Leestyd 63 minute

Opgedateer – 18 Februarie 2023

Hierdie blog sal nie meer voortgesit word nie. Korona-blog 2023 handel oor agtergrondinligting wat bekend geword het, veral van die farmaseutiese industrie en gesondheidsowerhede op internasionale vlak.

Die data-opdatering neem altyd eerste plek hier – artikels oor verskeie onderwerpe sal volg hieronder van hierdie afdeling. Die mees onlangse plasing is bo-aan en het 'n rooi opskrif.

Aangesien sommige opdaterings weens tydsbeperkings gemis is, word die volgende video-animasies van die relevante data vanaf die eerste aangetekende nadelige gebeurtenisverslag tot vandag toe in chronologiese volgorde aangebied, met die mees onlangse eerste. (Bron: EMA / EMA Data-analise Programmering).

• Perikarditis

• Creutzfeldt-Jakob-siekte

• Miokarditis

• Menstruele versteuring

• Guillain-Barre-sindroom

• Bell se verlamming

• Slaapversteuring

• Hallusinasie

• Trombositopenie

• Spontane aborsie

• Oogpyn

• Verlies van bewussyn

• Narkolepsie

• Limfadenopatie

• Hartklop verhoog

• Hoofpyne

• Serebrale trombose

• Serebrale veneuse sinus trombose

• Serebrale veneuse trombose

• Diepveneuse trombose

• Mesenteriese aartrombose

• Portaalvene-trombose

• Superieure sagittale sinus trombose

• Herpes zoster

• Trombose

• Veneuse trombose

• Veneuse trombose ledemaat

• Tinnitus

• Skielike dood

• Intermenstruele bloeding

• Vertraagde menstruasie

• Onreëlmatige menstruasie

• Urtikarie

---

Die volgende afdeling sal nie meer opgedateer word nie. Die EMA-data-opdaterings sal vervang word deur die video's hierbo.

Data-opdatering – EMA – VAERS – WHO – Verslae van newe-effekte

^* toename van 13.11.2021 – 03.12.2021 om 368.653 Boodskappe

Totale verslae: EMA 1 254 029 (+ 90 673^*) / WGO 2 706 410 (+206 529)^*) / CDC/FDA 951857 (+71,451^*)

Simptoom: Bell se verlamming (gesigsverlamming) – Geregistreerde verslae

Toename van 30.12.2021 – 15.01.2022 / 17.12.2021 – 07.01.2022 met 6.620 gevalle

Bronne: adrreports.eu (EMA) / vigiaccess.org (WGO) – vanaf 10 Desember 2021
Bron: vaers.hhs.gov (CDC / FDA) – vanaf 3 Desember 2021

Simptoom: Menstruele afwykings – Geregistreerde verslae

Bronne: adrreports.eu (EMA) / vigiaccess.org (WGO) – vanaf 13 November 2021
Bron: vaers.hhs.gov (CDC / FDA) – Vanaf 5 November 2021

Simptoom: Spontane Aborsie – Geregistreerde Verslae

Bronne: adrreports.eu (EMA) / vigiaccess.org (WGO) – vanaf 13 November 2021
Bron: vaers.hhs.gov (CDC / FDA) – Vanaf 5 November 2021

Simptoom: Limfadenopatie – Geregistreerde Verslae

^* toename van 18.12.2021 – 24.12.2021 / 10.12.2021 – 17.12.2021 om 713 gevalle

Bronne: adrreports.eu (EMA) / vigiaccess.org (WGO) – vanaf 24 Desember 2021
Bron: vaers.hhs.gov (CDC / FDA) – Vanaf 17 Desember 2021

Simptoom: Sterftes – Geregistreerde verslae

Huidige data oor Oormatige mortaliteit in alle ouderdomsgroepe kan daagliks gevind word hier.

Die grafika word geskep met behulp van data van 29 deelnemende lande: België, Denemarke, Estland, Finland, Frankryk, Duitsland, Duitsland (Berlyn), Duitsland (Hesse), Griekeland, Hongarye, Ierland, Israel, Italië, Luxemburg, Malta, Nederland, Noorweë, Portugal, Slowenië, Spanje, Swede, Switserland, Groot-Brittanje (Engeland), Groot-Brittanje (Noord-Ierland), Groot-Brittanje (Skotland), Groot-Brittanje (Wallis) en Oekraïne.
Oekraïne, Duitsland (Berlyn) en Duitsland (Hesse) is nie in die saamgevoegde data ingesluit nie.
(Bron: Euromomo)

^* toename van 16.03.2022 – 26.03.2022 / 05.03.2022 – 18.03.2022 om 2.595 Sterftes
(Verdubbel in vergelyking met 15 Maart / 4 Maart)

Bronne: adrreports.eu (EMA) – vanaf 26.03.2022 / vigiaccess.org (WGO) – vanaf 26 Maart 2022
Bron: vaers.hhs.gov (CDC / FDA) – Vanaf 18 Maart 2022

Simptoom: Miokarditis (inflammasie van die hartspier) – Geregistreerde verslae

^* toename van 19.11.2021 – 03.12.2021 / 12.11.2021 – 29.11.2021 om 2.088 Boodskappe

Bronne: adrreports.eu (EMA) / vigiaccess.org (WGO) – vanaf 19 November 2021
Bron: vaers.hhs.gov (CDC / FDA) – Vanaf 12 November 2021

Simptoom: Perikarditis (inflammasie van die perikardium) – Geregistreerde verslae

^* toename van 10.12.2021 – 24.12.2021 om 10.367 Boodskappe

Bronne: adrreports.eu (EMA) / vigiaccess.org (WGO) – vanaf 24 Desember 2021
Bron: vaers.hhs.gov (CDC / FDA) – Vanaf 17 Desember 2021

Simptoom: Herpes Zoster – Geregistreerde Verslae

Bronne: adrreports.eu (EMA) / vigiaccess.org (WGO) – vanaf 13 November 2021
Bron: vaers.hhs.gov (CDC / FDA) – Vanaf 5 November 2021

Simptoom: Trombose – Geregistreerde verslae

Bronne: adrreports.eu (EMA) / vigiaccess.org (WGO) – vanaf 13 November 2021
Bron: vaers.hhs.gov (CDC / FDA) – Vanaf 5 November 2021

Simptoom: Skielike dood – Geregistreerde verslae

Bronne: adrreports.eu (EMA) / vigiaccess.org (WGO) – vanaf 13 November 2021
Bron: vaers.hhs.gov (CDC / FDA) – Vanaf 5 November 2021

---

Evaluering van die geskiktheid van die RT-qPCR-tegniek vir
Bewyse van 'n moontlike infeksie en
Infeksie van individue met betrekking tot SARS-CoV-2

Huidige verslag deur Dr. rer. biol. brom. Ulrike Kämmerer

Die verslag is hier van die webwerf die Dokters en Wetenskaplikes vir Gesondheid, Vryheid en Demokrasie, eV of hier gestoor aflaaibaar.

Vals positiewe PCR-toetsresultate onder die loep

Navorsers Leslie C. Woodcock, P. Stallinga en Igor Khmelinskii van die Portugese Universiteit van Algarve rapporteer in hul artikel wat in November 2021 in The Lancet Respiratory Medicine gepubliseer is. Rol van eksosome in vals-positiewe covid-19 PCR-toetse oor hul navorsingsresultate, wat hierop beskikbaar is skakel is beskikbaar vir aflaai.

Data-opdatering – EMA – VAERS – WHO – Verslae van newe-effekte

Navorsers Leslie C. Woodcock, P. Stallinga en Igor Khmelinskii van die Portugese Universiteit van Algarve rapporteer in hul artikel wat in November 2021 in The Lancet Respiratory Medicine gepubliseer is. Rol van eksosome in vals-positiewe covid-19 PCR-toetse oor hul navorsingsresultate, wat hierop beskikbaar is skakel is beskikbaar vir aflaai.

Vergelyking van gerapporteerde nadelige reaksies op entstowwe van 1 000 gevalle

Beperking van fundamentele regte

In die Federale Regskoerant Deel I 2021 Nr. 83 van 11.12.2021 Wet om die te versterk
Inentingsvoorkoming teen Covid-19 en wysiging van ander regulasies in verband met die Covid-pandemie van 10 Desember 2021 die fundamentele regte

• fisiese integriteit
• persoonlike vryheid
• vryheid van vergadering
• vryheid van beweging
• die onskendbaarheid van die huis

BEPERK (PDF-aflaai):

Die volgende veranderinge sal op 25 November 2021 in werking tree:

Artikel 16 – Wysiging van Boek Twaalfde van die Sosiale Kode “Artikel 142 Oorgangsreëlings vir gemeenskaplike middagetes vir mense met gestremdhede as gevolg van die Covid-19-pandemie; magtiging om regulasies uit te reik”.

Artikel 17 – Wysiging van die Federale Wet op Maatskaplike Sekerheid

Artikel 18 – Wysiging van die Wet op Asielsoekers

Die volgende veranderinge sal op 1 Januarie 2022 in werking tree:

Artikel 12a – Wysiging van die Derde Boek van die Sosiale Kode

“In Artikel 109, Paragraaf 5, Sin 3, word die verwysing “31 Desember 2021” vervang met “31 Maart 2022”.

"Artikel 421c word soos volg gewysig: "aa) In die sin voor nommer 1 word die woorde "tot 31 Desember 2021" vervang deur die woorde "vanaf 1 Januarie 2022 tot 31 Maart 2022". bb) In die sin na nommer 2 word die woorde "indien die reg op korttydse werktoelaag teen 31 Maart 2021 ontstaan het en" geskrap."

Die volgende veranderinge sal op 1 Januarie 2023 in werking tree:

Artikel 2 – Verdere wysigings aan die Wet op Infeksiebeskerming

“Die Wet op Infeksiebeskerming, laas gewysig deur Artikel 1 van hierdie Wet, word soos volg gewysig:

1. Die §§ 20a en 20b word opgehef.
2. § 73 word soos volg gewysig:
   a) Paragraaf 1a nommers 7e tot 7h word herroep
   (b) In paragraaf 2 word die verwysing ‘7h’ vervang met ‘7d’.
   
   
   
   

Onderhoud oor verpligte korona-inenting: Voordele en nadele – MDR

Dinsdag, 23 November 2021, 06:50 – Duur 6:50 min.

Die Onderhoud deur MDR word hieronder as 'n transkripsie weergegee en hier as Oudio-aflaai Die moderator is Tim Deisinger, sy gesprekspartners is prof. Peter Dabrock, professor in teologie aan die Universiteit van Erlangen-Neurenberg en dr. Steffen Rabe, pediater in München en raadslid van Dokters vir Individuele Inentingsbesluite e. V. (ÄIIE).

• Moderator, Tim Deisinger:

Die groot taboe, 'n algemene inentingsvereiste, is nie meer 'n taboe nie; baie mense spreek hulle uit en ondersteun dit. Ons wil dit vanoggend van naderby bekyk en ook hul menings daaroor hoor, meer daaroor binnekort. Eerstens, 'n soort basis vir bespreking, so te sê. Ons wil twee standpunte hoor.

Die tweede sal 'n pediater wees. Die eerste is Peter Dabrock, 'n professor in teologie aan die Universiteit van Erlangen-Neurenberg en voorsitter van die Duitse Etiekraad tot 2020. Mnr. Dabrock, wat is u mening hieroor? Universele inentingsvereistes, ja of nee?

• Prof. Peter Dabrock: 

Ek erken dus dat my standpunt oor verpligte inenting mettertyd verander het, en ons merk op dat daar in hierdie kwessies nie 'n enkele besluit is wat jy een keer neem en dan eenvoudig implementeer nie; jy moet dit aanpas by die omstandighede. Ek pleit al maande hiervoor en hoop dat mense sal besef dat dit slegs minimale risiko vir hulself inhou en 'n groot voordeel vir hulself en ander.

en dat mense ingeënt word vir selfbeskerming, die onmiddellike beskerming van ander, en uit solidariteit. Dit was nie die geval nie, en toe ek hoor dat dit baie gevestig geraak het – daar was 'n ooreenstemmende opname drie weke gelede – het my standpunt ook verskuif, en daarom leun ek nou na die standpunt dat ons so gou as moontlik 'n algemene inentingsvereiste nodig het. 

• Moderator, Tim Deisinger:

Maar het jy nog begrip vir diegene wat nie ingeënt wil word nie, of nog nie ingeënt wil word nie?

• Prof. Peter Dabrock: 

So jy dink daaraan, natuurlik, veral as jy sulke massiewe weerstand teen loop voel en dan hoor jy altyd die twee argumente, dit is eintlik proporsioneel en dit is nie

'n Skending van fisiese integriteit. Die twee is ook verwant, en ek sou eerstens sê, wat fisiese integriteit betref, moet almal wat teen verpligte inenting gekant is, bewus wees dat die fisiese skade massief groter sal wees as een die siekte opdoen, of as ander die siekte opdoen. Alle ernstige wetenskap sê dat daar duidelik minimale oorblywende risiko's is, maar die voordele is aansienlik groter.

Die ander ding is dat fisiese integriteit nooit as absoluut beskou moet word wanneer dit by fundamentele regte kom nie, maar in praktiese ooreenstemming met ander fundamentele regte gebring moet word. As die vryheid van almal anders massief beperk word omdat 'n klein groepie verseker dat die virus aanhou versprei, dan kan fisiese integriteit, wat ek met die eerste oogopslag kan verstaan, ook nie as absoluut beskou word nie.

• Moderator, Tim Deisinger:

Die mening van Peter Dabok, voormalige voorsitter van die Duitse Etiekraad. En nou wil ons dr. Steffen Raabe, pediater en woordvoerder van die Vereniging van Dokters vir Individuele Inentingsbesluite, hoor. Mnr. Rabe, u denkrigting word reeds in die vereniging se naam gesinspeel. Kan u nog steeds mnr. Darbrock se argument verstaan?

• Dr. Steffen Rabe

Nee, die argument vir verpligte inenting is vir my heeltemal onbegryplik, veral as dit by COVID-entstowwe kom. En wanneer ek mnr. Darbrock hoor aanvoer dat dit indirekte beskerming vir ander bied, is dit natuurlik die deurslaggewende punt. Slegs so 'n argument kan selfs die oorweging van verpligte inenting regverdig, en dit is juis die aspek wat COVID-entstowwe nie aanspreek nie. COVID-entstowwe bied diegene wat hulself wil beskerm, nie-so-slegte, tydelike beskerming teen ernstige gevalle. Maar hulle bied absoluut geen relevante beskerming vir ander nie.

Dit skakel enige argument vir verpligte inenting uit. En wanneer hy praat van 'n lae en minimale risiko wat met inenting geassosieer word, is dit eenvoudig verkeerd. As 'n pediater word ek gekonfronteer met jong 16- en 18-jarige mans, vir wie ek moet sê dat as hulle nou ingeënt word met BioNTech, die enigste entstof wat tans vir hulle aanbeveel en goedgekeur word, hul risiko om miokarditis as 'n direkte gevolg van hierdie inenting te ontwikkel, ten minste in die orde van 1:5 000 is. Mnr. Deisinger, ons weet nie van enige ander medikasie nie. Ek weet nie van enige ander entstof in 30 jaar waar ons so 'n ernstige siekte soos miokarditis met so 'n dramaties hoë risiko assosieer nie. Hierdie verpligte inenting is geensins wettiglik, moreel of medies intelligent nie, maar is, soos mnr. Hans-Jürgen Pape tereg gesê het, 'n uitdrukking van hulpeloosheid en onnadenkendheid.

• Moderator, Tim Deisinger:

Kom ons neem dan vir 'n oomblik hulpeloosheid. As ons na die situasie in intensiewe sorgeenhede of in hospitale in die algemeen kyk, word dit as 'n verdere argument aangevoer dat ons 'n noodgeval het en daar geen ander uitweg daaruit is as met verpligte inenting nie.

