeliai) arba su (juodi stulpeliai) 500 ng/ml S1 baltymo ir analizuojama ACE2 baltymo raiška naudojant žmogaus ACE2 ELISA rinkinį; a. d.: tirpiklio kontrolė. Stulpeliai yra vidurkiai + SD, N ≥ 3 nepriklausomi eksperimentai.

Tada, naudodami SARS-CoV-2 spike pseudotipo lentivirusą, ištyrėme, ar ekstraktas gali blokuoti viruso patekimą į organizmą slopindamas spike. Iš anksto apdorojus ekstraktu, viruso transdukcija buvo sumažinta maždaug 85%, esant 20 mg/ml (5A pav.). Esant skirtingoms apdorojimo sąlygoms, liuminescencinis signalas, susidaręs dėl viruso transdukcijos, buvo slopinamas 70 % ± 16,7 (A), 58 % ± 9,6 (B) ir 53 % ± 8,1 (C) esant 10 mg/ml ekstrakto. Ekstraktas slopino viruso transdukciją kartu su reikšmingu viruso sukelto uždegiminio atsako slopinimu, kaip nustatyta pagal sumažėjusią prouždegiminio citokino IL-6 sekreciją A549-hACE2-TMPRSS2 ląstelėse (5D pav.).

A549-hACE2-TMPRSS2 ląstelių viruso perdavimo slopinimas T. officinale ekstraktu.
Ląstelės buvo transdukuojamos 2,5 µl SARS-CoV-2 spike pseudotipinio lentiviruso (Luc reporteris) 24 val. A) po 0,5 val. išankstinio apdorojimo T. officinale (TO) ekstraktu, B) 3 val. prieš pridedant TO arba C) be ekstrakto. Po to terpė buvo pakeista į šviežią terpę ir ląstelės kartu su ekstraktu inkubuotos dar 60 h. Luminescencija buvo nustatoma po 1 val. (-) Neigiama kontrolė: glotnioji lentivirolinė pseudovirusinė medžiaga; (+) teigiama kontrolė: ugnies liepsnelės luciferazės lentitivirusas. D) Prouždegiminio IL-6 citokinų sekrecijos analizė atlikta po 24 val. viruso transdukcijos kartu su ekstraktu (kairėje), po 24 val. + 60 val. po užsikrėtimo ekstraktu (centre) arba po 60 val. po užsikrėtimo ekstraktu (dešinėje) naudojant daugkartinę srauto citometrinę analizę. Tirpiklio kontrolė: distiliuotas vanduo (a.d.). N ≥ 3 nepriklausomi eksperimentai.

Diskusija

Veiksmingos SARS-CoV-2 infekcijos prevencijos ir gydymo strategijos dar tik kuriamos. Nors pirmosioms vakcinoms jau suteiktas leidimas prekiauti, vis dar išlieka problemų, susijusių su platinimo problemomis, ilgalaikiu veiksmingumu ir pakartotinio užsikrėtimo rizika (17, 18). Tačiau vėlesnės infekcijos gali būti lengvesnės nei pirmosios. Alternatyvi COVID-19 prevencijos strategija yra ne tik skiepijimas nuo COVID-19, bet ir viruso prieinamumo prie membranoje surišto ACE2, kuris yra pagrindinis receptorius patekimui į SARS-CoV-2 taikinio ląstelę, blokavimas. Čia taikomi skirtingi metodai (19), tačiau, žinoma, kiekviena iš šių gydymo strategijų taip pat turi esminių ir transliacinių problemų, kurias reikia įveikti siekiant klinikinės naudos. Techninės kliūtys apima netikslinio poveikio potencialą, nuo AKF2 nepriklausomą poveikį, stabilumą ar toksiškumą (19). Gamtinės kilmės junginiai šiuo atveju galėtų būti svarbus šaltinis, nes jie aprašyti per ilgą laiką ir daugelis jų laikomi saugiais. Nors in silico dokavimo eksperimentai parodė, kad keletas įprastų natūralių junginių yra AKE2 inhibitoriai, dauguma jų neslopina smaigalio prisijungimo prie AKE2, o tai galima paaiškinti tuo, kad junginiai nevisiškai padengia AKE2 jungiančias liekanas (20) . Tačiau glicirizino, nobiletino ir neohesperidino atveju ACE2 jungimasis iš dalies patenka į RBD kontaktinę sritį, todėl buvo iškelta prielaida, kad jie papildomai blokuoja spyglių jungimąsi su ACE2 (20). Tas pats pasakytina ir apie sintetinius AKE2 inhibitorius, tokius kaip N-(2-aminoetil)-1 aziridino etanaminas (NAAE) (21). Priešingai, dabar nustatyta, kad lipoglikopeptidinis antibiotikas dalbavancinas yra ir ACE2 rišiklis, ir SARS-CoV-2 smaigalio ACE2 inhibitorius (22); šis junginys veiksmingai slopino SARS-CoV-2 infekciją tiek pelių, tiek rezus beždžionių modeliuose. Taip pat nustatyta, kad hidroalkoholinis granatų žievelės ekstraktas blokuoja spike-ACE2 sąveiką su 74 %, jo pagrindiniai komponentai punicalaginas - su 64 %, o elago rūgštis - su 36 %. Naudojant SARS-CoV-2 spyglių pseudotipinę lentivirusinę infekciją žmogaus inkstų 2 (HK-2) ląstelėse, viruso patekimą veiksmingai blokavo žievelių ekstraktas (23). Šiame tyrime įrodėme, kad T. officinale ekstraktai stipriai slopina ACE2 spyglio S1 RBD baltymą, naudodami ląstelių neturintį testą, ir patvirtinome šią išvadą, pademonstravę veiksmingą ACE2 prisijungimo prie ląstelių paviršiaus slopinimą dviejose žmogaus ląstelių linijose. Pastebėjome stipresnį D614G ir N501Y variantų prisijungimą prie žmogaus ląstelių ACE2 paviršiaus receptoriaus, tačiau visi tirti variantai buvo jautrūs prisijungimo slopinimui T. officinale, naudojamam prieš tai arba po to. Iki šiol keletas tyrimų rodo, kad D614G viruso linija yra labiau užkrečiama nei D614 virusas (24). Be to, esant būdingoms mutacijoms, pavyzdžiui, N501Y, pavyzdžiui, vadinamojo UK varianto B.1.1.7, užkrečiamumas yra didesnis nei tėvinės padermės, o tai gali būti susiję su didesniu afinitetu tarp spyglio baltymo ir ACE2 (25). Todėl mūsų išvados apie T. officinale ekstraktus šiuo atveju gali būti svarbios, nes pandemijai progresuojant atsiras naujų potencialiai susirūpinimą keliančių viruso variantų, kurie taip pat gali sumažinti kai kurių vakcinų veiksmingumą arba lemti padidėjusį pakartotinio užsikrėtimo dažnį. Kaip minėta pirmiau, viena iš problemų kuriant produktus, skirtus SARS-CoV-2 infekcijos prevencijai arba sulėtinti sisteminį viruso plitimą, yra selektyvumas patekti virusams, kurių toksiškumas šeimininkui yra mažas. Nebuvo užregistruota nė vieno T. officinale perdozavimo atvejo, kuris būtų skirtas dabartinėms medicininėms indikacijoms (11, 13, 16). Rekomenduojama dozė yra 4-10 g (maždaug 20-30 mg viename ml karšto vandens) iki 3 kartų per dieną (E komisija ir ESCOP). Europos vaistų agentūros (EMA) duomenimis, T. officinale vartojimo kontraindikacijos yra padidėjęs jautrumas Asteraceae šeimos augalams arba jų veikliosioms medžiagoms, kepenų ir tulžies takų sutrikimai, įskaitant tulžies latakų obstrukciją, tulžies akmenligę ir cholangitą, arba aktyvios virškinamojo trakto opos (16). Augalas yra didelis kalio šaltinis (26, 27), todėl įspėjama dėl galimos hiperkalemijos rizikos. Vartojimas jaunesniems nei 12 metų vaikams, nėštumo ir žindymo laikotarpiu nenustatytas, nes nėra duomenų arba jų nepakanka.