• Dr. Steffen Rabe

Maar mnr. Deisinger, verpligte inenting is nie 'n onmiddellike maatreël nie. Die wetlike voorbereiding, die politieke implementering en die mediese effektiwiteit – ons sou vir onsself lieg as ons binne twee tot drie weke enige effek op intensiewe sorgeenhede sien. Ons moet uiteindelik ophou om die intensiewe sorgeenhede uit te dun en die aantal intensiewe sorgbeddens te verminder. In plaas daarvan om die verpleegsters uit hul werk te dwing met verpligte inenting, moet ons hulle uiteindelik die waardering toon wat hulle nodig het om in hul beroep te bly. En politici het in hierdie opsig al twee jaar lank heeltemal misluk. Hierdie ramp is 'n ramp wat wag om te gebeur, mnr. Deisinger. Ons het geweet dat hierdie herfs nog 'n uitdaging sou wees, ook vir die hospitale en die intensiewe sorgeenhede, en ons het willens en wetens duisende intensiewe sorgbeddens uitgeskakel. En dit is nou veronderstel om 'n argument te wees vir 'n ingryping in een van die sentrale fundamentele regte – en hier stem ek hewig saam met mnr. Dabrock – die reg op fisiese integriteit. Veral in 'n land soos Duitsland, wat hierdie ongelukkige verlede het, ook in die mediese veld, met hierdie ingrypings, moet ons baie, baie bedagsaam en baie, baie versigtig wees met hierdie manier van dink.

Hulpstowwe ALC-0315 en ALC-0159 “slegs vir navorsingsdoeleindes”

Die hulpstowwe wat in Pfizer/BioNTech Comirnaty voorkom ALC-0315  [(4-Hidroksibutiel)azaandiiel]di(heksaan-6,1-diiel)bis(2-heksieldekanoaat) (CAS 2036272-55-4) en ALC-0159 2-[(poliëtileenglikol)-2000]-N,N-ditetradesielasetamied (CAS 1849616-42-7) is volgens die vervaardiger ABP Biowetenskappe uitsluitlik vir navorsingsdoeleindes bedoel.

Tans beskikbare studies oor hierdie hulpstowwe:

• http://www.eurannallergyimm.com/cont/journals-articles/1043/volume-potential-culprits-immediate-hypersensitivity-reactions-4579allasp1.pdf (PDF-Laai af) 29.04.2021

• https://www.cell.com/molecular-therapy-family/molecular-therapy/fulltext/S1525-0016(21)00064-2?_returnURL=https%3A%2F%2Flinkinghub.elsevier.com%2Fretrieve%2Fpii%2FS1525001621000642%3Fshowall%3Dtrue (PDF-Laai af) 04.02.2021
  
  
  
  

Federale Regering se webwerf – verwydering van die stelling “Sal daar 'n wettige inentingsvereiste wees – NEE”

Die weergawe van 17.11.2021 00:39:55 was nog steeds

Die weergawe van 19.11.2021 16:44:31 is nou (hier beskikbaar in die oorspronklike):

Die bogenoemde skakels is via WayBackMachine (https://web.archive.org) beveiligde argiefbladsye.

Wat opvallend is, is dat "entstowwe steeds gemonitor en getoets word selfs na hul goedkeuring..." Hierdie "goedkeurings" is bloot voorwaardelik en moet jaarliks hernu word tot finale goedkeuring (sien hieronder).

Verlenging van – voorwaardelike – goedkeurings vir Covid-19-entstowwe

Die onderskeie dokumente wat hieronder genoem word en beskikbaar gestel word vir aflaai, kan gevind word in die afdeling “Prosedures van die Europese Kommissie“ via die betrokke skakel “Kommissie-uitvoeringsbesluit” wat hier in die vorm van 'n zip-lêer verskaf word deur op die betrokke te klik Dokumentikoon kan in die regterkolom afgelaai word.

Die eerste simbool staan vir “Besluite"(Die ZIP-lêer begin met "des", die tweede vir"Aanhangsels", wat ooreenstem met "anx." Die lêernaamuitbreiding van die onttrekte lêers verteenwoordig die taalkode (de – Duits).

In die (tweede) kolom “Prosedure tipe"jy sal inskrywings vind oor"Maandelikse Opdatering“(Inligtingsopdaterings van die vervaardiger oor die produk, newe-effekte, ens.), “Korrigendum“ (vertalingskorreksies), “Regstellende Besluit“(besluite oor bemarkingsbeskerming, uitbreidings daarvan), sowel as “Jaarlikse hernuwing"(Verlenging van voorwaardelike toelating)."

Komirnaty – BionTech/Pfizer

Die Europese Kommissie in Brussel kondig op 03.11.2021 aan met die dokument C(2021) 7992 (finaal), dem Kommissie-uitvoeringsbesluit gedateer 03.11.2021, "oor die jaarlikse hernuwing van die voorwaardelike bemarkingsmagtiging vir die medisinale produk vir menslike gebruik 'Comirnaty – Tozinameran, COVID-19 mRNA-entstof (nukleosied-gemodifiseerd)' toegestaan deur Besluit C(2020) 9598(finaal) en wysiging van daardie Besluit", met: "Die voorwaardelike bemarkingsmagtiging wat toegestaan is deur Besluit C(2020) 9598(finaal) van 21 Desember 2020 word verleng..“

Spikevax – Moderna

Die Europese Kommissie in Brussel kondig op 04.10.2021 aan met die dokument C(2021) 7305 (finaal), dem Kommissie-uitvoeringsbesluit gedateer 04.10.2021, "oor die jaarlikse hernuwing van die voorwaardelike bemarkingsmagtiging vir die medisinale produk vir menslike gebruik 'Spikevax - COVID-19 mRNA-entstof (nukleosied-gemodifiseerd)' toegestaan deur Besluit C(2020) 94(finaal) en wysiging van daardie Besluit", met: "Die voorwaardelike bemarkingsmagtiging wat toegestaan is deur Besluit C(2021) 94(finaal) van 6 Januarie 2021 word verleng..“

Vaxzevira – AstraZeneca

Die Europese Kommissie in Brussel het op 09.11.2021 met die dokument aangekondig C(2021) 8206 (finaal), dem Kommissie-uitvoeringsbesluit gedateer 09.11.2021, "oor die jaarlikse hernuwing van die voorwaardelike bemarkingsmagtiging vir die medisinale produk vir menslike gebruik 'Vaxzevira - COVID-19 mRNA-entstof (nukleosied-gemodifiseerd)' toegestaan deur Besluit C(2020) 698(finaal) en wysiging van daardie Besluit", met: "Die voorwaardelike bemarkingsmagtiging wat toegestaan is deur Besluit C(2021) 698(finaal) van 29 Januarie 2021 word verleng..“

Covid-19-entstof – Janssen

Tansmet die dokument C(2021) 1763 (finaal) slegs die Kommissie-uitvoeringsbesluit vir die voorwaardelike goedkeuring van die entstof gedateer 11.03.2021.

In Artikel 4 lui: “Die geldigheidstydperk van die magtiging is een jaar vanaf die datum van kennisgewing van hierdie besluit.”

Definisies van die Paul Ehrlich Instituut (PEI) oor COVID-19-entstowwe

Die skakels na die weergawes van 15.08.2021 en 07.09.2021 is beskikbaar via WayBackMachine (https://web.archive.org) beveiligde argiefbladsye, terwyl die huidige weergawe vanaf 23.09.2021 * via skakel na die Oorspronklike bladsy van die PEI. Die Rooi Handbriewe wat deur farmaseutiese maatskappye uitgereik word, is ook daar beskikbaar, asook hier beskikbaar vir aflaai.

Alle gelyste webwerwe is hier as PDF-aflaaie beskikbaar.

15.08.2021 – “COVID-19-entstowwe beskerm teen infeksies met die SARS-CoV-2-virus"(Webwerf as PDF-aflaai)

07.09.2021 – “COVID-19-entstowwe beskerm teen ernstige infeksie met die SARS-CoV-2-virus.“ (Webwerf as PDF-aflaai)

23.09.2021 * – “COVID-19-entstowwe word aangedui vir aktiewe immunisering om COVID-19-siekte wat deur die SARS-CoV-2-virus veroorsaak word, te voorkom.“ (Webwerf as PDF-aflaai)

Ons Wêreld in Data – Covid-19, inentings, sterftes

Op die webwerf Ons Wêreld in Data Johns Hopkins Universiteit verskaf amptelik versamelde data oor verskeie onderwerpe wêreldwyd, insluitend die volgende statistieke vir Duitsland:

Skakel na statistieke – Aandeel mense wat ten minste een dosis COVID-19-entstof ontvang het

Skakel na statistieke – Kumulatiewe bevestigde COVID-19-gevalle per miljoen mense

Skakel na statistieke – Kumulatiewe COVID-19-sterftes per miljoen mense

Raad van Europa – Resolusie 2361/2021

Die Raad van Europa het in sy resolusie getiteld Covid-19-entstowwe: etiese, wetlike en praktiese oorwegings Aanbevelings is ontwikkel wat onder andere die billike verspreiding van entstowwe, die vrywillige aard van inenting en die nie-diskriminasie van mense wat, om watter rede ook al, kies om nie ingeënt te word nie, aanspreek.

“7.3.1. verseker dat burgers ingelig word dat inenting nie verpligtend is nie
en dat niemand polities, sosiaal of andersins onder druk geplaas word om ingeënt te word nie
om te vertrek as hy dit nie self wil doen nie.”

“7.3.2 verseker dat niemand gediskrimineer word omdat hulle nie ingeënt is nie, weens moontlike gesondheidsrisiko's of omdat hulle nie ingeënt wil word nie.”

Aangesien die Raad van Europa geen wetgewende magte het nie, is hierdie aanbevelings nie wetlik bindend vir enige lidstaat nie.

Hierdie aanbevelings impliseer nie 'n verbod op verpligte inenting of diskriminasie nie – alhoewel dit wenslik sou wees in die belang van verantwoordelike burgers ...

Marburg-virus

Sedert die begin van 2021 het artikels oor die Marburg-virus toegeneem. Op 25 Februarie 2021, byvoorbeeld, 'n publikasie deur Elsevier Inc. in Nasionale Biblioteek van Geneeskunde.

Byna twee maande later, op 22.04.2021, die opskrif GAVI Die Entstofalliansie „Die volgende pandemie: Marburg?“

Reeds in 2018, die Primerdesign Bpk. 'n PCR-toetsVirale proteïen 35 (VP35) gene Marburgvirus genesig Standaard Kit„.

Alhoewel die Marburg-virus, wat eerste was In 1967,n is 'n familielid van die Ebola-virus, die 376 sterftes destyds en slegs 16 sedert 2005 is baie beperk.

In hierdie konteks lyk die oormatige vordering van die ontwikkeling van die entstof wat teen die Marburg-virus gebruik moet word, onbegryplik. RiVax® deur Soligenix Bpk.Die haas, wat uitgevoer word in ooreenstemming met die FDA se riglyne vir dieretoetsing, en die gewone fases 1, 2 en 3 van toetsing omseil, is rede tot kommer.

Op 22.09.2021 som Kieran Morrissey, Dublin, Ierland, sy gedagtes oor hierdie onderwerp op. hier saam.

Regsopinie oor indirekte verpligte inenting

In 'n 111-bladsy Regsopinie In sy verslag van 4 Oktober 2021 kom prof. dr. Dietrich Murswiek, na oorweging van alle relevante aspekte, tot die volgende samevattende gevolgtrekking: "Die diskriminasie teen die ongeëntes binne die raamwerk van die regulasies oor toegang tot die openbare lewe en binne die raamwerk van die kwarantynreëls skend die fundamentele regte van diegene wat geraak word en is ongrondwetlik."

Artikel_Li
Hospitale moet verpleegsters met natuurlike immuniteit aanstel, nie afdank nie

Duitse vertaling

DEUR MARTIN KULLDORFF   1 Oktober 2021   GESKIEDENIS, BELEID, OPENBARE GESONDHEID, SAMELEWING   4 MINUTE

Onder die vele verrassende ontwikkelinge tydens hierdie pandemie, was die verstommendste die bevraagtekening van natuurlik verworwe immuniteit nadat 'n persoon die Covid-siekte gehad het. 

Ons verstaan natuurlike immuniteit sedert ten minste die Atheense Pes in 430 v.C. Hier is Thucydides:

'Tog was dit by diegene wat van die siekte herstel het dat die siekes en die sterwendes die meeste medelye gevind het. Hulle het uit ondervinding geweet wat dit was en het geen vrees vir hulself gehad nie; want dieselfde man is nooit twee keer aangeval nie – ten minste nooit noodlottig nie.' – Thucydides

Ons leef al vir ten minste honderd jaar met endemiese koronavirusse, waarvoor ons langdurige natuurlike immuniteit het. Soos verwag, het ons ook natuurlike immuniteit na Covid-19-siekte, aangesien daar uiters min herinfeksies met ernstige siekte of dood was, ten spyte van 'n wydverspreide virus. 

Vir die meeste virusse is natuurlike immuniteit beter as entstof-geïnduseerde immuniteit, en dit is ook waar vir Covid. In die beste studie tot op datum, was die ingeëntes ongeveer 27 keer meer geneig om simptomatiese siekte te hê as diegene met natuurlike immuniteit, met 'n geraamde reeks tussen 13 en 57. Sonder Covid-sterftes in enige groep, beskerm beide natuurlike en entstofimmuniteit goed teen die dood. 

Gedurende die afgelope dekade het ek nou saamgewerk met hospitaalepidemioloë. Terwyl die rol van dokters is om pasiënte te behandel en hulle gesond te maak, is die taak van die hospitaalepidemioloog om te verseker dat pasiënte nie siek word terwyl hulle in die hospitaal is nie, soos om 'n dodelike virus van 'n ander pasiënt of 'n versorger op te doen. 

Vir daardie doel gebruik hospitale 'n verskeidenheid maatreëls, van gereelde handwas tot volledige infeksiebeheer-regalia wanneer 'n Ebola-pasiënt versorg word. Inentings is 'n sleutelkomponent van hierdie beheerpogings. Byvoorbeeld, twee weke voor miltoperasie word pasiënte die pneumokokkale entstof om postoperatiewe infeksies te verminder, en die meeste kliniese personeel word elke jaar teen griep ingeënt.

Infeksiebeheermaatreëls is veral krities vir ouer, brose hospitaalpasiënte met 'n verswakte immuunstelsel. Hulle kan besmet raak en sterf aan 'n virus wat die meeste mense maklik sou oorleef. 'n Belangrike rasionaal vir die immunisering van verpleegsters en dokters teen griep is om te verseker dat hulle nie sulke pasiënte besmet nie.  

Hoe kan hospitale hul pasiënte die beste teen Covid-siekte beskerm? Dit is 'n geweldig belangrike vraag, ook relevant vir verpleeginrigtings. Daar is 'n paar voor die hand liggende standaardoplossings, soos om Covid-pasiënte van ander pasiënte te skei, personeelrotasie te verminder en ruim siekteverlof te bied vir personeel met Covid-agtige simptome. 

Nog 'n doelwit behoort te wees om personeel met die sterkste moontlike immuniteit teen Covid in diens te neem, aangesien hulle minder geneig is om dit op te doen en na hul pasiënte te versprei. Dit beteken dat hospitale en verpleeginrigtings aktief moet poog om personeel aan te stel wat natuurlike immuniteit teen vorige Covid-siekte het en sulke personeel vir hul kwesbaarste pasiënte moet gebruik. 

Daarom sien ons nou 'n strawwe kompetisie waar hospitale en verpleeginrigtings desperaat probeer om mense met natuurlike immuniteit aan te stel. Wel, eintlik, noodgeval. 

In plaas daarvan ontslaan hospitale verpleegsters en ander personeel met beter natuurlike immuniteit terwyl hulle diegene met swakker entstof-geïnduseerde immuniteit behou. Deur dit te doen, verraai hulle hul pasiënte en verhoog hul risiko vir hospitaalverworwe infeksies. 

Deur inentingsmandate te bevorder, bevraagteken die hoof mediese adviseur van die Withuis, dr. Anthony Fauci, die bestaan van natuurlike immuniteit na Covid-siekte. Deur dit te doen, volg hy die leiding van CDC-direkteur Rochelle Walensky, wat natuurlike immuniteit in 'n 2020-verslag bevraagteken het. memorandum gepubliseer deur Die LancetDeur die instelling van inentingsmandate bevraagteken universiteitshospitale nou ook die bestaan van natuurlike immuniteit na Covid-siekte. 

Dit is verstommend. 

Ek werk by Brigham and Women's Hospital in Boston, wat aangekondig het dat alle verpleegsters, dokters en ander gesondheidsorgverskaffers afgedank sal word as hulle nie 'n Covid-entstof kry nie. Verlede week het ek met een van ons verpleegsters gepraat. Sy het hard gewerk om vir Covid-pasiënte te sorg, selfs toe sommige van haar kollegas aan die begin van die pandemie in vrees vertrek het. 

Dit is geen verrassing dat sy besmet geraak het, maar toe herstel het nie. Nou het sy sterker en langerdurige immuniteit as die ingeënte hospitaaladministrateurs wat van die huis af werk en haar afdank omdat sy nie ingeënt is nie. 

As universiteitshospitale nie die mediese bewyse oor die basiese wetenskap van immuniteit reg kan kry nie, hoe kan ons hulle dan vertrou met enige ander aspekte van ons gesondheid? 

Wat volgende? Universiteite wat bevraagteken of die aarde rond of plat is? Dit sal ten minste minder skade doen.

Martin Kulldorff, Senior Geleerde van Brownstone Instituut, is 'n professor in medisyne aan die Harvard Mediese Skool
kulldorff@brownstone.org

Strafregtelike klagte en kriminele aansoek in die BioNTech-kompleks

Aan die Federale Aanklaer-generaal by die Federale Hof van Justisie, Dr. Peter Frank

Op 10 Junie 2021 het prokureur Tobias Ulbrich van die regsfirma Robert & Ulbrich, Otto Str. 12, 50859 Keulen, die bogenoemde kriminele klag en vervolging ingedien teen "alle persone wat die mRNA eksperimentele stof van BioNTech/Pfizer, waarna verwys word as 'n 'entstof', ontwikkel, vervaardig, versprei, goedgekeur het vir inenting en toegedien het, en dit aan onwetende mense toegedien het. In die besonder teen:

1. Alexandra Knauer, Besturende Direkteur van Knauer Wissenschaftliche Geräte GmbH, Hegauer Weg 38, 14163 Berlyn, (vervaardiger van masjiene vir die vervaardiging van lipied-nanopartikels)
2. Vasant Nasasimhan, HUB van Novartis AG, (patenthouer vir lipied-nanopartikels AC – 0135 en AC 0159)
3. James Bradner, MD President van Novartis Institutes for Bio Medical Research (NIBR), ontwikkelaar van die lipiede
4. Thomas D. Madden PhD. HUB van Acuitas Therapeutics, vervaardiger van lipiede vir Biontech 5. Ying K. Tam, Hoofwetenskaplike Beampte Acuitas Therapeutics,
6. Sean Semple, Senior Direkteur Pre-Kliniese Navorsing
7. Dr. Dietmar Katinger, uitvoerende hoof Donaustraße 99, 3400 Klosterneuburg, Oostenryk, (vervaardiger en ontwikkelaar van produksie by Biontech SE)
8. Prof. Dr. Ugur Sahin, HUB, BioNTech SE, By die Goudmyn 12, 55131 Mainz
9. Sean Marett, CBO & CCO, BioNTech SE, ibid.
10. Dr. Sierk Poetting, finansiële hoof en bedryfshoof, BioNTech SE, ibid.
11. PD Dr. Özlem Türeci, CMO, BioNTech SE, ibid.
12. Ryan Richardson, hoofbeampte, BioNTech SE, ibid.
13. Karin Samusch, Dermapharm AG, Lil-Dagover-Ring 7, 82031 Grünwald (Vervaardiger)
14. Hilde Neumeyer, Dermapharm AG, Lil-Dagover-Ring 7, 82031 Grünwald (Vervaardiger) 15. Dr. Hans-Georg Feldmeier, Dermapharm AG, Lil-Dagover-Ring 7, 82031 Grünwald (Vervaardiger)
16. Dr. Jürgen Ott , Dermapharm AG, Lil-Dagover-Ring 7, 82031 Grünwald (Vervaardiger) 17. Mark Pfister, Produksiebestuurder vir Biontech by Novartis AG in Marburg (Vervaardiger) 18. Dr. Sabine Brand, Siegfried Hameln, Langes Feld 13, 31789 Hameln, Duitsland (vervaardiger)
19. Dr. Sven Remmerbach, Baxter Oncology GmbH, Kantstraße 2, 33790 Halle/Wesfale (Vervaardiger)
20. Dr. Fabrizio Guidi, Voorsitter; Sanofi-Aventis Deutschland GmbH, Industriepark Höchst, K703, Brüningstr. 50, 65926 Frankfurt (Vervaardiger)
21. Dr. Matthias Braun, Sanofi-Aventis Deutschland GmbH
22. Oliver Coenenberg, Sanofi-Aventis Duitsland GmbH,
23. Evelyne Freitag, Sanofi-Aventis Duitsland GmbH,
24. Prof. Dr. Jochen Maas, Sanofi-Aventis Duitsland GmbH,
25. Prof. Dr. Cichutek, President van die Paul Ehrlich Instituut, (skending van die plig om te monitor en te waarsku, versuim om die magtiging in te trek)
26. Prof. Dr. Vieths, Visepresident van die Paul Ehrlich Instituut,
27. Dr. Keller-Stanislawski, Departement van Veiligheid van Medisyne en Mediese Toestelle by die Paul Ehrlich Instituut.
28. Prof. Dr. Hildt, Hoof van die Virologie-afdeling by die Paul Ehrlich Instituut
29. Prof. Dr. van Zandbergen, Hoof van die Departement Immunologie aan die Paul Ehrlich Instituut
30. Dr. Hinz, Hoof van Departement 3 en 4, Terapeutiese Entstowwe by die Paul Ehrlich Instituut 31. Matthias Groote, Verteenwoordiger van die EMA in die Europese Parlement, Bergmannstraße 37, 26789 Leer,
32. Karl Broich, President van die Federale Instituut vir Geneesmiddels en Mediese Toestelle en Verteenwoordiger van die EMA in Duitsland, Kurt-Georg-Kiesinger-Alle 3, 53175 Bonn,
33. Mev. Emer Cooke, President van die EMA, Domenico Scarlattilaaan 6, 1083 HS Amsterdam,
34Federale Minister van Gesondheid Jens Spahn, Rochusstraat 1, 53123 Bonn,
35. Prof. Dr. Lothar H. Wieler, om af te laai via die Robert Koch Instituut,
36. Prof. Dr. Christian Drosten, om af te laai via die Robert Koch Instituut,
37. Bill en Melinda Gates,
onder andere

Daarbenewens is daar al die oninformerende inentingsbeamptes in die inentingsentrums wat die 'entstof' toegedien het sonder enige inligting oor die goedkeuringsstatus en die gevolge van die inenting, wat onbekend is aan die ondergetekende.

Vir volksmoord, poging tot volksmoord, oortreding van Artikel 20 KrWKG en hoogverraad teen die federale regering, onder andere.„

Die hoogs interessante volledige teks (194 bladsye) is hier beskikbaar en haal onder andere die historikus dr. Paul Schreyer aan, wat as getuie benoem is, wat "die gebeure van die afgelope 20 jaar opgesom het en die invloed van NRO's (Nie-regeringsorganisasies) op die voorbereiding van die pandemie beskryf het."

LUBECAVAX – Prof. Dr. Winfried Stöcker, Lübeck

Vanaf 31 Augustus 2021

Winfried Stöcker is in 1947 in Opper-Lusatie gebore. Hy het van 1967 tot 1973 in Würzburg medisyne gestudeer, sy doktorsgraad in 1976 verwerf, is sedert 1999 professor aan die Tongji Mediese Universiteit in Wuhan en sedert 2011 ereprofessor aan die Universiteit van Lübeck. Hy het die maatskappy gestig. EUROIMMUN Mediese Laboratoriumdiagnostiek AG 1987 met 'n fokus op outo-immuun- en allergiediagnostiek, sowel as aansteeklike serologie en molekulêre genetika.

Prof. Dr. Stöcker was vroeg betrokke by die ontwikkeling van 'n effektiewe entstof teen SARS CoV2, deur dit eers op homself te toets, toe sy familielede in te ent en uiteindelik die selfvervaardigde entstof aan sy werknemers beskikbaar te stel.

Hy beskryf die effek op hom Blog soos volg (Aanhaling):

Ons glo dat 'n koronavirusinfeksie effektief voorkom kan word deur inenting. Lübeck-inenting Om dit te doen, gebruik dit 'n klein, op maat gemaakte, geneties gemanipuleerde, minder belangrike antigeen wat die liggaam nie self hoef te sintetiseer nie, soos die geval is met geenpendelmetodes. Dit veroorsaak die vorming van teenliggaampies in die ontvanger se liggaam teen presies daardie strukture van die virus wat aan die angiotensien-2-reseptore van endoteelselle in ongeënte individue bind. Deur hierdie reseptore te blokkeer, verhoed die teenliggaampies dat die selle besmet word, en die virus kan nie 'n vastrapplek kry nie.

Inentings word gewoonlik drie keer toegedien: op dag nul, dan na ongeveer 14 dae, en weer na nog vier weke. Die teenliggaamkonsentrasie word 14 dae later gemeet omdat ons nie die amptelike vertroue het dat immuunbeskerming teen daardie tyd ontwikkel sal het nie. Meer as 95% van pasiënte toon uiteindelik 'n hoë konsentrasie IgG-immunoglobulien-teenliggaampies teen koronavirus-piekproteïene, wat beteken dat hulle waarskynlik immuun teen koronavirus is. Immuungekompromitteerde individue ontvang een of twee versterkingsdosisse met 'n dubbele dosis – dit kan slegs deur serumtoetse opgespoor word – en die helfte van hulle bereik steeds hoë titers. Metings het ook getoon dat die teenliggaampies die koronavirusse kon neutraliseer (inaktiveer) en dat T-sel-immuniteit in driekwart van die gevalle ontwikkel het.

Hy rapporteer ook oor die onderwerp van entstofproduksie en -toediening deur dokters in die algemeen (Aanhaling):

In Duitsland mag enige dokter 'n antigeen met 'n adjuvant meng (dit is nou 'n entstof) en dit wettiglik aan hul individuele pasiënte inspuit of toedien. Die adjuvant bind die antigeen en bied dit aan die immuunstelsel aan. Sonder die adjuvant sou die antigeen deur die liggaam versprei en verdun word tot die punt van ondoeltreffendheid. Om funksionele redes moet die twee komponente apart gehou word en elke keer vars gemeng word. Die dokter word egter wetlik verbied om die entstof wat hulle vervaardig het, aan derde partye te versprei (plaas).

Die bron wat op sy blog gelys word, is:

medidoc GmbH
Jakob-Haringer-Straße 1
5020 Salzburg
OOSTENRYK

E-pos: info@medidoc.uk
Telefoonnommer: +43 59333 2000

medidoc.uk
medidoc.us
medidoc.gmbh

BTW-nommer: ATU33905904
Belastingkantoor Salzburg Stad 114/8583
Handelsregister: 45971F
Handelsregisterhof: Streekhof van Salzburg

Die probleem dat hierdie entstof nog nie deur die EU goedgekeur is nie (in vergelyking met die noodgoedkeurings vir mRNA en vektorpreparate) word vergoed deur die feit dat dit T-sel-immuniteit tot gevolg het soortgelyk aan dié van herstelde individue.

T-sel-immuniteit word bepaal en gesertifiseer deur toepaslik toegeruste laboratoriums. Hierdie sertifikaat dien as wetlik bindende bewys van immuniteit.

Solank die regering(e) verseker dat diegene wat herstel het, gelyk behandel word en bly as diegene wat ingeënt is met betrekking tot verskeie beperkings/verslappings, is hierdie entstof 'n – nou goed getoetste – alternatief sonder vergelykbare newe-effekte as mRNA of vektorpreparate.

BNT162b2-entstof: moontlike kodon-mislesing, proteïensintese-foute en alternatiewe splitsingsafwykings

Kira Smith

In 'n wetenskaplike kommentaar gedateer 25.03.2021, gepubliseer as 'n voordruk by AUTHOREA, aflaaibaar as PDF In Engels word moontlike newe-effekte van die BioNTec/Pfizer-entstof BNT162b2 bespreek en die algemene effek van mRNA-entstowwe word aangebied. Hier is die Duitse vertaling:

Abstrak

Die BNT162b2-entstof teen COVID-19 bestaan ​​uit 'n 4 284-nukleotied RNA wat in ses segmente verdeel is wat die inligting verskaf wat nodig is om 'n fabriek van S-spike-proteïene te skep wat deur SARS-CoV-2 (COVID-19) gebruik word om die gasheer aan te val. Hierdie proteïene word dan buite die sel vervoer, wat die immuunrespons en teenliggaamproduksie veroorsaak.

Die probleem is die sterk verandering van die mRNA: urasiel word vervang deur Ψ (pseudouridien) om die immuunstelsel te mislei; die letters van alle kodon-drielinge word vervang deur 'n C of 'n G om die tempo van proteïensintese geweldig te verhoog; vervanging van sommige aminosure deur prolien; byvoeging van 'n volgorde (3'-UTR) met 'n onbekende verandering.

Hierdie gebreke kan ernstige twyfel laat ontstaan oor die teenwoordigheid van kodongebruiksfoute. Potensiële verkeerde vertaling het gevolge vir die patofisiologie van 'n wye reeks siektes. Verder is die ingespuite mRNA 'n pre-mRNA wat aanleiding kan gee tot veelvuldige volwasse mRNA's; hierdie verteenwoordig alternatiewe splitsingsafwykings, wat 'n direkte bron van ernstige langtermyn skade aan menslike gesondheid is.

In wese is wat geproduseer word dalk nie identies aan Protein S Spike nie: net 'n fout in translasionele dekodering, verkeerde lees van kodons, produksie van verskeie aminosure, dan proteïene om ernstige langtermyn skade aan menslike gesondheid te veroorsaak, alhoewel die DNS nie gemodifiseer word nie, maar in die kern en nie in die sitoplasma waar die gemodifiseerde mRNA aankom nie.

In hierdie geval bly die korrelasie tussen sintesespoed en proteïenuitdrukking met sintesefoute, sowel as die meganisme wat volgordevertaling kan beïnvloed, egter onduidelik; baie studies is nog nie uitgevoer nie.

inleiding

Inligting oor hoe die entstof werk

Die Sars-CoV-2 (Covid-19) entstof van BioNTec/Pfizer, genaamd BNT162b2, maar ook genoem Tozinameran of Comirnaty, bevat ongeveer 30 µg RNA wat in 'n lipiedsfeer in die menslike liggaam ingespuit word, spesifiek in die sitoplasma van selle, maar buite die kern (waar die DNS geleë is). Hierdie RNA het veranderde genetiese inligting (dus modRNA), d.w.s. 'n mRNA (boodskapper-RNA) wat instruksies bevat om 'n proteïenfabriek te bou, klone van die S Spike-proteïen, d.w.s. die proteïen (en slegs die proteïen, nie die hele virus nie) wat deur Covid-19 gebruik word om die gasheer binne te val en te infekteer. Sodra hulle serieel deur die ribosome geproduseer word, word hulle uit die sel vervoer verby die lipiedlaag; op hierdie manier identifiseer die immuunstelsel hierdie proteïene as sel-indringers en val hulle aan deur teenliggaampies te produseer. Daarom is dit nie denkbaar dat die entstof Covid-19 induseer of menslike DNS verander nie.

Notas oor proteïensintese

Vertaling word oor die algemeen in drie fases verdeel: begin, uitbreiding en einde.

1. Die ribosoom bind aan die mRNA by die beginkodon;
2. Die polipeptiedketting verleng in een rigting van ribosoombeweging deur opeenvolgende byvoeging van aminosure;
3. Wanneer 'n stopkodon gevind word, word die polipeptied vrygestel en die ribosoom dissosieer.