Nors šiame tyrime T. officinale ekstraktas neturėjo įtakos ACE2 fermento aktyvumui, ACE2 baltymas buvo laikinai sumažintas ACE2 išstumiančioje plaučių ląstelių linijoje, todėl šiuo metu atliekamiems tyrimams reikia skirti daugiau dėmesio. AKE2 yra svarbi nuo cinko priklausoma monokarboksipeptidazė renino ir angiotenzino signalizacijos kelyje, kuris yra labai svarbus širdies ir kraujagyslių bei imuninės sistemos poveikiui. Pripažįstama, kad angiotenzino II ir angiotenzino (1-7) pusiausvyros sutrikdymas slopinant ACE2 fermento aktyvumą arba mažinant baltymo kiekį ir sistemoje cirkuliuojant daugiau angiotenzino II skatina plaučių pažeidimą, susijusį su COVID-19 liga (28, 29).

Manoma, kad plaučiai yra pagrindinis dominantis objektas, tačiau ACE2 mRNA ir baltymų raiška nustatyta visų burnos audinių epitelio ląstelėse, ypač burnos gleivinėje, lūpose ir liežuvyje (30). Šie duomenys sutampa su pastebėjimu, kad SARS-CoV-2 užsikrėtusių pacientų seilėse aptinkamas labai didelis viruso kiekis (31, 32). Todėl manoma, kad burnos ertmė, kaip esminė viršutinio aerodigestyvaus trakto dalis, vaidina svarbų vaidmenį SARS-CoV-2 perdavimui ir patogeniškumui. Yra didelė tikimybė, kad viruso kolonizacijos burnos ir ryklės gleivinėje prevencija gali būti labai svarbi siekiant išvengti tolesnio kitų organų užsikrėtimo ir COVID-19 protrūkio (33). Todėl siūloma, kad komerciniai virusocidiniai burnos skalavimo skysčiai, pirmiausia povidono jodo, potencialiai gali sumažinti užsikrėtusių asmenų SARS-CoV-2 virusinį krūvį (34-36), tačiau iki šiol nėra atlikta jokių reikšmingų klinikinių tyrimų (36) . SARS-CoV-2 viruso prisijungimo prie burnos ertmės ląstelių blokavimas naudojant T. officinale ekstraktus gali būti toleruojamas vartotojo tik ribotą laiką (pvz., produkto naudojimas po kontakto su infekuotais asmenimis arba infekcijos metu). Kiti mūsų atlikti fiziologiškai svarbūs in vitro eksperimentai parodė, kad tik trumpas kontakto su T. officinale ekstraktu laikas buvo būtinas, kad būtų veiksmingai blokuojamas SARS-CoV-2 spyglių prisijungimas arba jau prisijungę spygliukai būtų pašalinti nuo ląstelių paviršiaus. Daugiau svarbos įrodymų pateikė eksperimentai su pseudotipiniu SARS-CoV-2 virusu. Nors naudojant šiuos pseudotipinius virusus negalima įvertinti viriono savybių, tokių kaip membranos ar apvalkalo baltymai, įtakos ląstelių tropizmui (37), jie laikomi naudinga priemone, leidžiančia dokumentuoti ACE2 svarbą spyglių baltymo tarpininkaujamiems patekimo į ląstelę etapams.

Visų sukurtų vakcinų tikslas - sukelti antikūnų (ir T ląstelių) atsaką prieš spyglio baltymą, o šiuo atveju buvo remiamasi ankstyvosios Wuhan padermės spyglių sekomis (38). Tačiau SARS-CoV-2 nuolat mutuoja nuolatinio perdavimo tarp žmonių metu. Viruso antigenų dreifą aiškiai rodo neseniai atsiradę B.1.1.7, B.1.351 arba B.1.1.28 (P.1). Jis vystosi taip, kad potencialiai gali apeiti mūsų taikomus terapinius ir profilaktinius metodus, nukreiptus į viruso viršūnę. Todėl tokie veiksniai, kaip mažas toksiškumas žmonėms ir veiksmingas penkių svarbių smailių mutacijų surišimo su žmogaus ACE2 receptoriumi slopinimas, kaip čia nurodyta in vitro, skatina nuodugniau analizuoti T. officinales veiksmingumą SARS-CoV-2 profilaktikai ir dabar reikia papildomų patvirtinančių klinikinių įrodymų.

Medžiagos ir metodika

Augalinė medžiaga

Tyrimas atliktas su džiovintais vaistinio t. officinale lapais (vom Achterhof, Uplengenas, Vokietija; partijos Nr. 37259, B370244 ir P351756). Tirtas teigiamai trijose skirtingose Freiburgo i. Gebr. regiono (Vokietija) vietovėse, 2020 m. liepos 12 d., ir atliekant ląstelių be smaigų S1-ACE2 surišimo tyrimą (duomenys nepateikti). C. intybus gautas iš Naturideen (Vokietija).

Ląstelių linijos ir kultūros

Žmogaus embrioninio inksto 293 (HEK293) ląsteles, stabiliai ekspresuojančias hACE2, dosniai suteikė Prof. Dr. Stefan Pöhlmann (Getingenas, Vokietija). Ląstelės buvo palaikomos Dulbeko modifikuotoje Eagle terpėje (DMEM) su dideliu gliukozės kiekiu, papildytoje 10 % vaisiaus veršelių serumo (FCS), 100 E/ml penicilino/streptomicino ir 50 µg/ml zeocino (Life Technologies, Darmštatas, Vokietija). Žmogaus A549-hACE2-TMPRSS2 ląstelės, sukurtos iš žmogaus plaučių A549 ląstelių linijos, buvo įsigytos iš "InvivoGen SAS" ("Toulouse Cedex 4", Prancūzija) ir palaikomos DMEM, papildytame 10 % termiškai inaktyvuoto FCS, 100 E/ml penicilino/streptomicino, 100 µg/ml normocino, 0,5 µg/ml puromicino ir 300 µg/ml higromicino. Norint subkultūruoti, visos ląstelės pirmiausia buvo nuplautos fosfato buferiniu fiziologiniu tirpalu (PBS), tada inkubuotos su 0,25% tripsinu-EDTA, kol atsiskyrė. Visos ląstelės buvo auginamos 37 °C temperatūroje drėkinamame inkubatoriuje su 5 % CO2/95 % oro atmosfera.

Augalų ekstraktai

Džiovinta augalinė medžiaga buvo pasverta į gintarinio stiklo buteliuką (Carl Roth GmbH, Vokietija) ir kambario temperatūroje (RT) sumaišyta su HPLC klasės vandeniu (a.d.). Tada ekstraktai buvo inkubuojami 1 val. ir centrifuguojami 16 000 g greičiu (3 min., RT). Prieš naudojant eksperimentams, supernatantas buvo filtruojamas (0,22 µm).

SARS-COV2 smaigalio ir ACE2 sąveikos slopinimo analizė naudojant ELISA ir srauto citometriją

SARS-CoV-2 smaigalio ir ACE2 sąveikos slopinimui be ląstelių nustatyti naudotas komercinis SARS-CoV-2 inhibitorių atrankos rinkinys (Kat#: 16605302, Fisher Scientific GmbH, Schwerte, Vokietija). Šiuo spalvotu ELISA testu matuojamas imobilizuoto SARS-CoV-2 spyglių baltymo RBD ir biotinilinto žmogaus ACE2 baltymo sukibimas. Kolorimetrinis aptikimas atliekamas naudojant streptavidiną-HRP, po to inkubuojant TMB. SARS-CoV-2 inhibitorius (hACE2) naudojamas kaip metodologiškai patikrintas etalonas.

ACE2 raiška ląstelių paviršiuje buvo nustatyta naudojant žmogaus ACE2 PE konjuguotą antikūną (Bio-Techne GmbH, Wiesbaden-Nordenstadt, Vokietija) ir atliekant srauto citometrinę analizę. Siekiant išanalizuoti SARS-CoV-2 S1 smaigalio RBD -ACE2 prisijungimą, 2 x 105 ląstelės (5 x 106 ląstelių/ml) buvo iš anksto apdorotos augalų ekstraktais skirtingais laiko momentais. Tada į kiekvieną mėginį buvo įdėta 500 ng/ml SARS-CoV-2 spike S1 (Trenzyme GmbH, Konstanz, Vokietija), spike S1 D614G, N50Y arba K417N, E484K ir N501Y mišinio (Sino Biological Europe GmbH, Eschborn, Vokietija) -His rekombinantinio baltymo ir mėginiai toliau inkubuoti 30-60 min. Kitu atveju ląstelės prieš inkubuojant su augaliniu ekstraktu 30-60 s 4 °C arba 37 °C temperatūroje 30 min. buvo iš anksto apdorotos 500 ng/ml SARS-CoV-2 Spike-His rekombinantiniu baltymu. Mėginiai buvo inkubuojami PBS buferiniame tirpale, kuriame yra 5% FCS. Po to ląstelės vieną kartą nuplautos PBS buferiu, kurio sudėtyje yra 1% FCS, 500 x g, 5 min. prieš dažant His žyme A647 mAb (Bio-Techne GmbH, Wiesbaden-Nordenstadt, Vokietija) 30 min. prie RT. Po to ląstelės buvo du kartus nuplautos, kaip aprašyta pirmiau. Ląstelės buvo analizuojamos FACSCalibur (BD Biosciences, Heidelbergas, Vokietija), užregistruota 10 000 įvykių. Kiekvieno mėginio vidutinis fluorescencijos intensyvumas (MFI) buvo nustatytas naudojant "FlowJo" programinę įrangą (Ashland, Oregonas, JAV).

Žmogaus AKE2 fermento aktyvumas ir baltymų kiekybinis nustatymas

A549-hACE2-TMPRSS2 (2 × 105) ląstelės buvo pasėtos į 24 duobučių plokštelę DMEM terpėje su dideliu gliukozės kiekiu, kurioje yra 10 % termiškai inaktyvuotos FCS, 37 °C temperatūroje, 5 % CO2. Po to ląstelės 1-24 val. buvo apdorotos T. officinale ekstraktu su 500 ng/ml SARS-CoV-2 S1 spike RBD baltymu ir be jo. Po to ląstelės buvo nuplautos PBS ir lizuotos. 25 µg baltymų buvo naudojami ACE2 baltymų kiekybiniam nustatymui (ACE2 ELISA rinkinys), 5 µg - ACE2 fermento aktyvumui nustatyti (ACE2 Activity Assay Kit, Abcam, Kembridžas, Jungtinė Karalystė) pagal gamintojo instrukcijas.

A549-hACE2-TMPRSS2 ląstelių užkrėtimas pseudotipiniu lentivirusiniu SARS-CoV-2

SARS-CoV-2 spike pseudotipinės lentivirusinės dalelės, pagamintos naudojant SARS-CoV-2 spike (Genbank Accession #QHD43416.1) kaip apvalkalo glikoproteinus vietoj įprastai naudojamų VSV-G, buvo įsigytos iš "BPS Bioscience" (katalogas#: 7994299). Biomol, Hamburgas). Šiuose pseudovirionuose taip pat yra ugnies liepsnelės liuciferazės genas, kurį valdo CMV promotorius. Taigi spyglių sukeltą patekimą į ląstelę galima kiekybiškai įvertinti naudojant liuciferazės reporterio aktyvumą. Kaip neigiama kontrolė buvo naudojamas glotnus lentivirusinis pseudovirionas (BPS Bioscience #79943), kuriame nėra išreikštas apvalkalo glikoproteinas. Kaip teigiama transdukcijos kontrolė naudota BPS Bioscience (katalogas #: 79692-P) sukurta Firefly luciferase (puromicinas) lentivirusinė programa. Šie virusai konstituciškai ekspresuoja ugnies liepsnelės luciferazę pagal CMV promotorių. Plaučių ląstelės buvo sėjamos po 0,1 × 106 ląstelių/cm2 į 96 duobučių plokšteles DMEM, kurioje yra 10 % termiškai inaktyvuoto FCS, 100 E/ml penicilino/streptomicino, 100 µg/ml normocino, 0,5 µg/ml puromicino ir 300 µg/ml higromicino per naktį. Terpė buvo pakeista DMEM + 10 % termiškai aktyvuotų FCS ir ląstelės buvo inkubuojamos su a.d. arba T. officinale ekstraktu 30 min. prieš arba 3 val. po 2,5 µl lentivirusinių dalelių įterpimo. Po 24 val. inkubacijos su viruso dalelėmis, terpė buvo pašalinta nuplaunant PBS, įpilta šviežios terpės ir ląstelės buvo inkubuojamos dar 60 val. su a.d. arba T. officinale ekstraktu. Luminescencija buvo nustatyta per 1 h naudojant BPS vieno žingsnio liuciferazės reagentą pagal gamintojo protokolą "Tecan multiplate reader" (Tecan Group Ltd, Crailsheim, Vokietija).

Citokinų išsiskyrimo kiekybinis įvertinimas naudojant daugybinių rutuliukų metodą

Citokinų išsiskyrimo kiekybinis įvertinimas naudojant daugybinių rutuliukų metodąPraėjus 24 val. po SARS-CoV-2 spike pseudotipinio lentiviruso transdukcijos ir 60 val. po A549-hACE2-TMPRSS2 ląstelių užkrėtimo, supernatantai buvo surinkti ir saugomi -80 °C temperatūroje, kol bus atlikta citokinų sekrecijos analizė naudojant žmogaus MACSplex . citokinų 12 rinkinį ("Miltenyi Biotec GmbH", Bergisch Gladbach, Vokietija) pagal gamintojo protokolą.

Augalų ekstraktų molekulinės masės frakcionavimas

Išdžiovintų augalų lapų ekstraktai buvo ruošiami į augalinę medžiagą (po 500 mg) įpilant dvigubai distiliuoto vandens (5 ml). Mėginiai 60 min. buvo inkubuojami tamsoje kambario temperatūroje (RT), po to 3 min. centrifuguojami 16 000 g. Supernatantas buvo surinktas ir filtruojamas membraniniu filtru (0,45 µm), taip gaunami ekstraktai. Alikvotai buvo 48 valandas džiovinti šaltyje, kad būtų galima nustatyti jų išeigą pagal svorį. Tada ekstraktai buvo toliau skirstomi į didelės molekulinės masės (HMW) ir mažos molekulinės masės (LMW) frakcijas naudojant centrifugavimo mėgintuvėlį su įdėklu, kuriame yra molekulinės masės filtras (5 kDa, Sartorius Stedim Biotech, Göttingen, Vokietija). . Kiekviena HMW frakcija buvo išgryninta skalaujant 20 ml vandens, taip gaunant HMW ir LMW frakcijas. Frakcijos buvo išdžiovintos liofilizacijos būdu, nustatyta jų išeiga pagal svorį ir iki naudojimo laikytos -20 °C temperatūroje.

Ląstelių gyvybingumo nustatymas naudojant tripano mėlynąjį dažymą

Ląstelių gyvybingumo nustatymas naudojant tripano mėlynąjį Ląstelių gyvybingumas buvo įvertintas naudojant tripano mėlynojo dažiklio išskyrimo testą, kaip aprašyta anksčiau (Odongo ir kt., 2017). Trumpai tariant, A549-hACE2-TMPRSS2 ląstelės buvo kultivuojamos 24 val. ir po to 84 val. veikiamos ekstraktais arba kontroliniu tirpikliu (a. d.).

Statistinė analizė

Rezultatai buvo analizuojami naudojant GraphPad Prism 6.0 programinę įrangą (La Jolla, Kalifornija, JAV). Duomenys pateikti kaip vidurkis + SD. Statistinis reikšmingumas nustatytas taikant vienpusį ANOVA testą, po kurio taikyta Bonferroni korekcija. P vertės < 0,05 () buvo statistiškai reikšmingi ir < 0,01 (*) laikoma labai statistiškai reikšminga.

Autorių indėlis

Tyrimo planas ir koncepcija: E.L.; eksperimentinis planas, duomenų gavimas, duomenų analizė: H.T.T., E.L., N.P.K.L.; ekstrakto frakcijų paruošimas: C.D., M.G.; pirmojo rankraščio juodraščio projekto rengimas: C.D., M.G: E.L.. Visi autoriai teikė pastabas dėl ankstesnių rankraščio versijų.