Foute in volgordebewerking en vertaling

Die omskakeling van die mRNA-volgorde na 'n polipeptied hang af van oordrag-RNA (tRNA) om aminosure na die ribosoom te vervoer. By ribosome paar tRNA met mRNA deur komplementêre basisparing tussen mRNA-kodonnukleotiede en tRNA-antikodonnukleotiede. Sodra die korrekte tRNA deur 'n kodon gebind is, dra dit sy aminosuur oor na die einde van 'n groeiende polipeptiedketting.

Die dekodering van mRNA-kodons deur oordrag-RNA's (tRNA's) in die ribosoom behels Watson-Crick-basisparing.

Die algehele foutkoerse van genomiese replikasie (ongeveer 10–8) word beraam op ongeveer 10 000 keer laer as dié van proteïensintese (ongeveer 10–4), en daarom is mRNA-translasie in die meeste gevalle die sleutelproses wat bydra tot die onakkuraatheid van die sellulêre proteoom. Die verskil tussen foutkoerse in DNS-replikasie en mRNA-translasie kan deels te wyte wees aan die feit dat DNS-replikasie op die vlak van enkelnukleotiede plaasvind (met 41 = 4 moontlike permutasies), terwyl die vertaalmasjinerie mRNA-kodons in drieling interpreteer (met 43 = 64 moontlike permutasies).(1)

Die doeltreffendheid van die mRNA-dekoderingsmasjinerie word ook grootliks gereguleer deur kodongebruiksvooroordeel, wat gekenmerk word deur oor- of onderverteenwoordigde sinonieme kodons. Gevolglik kan die optimalisering van tRNA-swaai en kodongebruik in mRNA translasiedoeltreffendheid en -trouheid aansienlik verbeter.(1)

Voor- of na-mRNA-translasie kan indirek foute in proteïensintese tydens transkripsie en na-translasionele verwerking veroorsaak. Die vertaalmasjinerie kan egter direk bydra tot verkeerde vertaling deur middel van tRNA-misdekodering (wat lei tot verkeerde inkorporasie of stop-kodon-deurlees), tRNA-misasilering (wat lei tot verkeerde tRNA-aminosuurparing), kodon-hertoewysing of raamverskuiwings wat deur ribosomale translokasie veroorsaak word.(1)

Eksamenmetode

Genetiese volgorde-analise

Die entstof bestaan ​​uit 4284 nukleotiede wat in 6 afdelings verdeel is: cap is die begin van die volgorde, wat begin met die twee GA-nukleotiede, wat valslik aandui dat die mRNA van die menslike sel afkomstig is en dus aanvaar word; 5′ dui die rigting aan wat vir translasie gevolg moet word, terwyl UTR die gebied aandui waar die ribosoom moet rus om proteïene te produseer. In hierdie afdeling is die U van urasiel vervang deur 'n molekule van 1-metiel-3′-pseudouridien, aangedui deur die simbool Ψ, om die immuunstelsel te ontduik en die afbraak van die nuut ingevoerde mRNA te voorkom; dit is egter 'n faktor wat tot foute in proteïenproduksie kan lei. Verskeie Ψ-sintases is betrokke by die wysiging van spesifieke posisies, en defekte in verskeie daarvan is geassosieer met menslike siektes (2).

Dan is daar die sig-segment, genaamd die uitgebreide beginvolgorde van die S-glikoproteïen-seinpeptied, waarvan die inligting nodig is om die nuutgevormde proteïen via die endoplasmiese retikulum uit die sel te lei. Ook hier word veranderinge aan die drieling nukleotiede aangebring sodat die RNA deur die immuunstelsel aanvaar word, waar sommige letters wat die inligting vorm, vervang word met ander (gewoonlik in die derde posisie, "wikkelend"), skynbaar "onskadelike sinonieme" (hoofsaaklik deur die aantal letters C en G, wat die tempo van proteïensintese kodeer, te verhoog). Alhoewel hulle identiese aminosure spesifiseer, is die twee sinonieme nie presies dieselfde nie, ten minste wat vertaling betref. Meganistiese studies toon dat daar subtiele maar beduidende verskille is in hoe elkeen met sy ooreenstemmende oordrag-RNA (tRNA) interaksie het, verskille wat beide die tempo en getrouheid van vertaling beïnvloed.3 Alhoewel dit waar is dat drie letters 'n kodon uitmaak en meer as een kodon vir dieselfde aminosuur kodeer, is dit ook waar dat 'n oneweredige toename in die tempo van proteïenproduksie 'n risiko van ernstige vertaalfoute kan inhou.

Die karakters wat die volgorde uitmaak wat verband hou met die konstruksie van die egte spykerproteïen S protein_mut, is ook gewysig, met meer C- en G-aminosure bygevoeg, met inagneming van die sinonieme in die standaardtabel van die genetiese kode. Vervanging van die aminosure lisien (AAA) en valien (GUU) met prolien (CUU) het verhoed dat die gekonstrueerde proteïen ineenstort. Aan die einde van hierdie volgorde is twee stopkodons. Dit is nie ten volle bewys dat hierdie vervanging daartoe lei dat dieselfde elemente gevorm word nie en dat geen waninterpretasies sal plaasvind nie.

3′-UTR (Onvertaalde Streek 3 Eerste): Dit word veronderstel om die rigting van translasie van die volgorde aan te dui en proteïensintese te verbeter, maar baie van sy funksies bly onbekend; daarom is dit onmoontlik om die veiligheid daarvan te verifieer. Wat bekend is, word deur die WGO verklaar en is die volgende sin: Die 3′ UTR vir die BioNTech/Pfizer-entstof is geneem van "die amino-terminale versterker van gesplete (AES) mRNA en die mitochondriaal gekodeerde 12S ribosomale RNA."

poli(A): Ons bereik dan die einde van die volgorde en teëkom 30 A's, dan 'n 10-nukleotied GCAUAUGACU-skakel, gevolg deur nog 70 A's, aangesien elke mRNA verskeie kere deur die organisme hergebruik kan word.
Wanneer die A opgebruik is, word die mRNA afgebreek.

Al hierdie is gepatenteerde wysigings om proteïenuitdrukking te verhoog, en niks is bekend oor die werklike vertaling wat deur die organisme uitgevoer word nie.

Anomalieë en ander foute in alternatiewe splitsing

Nog 'n verwante probleem is dat dieselfde pre-mRNA aanleiding kan gee tot verskillende volwasse mRNA's en dus effens verskillende proteïene (alternatiewe splitsingsafwykings). Veranderinge in die proses van proteïensintese is gevind as die oorsaak van die ontwikkeling en groei van sommige kankers en ander siektes sonder om die DNS op enige manier te verander.
Alle splitsingsgebeurtenisse wat in die drie PHT-reeksgene geïdentifiseer is, behels die verlies van die boodskappervolgorde-leesraamwerk en die bekendstelling van 'n premature terminasiekodon (PTC), wat altyd meer as 50-55 nukleotiede stroomop van die laaste ekson-ekson-aansluiting geleë is, die alternatiewe transkripsies van die NMD (nonsens-gemedieerde mRNA-verval) toesigstelsel. Vir menslike en rot slc15a4/PHT1 is dit gedemonstreer deur NMD-inhibisie-eksperimente in verskeie sellyne, waarin die uitdrukking van alternatiewe variante tot kanonieke transkripsies altyd gestabiliseer is na inhibisie.(4)

Gevolgtrekkings

Moontlike langtermynrisiko's vir menslike gesondheid

Ons kan sê dat, afgesien van die feit dat dit nie geoptimaliseer is nie, die volgorde sterk twyfel laat ontstaan oor die teenwoordigheid van kodongebruiksfoute. Dit is moontlik om te spekuleer dat oormatige modifikasie wat gemik is op 'n uiterste toename in proteïenuitdrukking die bron van die fout in die samestelling van die mRNA-geenvolgorde kan wees.

Verandering van tRNA-beskikbaarheid kan lei tot neurodegeneratiewe siektes (Ishimura et al., 2014), en opregulering van spesifieke tRNA's bevorder metastase deur die stabiliteit van transkripsies wat verryk is met hul verwante kodons te verhoog. (5)

Verkeerde vertalings het baie ernstige gevolge vir die patofisiologie van 'n wye reeks siektes, insluitend veelvuldige sklerose, neurodegenerasie, mitochondriale miopatie, enkefalopatie, melksuurasidose, beroerte-agtige episodes, Parkinson se siekte en kanker (genese, groeiversnelling en metastase).(6)

Die korrelasie tussen die verhoogde tempo van proteïensintese met 100 % en die vertaalfoute van die volgorde, sowel as die meganisme wat die produksie van aminosure beïnvloed, bly in hierdie geval voorlopig onduidelik, aangesien baie eksperimente nog nie uitgevoer is nie.

Basies kan gesê word dat die kode van die algehele volgorde intrinsiek ongebalanseerd is, te veel verander is in vergelyking met die natuurlike virale eweknie, en te veel om te kan sê dat die menslike organisme presies die S-spike-proteïene reproduseer, as 'n presies identiese kopie, wat dus ernstige skade aan die menslike gesondheid op die lang termyn inhou, benewens onvoldoende immunisering.

Wat uit hierdie volgorde geproduseer word, is ver van presies gedefinieer nie, maar dit is geskryf in die gene van elke individu, deur die ribosomale profiel, hoe dit vertaal word en wat geproduseer word, dit wil sê, die voordeel of skade wat veroorsaak word.

Verwysings

1. Ou X, Cao J, Cheng A, Peppelenbosch MP, Pan Q (2019) Foute in translasionele dekodering: tRNA-skommeling of verkeerde inkorporasie? PLoS Genet 15(3): e1008017. https://doi.org/10.1371/journal.pgen.1008017
2. Biomolekules 2020, 10(5),729; https://doi.org/10.3390/biom10050729
3. Robinson R (2014) Watter kodonsinoniem is die beste? Dit mag afhang van wat op die spyskaart is. PLoS Biol 12(12): e1002014. doi:10.1371/journal.pbio.1002014
4. Andries, O. (2015). mRNA-modifikasie- en afleweringsstrategieë om 'n platform vir veilige en effektiewe geenterapie te vestig. Universiteit Gent, Fakulteit Veeartsenykunde, Merelbeke, België.
5. eLife 2019;8:e45396 DOI: 10.7554/eLife.45396
6. Mafalda Santos, Patricia M. Pereira, A. Sofia Varanda, Joana Carvalho, Mafalda Azevedo, Denisa D. Mateus, Nuno Mendes, Patricia Oliveira, Fábio Trindade, Marta Teixeira Pinto, Renata Bordeira-Carriço, Fátima Carneiro & Carl. verkeerde lees van tRNA's bevorder tumorgroei in muise, RNA Biology, 15:6, 773-786, DOI: 10.1080/15476286.2018.1454244

Studies bevestig herprogrammering van die immuunstelsel deur mRNA en vektor-entstowwe

Stephanie Seneff van die Massachusetts Institute of Technology en Greg Nigh van Naturopatiese Onkologie in Portland, 'n navorsingspan van die Helmholtz-sentrum vir infeksienavorsing, die Hannover Mediese Skool, die Universiteit van Bonn, en dokters en navorsers van die Erasmus Mediese Sentrum in Rotterdam het tot konsekwente gevolgtrekkings gekom.

Die teneur van die studies is die mRNA-geïnduseerde reduksie van die menslike immuunstelsel met betrekking tot sogenaamde gereedskapagtige reseptore. Hierdie reseptore is verantwoordelik vir die herkenning van die strukture van bakteriële en virale patogene.
Die studie deur Stephanie Seneff ea en die Navorsingspanne van die Helmholtz-instituut is hier beskikbaar vir aflaai.

Ook die PEI (Paul Ehrlich Instituut) wys reeds vanaf 30.07.2020(!) op die teenliggaampies wat die virale lading verhoog (webwerf as PDF-aflaai):

"Infeksie-versterkende teenliggaampies veroorsaak nie viruseliminasie of -neutralisering nie, maar stel die virus eerder in staat om te bind aan sogenaamde Fcγ-reseptore, wat onder andere op gespesialiseerde immuunselle (sogenaamde fagosiete) voorkom. Dit stel die virus weer in staat om in hierdie selle opgeneem te word, waar dit dan kan vermenigvuldig. Hierdie proses kan lei tot 'n toename in die viruslading."

Die verhoogde risiko van trombose wat deur mRNA en vektorstowwe veroorsaak word, maak die situasie nog moeiliker. Die D-dimeertoets kan gebruik word om die waarskynlikheid van 'n verhoogde risiko van trombose mikroskopies te skat en te bevestig.
Die verwysingswaarde vir volwassenes is < 0.5 mg/l. Waardes tussen 0.5 en 3.0 mg/l word as effens verhoog gedefinieer, terwyl waardes > 4.0 mg/l as ernstig verhoog gedefinieer word.

MIT-studie

– Abstrak (Duitse vertaling)

"Operation Warp Speed het twee mRNA-entstowwe in die Verenigde State bekendgestel, dié van Pfizer en Moderna. Voorlopige data het hoë doeltreffendheid vir hierdie twee entstowwe voorgestel, wat gehelp het om die FDA se Noodgebruiksmagtiging (EUA) te legitimeer."
EUA (Noodgebruiksmagtiging) deur die FDA. Die buitengewoon vinnige ontwikkeling van hierdie entstowwe deur beheerde proewe en massagebruik van hierdie entstowwe wek egter talle veiligheidskwessies. In hierdie oorsig beskryf ons eers die tegnologie onderliggend aan hierdie entstowwe in detail. Ons bespreek dan beide die komponente van hierdie entstowwe en die beoogde biologiese reaksie op hierdie entstowwe, insluitend die produksie van die spykerproteïen self, en hul potensiële verband met 'n wye reeks akute en langtermynpatologieë, soos bloedafwykings, neurodegeneratiewe siektes en outo-immuunsiektes. In die konteks van hierdie potensieel geïnduseerde patologieë bespreek ons die betekenis van aminosuurvolgordes binne die spykerproteïen wat verband hou met die prionproteïen. Ons bied ook 'n kort oorsig van
Studies wat die potensiaal vir piekproteïenafskeiding ondersoek, die oordrag van proteïen van 'n ingeënte na 'n
ongeënte persoon, wat simptome by laasgenoemde veroorsaak. Laastens spreek ons 'n gereeld bespreekte punt aan, naamlik of hierdie entstowwe die DNS van diegene wat ingeënt is, kan verander. Alhoewel daar geen studies is wat dit definitief bewys nie, bied ons 'n aanneemlike scenario aan wat ondersteun word deur reeds gevestigde weë van transformasie en vervoer van genetiese materiaal, waardeur die ingespuite mRNA uiteindelik in die kiemsel-DNS opgeneem kan word om intergenerasionaal oorgedra te word. Ons sluit af met ons aanbevelings vir monitering om die langtermyn-effekte van hierdie eksperimentele middels te verduidelik en die ware risiko-voordeel-verhouding van hierdie nuwe tegnologieë beter te bepaal.„

…

– Gevolgtrekking (Duitse vertaling)

„Eksperimentele mRNA-entstowwe het glo groot voordele, maar hulle dra ook die risiko van tragiese en selfs katastrofiese, onvoorsiene gevolge. Die mRNA-entstowwe teen SARS-CoV-2 is met groot fanfare bekendgestel, maar daar is baie aspekte van hul wydverspreide gebruik wat kommer wek. Ons het sommige, maar nie almal nie, van hierdie kommer hier aangespreek en wil beklemtoon dat hierdie kommer moontlik ernstig is en dalk nie vir jare of selfs geslagte duidelik sal word nie. Om die nadelige risiko's wat in hierdie artikel beskryf word, uit te sluit, beveel ons ten minste aan dat die volgende navorsingsbevindinge en moniteringsaanbevelings oorweeg word:

• 'n Nasionale opname van gedetailleerde data oor nadelige gebeurtenisse wat met mRNA-entstowwe geassosieer word, met aansienlike finansiële ondersteuning en wat ver verder strek as die eerste weke na inenting.
• Herhaalde outo-antiliggaamtoetse in die ingeënte bevolking. Die getoetste outo-antiliggame
  kan gestandaardiseer word en behoort gebaseer te wees op voorheen gedokumenteerde teenliggaampies en outo-antiliggaampies wat moontlik deur die spykerproteïen veroorsaak word. Dit sluit in outo-antiliggaampies teen fosfolipiede, kollageen, aktien, tiroperoksidase (TPO), miëlienbasisproteïen, weefseltransglutaminase, transglutaminase, en moontlik ander.
• Immunologiese profilering met betrekking tot sitokienbalans en gepaardgaande biologiese effekte. Toetse moet ten minste IL-6, INF-α, D-dimere, fibrinogeen en C-reaktiewe proteïen insluit.
• Studies wat bevolkings wat met mRNA-entstowwe ingeënt is, vergelyk met dié wat nie ingeënt is nie, om die verwagte laer infeksiekoers en milder simptome in die ingeënte groep te bevestig, terwyl ook die koerse van aangetekende outo-immuun siektes vergelyk word.
• Studies om te bepaal of dit moontlik is vir 'n ongeënte persoon om entstofspesifieke vorme van die aarproteïene van 'n ingeënte persoon in noue nabyheid te verkry.
• In vitro-studies om te bepaal of mRNA-nanopartikels deur sperma opgeneem en in cDNA-plasmiede omgeskakel kan word.„
  
  

Bestudeer die Helmholtz Instituut

– Opsomming (Duitse vertaling)

„Die mRNA-gebaseerde BNT162b2-entstof van Pfizer/BioNTech was die eerste geregistreerde COVID-19-entstof en is tot 95% effektief in die voorkoming van SARS-CoV-2-infeksies.
Min is bekend oor die breë effekte van die nuwe klas mRNA-entstowwe, veral of hulle gekombineerde effekte op aangebore en aanpasbare immuunresponse het. Hier het ons bevestig dat BNT162b2-inenting van gesonde individue effektiewe humorale en sellulêre immuniteit teen verskeie SARS-CoV-2-variante veroorsaak. Interessant genoeg het die BNT162b2-entstof egter ook die produksie van inflammatoriese sitokiene deur aangebore immuunselle gemoduleer, beide na stimulasie met spesifieke (SARS-CoV-2) en nie-spesifieke (virale, swam- en bakteriële) stimuli.
Die reaksie van aangebore immuunselle op TLR4- en TLR7/8-ligande was laer na BNT162b2-inenting, terwyl swam-geïnduseerde sitokienreaksies sterker was. Ten slotte lei die BNT162b2 mRNA-entstof tot 'n komplekse funksionele herprogrammering van aangebore immuunreaksies, wat in ag geneem moet word in die ontwikkeling en gebruik van hierdie nuwe klas entstowwe.

…

Samevattend toon ons data dat die BNT162b2-entstof effekte op beide die aanpasbare en aangebore takke van immuniteit uitoefen en dat hierdie effekte verskil vir verskillende SARS-CoV-2-stamme.
Interessant genoeg herprogrammeer die BNT162b2-entstof ook die aangebore immuunrespons. Daar moet in ag geneem word dat dit, in kombinasie met sterk aanpasbare immuunresponse, kan bydra tot 'n meer gebalanseerde inflammatoriese reaksie tydens COVID-19-infeksie, of dit kan bydra tot 'n verminderde aangebore immuunrespons op die virus. Die BNT162b2-entstof beskerm duidelik teen COVID-19, maar die duur van hierdie beskerming is nog nie bekend nie, en dit is denkbaar dat hierdie kennis in toekomstige generasies van die entstof opgeneem kan word om die reikwydte en duur van beskerming te verbeter. Ons resultate moet bevestig word deur groter kohortstudies met bevolkings van uiteenlopende agtergronde uit te voer, terwyl verdere studies potensiële interaksies tussen BNT162b2 en ander entstowwe ondersoek.„

Rooi Handletters

Rooi Handbriewe word deur farmaseutiese maatskappye uitgereik wanneer, onder andere, voorheen onbekende geneesmiddelrisiko's ontstaan het of geneesmiddelgroepe om veiligheidsredes teruggeroep word.

Dit het ook gebeur met betrekking tot alle COVID-19-farmaseutiese produkte (entstowwe):

BionTech/Pfizer

• 19.07.2021 – https://csiag.de/wp-content/uploads/2021/09/Rote-Hand-Moderna-BioNTech-19.07.2021.pdf

Janssen

• 26.04.2021 – https://csiag.de/wp-content/uploads/2021/09/Rote-Hand-Janssen-26.042021.pdf
• 19.07.2021 – https://csiag.de/wp-content/uploads/2021/09/Rote-Hand-Janssen-19.07.2021.pdf

AstraZeneca

• 24.03.2021 – https://csiag.de/wp-content/uploads/2021/09/Rote-Hand-AstraZeneca-24.03.2021.pdf
• 02.06.2021 – https://csiag.de/wp-content/uploads/2021/09/Rote-Hand-AstraZeneca-02.06.2021.pdf
• 23.06.2021 – https://csiag.de/wp-content/uploads/2021/09/Rote-Hand-AstraZeneca-23.06.2021.pdf

Mediese inligting / pakketbylaag vir COVID-entstowwe

Elke bondel entstowwe word vergesel van 'n pamflet en 'n mediese inligtingsbrosjure. Hierdie is bedoel om inligting voor inenting te verskaf.

Die vervaardigers se mediese inligting is hier beskikbaar in die vorm van 'n EMA-skakel en as 'n PDF-aflaai. Pakketinvoere is tans nie of nie meer aanlyn beskikbaar nie.

• Komirnaty – BioNTech
  • Pakketbrosjure (PDF)
  • Mediese inligting (Aanhangsel I – EMA) – Inligting vir gebruikers – (PDF)
    
• Johnson & Johnson / Janssen
  • Pakketbrosjure (PDF)
  • Mediese inligting (Aanhangsel I – EMA) – (PDF)
    
• Spikevax – Moderna
  • Pakketbrosjure (PDF)
  • Mediese inligting (Aanhangsel I – EMA) – (PDF)
    
• Vaxzevria – AstraZeneca
  • Pakketbrosjure (PDF)
  • Mediese inligting (Aanhangsel I – EMA) – Mediese inligting (Vervaardiger) - (PDF)
    

In die inligting wat deur die bogenoemde vervaardiger verskaf is, word die doel van die entstof hoofsaaklik gedefinieer as "voorkoming van COVID-siekte." Dit waarborg nie volledige beskerming teen toekomstige COVID-infeksie nie.

AstraZeneca wys ook op die kwessie van “godsdienstige oortuigings”:

“Elkeen moet self besluit of hul behandeling versoenbaar is met hul eie godsdienstige oortuigings.”

Outopsie-uitslae van 'n persoon wat kort na die ontvangs van BioNTech-inenting oorlede is

Onder die titel Eerste geval van nadoodse studie in 'n pasiënt ingeënt teen SARS-CoV-2 Op 16 April 2021 is die resultate van 'n outopsie wat in samewerking met die Instituut vir Patologie, Universiteitshospitaal OWL van die Universiteit van Bielefeld, Kampus Lippe, Röntgenstr. 18, D-32756 Detmold en die Instituut vir Patologie, KRH-hospitaal Nordstadt, Hannover, Duitsland, uitgevoer is, gepubliseer. hier word in die oorspronklike as 'n PDF verskaf.

Die volledige teks volg in Duitse vertaling:

Opsomming

'n Voorheen asimptomatiese 86-jarige man het die eerste dosis van die BNT162b2 mRNA COVID-19-entstof ontvang. Hy is 4 weke later oorlede aan akute nier- en respiratoriese versaking. Alhoewel hy nie COVID-19-spesifieke simptome getoon het nie, het hy positief getoets vir SARS-CoV-2 voor sy dood. Antigeenbinding van die spykerproteïen (S1) het beduidende vlakke van immunoglobulien (Ig) G getoon, terwyl nukleokapsied IgG/IgM nie ontlok is nie. Akute brongopneumonie en tubulêre versaking is as die oorsaak van dood by outopsie toegeskryf; ons het egter geen kenmerkende morfologiese kenmerke van COVID-19 waargeneem nie. Postmortem molekulêre kartering met behulp van intydse polimerase-kettingreaksie het relevante SARS-CoV-2-siklusdrempels in alle organe wat ondersoek is (orofarinks, olfaktoriese mukosa, tragea, longe, hart, niere en serebrum) aan die lig gebring, behalwe vir die lewer en olfaktoriese bol. Hierdie resultate kan aandui dat die eerste inenting immunogenisiteit veroorsaak, maar nie steriele immuniteit nie.

Ons rapporteer oor die geval van 'n 86-jarige manlike inwoner van 'n verpleeginrigting wat teen SARS-CoV-2 ingeënt is. Sy mediese geskiedenis het sistemiese arteriële hipertensie, chroniese veneuse insuffisiëntheid, demensie en prostaatkanker ingesluit. Op 9 Januarie 2021 het die man die lipied-nanopartikel-geformuleerde, nukleosied-gemodifiseerde RNA-entstof BNT162b2 teen 'n dosis van 30 μg ontvang. Op daardie dag en vir die volgende 2 weke het hy geen kliniese simptome getoon nie (Tabel 1). Op dag 18 is hy in die hospitaal opgeneem met verergerende diarree. Aangesien hy geen kliniese tekens van COVID-19 getoon het nie, was dit nie nodig dat hy in 'n spesifieke omgewing geïsoleer moes word nie. Laboratoriumtoetse het hipochromiese anemie en verhoogde serumkreatinienvlakke aan die lig gebring. Antigeentoetsing en polimerase-kettingreaksie (PCR) vir SARS-CoV-2 was negatief.

Gastroskopie en kolonoskopie is uitgevoer om die oorsaak van diarree verder te ondersoek. Kolonoskopie het veral 'n ulseratiewe letsel van die linker koliekfleksie aan die lig gebring, wat histologies as iskemiese kolitis gediagnoseer is. PCR-analise van biopsiemonsters met behulp van 'n voorheen gerapporteerde metode (Kaltschmidt et al., 2021) was negatief vir SARS-CoV-2. Behandeling was ondersteunend met mesalasien en intraveneuse ysteraanvulling. Daarna het die pasiënt se toestand versleg, met die ontwikkeling van nierversaking. Op dag 24 het 'n pasiënt in dieselfde hospitaalkamer as ons geval positief getoets vir SARS-CoV-2. Op dag 25 het ons pasiënt positief getoets vir SARS-CoV-2 deur middel van intydse PCR (RT-PCR), met 'n lae siklusdrempel (Ct) wat 'n hoë viruslading aandui. Verdere analise van die deppermonster het geen bewyse van die gemuteerde SARS-CoV-2-variante B.1.1.7, B.1.351 of B.1.1.28.1 aan die lig gebring nie. Alles saamgevat, blyk dit dat die pasiënt deur die pasiënt in sy hospitaalkamer besmet is. Ons pasiënt het toe met koors en respiratoriese nood aangekom, en longauskultasie het gekraak getoon. Ten spyte van die aanvang van aanvullende suurstof (2 liter per minuut) en antibiotiese terapie met keftriaksoon, is die pasiënt die volgende dag aan akute nier- en respiratoriese versaking oorlede.

Immunogenisiteitsassessering deur die meting van antigeen-bindende immunoglobulien (Ig) G van die spykerproteïen (S1) in serummonsters wat op dag 25 verkry is, het 'n teenliggaamrespons getoon (8.7 U/ml, verwysingswaarde 1.0 U/ml; Roche ECLIA™). Hierdie resultate dui daarop dat die pasiënt reeds relevante immunogenisiteit na inenting ontwikkel het.

Nadoodse ondersoek het akute bilaterale brongopneumonie met absesse aan die lig gebring, soms omring deur bakteriese kokke (Figuur 1). Daar was geen bevindinge van algemeen beskryfde manifestasies van COVID-19-geassosieerde pneumonitis nie. In die hart het ons biventrikulêre hipertrofie (gewig 580 g) gevind, en histologies het ons iskemiese kardiomiopatie gediagnoseer. Ons het transtiretien-tipe amiloïdose in die hart en, in 'n mindere mate, in die longe gedemonstreer. Die niere het beide chroniese skade met arteriolosklerose en interstisiële fibrose getoon, sowel as akute nierversaking met hidropiese tubulêre degenerasie. Breinondersoek het linker pariëtale pseudosistiese weefselnekrose aan die lig gebring, wat as 'n ou infarkgebied gediagnoseer is.

Die bogenoemde figuur verteenwoordig hier beskikbaar vir aflaai as 'n hoë-resolusie PDF.

Ons het molekulêre kartering van nege verskillende anatomiese gedeeltes van formalien-gefikseerde, paraffien-ingebedde weefsel uitgevoer, soos voorheen beskryf (Kaltschmidt et al., 2021). RNA is uit paraffien-gedeeltes onttrek met behulp van die Maxwell RSC (Promega, Madison, WI, VSA). Multiplex RT-PCR-analise het twee onafhanklike gene van die SARS-CoV-2-genoom (Fluorotipe SARS-CoV-2 plus-kit; HAIN/Bruker, Nehren, Duitsland) geteiken: RNA-afhanklike RNA-polimerase (Teiken 1) en nukleopeptied (Teiken 2). Die negatiewe afsnywaarde was Ct >45. Ons het nege verskillende weefselmonsters ondersoek vir bekende en relevante weë van virusverspreiding in die menslike liggaam (Figuur 1). Om kruiskontaminasie te vermy, is elke monster direk in aparte weefselkassette ingebed en afsonderlik in 4%-fosfaatgebufferde soutoplossing formalien gefikseer. Ons het virale RNA in byna alle organe wat ondersoek is, opgespoor, met die uitsondering van die lewer en reukbol (Figuur 1).

Na die outeurs se wete is 'n gedetailleerde outopsiestudie, insluitend molekulêre viruskartering van 'n pasiënt wat teen SARS-CoV-2 ingeënt is met 'n positiewe SARS-CoV-2-toets na inenting, nog nie voorheen gerapporteer nie. Ons stel voor dat 'n enkele behandeling met die BNT162b2b2 RNA-entstof beduidende immunogenisiteit veroorsaak het, soos weerspieël deur die gerapporteerde piekproteïen-gebaseerde neutraliserende IgG-serumvlakke. Van die weke voor inenting tot inenting (dag 1) tot kort voor die dood (dag 24), was die pasiënt vry van kliniese simptome wat tipies aan COVID-19 toegeskryf word. Verder het bloedtoetse nie 'n IgM-titer getoon nie, wat gewoonlik 7-14 dae na die aanvang van simptome waargeneem word (Kim et al., 2020). Die pasiënt het egter positief getoets vir SARS-CoV-2. Beide die ct-waarde gemeet in nasofaringeale deppers en die waardes gemeet in formalien-gefikseerde, paraffien-ingebedde outopsiemonsters dui op virale lading en dui op oordraagbaarheid. Aangesien ons pasiënt ongeveer 2 dae na sy eerste positiewe SARS-CoV-2-toetsresultaat oorlede is, neem ons aan dat die molekulêre karteringsdata 'n vroeë stadium van virusinfeksie weerspieël. 'n Vroeë stadium van infeksie kan ook verklaar waarom verskeie streke soos die reukbol en lewer (nog) nie deur sistemiese virusverspreiding geraak is nie.

Ons het geen kenmerkende morfologiese kenmerke van COVID-19 waargeneem wat in uitgebreide morfologiese outopsiestudies gerapporteer is nie (Schaller et al., 2020, Edler et al., 2020, Ackermann et al., 2020). Ons het nie tipiese tekens van diffuse alveolêre besering in die longe gevind nie, maar ons het wel uitgebreide akute brongopneumonie, moontlik van bakteriële oorsprong, geïdentifiseer. Ons het tot die gevolgtrekking gekom dat die pasiënt aan brongopneumonie en akute nierversaking gesterf het.