Padėkos

Autoriai dėkoja profesoriui Dr. Stefan Pöhlmann (Vokietijos primatų centras, Getingenas, Vokietija) už suteiktas žmogaus embrioninių inkstų 293 (HEK293) ląsteles, stabiliai ekspresuojančias hACE2.

Nuorodos

1. 1.↵Lu R ir kt. (2020) 2019 m. naujo koronaviruso genominis apibūdinimas ir epidemiologija: reikšmė viruso kilmei ir receptorių prisijungimui. Lancet 395(10224):565-574.CrossRefPubMedGoogle Scholar
2. 2.↵Paules CI, Marston HD ir Fauci AS (2020) Koronavirusinės infekcijos - daugiau nei tik peršalimas. JAMA 323(8):707-708.CrossRefPubMedGoogle Scholar
3. 3.↵Berlin DA, Gulick RM ir Martinez FJ (2020) Sunkus Covid-19. N Engl J Med 383(25):2451-2460.CrossRefPubMedGoogle Scholar
4. 4.↵Huang Y, Yang C, Xu XF, Xu W ir Liu SW (2020) SARS-CoV-2 smaigalio baltymo struktūrinės ir funkcinės savybės: galimas antivirusinio vaisto COVID-19 kūrimas Acta Pharmacol Sin 41(9):1141-1149.CrossRefPubMedGoogle Scholar
5. 5.↵Grubaugh ND, Hodcroft EB, Fauver JR, Phelan AL ir Cevik M (2021) Visuomenės sveikatos veiksmai, skirti naujiems SARS-CoV-2 variantams kontroliuoti. Cell.Google Scholar
6. 6.↵Zhou D ir kt. (2021) SARS-CoV-2 varianto B.1.351 ištrūkimo iš natūralių ir vakcinuotų serumų įrodymai. Cell.Google Scholar
7. 7.↵Becerra-Flores M & Cardozo T (2020) SARS-CoV-2 viruso G614 mutacija pasižymi didesniu mirštamumu. International journal of clinical practice 74(8):e13525.Google Scholar
8. 8.↵Fratev F (2020) N501Y ir K417N mutacijos SARS-CoV-2 smaigalio baltyme keičia sąveiką su hACE2 ir žmogaus antikūnais: perturbacijos laisvosios energijos tyrimas. bioRxiv:2020.2012.2023.424283.Google Scholar
9. 9.↵Ho D ir kt. (2021) Padidėjęs SARS-CoV-2 B.1.351 ir B.1.1.7 variantų atsparumas antikūnų neutralizacijai. Res Sq.Google Scholar
10. 10.↵Perrotta F, Matera MG, Cazzola M ir Bianco A (2020) Sunki kvėpavimo takų SARS-CoV2 infekcija: ar svarbus AKE2 receptorius? Respir Med 168:105996.CrossRefGoogle Scholar
11. 11.↵ESCOP (2003) "Taraxaci folium" ir "Taraxaci radix". Monografijos apie augalinių vaistų medicininį naudojimą. (Thieme, Štutgartas), antrasis leidimas, red. p. 499-504.Google Scholar
12. 12.↵Blumenthal M, Busse WR, Goldberg A, Gruenwald J, Hall T, Riggins CW, Rister RS. (red.) "Kiaulpienių žolė" ir "Kiaulpienių šaknys su žole" In: E komisijos monografijos. Augalinių vaistų terapinis vadovas. American Botanical Council, Austin, Texas 1998; 118-120. 13 Association BHM (1990) "Dandelion Leaf" and "Dandelion Root". Didžiosios Britanijos vaistažolių farmakopėja 1: 37-39.Google Scholar
13. 14.↵Gonzalez-Castejon M, Visioli F, & Rodriguez-Casado A (2012) Diverse biological activities of dandelion. Nutr Rev 70(9):534-547.PubMedGoogle Scholar
14. 15.↵Schutz K, Carle R ir Schieber A (2006) Taraxacum - fitocheminio ir farmakologinio profilio apžvalga. J Ethnopharmacol 107(3):313-323.CrossRefPubMedMokslo žiniatinklisGoogle Scholar
15. 16.↵Europos vaistų agentūra (EMA) CoHMPH (2009) Taraxacum officinale Weber ex Wigg., folium vertinimo ataskaita. HMPC/579634/2008.Google Scholar
16. 17.↵To KK ir kt. (2020) COVID-19 pakartotinė infekcija filogenetiškai skirtinga SARS koronaviruso-2 paderme, patvirtinta viso genomo sekoskaitos metodu. Clin Infect Dis. Aug 25:ciaa1275. doi: 10.1093/cid/ciaa1275.CrossRefPubMedGoogle Scholar
17. 18.↵Edridge AWD, et al. (2020) Coronavirus apsauginis imunitetas yra trumpalaikis. medRxiv:2020.2005.2011.20086439.Google Scholar
18. 19.↵Jia H, Neptune E, & Cui H (2020) ACE2 nukreipimas į COVID-19 terapiją: galimybės ir iššūkiai. American journal of respiratory cell and molecular biology. Dec 9. doi: 10.1165/rcmb.2020-0322PS.CrossRefGoogle Scholar
19. 20.↵Zhou J & Huang J (2020) Current Findings Regarding Natural Components With Potential Anti-2019-nCoV Activity. Frontiers in Cell and Developmental Biology 8:589.Google Scholar
20. 21.↵Huentelman MJ ir kt. (2004) Naujo angiotenziną konvertuojančio fermento 2 inhibitoriaus atradimas pagal struktūrą. Hipertenzija 44(6):903-906.CrossRefGoogle Scholar
21. 22.↵Wang G ir kt. (2021) Dalbavancinas prisijungia ACE2 ir blokuoja jo sąveiką su SARS-CoV-2 smaigalio baltymu bei veiksmingai slopina SARS-CoV-2 infekciją gyvūnų modeliuose. Cell Res 31(1): 17-24.Google Scholar
22. 23.↵Tito A ir kt. (2020) Granatų žievelės ekstraktas kaip SARS-CoV-2 spyglio prisijungimo prie žmogaus ACE2 inhibitorius: perspektyvus naujų antivirusinių vaistų šaltinis. bioRxiv:2020.2012.2001.406116.Google Scholar
23. 24.↵Korber B ir kt. (2020) SARS-CoV-2 smaigalyje vykstančių pokyčių stebėjimas: įrodymai, kad D614G padidina COVID-19 viruso užkrečiamumą. Cell 182(4):812-827 e819.CrossRefPubMedGoogle Scholar
24. 25.↵Santos JC & Passos GA (2021) Didelis SARS-CoV-2 B.1.1.7 užkrečiamumas yra susijęs su padidėjusia Spike-ACE2 sąveikos jėga, kurią sukelia viruso N501Y mutacija. bioRxiv:2020.2012.2029.424708.Google Scholar
25. 26.↵Hook I, McGee A ir Henman M (1993) Kiaulpienių diuretinio aktyvumo ir kalio kiekio kitimo įvertinimas. International Journal of Pharmacognosy 31(1):29-34.Google Scholar
26. 27.↵Escudero NL, De Arellano ML, Fernández S, Albarracín G, & Mucciarelli S (2003) Taraxacum officinale as a food source. Plant Foods for Human Nutrition 58(3):1-10.PubMedMokslo žiniatinklisGoogle Scholar
27. 28.↵Imai Y ir kt. (2005) Angiotenziną konvertuojantis fermentas 2 apsaugo nuo sunkaus ūminio plaučių nepakankamumo. Nature 436(7047):112-116.CrossRefPubMedMokslo žiniatinklisGoogle Scholar
28. 29.↵Kuba K ir kt. (2005) Angiotenziną konvertuojančio fermento 2 (ACE2) lemiamas vaidmuo SARS koronaviruso sukeltame plaučių pažeidime. Nat Med 11(8):875-879.CrossRefPubMedMokslo žiniatinklisGoogle Scholar
29. 30.↵Zhong M ir kt. (2020) ACE2 ir furino raiška burnos epitelio ląstelėse galbūt palengvina COVID-19 infekciją per kvėpavimo takus ir fekalinį-oralinį kelią. Front Med (Lozana) 7:580796.Google Scholar
30. 31.↵ To KK-W, et al. (2020) 2019 m. naujo koronaviruso nuoseklus aptikimas seilėse. Clinical infectious diseases: an official publication of the Infectious Diseases Society of America 71(15):841-843.CrossRefPubMedGoogle Scholar
31. 32.↵Yoon JG ir kt. (2020) Didelio SARS-CoV-2 viruso kiekio seilėse klinikinė reikšmė. J Korean Med Sci 35(20):e195-e195.CrossRefGoogle Scholar
32. 33.↵Wolfel R ir kt. (2020) Hospitalizuotų pacientų, sergančių COVID-2019, virusologinis įvertinimas. Nature 581(7809):465-469.CrossRefPubMedGoogle Scholar
33. 34.↵Seneviratne CJ ir kt. (2020) Komercinių burnos skalavimo skysčių poveikis SARS-CoV-2 viruso kiekiui seilėse: atsitiktinių imčių kontrolinis tyrimas Singapūre. Infection:1-7.Google Scholar
34. 35.↵ de Toledo Telles-Araujo G, Caminha RDG, Kallas MS, Sipahi AM, & da Silva Santos PS (2020) Potencialūs burnos skalavimo skysčiai ir nosies purškalai, mažinantys SARS-CoV-2 viruso kiekį: Ką žinome iki šiol? Clinics (Sao Paulo) 75:e2328.Google Scholar
35. 36. Carrouel F ir kt. (2021) Burnos skalavimo skysčiuose esančių reagentų antivirusinis aktyvumas prieš SARS-CoV-2. Journal of dental research 100(2):124-132.Google Scholar
36. 37.↵Joglekar AV & Sandoval S (2017) Pseudotipiniai lentivirusiniai vektoriai: vienas vektorius, daug pavidalų. Hum Gene Ther Methods 28(6):291-301.CrossRefGoogle Scholar
37. 38.↵Krammer F (2020) Kuriamos SARS-CoV-2 vakcinos. Nature 586(7830):516-527.CrossRefPubMedGoogle Scholar