Ons resultate stem ooreen met vorige bevindinge van diermodelle dat immunisering teen SARS-CoV-2 deur inenting die erns van patogenese verminder het, veral met betrekking tot ernstige longsiekte, terwyl virale RNA in neusdruppels voortgeduur het (Van Doremalen et al., 2020, Vogel et al., 2021). Onlangs het Amit et al. (2021) resultate gepubliseer van 'n kliniese proefneming in gesondheidswerkers wat die BNT162b2-entstof gebruik het, wat 'n beduidende vroeë vermindering in SARS-CoV-2-infeksie en simptomatiese COVID-19-koerse na toediening van die eerste entstofdosis getoon het.

Die belangrikste newe-effekte by pasiënte wat teen SARS-CoV-2 ingeënt is, is oorwegend lokaal, en ernstige sistemiese reaksies word selde aangemeld (Yuan et al., 2020). Onlangse verslae van 'n verhoogde risiko van bloedklonte, veral serebrale veneuse sinus trombose in die geval van die Oxford-AstraZeneca-entstof (Mahase 2021), het egter 'n debat oor die veiligheid van die COVID-19-entstof in die algemeen laat ontstaan. 'n Omvattende analise van outopsiedata is nodig om meer gedetailleerde insigte in noodlottige newe-effekte en inentingsverwante sterftes te verkry.

Samevattend bevestig die resultate van ons outopsie-gevallestudie in 'n pasiënt met 'n mRNA-entstof die siening dat immunogenisiteit reeds deur die eerste inenting teen SARS-CoV-2 geïnduseer kan word, terwyl steriele immuniteit nie voldoende ontwikkel is nie.

Erkennings

Ons bedank Ralf Bode en Nadine Weber (OWL Universiteitshospitaal van die Universiteit Bielefeld, Kampus Lippe, Detmold) vir hul kundige tegniese ondersteuning.

Verwysings

1. Ackermann M., Verleden SE, Kuehnel M., Haverich A., Welte T., Laenger F. Pulmonale vaskulêre endoteelitis, trombose en angiogenese in Covid-19. N Engl J Med. 2020;383:120–128. doi: 10.1056/NEJMoa2015432. [PMC gratis artikel] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
2. Amit S., Regev-Yochay G., Afek A., Kreiss Y., Leshem E. Vroeë tempoverlagings van SARS-CoV2-infeksie en COVID-19 in BNT162b2-entstofontvangers. Lancet. 2021;397(10277):875–877. doi: 10.1016/S0140-6736(21)00448-7. [PMC gratis artikel] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
3. Edler C., Schröder AS, Aepfelbacher M., Fitzek A., Heinemann A., Heinrich F. Sterf met SARS-CoV2-infeksie – 'n outopsiestudie van die eerste opeenvolgende 80 gevalle in Hamburg, Duitsland. Int J Regsgeneeskunde. 2020;134:1275–1284. doi: 10.1007/s00414-020-02336-7. [PMC gratis artikel] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
4. Kaltschmidt B., Fitzek ADE, Schaedler J., Förster C., Kaltschmidt C., Hansen T. Hepatiese vaskulopatie en regeneratiewe reaksies van die lewer in noodlottige gevalle van COVID-19. Kliniese Gastroenterol Hepatol. 2021 doi: 10.1016/j.cgh.2021.01.044. In druk.PMC gratis artikel] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
5. Kim DS, Rowland-Jones S, Gea-Mallorqui E. Sal SARS-CoV-2-infeksie langdurige beskermende of steriliserende immuniteit ontlok? Implikasies vir entstofstrategieë. Front Immunol. 2020;11:571481. doi: 10.3389/fimmu.2020.571481.eCollection2020. [PMC gratis artikel] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
6. Mahase E. Covid-19: AstraZeneca-entstof is nie gekoppel aan verhoogde risiko van bloedklonte nie, bevind Europese Medisyne-agentskap. BMJ. 2021;372:n774. doi: 10.1136/bmj.n774. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
7. Schaller T., Hirschbühl K., Burkhardt K., Braun G., Trepel M., Märkl B. Nadoodse ondersoeke van pasiënte met COVID19. JAMA. 2020;323:2518–2520. doi: 10.1001/jama.2020.8907. [PMC gratis artikel] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
8. Van Doremalen N, Lambe T, Spencer A, Belij-Rammersdorfer S, Purushotham JN, Port JR ChAdOx1 nCoV-19-entstof voorkom SARS-CoV-2-longontsteking in rhesus macaques. Natuur. 2020;586:578–582. doi: 10.1101/2020.05.13.093195. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
9. Vogel AB, Kanevsky I, Che Y, Swanson KA, Muik A, Vormehr M. Immunogeniese BNT162b-entstowwe beskerm rhesusmakake teen SARS-CoV-2. Natuur. 2021;592(7853):283–289. doi: 10.1101/2020.12.11.421008. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
10. Yuan P., Ai P., Liu Y., Ai Z., Wang Y., Cao W. Veiligheid, verdraagsaamheid en immunogenisiteit van COVID19-entstowwe: 'n sistematiese oorsig en meta-analise. medRxiv. 2020-doi: 10.1101/2020.11.03.20224998. Voordruk. [CrossRef] [Google Scholar]
    
    
    

Navorsingsresultate oor paardebloem-ekstrak – inhibeer binding van aarproteïene

Teksuittreksel / vertaling uit die artikel “NAVORSING: Paardebloemblaarekstrak blokkeer binding van aarproteïene aan die ACE2-seloppervlakreseptor„:

Spykerproteïene van SARS-CoV-2 kan geneutraliseer word deur 'n algemene "onkruid" wat elke jaar van grasperke verban word. 'n Duitser Universiteitstudie het getoon dat paardebloem (Taraxacum officinale) die binding van aarproteïene aan die ACE2-seloppervlakreseptore in menslike long- en nierselle kan blokkeer. Die watergebaseerde paardebloem-ekstrak, verkry van die gedroogde blare van die plant, was effektief teen die aarproteïen D614 en 'n verskeidenheid mutante stamme, insluitend D614G, N501Y, K417N en E484K.

Hier is die Duitse vertaling van die oorspronklike studie (PDF - Engels) :

Opsomming:

Op 11 Maart 2020 is die koronavirussiekte 2019 (COVID-19), veroorsaak deur die SARS-CoV-2-virus, deur die Wêreldgesondheidsorganisasie (WGO) tot 'n wêreldwye pandemie verklaar. Tot op hede versprei nuwe "kommerniële variante" van SARS-CoV-2, soos die VK (B.1.1.7), die Suid-Afrikaanse (B.1.351) en die Brasiliaanse (P.1) variante, vinnig. Almal bevat veelvuldige mutasies in die ACE2-reseptorherkenningsplek van die spykerproteïen in vergelyking met die oorspronklike Wuhan-volgorde, wat van groot belang is as gevolg van die potensiaal vir immuunverdediging. Hier rapporteer ons die doeltreffendheid van paardebloem (Taraxacum officinale) in die blokkering van die proteïen-proteïen-interaksie van spyker S1 met die menslike ACE2-seloppervlakreseptor. Hierdie effek is gedemonstreer vir die oorspronklike spike D614, maar ook vir sy gemuteerde vorms (D614G, N501Y, en 'n mengsel van K417N, E484K, N501Y) in menslike HEK293-hACE2 nier- en A549-hACE2-TMPRSS2 longselle. Hoë-molekulêre gewig verbindings in die water-gebaseerde uittreksel is verantwoordelik vir hierdie effek. Die uittreksel het doeltreffend infeksie van longselle met SARS-CoV-2 Spike pseudotipeerde lentivirus deeltjies voorkom, sowel as virus-geïnduseerde pro-inflammatoriese interleukien-6 afskeiding. Moderne kruiemonografieë beskou die gebruik van hierdie medisinale plant as veilig. Daarom behoort die in vitro resultate wat hier gerapporteer word verdere navorsing te stimuleer oor die kliniese relevansie en toepaslikheid van die uittreksel as 'n voorkomende strategie vir SARS-CoV-2 infeksie.

SARS-CoV-2 muteer voortdurend tydens oordrag tussen mense. Dit kan uiteindelik daartoe lei dat die virus bestaande terapeutiese en profilaktiese benaderings wat die aarproteïen teiken, ontduik. Ons het effektiewe inhibisie van die proteïen-proteïen-interaksie tussen die menslike virale sel-intreereseptor ACE2 en die SARS-CoV-2-aarproteïen, insluitend vyf relevante mutasies, gevind deur watergebaseerde uittreksels van gewone paardebloem (Taraxacum officinale). Dit is in vitro gedemonstreer met behulp van menslike nier- (HEK293) en long- (A549) selle wat onderskeidelik die ACE2- en ACE2/TMPRSS2-proteïene ooruitdruk. Infeksie van longselle met die pseudotypiese lentivirus SARS-CoV-2 is doeltreffend deur die uittreksel voorkom. Die resultate vra vir verdere analise van die doeltreffendheid van paardebloem in SARS-CoV-2-voorkoming en bevestigende kliniese bewyse.

Tot op hede is daar drie vinnig verspreidende nuwe variante van SARS-CoV-2, wat die eerste keer in die Verenigde Koninkryk (variant B.1.1.7), Suid-Afrika (variant B.1.351) en Brasilië (variant P.1) aangemeld is. Almal deel die N501Y-mutasie in die spykerproteïen (5). SARS-CoV-2-variante met spykerproteïen D614G-mutasies oorheers nou wêreldwyd. B.1.351 bevat ander spykermutasies benewens D614G, insluitend drie mutasies (K417N, E484K en N501Y) in die RBD (6). Voorlopige data dui op 'n moontlike verband tussen die waargenome verhoogde mortaliteitsyfer en die D614G-mutasie, en 'n konformasieverandering in die spykerproteïen word vermoedelik tot verhoogde infektiwiteit te lei (7). Vrye energie-perturbasieberekeninge vir die interaksies van die N501Y- en K417N-mutasies, beide met die ACE2-reseptor en met 'n teenliggaam afgelei van COVID-19-pasiënte, laat belangrike vrae ontstaan oor die potensiële menslike immuunrespons en die sukses van bestaande entstowwe (8). Verder is verhoogde weerstand van die B.1.351- en B.1.1.7-variante teen teenliggaamneutralisering gerapporteer; vir B.1.351 was dit hoofsaaklik te wyte aan die E484K-mutasie in die spykerproteïen (9).

Interferensie met die interaksieplek tussen die spike S1-subeenheid en ACE2 kan 'n belangrike teiken vir terapie of voorkoming wees (10). Verbindings van natuurlike oorsprong kan 'n mate van beskerming bied teen virale selinval terwyl hulle geen of min newe-effekte het. Hier rapporteer ons die inhiberende potensiaal van paardebloem op die binding van die spike S1-proteïen RBD aan die hACE2-seloppervlakreseptor en vergelyk die effek van die oorspronklike spike-proteïen D614 met sy D614G-, N501Y- en Mix (K417N, E484K, N501Y)-mutasies.

Die gewone paardebloem (Taraxacum officinale) behoort aan die madeliefiefamilie (Asteraceae), subfamilie Cichorioideae, met baie kultivars en subspesies. Dit is 'n meerjarige kruid inheems aan die warmer gematigde sones van die Noordelike Halfrond, wat velde, paaie en ruderale terreine bewoon. T. officinale word as 'n kruievoedsel verbruik, maar word ook in Europese fitoterapie gebruik vir afwykings van die lewer, galblaas, spysverteringskanaal en rumatiese siektes. Moderne kruiemonografieë beskou die plant se gebruik as veilig en het die empiriese gebruik van T. officinale met positiewe resultate geëvalueer. Indikasies vir T. officinale word gelys in die monografieë van die Duitse Kommissie E, die Europese Wetenskaplike Koöperatief vir Fitoterapie (ESCOP) (11, 12), en die Britse Kruiegeneeskundevereniging (13). Die plant bevat 'n wye spektrum van sekondêre plantverbindings, insluitend terpene (seskwiterpeenlaktone soos teeraksiensuur en triterpene), fenoliese verbindings (fenoliese sure, flavonoïede en kumariene), en polisakkariede (14). Die oorheersende fenoliese verbinding is sigoriensuur (dikafeïelwynsteensuur). Die ander was mono- en dikafeïelkiniese sure, wynsteensuurderivate, flavone en flavonolglikosiede. Benewens hierdie verbindingsklasse bevat die wortels hoë hoeveelhede inulien (15). Dosisvorme sluit in waterige afkooksels en infusies, uitgedrukte vars plantsap, hidroalkoholiese tinkture en bedekte tablette gemaak van droë uittreksels wat as monopreparate gebruik word (16), maar ook as integrale komponente van medisinale produkte. Ons navorsing is uitgevoer met behulp van watergebaseerde uittreksels van plantblare. Ons het gevind dat blaaruittreksels die aarproteïen of sy gemuteerde vorme van die ACE2-reseptor effektief geblokkeer het, wat voor of na inkubasie gebruik is, en dat hoëmolekulêre gewigverbindings verantwoordelik is vir hierdie effek. 'n Plant van dieselfde stam (Cichorium intybus) kan soortgelyke effekte hê, alhoewel met laer sterkte. Die uittreksel het doeltreffend infeksie van menslike longselle A549-hACE2-TMPRSS2 met die pseudotypiese lentivirus SARS-CoV-2 voorkom.

Resultate

T. officinale inhibeer Spike S1 – ACE2 binding
Ons het eers die inhibisie van die interaksie tussen SARS-CoV-2-spykproteïen RBD en ACE2 ondersoek deur gebruik te maak van uittreksels van T. officinale-blare. Figuur 1A toon die konsentrasieafhanklike inhibisie van Spyke S1-ACE2-binding na behandeling met T. officinale-uittreksel (EC50 = 12 mg/ml). Uittreksels van C. intybus het ook konsentrasieafhanklike bindingsinhibisie getoon, maar met laer doeltreffendheid as T. officinale (EC50 = 30 mg/ml) (Figuur 1B). Ons het toe twee fraksies van gedroogde T. officinale- en sigoreiblare voorberei en die uittreksels geskei in 'n hoëmolekulêre gewig (>5 kDa) en 'n lae molekulêre gewig (<5 kDa) fraksie. Soos getoon in Figuur 1C, was die bioaktiewe verbindings hoofsaaklik teenwoordig in die HMW-fraksie. Slegs lae aktiwiteit is waargeneem in die LMW-fraksie.

.

Effek van T. officinale en sigorei op Sars-CoV-2-piek – ACE 2-inhibisie.
AB) Konsentrasie-afhanklike effek van T. officinale (TO) en C. intybus (CI) uittreksel. CD) Effek van fraksies van TO en CI blaaruittreksel. Die uittreksels is gevriesdroog, gevolg deur molekulêre gewigsfraksionering. Die afsnypunt is gestel op 5 kDa (HMW > 5 kDa, LMW < 5 kDa). H+L: HMW en LMW fraksies; 50 mg gedroogde blare per ml water is as verwysing gebruik. HMW en LMW fraksiehoeveelhede gelykstaande aan die gedroogde blare is gebruik. Bindingsinhibisie is beoordeel met behulp van die ELISA-tegniek. Stawe is gemiddeldes + SD. Oplosmiddelbeheer: gedistilleerde water (ad).

Deur gebruik te maak van HEK293-selle wat hACE2 ooruitdruk, is die potensiaal van T. officinale- en C. intybus-ekstrakte om aarbinding aan selle te blokkeer verder ondersoek. Soos getoon in Figuur 2, het voorinkubasie van selle met T. officinale vir een minuut die aarbinding van selle effektief met 76.67 ± 2.9 μM en die HMW-fraksie met 62.5 ± 13.4 μM geblokkeer in vergelyking met die waterkontrole. Na 3 uur was die inhibisie steeds 50 ± 13.6 μM vir die ekstrak en 35.0 ± 20 μM vir die HMW-fraksie van T. officinale. Die sigorei-ekstrak was minder effektief in hierdie toetsstelsel; bindingsinhibisie is waargeneem by 37 ± 20 μM na 1 minuut en 5.6 ± 9.9 %.