Europos Taryba - Rezoliucija 2361 (2021) - Neprivalomas skiepijimas

Pavadinimas: Kovid-19 vakcinos: etiniai, teisiniai ir praktiniai aspektai

Šioje rezoliucijoje 7.1.1 punkte rašoma: "užtikrinti aukštos kokybės tyrimus, kurie yra pagrįsti ir atliekami laikantis etikos principų pagal atitinkamas Žmogaus teisių ir orumo apsaugos konvencijos dėl biologijos ir medicinos taikymo: Žmogaus teisių ir biomedicinos konvencijos (ETS Nr. 164, Ovjedo konvencija) ir jos papildomo protokolo dėl biomedicininių tyrimų (CETS Nr. 195) nuostatas ir į kuriuos palaipsniui įtraukiami vaikai, nėščios moterys ir maitinančios motinos;".

7.1.1 skirsnyje reikalaujama, kad aukštos kokybės ir etiškai pagrįsti tyrimai būtų atliekami pagal atitinkamas Žmogaus teisių ir orumo apsaugos konvencijos dėl žmogaus teisių ir orumo apsaugos biologijos ir medicinos taikymo srityje nuostatas, laikantis Žmogaus teisių ir biomedicinos apsaugos konvencijos (angl.ETS Nr. 164, Ovjedo konvencija (Nuoroda) - PDF) ir Papildomo protokolo dėl biomedicininių tyrimų (dok.SEV Nr. 195 (Nuoroda) - PDF), įskaitant vaikus, nėščias moteris ir krūtimi maitinančias motinas.

1997 m. balandžio 4 d. Ovjedo susitarimo CETS 164 (SEV 1164) IV skyriaus 13 straipsnyje reikalaujama: "Intervencija į žmogaus genomą - Intervencija, kuria siekiama modifikuoti žmogaus genomą, gali būti atliekama tik prevenciniais tikslais,
diagnostikos ar gydymo tikslais ir tik tuo atveju, jei jo tikslas nėra modifikuoti palikuonių genomą."

Tai aiškiai apibrėžia, kad intervencija į žmogaus genomą leidžiama tik prevenciniais tikslais,
diagnostikos ar gydymo tikslais ir tik tuo atveju, jei nesiekiama pakeisti palikuonių genomo.

13 straipsnis - Intervencijos į žmogaus genomą
Intervencija, kuria siekiama pakeisti žmogaus genomą, gali būti atliekama tik prevenciniais tikslais,
diagnostikos ar terapijos tikslais ir tik tuo atveju, jei jo tikslas nėra pakeisti
visų palikuonių genomą.

7.3.1 punkte teigiama: "užtikrinti, kad piliečiai būtų informuoti, jog skiepijimas nėra privalomas ir kad niekas nepatirtų politinio, socialinio ar kitokio spaudimo skiepytis, jei to nenori".

Kitaip tariant, siekiama užtikrinti, kad piliečiai būtų informuoti, jog skiepijimas NĖRA privalomas ir kad niekas nebūtų politiškai, socialiai ar kitaip spaudžiamas skiepytis, jei to nenori.

7.5.1 punkte nurodoma, kad "įdiegti nepriklausomas vakcinų kompensavimo programas, kurios užtikrintų kompensacijas už netinkamą skiepų žalą ir skiepų padarytą žalą"; turi būti įdiegtos nepriklausomos kompensavimo programos, iš kurių būtų mokamos kompensacijos už netinkamą skiepų žalą ir skiepų padarytą žalą.

7.5.2 punkte teigiama, kad "skiepų pažymėjimus naudoti tik pagal paskirtį - vakcinos veiksmingumui, galimam šalutiniam poveikiui ir nepageidaujamiems reiškiniams stebėti".

Vienintelis skiepų sertifikatų tikslas - stebėti vakcinų veiksmingumą, jų šalutinį poveikį ir nepageidaujamus reiškinius.

Be to, verta perskaityti ir atkreipti dėmesį į kitą turinį.

Portugalija - 0,9 % Covid-19 mirčių vietoj oficialiai nustatytų 17 000

Dėl Portugalijos gyventojų peticijos Portugalijos teismas turėjo spręsti klausimą, kiek žmonių, kurie buvo užregistruoti kaip Covid-19 mirusieji ir oficialiai pripažinti mirusiais nuo maždaug 17.000 iš tikrųjų mirė nuo Covid-19.

Teismas surinko įrodymus ir padarė išvadą, kad Sprendimas 2021 m. gegužės 19 d. buvo padaryta išvada, kad nuo Kovid-19 mirė tik 152 žmonės.

Pagal įprastą aiškinimą, kiekvienas miręs asmuo, kurio PGR testas buvo teigiamas per paskutines 28 dienas arba kuris buvo registruotas kaip kontaktinis asmuo, turi būti laikomas Covid-19 mirusiu asmeniu.

2020 m. lapkričio 11 d. Lisabonos apeliacinis teismas jau išnagrinėjo apeliacinį skundą dėl karantino priemonių, kurios buvo paskirtos remiantis PGR tyrimų rezultatais. 34 puslapių sprendime SprendimasAtaskaitoje, remiantis įvairiais moksliniais šaltiniais, kritikuojama karantino tvarka, atsižvelgiant į abejotiną PGR tyrimo procedūros pagrįstumą.

Pranešimų apie mirties atvejus po CORONA vakcinacijos centras 

Asociacija Gydytojai ir mokslininkai už sveikatą, laisvę ir demokratiją e.V. savo interneto svetainėje pateikia daug informacijos, patarimų ir pasiūlymų, susijusių su mirusių asmenų skrodimu po vakcinacijos nuo koronos. Čia taip pat galima atsisiųsti PDF paskelbta. Be kita ko, aiškiai nurodoma, kad skrodimas turi būti atliekamas pagal rekomendacijas

Prof. Dr. Arne Burkhardt
Patologijos laboratorija Reutlingene
Obere Wässere 3-7
72764 Reutlingenas

turi būti atliekami.

Asociacijos valdybą sudaro medicinos mokslų daktaras, mikrobiologijos ir infekcijų epidemiologijos specialistas, Johanneso Gutenbergo Mainco universiteto profesorius emeritas, 1991-2012 m. vadovavęs šio universiteto Medicininės mikrobiologijos ir higienos institutui, medicinos mokslų daktaras, ginekologas Ronaldas Weiklas, Hanoverio Leibnico universiteto viešųjų finansų profesorius Stefanas Homburgas ir psichologinė konsultantė, mokytoja Daniela Folkinger.

Osteopatija ir skiepijimas vainiklapiais

Kelno osteopatas Jensas Oskampas* parengė šią informaciją pacientams, kurioje kalbama apie vektorinių ir mRNA vakcinų riziką, susijusią su osteopatiniu gydymu, ir todėl priežastiniu ryšiu neįtraukia skiepytų asmenų.

„Apgailestauju, bet turiu pranešti, kad žmonių, kurie buvo paskiepyti vadinamosiomis mRNA ir vektorinėmis vakcinomis nuo SARS CoV2, gydyti negaliu. Priešingai nei tradiciniai skiepai, tai yra genų inžinerijos metodai, kuriais manipuliuojama paties organizmo ląstelėmis, kad jos pačios gamintų viruso dalis, siekiant sukelti organizmo imuninį atsaką. Šioms "vakcinoms" išduotas leidimas tik skubos tvarka. Kryžminės reakcijos su kitais vaistais ir gydymo būdais tyrimai atlikti mažai arba visai neatlikti. (Vaizdo įrašas - Prof.Dr.Hockertz, 2020 m.)

Šiuo atžvilgiu osteopatiniam gydymui kyla šios problemos:

Kol kas neaišku, kuriose kūno vietose susidaro trombozė. Gerai žinoma smegenų venų trombozė kaip šalutinis poveikis atsiranda todėl, kad šioje kūno vietoje kraujas teka palyginti lėtai (Chen et al. 2021). Tačiau lėtai tekantis kraujas pasitaiko ir kitose kūno dalyse. Ten taip pat gali susidaryti trombai. (Kadkhoda, 2021 m.). Jei, pavyzdžiui, dėl osteopatinių metodų kojų venų sistemos kraujagyslės tampa pralaidesnės, iš pradžių susiformavę trombai gali atsiskirti ir blogiausiu atveju sukelti plaučių emboliją. Trombų susidarymas dažnai būna besimptomis.

Be to, negalima atmesti galimybės, kad osteopatinio gydymo metu iš audinių išsiskyrus patogenams, gali kilti kitų nekontroliuojamų imuninių reakcijų. Paprastai imuninė sistema su tuo susitvarko be jokių problemų. Tačiau pernelyg aktyvi imuninė sistema gali sukelti rimtų komplikacijų ir sunaikinti paties organizmo audinius (Vojdania ir Charrazianb, 2020 m.), (Talotta,2021).

Geras osteopatinis gydymas pašalina limfinės sistemos užsikimšimus. Tačiau dėl mRNA manipuliacijų joje susikaupia nenatūralus specifinių antikūnų kiekis (2020 m. kambarys). Negalima atmesti galimybės, kad bus nemažai reakcijų (Hotez et al. 2020), kai tik šie audiniai pasikeičia osteopatinio gydymo metu. Nervų sistema taip pat gali būti paveikta, pavyzdžiui, veido paralyžiaus atvejais (Shemer et al. 2021),(Renould et al,2021) arba akių problemos dėl Užkietėjusi papilvė (Vokietijos oftalmologų draugija, 2021 m.) parodyti.

Kitos problemos kyla dėl mRNA vakcinose naudojamų nanodalelių (Chen et al. 2021). Be kita ko, jos sukelia tam tikrų rūšių audinių, ypač kepenų, vakuolizaciją (praktiškai ląstelių edemą). Tai ženklas, kad atitinkamos ląstelės žuvo dėl reakcijos su nanodalelėmis (Vaizdo įrašas - Dr. Vanessa Schmidt-Krüger, 2021 m.*). Šiuo atveju taip pat neaišku, kas atsitinka, kai skystis iš šių "edemų" arba negyvas audinys patenka į kraują dėl osteopatinių metodų.

*Lokalinės Dr. Vanessos Schmidt-Krüger vaizdo įrašų atsisiuntimo nuorodos yra šios čia (1_2 vaizdo įrašas) ir čia (2_2 vaizdo įrašas).

Jei dėl mRNA ir (arba) vektorinių vakcinų jums jau buvo atliktos genetinės modifikacijos, prašyčiau vėl susitikti su manimi ne anksčiau kaip po 10 mėnesių nuo šių priemonių taikymo. Tuomet aptarsime, kokius laboratorinius tyrimus ir vaizdavimo procedūras būtina atlikti, kad būtų galima atmesti komplikacijas. (pvz., tyrimas dėl užspaustos papilvės - Vokietijos oftalmologų draugija, 2021 m.)
Kelios injekcijos padidina pirmiau aprašytų koreliacijų intensyvumą ir tikimybę. Todėl pasilieku teisę apskritai atsisakyti gydymo net ir po 10 mėnesių.

Stipriai imuninei sistemai, kaip alternatyvai skiepams, reikia žinių!!! Rekomenduoju šią vaizdo medžiagą:

• Dr. rer. nat. Markus Stark - Imuninės sistemos ir gynybos stiprinimas
• Dr. Mathias Rath - Įveikite dabartinę pandemiją - užkirskite kelią būsimoms pandemijoms!
• Prof. Dr. Jörg Spitz - Vitaminas D - mitas ar viltis„

• Jens Oskamp interneto svetainė (šiuo metu atnaujinama)*

Apsaugos nuo infekcijų ir pagrindinio įstatymo pakeitimas

2021 m. birželio 22 d. Vokietijos Bundestago paskelbta rezoliucija Spausdinta medžiaga 19/30938 tampa į 23.07.2023 konstitucijos garantuojamos teisės į fizinę neliečiamybę apribojimas!

' 9 straipsnis
Apsaugos nuo infekcijų įstatymo pakeitimas
§ 2000 m. liepos 20 d. Infekcijų apsaugos įstatymo 36 straipsnio 12 dalis (BGBl.
I p. 1045), kuris paskutinį kartą buvo iš dalies pakeistas 2021 m. gegužės 28 d. Įstatymo 1 straipsniu.
(BGBl. I p. 1174) iš dalies keičiamas taip:
"(12) Leidimas, išduotas remiantis 8 dalies 1 sakiniu arba 10 dalies 1 sakiniu
įsigalioja ne vėliau kaip per vienerius metus nuo potvarkio panaikinimo.
Nacionalinės svarbos epidemiologinės situacijos nustatymas pagal
Vokietijos Bundestagas pagal 5 straipsnio 1 dalies 2 sakinį. Iki jos
Potvarkis, priimtas remiantis 8 dalies 1 sakiniu arba 10 dalies 1 sakiniu, taip pat gali būti keičiamas panaikinus valstybinės svarbos epidemiologinę situaciją."

10 straipsnis
Pagrindinių teisių apribojimas
Per 9 straipsnį pagrindinės teisės į fizinę neliečiamybę yra (Pagrindinio įstatymo 2 straipsnio 2 dalies 1 sakinys), asmens laisvė
(Pagrindinio įstatymo 2 straipsnio 2 dalies 2 sakinys), judėjimo laisvė (Pagrindinio įstatymo 11 straipsnis)
Pagrindinio įstatymo 1 dalis) ir būsto neliečiamybė (Pagrindinio įstatymo 13 straipsnio 1 dalis). ribotas.

7. buvęs 9 straipsnis tampa 11 straipsniu, o 2 dalis išdėstoma taip:
(2)" 1, 2, 6, 7 straipsnių 1, 2 ir 4 numeriai ir 8 straipsnis įsigalioja 2023 m. liepos mėn."