Inhibisie van S1-spikeproteïenbinding aan menslike HEK293 hACE2-selle deur ekstrakvoorinkubasie.
Selle is vir die aangeduide tye vooraf geïnkubeer met die ekstrak van 10 mg/ml T. officinale (TO), die HMW-fraksie gelyk aan 10 mg/ml ekstrak (HMW), en 10 mg/ml C. intybus (CI), of oplosmiddelkontrole (ad), en daarna vir 1 uur behandel met HIS-gemerkte S1-spykproteïen sonder 'n tussentydse wasstap by 4°C. Bindingsinhibisie is bepaal deur vloeisitometrie. N=3, stawe is gemiddeldes + SD. Links bo: Sitogram van gekontroleerde HEK-hACE2-selle. Middel: Oorleg van verteenwoordigende fluoresensie-intensiteitshistogramme vir ACE2-oppervlak-ekspressie. Regs bo: Oorleg van verteenwoordigende fluoresensie-intensiteitshistogramme vir die inhibisie van spykbinding deur die ekstrakte of ad; positiewe kontrole: 20 µg/ml oplosbare hACE2. Selle is gekleur met anti-His-merker Alexa Fluor 647 gekonjugeerde monoklonale teenliggaam.

Selbehandeling met gelyke hoeveelhede Spike D614 en sy variante D614G en N501Y het 'n sterker bindingsaffiniteit van D614G (ongeveer 1.5-voudig) en N501Y (ongeveer 3- tot 4-voudig) as D614-spikeproteïen aan die ACE2-oppervlakreseptor van HEK293-selle bevestig (Figuur 3A). Vinnige voorbehandeling met T. officinale (binne 30 s) het spikebinding aan die ACE2-oppervlakreseptor geblokkeer (Figure 3B-C). Na 30 s was dit 58.2 ± 28.7 μM vir D614, 88.2 ± 4.6 μM vir D614G, en 88 ± 1.3 μM vir N501Y-bindingsinhibisie deur T. officinale-ekstrak. Alhoewel spikebindingsinhibisie vir C. intybus-ekstrak waargeneem is, was dit ongeveer 30-70% laer in vergelyking met T. officinale, afhangende van die spikeproteïen wat getoets is. Toe binding by 37°C in plaas van 4°C ondersoek is, was die resultate vergelykbaar vir T. officinale, maar selfs swakker vir sigorei-ekstrak in hierdie sellyn (Figuur 3D). Vir T. officinale- en C. intybus-ekstrakte was die inhibisie van spykerbinding onderskeidelik 47.90 ± 14.72 en 13.12 ± 12.37 (D614), 68.42 ± 14.53 en 8.86 ± 15.29 (D614G), en 71.66 ± 7.66 en 37.56 ± 16.14 (N501Y). Ons het ook gevra of die ekstrakte spykerbinding aan die ACE2-oppervlakreseptor van menslike selle kon vervang. Om dit te doen, het ons eers die selle met D614-, D614G- of N501Y-spykerproteïen geïnkubeer en toe met die ekstrakte. Soos getoon in Figuur 3D, kon T. officinale die piek effektief van die reseptor verwyder (gemiddeld 50 μg/L); sigorei was baie swakker (gemiddeld 25 μg/L). Ons het ons eksperimente uitgebrei na menslike A549-hACE2-TMPRSS2-selle en kon die resultate bevestig wat in HEK293-hACE2-selle vir T. officinale waargeneem is (Figuur 3D-G). Hierdie sellyn is stabiel getransfekteer met beide die menslike ACE2- en TMPRSS2-gene, en interessant genoeg was die C. intybus-ekstrak meer effektief in vergelyking met HEK-hACE2-selle. Na voorbehandeling van die ekstrak, het die inhibisie van spykerbinding aan selle gewissel van 73.5 ± 5.2 (D614) tot 86.3 ± 3.23 (N501Y) vir T. officinale-ekstrak en 56.1 ± 5.28 (D614) tot 63.07 ± 14.55 (N501Y) vir C. intybus-ekstrak. Selfs teen 0.6 mg/ml het T. officinale die binding aan die D614G-spykerproteïen beduidend geblokkeer met ongeveer 40 ± 3 (IC50 = 1.73 mg/ml). Toe selle voor die ekstrakbehandeling met die spykerproteïen voorgeïnkubeer is, was die resultate vir D614 en D614G vergelykbaar vir T. officinale-ekstrak, maar effens laer vir N501Y (Figuur 3C – D). 'n Mengsel van die spykermutante N501Y, K417N en E484K is ook in hierdie omgewing getoets, en ook hier het T. officinale-ekstrak binding met 82.97 ± 6.31 (ekstrak voor inkubasie) en 79.7 ± 9.15 (ekstrak na inkubasie) geblokkeer.

Inhibisie van binding van Spike D614 en sy mutante D614G, N501Y of mengsel (N501Y, K417N en E484K) aan menslike HEK293-hACE2 en A549-hACE2-TMPRSS2 selle deur ekstrak voor of na inkubasie.
Oorvleueling van die fluoresensie-intensiteitshistogram vir A) ongekleurde HEK-selle, kleuringskontrole (anti-His-etiket A647), en selle geïnkubeer met His-etiket-gemerkte Spike D614, D614G, of N501Y vir 1 uur by 4°C. B) Selle vooraf geïnkubeer met oplosmiddelkontrole (ad), 10 mg/ml T. officinale (TO), of 10 mg/ml C. intybus (CI) vir 30-60 s en dan behandel met His-etiket-gemerkte S1 Spike D614, D614G, of N501Y proteïen vir 1 uur sonder enige wasstap tussenin by 4°C. DG) Effek van ekstrakinkubasie op HEK- of A549-selle, hetsy voor of na inkubasie met His-gemerkte Spike D614, D614G, N501Y, of gemengde proteïen (N501Y, K417N, en E484K) by 37°C. H) Plantekstrakte is vir 30 minute by 37°C in speeksel van 4 menslike skenkers geïnkubeer. Daarna is die selle vir 60 sekondes by 37°C voorbehandel met 5 mg/ml ekstrakte voor inkubasie met His-gemerkte Spike D614-proteïen vir 0.5 uur by 37°C. Inhibisie van spike-binding aan menslike selle is beoordeel deur gebruik te maak van vloeisitometriese analise van selle gekleur met anti-His-merker Alexa Fluor 647-gekonjugeerde monoklonale teenliggaam. Stawe is gemiddeldes + SD.

Ekstrakte wat vir 30 minute by 37 °C in menslike speeksel geïnkubeer is voor selbehandeling, het vergelykbare effekte op Spike D614G-inhibisie gehad (Fig. 3H), wat dui op goeie stabiliteit van die bioaktiewe verbindings in speeksel.

Om te bepaal of T. officinale-ekstrak inmeng met die katalitiese aktiwiteit van die ACE2-reseptor of ACE2-proteïenuitdrukking beïnvloed, het ons A549-hACE2-TMPRSS2-selle vir 1-24 uur voor sellise en -opsporing met die ekstrak behandel. Na 84 uur se selblootstelling aan die ekstrak is geen verlies aan sel-lewensvatbaarheid waargeneem nie (Figuur 4A). Geen verswakking van ensiemaktiwiteit is na 1 of 24 uur waargeneem nie (Figuur 4B). Spike het ACE2-proteïen na 6 uur aansienlik afgereguleer (Figuur 4C, swart stawe), en dit was ook waar vir die ekstrak, hetsy alleen (Figuur 4C, wit stawe) of in kombinasie met Spike (swart stawe). Na 24 uur is hierdie effek afgeskaf (Figuur 4D).

Effek van T. officinale-ekstrak op ACE2-ensiemaktiwiteit en proteïenuitdrukking.
A) Die lewensvatbaarheid van A549-hACE2-TMPRSS2-selle is bepaal deur middel van trypanblouselkleuring na 84 uur se blootstelling aan die ekstrak. B) Selle is geïnkubeer met TO-ekstrak of 500 ng/ml S1-proteïen en geanaliseer vir ensiemaktiwiteit met behulp van 'n fluoresensie-kit. C) Selle is vir 6 uur of 24 uur blootgestel om te ekstraheer sonder (wit stawe) of met (swart stawe) 500 ng/ml S1-proteïen en geanaliseer vir ACE2-proteïenuitdrukking met behulp van 'n menslike ACE2 ELISA-kit; a. d.: oplosmiddelkontrole. Stawe is gemiddeldes + SD, N ≥ 3 onafhanklike eksperimente.

Met behulp van 'n SARS-CoV-2-spyk-pseudotype-lentivirus het ons toe ondersoek of die uittreksel virustoegang deur spykinhibisie kon blokkeer. Na voorbehandeling met die uittreksel is virustransduksie met ongeveer 85 µT verminder teen 20 mg/ml (Fig. 5A). Onder die verskillende behandelingsomstandighede is die luminessensie-sein wat deur virustransduksie gegenereer is, geïnhibeer met 70 ± 16.7 µT (A), 58 ± 9.6 µT (B) en 53 ± 8.1 µT (C) teen 10 mg/ml uittreksel. Hierdie inhibisie van virustransduksie deur die uittreksel is gepaard met 'n beduidende onderdrukking van die virus-geïnduseerde inflammatoriese reaksie, soos bepaal deur 'n verminderde afskeiding van die pro-inflammatoriese sitokien IL-6 in A549-hACE2-TMPRSS2-selle (Fig. 5D).

Virale transduksie-inhibisie van A549-hACE2-TMPRSS2-selle deur T. officinale-ekstrak.
Selle is getransduksieer met 2.5 µl SARS-CoV-2 Spike pseudotipeerde lentivirus (Luc reporter) vir 24 uur (A) na voorbehandeling met T. officinale (TO) uittreksel vir 0.5 uur, (B) 3 uur voor die byvoeging van TO, of (C) sonder uittreksel. Die medium is toe na vars medium verander, en die selle is vir nog 60 uur met die uittreksel geïnkubeer. Luminessensie is na 1 uur waargeneem. (-) Negatiewe kontrole: kaal lentivirale pseudovirion; (+) positiewe kontrole: vuurvlieg-lusiferase lentivirus. D) Analise van pro-inflammatoriese IL-6 sitokien-sekresie is uitgevoer na 24 uur van virustransduksie saam met uittreksel (links), na 24 uur + 60 uur na infeksie met uittreksel (middel), of na 60 uur na infeksie met uittreksel (regs) met behulp van gemultiplekseerde vloeisitometriese analise. Oplosmiddelkontrole: gedistilleerde water (ad). N ≥ 3 onafhanklike eksperimente.

bespreking

Die ontwikkeling van effektiewe voorkomings- en behandelingstrategieë vir SARS-CoV-2-infeksie is nog in sy vroeë stadiums. Alhoewel die eerste entstowwe nou markgoedkeuring ontvang het, bly daar uitdagings rakende verspreidingskwessies, volgehoue ​​doeltreffendheid en die risiko van herinfeksie (17, 18). Daaropvolgende infeksies kan egter milder wees as die aanvanklike een. Benewens inenting teen COVID-19, verteenwoordig die blokkering van die virus se toeganklikheid tot membraangebonde ACE2, die primêre reseptor vir toegang tot die SARS-CoV-2-teikensel, 'n alternatiewe strategie vir COVID-19-voorkoming. Verskillende benaderings bestaan ​​(19), maar elk van hierdie behandelingstrategieë bied natuurlik sy eie fundamentele en translasionele uitdagings wat oorkom moet word vir kliniese voordeel. Tegniese struikelblokke sluit in potensiaal buite die teiken, ACE2-onafhanklike effekte, stabiliteit of toksisiteit (19). Verbindings van natuurlike oorsprong kan hier 'n belangrike hulpbron wees, aangesien hulle oor die lang termyn beskryf is en baie as veilig beskou word. Terwyl in silico-docking-eksperimente verskeie algemene natuurlike produkte as ACE2-inhibeerders voorgestel het, is inhibisie van piekbinding aan ACE2 nog nie vir die meeste van hulle gedemonstreer nie, wat verklaar kan word deur 'n gebrek aan volledige dekking van die ACE2-bindingsresidue deur die verbindings (20). Vir glikirrisien, nobiletien en neohesperidien val ACE2-binding egter gedeeltelik binne die RBD-kontakgebied, en daarom is daar voorgestel dat hierdie addisioneel piekbinding aan ACE2 blokkeer (20). Dieselfde geld vir sintetiese ACE2-inhibeerders soos N-(2-aminoetiel)-1-asiridien-etaanamien (NAAE) (21). In teenstelling hiermee is die lipoglikopeptied-antibiotikum dalbavancin nou geïdentifiseer as beide 'n ACE2-binder en 'n SARS-CoV-2 piek ACE2-inhibeerder (22); SARS-CoV-2-infeksie is effektief deur hierdie verbinding in beide muis- en rhesusaapmodelle geïnhibeer. Blokkering van die spike-ACE2-interaksie is ook gedemonstreer vir 'n hidroalkoholiese granaatskil-ekstrak met 74 TNF-α, en vir sy hoofkomponente, punikalagien met 64 TNF-α, en ellagiensuur met 36 TNF-α. Deur 'n SARS-CoV-2 spike-pseudotypeerde lentivirusinfeksie van menslike nier-2 (HK-2) selle te gebruik, is virustoegang doeltreffend geblokkeer deur die skil-ekstrak (23). In die huidige studie het ons kragtige inhibisie van die ACE2 spike S1 RBD-proteïen deur T. officinale-ekstrakte gedemonstreer met behulp van 'n selvrye toets en hierdie bevinding bevestig deur doeltreffende inhibisie van ACE2-seloppervlakbinding in twee menslike sellyne te demonstreer. Ons het sterker binding van die D614G- en N501Y-variante aan die ACE2-oppervlakreseptor van menslike selle waargeneem, maar alle getoetste variante was sensitief vir bindingsinhibisie deur T. officinale, hetsy voor of na gebruik. Tot op hede dui verskeie studies daarop dat die D614G-viruslyn meer aansteeklik is as die D614-virus (24). Ook lei die teenwoordigheid van kenmerkende mutasies, soos N501Y van byvoorbeeld die sogenaamde VK-variant B.1.1.7, tot hoër infektiwiteit as die ouerstam, wat moontlik te wyte is aan 'n hoër bindingsaffiniteit tussen die spykerproteïen en ACE2 (25). Daarom kan ons bevindinge oor T. officinale-ekstrakte hier belangrik wees, aangesien nuwe potensieel kommerwekkende virusvariante sal na vore kom soos die pandemie vorder, wat ook die doeltreffendheid van sommige entstowwe kan verminder of tot verhoogde herinfeksiesyfers kan lei. Soos hierbo genoem, is een uitdaging in die ontwikkeling van produkte vir die profilakse van SARS-CoV-2-infeksie of om sistemiese virusverspreiding te vertraag, die selektiwiteit vir virusse met lae toksisiteit vir die gasheer. Vir huidige mediese aanduidings is geen gevalle van oordosis met T. officinale aangemeld nie (11, 13, 16). Die aanbevole dosis is 4–10 g (ongeveer 20–30 mg per ml warm water) tot 3 keer per dag (Kommissie E en ESCOP). Volgens inligting van die Europese Medisyne-agentskap (EMA) sluit kontraindikasies vir die gebruik van T. officinale hipersensitiwiteit vir die madeliefiefamilie (Asteraceae) of die aktiewe bestanddele daarvan, lewer- en galwesiektes, insluitend galwegobstruksie, galstene en cholangitis, of aktiewe gastroïntestinale ulkusse in (16). Die plant is 'n belangrike bron van kalium (26, 27) en daarom word waarskuwings gegee rakende die potensiële risiko van hiperkalemie. Gebruik by kinders onder 12 jaar, tydens swangerskap en tydens borsvoeding is nie vasgestel nie weens 'n gebrek aan of onvoldoende data.

Alhoewel ACE2-ensiemaktiwiteit nie deur T. officinale-ekstrak in die huidige studie beïnvloed is nie, was ACE2-proteïen tydelik afgereguleer in die ACE2-ooruitdrukkende longsellyn, wat verdere aandag in voortgesette studies regverdig. ACE2 is 'n belangrike sinkafhanklike monokarboksipeptidase in die renien-angiotensien seinweg, wat noodsaaklik is vir die effekte daarvan op die kardiovaskulêre en immuunstelsels. Ontwrigting van die angiotensien II/angiotensien (1-7) balans deur inhibisie van ACE2-ensiemaktiwiteit of proteïenuitputting en verhoogde sirkulerende angiotensien II in die stelsel word byvoorbeeld erken as 'n bevordering van longbesering wat verband hou met COVID-19-siekte (28, 29).