109 tyrimų apie kaukių dėvėjimą įvertinimas

2021 m. balandžio 20 d. paskelbtas 109 tyrimų, susijusių su kaukės dėvėjimo pandemijos metu sveikatos aspektais, įvertinimas. Tarptautinis aplinkos tyrimų ir visuomenės sveikatos žurnalas paskelbtas, kuris čia PDF formatu originalo kalba (anglų kalba) ir čia galima atsisiųsti vokišką versiją.

Tyrėjai priėjo prie išvados, kurios jie patys nebūtų pagalvoję, kad tokia žala yra įmanoma.

Be jau žinomo neigiamo poveikio, reikėtų pabrėžti kaukės sukelto išsekimo sindromą (MIES).

Dėl MIES poveikio gali sutrikti koncentracija, mąstymas ir kalba, sumažėti širdies ir kvėpavimo dažnis bei kvėpavimo gylis, o tai savo ruožtu gali pažeisti kraujagysles ir vainikines arterijas, o vėliau sukelti neurologines ir širdies ligas. Ilgalaikis poveikis vis dar tiriamas.

PSO - Vaikų skiepijimo rekomendacijos pakeitimas

Į Versija 2021 m. birželio 3 d. rekomendacija šiuo metu neskiepyti vaikų, nes vis dar nėra patikimų įrodymų, kad vaikus reikėtų skiepyti nuo Covid-19, juolab kad jiems, kaip ir paaugliams, paprastai ligos eiga būna lengvesnė nei suaugusiesiems. Įprastinius rekomenduojamus skiepus vaikams vis tiek reikėtų tęsti.

Į dabartinė versijapaskelbta 2021 m. birželio 20 d., pirmiau minėta ištrauka buvo iš dalies pakeista taip, kad, nors minimi lengvesni ligos atvejai ir skiepijimas nebūtinai turi būti atliktas, jei vaikai nepriklauso rizikos grupei, vis dėlto reikia daugiau informacijos, kad būtų galima pateikti bendrą rekomendaciją dėl skiepijimo.
Nepaisant to, "Pfizer BioNTech" apibrėžiamas kaip tinkamas vyresniems nei 12 metų vaikams. Vaikams nuo 12 iki 15 metų, kaip rizikos grupių nariams, ši vakcina taip pat bus siūloma kartu su kitomis prioritetinėmis grupėmis.
Kaip ir senojoje versijoje, nurodoma, kad dar nėra pakankamai duomenų, gautų atlikus tyrimus su vaikais. Atitinkamos rekomendacijos bus pateiktos, kai tik bus gauta papildomų duomenų.

Iš dalies pakeistos dalys pirmiau minėtuose dokumentuose pažymėtos geltonai.

Pagal STIKO sprendimas dėl 6-osios atnaujintos COVID-19 vakcinacijos rekomendacijos ir susijusio mokslinio pagrindimo Epidemiologinis biuletenis 23/2021 rekomenduojama (pagal dabartines PSO rekomendacijas) "skiepyti vaikus ir paauglius, sergančius anksčiau buvusiomis ligomis, mRNA vakcina Comirnaty (BioNTech/Pfizer) dėl numanomos padidėjusios sunkios COVID-19 ligos eigos rizikos". turi būti įvykdyta. "Šiuo metu "Comirnaty" naudojimas 12-17 metų vaikams ir paaugliams, neturintiems anksčiau buvusių būklių, paprastai nerekomenduojamas, tačiau yra galimas gavus medicininį išaiškinimą ir esant individualiam norui bei pritarimui rizikai."

PEI - Saugos ataskaita

Būklė 2021 06 10

Federalinė Sveikatos apsaugos ministerijos institucija PEI (Paul-Ehrlich-Institut), kuriai privalomos instrukcijos, kas kelias savaites skelbia vadinamąsias saugumo ataskaitas apie naudojamas vakcinas ir jų šalutinį poveikį.

RKI (Roberto Kocho institutas), nepriklausoma aukštesnioji federalinė institucija, privalanti laikytis direktyvų, kaip apibrėžta DK 87 straipsnio 3 dalies 1 sakinys. Joje veikia "kelios mokslinės komisijos, pavyzdžiui, Nuolatinė vakcinacijos komisija, kuri rengia vakcinacijos rekomendacijas. Ji taip pat atsakinga už federalinių sveikatos ataskaitų turinio tvarkymą ir koordinavimą, taip pat už leidimą importuoti ir naudoti žmogaus embrionines kamienines ląsteles".

Bylų santrauka:

Daugiau informacijos apie šias institucijas galima rasti Federalinė sveikatos apsaugos ministerija.

JAV duomenų bazė VAERS pateikia šiuos JAV duomenis:

Palyginimui: nuo tada, kai JAV pradėta skiepyti nuo difterijos, tymų, kiaulytės, raudonukės, poliomielito ir stabligės, mirė 4050 žmonių. Pirmąją vakciną nuo difterijos Vokietijoje leista naudoti 1936 m., nuo tymų - 1963 m., nuo kiaulytės ir raudonukės - 1969 m., nuo poliomielito - 1955 m., nuo stabligės - 1930 m.

T.y., vyriausybės apibrėžimas "Saugus" ir "labai veiksmingas" paskelbtos Covid-19 vakcinos per šešis mėnesius (!), remiantis JAV turimais duomenimis, sukėlė 150 % tokių mirčių, ko visos pirmiau minėtos vakcinos kartu nepasiekė per šešis-aštuonis dešimtmečius!

Covid-19 vakcinų veiksmingumas

Nuo 2021 m. birželio 1 d. RKI DUK dėl mRNA vakcinų nurodo: "Kol kas nežinoma, kiek laiko trunka apsauga nuo skiepų. Apsauga neprasideda iš karto po skiepijimo, o kai kurie paskiepyti žmonės lieka neapsaugoti."

Pranešama apie vektorines vakcinas: "Kol kas nežinoma, kiek laiko trunka apsauga nuo skiepų. Apsauga neprasideda iš karto po skiepijimo, o kai kurie paskiepyti žmonės lieka neapsaugoti."

Todėl kyla klausimas, kiek galima pateisinti PEI ar kitose duomenų bazėse saugos ataskaitose užregistruotas "nepageidaujamas reakcijas" ir "mirtis", jei atvirai pripažįstama, kad nėra nei tiesioginės apsaugos, nei apsaugos po daugkartinių skiepijimų ir nėra informacijos apie galimą apsaugos trukmę.

Archyviniai įnašai:

DUK - "Corona" testai

Paštas nuo 2021 m. kovo 31 d. 08:43

Testavimas" šiais laikais yra beveik kasdienis palydovas. Dažnai kyla klausimas, kokie testai, kaip ir kokią reikšmę turi. Toliau pateikiamas galimų bandymų metodų ir savybių sąrašas:

PGR tyrimas

... naudojamas SARS-CoV-2 RNR, t. y. Covid-19 viruso genetinės medžiagos dalims aptikti, bet ne aktyviam, t. y. replikuojamam virusui aptikti.

Norint aptikti konkrečią fluorescencijos liniją, mėginyje esanti genetinė medžiaga turi būti padauginta. Amplifikacijos eigos dažnį rodo vadinamoji Ct vertė (ciklo slenkstinė vertė).

Geriausia būtų, jei ši Ct vertė būtų užfiksuota laboratorinių tyrimų rezultatų ataskaitoje.

Teigiamas PGR tyrimas, kurio Ct vertė yra 30 ... 35 rodo mažą virusinį krūvį, Ct vertė >35 rodo labai mažą virusinį krūvį.

Pavyzdžiui, 25 Ct reikšmė rodo didelį viruso kiekį. (Šaltinis: PGR tyrimas - Ct vertė Reikšmė)

Tačiau, kadangi Ct vertės nėra dokumentuotos ir praktiškai standartizuotos įvairiose laboratorijose, o kai kurios dirba su 40 ar didesnėmis Ct vertėmis (iki 50), PGR tyrimų rezultatai nėra nei palyginami, nei reikšmingi. Didėjant Ct vertėms, didėja klaidingai teigiamų tyrimų rezultatų rizika, o tai sukelia visas neigiamas pasekmes, pvz. The Lancet pranešta apie tyrimą Jungtinėje Karalystėje.

Ne veltui rekomendacijos PSO visada vertinkite PGR tyrimo rezultatus atsižvelgdami į esamus ligos simptomus ir klinikinę diagnostiką.

Antigeno tyrimas

... yra skirtas ūmiai infekcijai (vainikinio viruso baltyminės struktūros) nustatyti, tačiau tam reikia didelio viruso krūvio. Todėl reikalingas patvirtinimas vėlesniu PGR tyrimu (su maža Ct verte).

Transporto priemonių, kurioms Vokietijoje išduotas specialus leidimas, sąrašas (Galiojimas iki 2021 m. gegužės vidurio) galima rasti Federalinio vaistų ir medicinos prietaisų instituto (BfArM) interneto svetainėje adresu BfArM - Antigenų tyrimai su specialiu leidimu.

Bandymo rezultatai gali būti klaidingai teigiami, jei bandymo įranga buvo laikoma žemesnėje nei rekomenduojama laikymo temperatūroje, o po to naudojama.

Antikūnų tyrimas (kraujo tyrimas - Elisa testas / greitasis testas)

... aptikti specifinius antikūnus, kuriuos organizmas gamina reaguodamas į koronavirusą.
Nesvarbu, ar imuninis atsakas (aptiktų antikūnų susidarymas) atsirado dėl ankstesnio užsikrėtimo Covid-19, ar dėl vakcinacijos nuo Covd-19.

Interviu su Dr. Greineriu, laboratorinė diagnostika, Viena

Kovid-19 - Ką mums gali pasakyti antikūnai.

Išnaikinti Covid-19?

Paštas nuo 2021 m. kovo 31 d. 09:06

Ar įmanoma išnaikinti virusą?

- Kiek laiko užtruko, kol tymų virusas buvo (pusiau) "nugalėtas"?

1963 m. JAV buvo leista naudoti pirmąją tymų vakciną su inaktyvuota suskaidyta vakcina, kuri buvo nuolat tobulinama. Nepaisant to, praėjus beveik 60 metų, tymai vis dar nėra išnaikinti (šaltinis: tymų virusas).

- Kiek laiko prireikė poliomielito virusui išnaikinti?

Pirmą kartą nuo poliomielito inaktyvuotu virusu buvo paskiepyta 1955 m. (šaltinis: Skiepijimas nuo poliomielito2015 m., praėjus 60 metų (!), PSO paskelbė, kad poliomielitas išnaikintas.

Šiandien manoma, kad vos per kelis mėnesius sukurtos vakcinos, kuriose naudojamos naujos vektorių ar mRNA technologijos, kurios nebuvo sėkmingai išbandytos su gyvūnais ar žmonėmis per įprastai suplanuotus I etapo ... III bandymuose, apie kurių šalutinį ir ilgalaikį šalutinį poveikį nebuvo pranešta ir kurios buvo pateiktos rinkai tik gavus skubų leidimą, kuris sutikimo formose nepaminėtas, gali nugalėti ar net išnaikinti virusą - ir tai per kelis mėnesius!

Kaip ir poliomielito ir tymų virusų atveju, galima daryti prielaidą, kad Covid-19 bus išnaikintas arba bent jau suvaldytas ne mažiau kaip per dvi kartas.

Ar norime įvesti uždarymą, privalomą skiepijimą (vis dar tik netiesioginį), karantiną, izoliaciją, privalomas kaukes ir t. t., ir net skaitmeninę skiepų kortelę?

Todėl vienintelis garantuotai veiksmingas būdas išnaikinti virusą yra beveik 60 metų trunkantis uždarymas arba viruso šeimininko pašalinimas, t. y. kiekvieno žmogaus išnaikinimas. Tuomet bus panaikintas ir viruso išlikimas.

B.t.w.: tai taip pat paaiškina, kodėl virusas visada stengiasi nenužudyti savo šeimininko, kad galėtų toliau daugintis. Todėl mutacijos visada sieks tikslo optimizuoti dauginimąsi netapdamos pavojingesnės šeimininkui. Tačiau neabejotina, kad virusai vis tiek gali tapti mirtini jau sergantiems žmonėms.

Kaip galime suprasti, ką vyriausybė daro pirmyn ir atgal?

Post from03. April 2021 22:11

Prieš bandant atsakyti į šį klausimą ir rasti vieną iš galimų atsakymų, naudinga pažvelgti į 2012 m.

2012 m. Vokietijos Bundestagas užsakė "Rizikos analizę civilinės saugos srityje", kurios ataskaita buvo paskelbta 2013 m. sausio 3 d. kaip spaudinys 17/12051, kurį galima rasti adresu Rizikos analizės ataskaita - Spausdintas klausimas 17/12051, 2013 01 03 galima iškviesti ir atsisiųsti kaip PDF failą.

2.3 skyriaus 5 puslapyje pateikta tema "Rizikos analizė "Modi-SARS viruso sukelta pandemija".

Po to buvo parengtas 17 puslapių dokumentas "Kaip mes kontroliuojame COVID-19", kuris buvo įslaptintas tik tarnybiniam naudojimui ir 2020 m. gegužės 20 d. paskelbtas Federalinės vidaus reikalų ministerijos interneto svetainėje. Kaip kontroliuojame COVID-19 buvo prieinamas ir atsisiunčiamas. Šiandien ji nebėra pasiekiama, bet per šią atsarginę nuorodą Federalinės vidaus reikalų ministerijos įslaptintas COVID-19 scenos dokumentas.

Visi ankstesni, dabartiniai ir būsimi federalinės vyriausybės veiksmai, susiję su COVID-a9, yra išvestiniai.

Dabartinės vyriausybės pastangos palaipsniui apriboti visų aukštesniųjų institucijų įtaką kanclerio sprendimams, jas pašalinti, atimti iš įstatymų leidžiamosios valdžios konstitucijos garantuojamą funkciją, struktūriniai personalo pokyčiai VFR teismuose - visa tai vyksta ta pačia kryptimi kaip ir 1933 m. Tačiau šį kartą po ranka nėra sąjungininkų, galinčių įdiegti naują Pagrindinį įstatymą, kuris sustabdytų šias pastangas!

EMA - fonai

Paštas nuo 20 balandžio 2021 02:43

Čia pateikiamos 2021 m. balandžio 7 d. portale epochtimes.de paskelbtos EMA (Europos vaistų agentūros) funkcijos ir EMA prezidento Emero Cooke'o karjeros bei iš to kylančių interesų konfliktų sąsajos: EMA prezidentas Emeras Kukas (Emer Cooke) daugelį metų dirbo didžiausios Europos farmacijos organizacijos lobistu.

Perteklinis mirtingumas

Paštas nuo 20 balandžio 2021 08:09

Mirtingumo perviršio problema nuolat kartojasi. Be to, kad trūksta intensyviosios terapijos lovų, per didelio mirtingumo argumentas yra nuolatinis Vyriausybės įsakytų priemonių pagrindimo palydovas.

Galima manyti, kad Federalinės statistikos tarnybos duomenys turėtų būti žinomi ir federalinėse spaudos konferencijose (žr: 2021 m. kovo mėn. mirčių skaičius: 11 % mažesnis už ankstesnių metų vidurkį).

Vis dėlto sveikatos apsaugos ministro Jenso Spahno atstovas spaudai Hanno Kautzas žino, kad 2021 04 19 federalinė spaudos konferencija nieko apie šiuos skaičius. Į J. Reitschusterio klausimą: "Pone Kautzai, Federalinės statistikos tarnybos duomenimis, praėjusį mėnesį mūsų mirtingumas buvo per mažas. Kovo mėnesį mirė 11 proc. mažiau žmonių nei vidutiniškai 2017-2020 m. Kaip tai paaiškinsite?" Jis tiesiog atsako: "Aš nekomentuoju skaičių, kurių anksčiau nemačiau" ir "Jūs cituojate labai konkretų skaičių, kurio konteksto nežinau. Šiuo metu negaliu to komentuoti.".

Kyla klausimas: jei šie skaičiai tokie neįdomūs, jei jie net nepripažįstami ar nežinomi, kodėl jie nuolat nurodomi kaip vis griežtesnių priemonių pagrindimas?