Daar word geglo dat die long die primêre teiken van belang is, maar ACE2 mRNA en proteïen-ekspressie is gevind in epiteelselle van alle mondweefsels, veral in die mondslymvlies, lip en tong (30). Hierdie data stem ooreen met die waarneming van baie hoë virusladings in speeksel in SARS-CoV-2-besmette pasiënte (31, 32). Die mondholte, as 'n noodsaaklike komponent van die boonste aërodigestiewe kanaal, word dus beskou as 'n sleutelrol in die oordrag en patogenisiteit van SARS-CoV-2. Daar is 'n hoë potensiaal dat die voorkoming van virale kolonisasie van die mond- en faringeale slymvlies van kritieke belang kan wees om verdere infeksie van ander organe en die uitbreek van COVID-19 te voorkom (33). Kommersiële virucidale mondspoelmiddels, hoofsaaklik povidoonjodium, is dus voorgestel om die SARS-CoV-2-viruslading in besmette individue moontlik te verminder (34-36), maar geen beduidende kliniese studies is tot op hede uitgevoer nie (36). Die blokkering van SARS-CoV-2-virusbinding aan orale selle met T. officinale-ekstrakte mag dalk slegs vir beperkte tydperke vir verbruikers verdraagsaam wees (bv. produktoediening na kontak met besmette individue of tydens infeksie). Verdere fisiologies relevante in vitro-eksperimente wat deur ons uitgevoer is, het getoon dat slegs kort kontaktye met T. officinale-ekstrak nodig was om SARS-CoV-2-piekbinding doeltreffend te blokkeer of om reeds gebonde spykers van die seloppervlak te verwyder. Verdere bewyse van relevansie is verskaf deur eksperimente met pseudotipeerde SARS-CoV-2-piekvirus. Alhoewel die gebruik van hierdie pseudotipeerde virusse nie toelaat om die bydrae van virionkenmerke soos membraan- of omhulselproteïene tot seltropisme te bepaal nie (37), word hulle beskou as 'n nuttige instrument om die relevansie van ACE2 tot seltoetredestappe wat deur die piekproteïen gemedieer word, te dokumenteer.

Alle ontwikkelde entstofkandidate poog om teenliggaam- (en T-sel-) reaksies teen die spykerproteïen te genereer, en spykersekwensies van die vroeë Wuhan-stam het hier as basis gedien (38). SARS-CoV-2 muteer egter voortdurend tydens deurlopende oordrag tussen mense. Virale antigeendrift word duidelik gedemonstreer deur die onlangse opkoms van B.1.1.7, B.1.351, of B.1.1.28 (P.1). Dit ontwikkel so dat dit moontlik ons bestaande terapeutiese en profilaktiese benaderings wat die virale spyker teiken, kan ontduik. Daarom moedig faktore soos lae toksisiteit by mense en die kragtige bindingsinhibisie van vyf relevante spykermutasies by die menslike ACE2-reseptor, soos hier in vitro gerapporteer, 'n meer diepgaande analise van die doeltreffendheid van T. officinales in SARS-CoV-2-voorkoming aan en vereis nou verdere bevestigende kliniese bewyse.

Materiaal en metodologie

Plantmateriaal

Die studie is uitgevoer met gedroogde blare van T. officinale (van Achterhof, Uplengen, Duitsland; bondelnommers 37259, B370244 en P351756). Die blare is op 12 Julie 2020 op drie verskillende plekke in die Freiburg im Breisgau-streek (Duitsland) versamel en positief getoets in die selvrye Spike S1-ACE2-bindingstoets (data nie getoon nie). C. intybus is van Naturideen (Duitsland) aangekoop.

Sellyne en kulture

Menslike embrioniese nier 293 (HEK293) selle wat stabiel hACE2 uitdruk, is ruimhartig verskaf deur Prof. Dr. Stefan Pöhlmann (Göttingen, Duitsland). Die selle is gehou in hoë-glukose Dulbecco se gemodifiseerde Eagle se medium (DMEM) aangevul met 10 μg fetale kalfserum (FCS), 100 U/ml penisillien/streptomisien, en 50 μg/ml Zeocin (Life Technologies, Darmstadt, Duitsland). Menslike A549-hACE2-TMPRSS2 selle, gegenereer uit die menslike long A549 sellyn, is aangekoop van InvivoGen SAS (Toulouse Cedex 4, Frankryk) en gehou in hoë-glukose DMEM aangevul met 10 U/ml hitte-geïnaktiveerde FCS, 100 U/ml penisillien/streptomisien, 100 µg/ml normosien, 0.5 µg/ml puromisien, en 300 µg/ml higromisien. Vir subkultuur is alle selle eers met fosfaatgebufferde soutoplossing (PBS) afgespoel en daarna met 0.25 U/ml tripsin-EDTA geïnkubeer totdat dit losgekom het. Alle selle is by 37°C in 'n bevogtigde inkubeerder met 5 U/ml CO2/95 U/ml lug gekweek.

Plantekstrakte

Gedroogde plantmateriaal is in 'n amberkleurige glasflessie (Carl Roth GmbH, Duitsland) geweeg en met HPLC-graad water (ad) by kamertemperatuur (RT) gemeng. Die ekstrakte is toe vir 1 uur geïnkubeer en teen 16 000 g (3 min, RT) gesentrifugeer. Die supernatant is gefiltreer (0,22 µm) voor gebruik in die eksperimente.

Analise van SARS-COV2-piek – ACE2-interaksie-inhibisie deur ELISA en vloeisitometrie

Vir die selvrye opsporing van SARS-CoV-2-piek – ACE2-interaksie-inhibisie, is 'n kommersieel beskikbare SARS-CoV-2-inhibeerder-siftingstel (Kat#: 16605302, Fisher Scientific GmbH, Schwerte, Duitsland) gebruik. Hierdie kolorimetriese ELISA-toets meet die binding tussen geïmmobiliseerde SARS-CoV-2-piekproteïen RBD en gebiotinileerde menslike ACE2-proteïen. Kolorimetriese opsporing word uitgevoer met behulp van streptavidien-HRP gevolg deur TMB-inkubasie. 'n SARS-CoV-2-inhibeerder (hACE2) het as 'n metodies geverifieerde verwysing gedien.

Seloppervlak-ekspressie van ACE2 is bepaal met behulp van 'n menslike ACE2 PE-gekonjugeerde teenliggaam (Bio-Techne GmbH, Wiesbaden-Nordenstadt, Duitsland) en vloeisitometriese analise. Om SARS-CoV-2 S1 Spike RBD-ACE2-binding te analiseer, is 2 x 105 selle (5 x 106 selle/ml) op verskillende tydspunte met plantekstrakte voorbehandel. Daarna is 500 ng/ml SARS-CoV-2 Spike S1 (Trenzyme GmbH, Konstanz, Duitsland), Spike S1 D614G, N50Y, of 'n mengsel van K417N, E484K, en N501Y (Sino Biological Europe GmbH, Eschborn, Duitsland) - die rekombinante proteïen - by elke monster gevoeg, en die monsters is verder vir 30-60 min geïnkubeer. In 'n ander omgewing is selle vir 30 minute met 500 ng/ml SARS-CoV-2 Spike-His rekombinante proteïen voor inkubasie met die plantekstrak vir 30-60 sekondes by 4°C of 37°C voorbehandel. Monsters is in PBS-buffer wat 5% FCS bevat, geïnkubeer. Selle is toe een keer met PBS-buffer wat 1% FCS bevat teen 500 × g vir 5 minute gewas voor kleuring met His-gemerkte A647 mAb (Bio-Techne GmbH, Wiesbaden-Nordenstadt, Duitsland) vir 30 minute by kamertemperatuur. Daarna is selle twee keer gewas soos hierbo beskryf. Selle is geanaliseer met behulp van 'n FACSCalibur (BD Biosciences, Heidelberg, Duitsland), en 10 000 gebeurtenisse is verkry. Die gemiddelde fluoresensie-intensiteit (MFI) van elke monster is bepaal met behulp van FlowJo-sagteware (Ashland, Oregon, VSA).

Menslike ACE2 ensiemaktiwiteit en proteïenkwantifisering

A549-hACE2-TMPRSS2 (2 × 105) selle is gesaai in 'n 24-put plaat in hoë-glukose DMEM medium wat 10% hitte-geïnaktiveerde FCS bevat by 37°C en 5% CO2. Die selle is toe behandel met T. officinale uittreksel met/sonder 500 ng/ml SARS-CoV-2 S1 Spike RBD proteïen vir 1-24 uur. Die selle is toe gewas met PBS en geliseer. 25 µg proteïen is gebruik om ACE2 proteïen te kwantifiseer (ACE2 ELISA Kit), en 5 µg vir ACE2 ensiemaktiwiteit (ACE2 Activity Assay Kit, Abcam, Cambridge, VK) volgens die vervaardiger se instruksies.

Infeksie van A549-hACE2-TMPRSS2-selle met die pseudotypiese lentivirus SARS-CoV-2

SARS-CoV-2 Spike pseudotipeerde lentivirusdeeltjies, wat met SARS-CoV-2 Spike (Genbank Accession #QHD43416.1) as omhulselglikoproteïene in plaas van die algemeen gebruikte VSV-G geproduseer is, is aangekoop van BPS Bioscience (katalogus #: 7994299, Biomol, Hamburg). Hierdie pseudovirione bevat ook die vuurvliegluciferase-geen wat deur 'n CMV-promotor aangedryf word. Dus kan piek-gemedieerde seltoetrede gekwantifiseer word via luciferase-verslaggeweraktiwiteit. Die kaal lentivirale pseudovirion (BPS Bioscience #79943), wat nie omhulselglikoproteïen-ekspressie het nie, is as 'n negatiewe kontrole gebruik. Vuurvliegluciferase-lentivirus (puromycin) van BPS Bioscience (katalogus 79692-P) is as 'n positiewe kontrole vir transduksie gebruik. Hierdie virusse druk konstitutief vuurvliegluciferase uit onder 'n CMV-promotor. Longselle is oornag teen 0.1 × 106 selle/cm2 in 96-putplate in DMEM gesaai wat 10 U/ml hitte-geïnaktiveerde FCS, 100 U/ml penisillien/streptomisien, 100 µg/ml normosien, 0.5 µg/ml puromisien en 300 µg/ml higromisien bevat. Die medium is vervang met DMEM + 10 μl hitte-geïnaktiveerde FCS, en die selle is met advertensie- of T. officinale-ekstrak geïnkubeer, óf 30 min voor óf 3 uur na die byvoeging van 2.5 μl lentivirusdeeltjies. Na 24 uur se virusdeeltjie-inkubasie is die medium verwyder deur met PBS te was, vars medium is bygevoeg, en die selle is vir 'n verdere 60 uur met advertensie- of T. officinale-ekstrak geïnkubeer. Luminessensie is binne 1 uur waargeneem met behulp van die BPS eenstap-lusiferase-reagens volgens die vervaardiger se protokol in 'n Tecan-multiplaatleser (Tecan Group Ltd, Crailsheim, Duitsland).

Kwantifisering van sitokienvrystelling met behulp van multiplekskraaltegniek

Kwantifisering van sitokienvrystelling deur middel van multiplekskraaltegniek. Na 24 uur van SARS-CoV-2-piek-pseudotypiese lentivirustransduksie en 60 uur na infeksie van A549-hACE2-TMPRSS2-selle, is supernatante versamel en by -80 °C gestoor tot analise vir sitokienafskeiding met behulp van die menslike MACSplex Cytokine 12-kit (Miltenyi Biotec GmbH, Bergisch Gladbach, Duitsland) volgens die vervaardiger se protokol.

Molekulêre gewigsfraksionering van plantekstrakte

Uittreksels van gedroogde plantblare is voorberei deur dubbelgedistilleerde water (5 ml) by plantmateriaal (500 mg elk) te voeg. Die monsters is vir 60 minute by kamertemperatuur (RT) in die donker geïnkubeer, gevolg deur sentrifugering by 16 000 g vir 3 minute. Die supernatante is versamel en membraanfiltreer (0,45 µm), wat die uittreksels opgelewer het. Aliquots is vir 48 uur gevriesdroog om hul gewigsgebaseerde opbrengs te bepaal. Die uittreksels is toe verder geskei in hoë molekulêre gewig (HMW) en lae molekulêre gewig (LMW) fraksies met behulp van 'n sentrifugasiebuis toegerus met 'n molekulêre gewig-afsnyfilterinsetsel (5 kDa, Sartorius Stedim Biotech, Göttingen, Duitsland). Elke HMW-fraksie is gesuiwer deur met 20 ml water te spoel, wat die HMW-fraksies en LMW-fraksies opgelewer het. Die fraksies is gevriesdroog, hul opbrengs is volgens gewig bepaal, en by -20°C gestoor tot gebruik.

Bepaling van sel-lewensvatbaarheid met behulp van trypanblou-kleuring

Bepaling van sel-lewensvatbaarheid met trypanblou-kleurstof. Sel-lewensvatbaarheid is bepaal deur die trypanblou-kleurstof-uitsluitingstoets te gebruik soos voorheen beskryf (Odongo et al., 2017). Kortliks, A549-hACE2-TMPRSS2-selle is vir 24 uur gekweek en toe vir 84 uur aan ekstrakte of die oplosmiddelkontrole (ad) blootgestel.

Statistiese analise

Die resultate is geanaliseer met behulp van GraphPad Prism 6.0 sagteware (La Jolla, Kalifornië, VSA). Data is aangebied as gemiddelde + SD. Statistiese betekenisvolheid is bepaal deur die eenrigting-ANOVA-toets met daaropvolgende Bonferroni-korreksie. P-waardes < 0.05 () is as statisties beduidend beskou en < 0.01 (*) as hoogs statisties beduidend beskou

Outeurbydraes

Studie-ontwerp en -konsepsie: EL; eksperimentele beplanning, data-insameling en data-analise: HTT, EL, NPKL; voorbereiding van ekstrakfraksies: CD, MG; skryf van die eerste konsep van die manuskrip: EL. Alle outeurs het kommentaar gelewer oor vorige weergawes van die manuskrip.

Erkennings

Die outeurs bedank prof. dr. Stefan Pöhlmann (Duitse Primaatsentrum, Göttingen, Duitsland) vir die verskaffing van menslike embrioniese nier 293 (HEK293) selle wat stabiel hACE2 uitdruk.

Bronne

1. 1.↵Lu R, et al. (2020) Genomiese karakterisering en epidemiologie van die nuwe koronavirus van 2019: implikasies vir virusoorsprong en reseptorbinding. Lancet 395(10224):565–574.CrossRefPubMedGoogle Scholar
2. 2.↵Paules CI, Marston HD, & Fauci AS (2020) Koronavirusinfeksies - Meer as net die gewone verkoue. JAMA 323(8):707–708.CrossRefPubMedGoogle Scholar
3. 3.↵Berlyn DA, Gulick RM, & Martinez FJ (2020) Ernstige Covid-19. N Engl J Med 383(25):2451–2460.CrossRefPubMedGoogle Scholar
4. 4.↵Huang Y, Yang C, Xu XF, Xu W, & Liu SW (2020) Strukturele en funksionele eienskappe van SARS-CoV-2-spykproteïen: potensiële ontwikkeling van antivirale middels vir COVID-19. Acta Pharmacol Sin 41(9):1141–1149.CrossRefPubMedGoogle Scholar
5. 5.↵Grubaugh ND, Hodcroft EB, Fauver JR, Phelan AL, & Cevik M (2021) Openbare gesondheidsaksies om nuwe SARS-CoV-2-variante te beheer. Sel.Google Scholar
6. 6.↵Zhou D, et al. (2021) Bewyse van ontsnapping van SARS-CoV-2 variant B.1.351 uit natuurlike en entstof-geïnduseerde sera. Sel.Google Scholar
7. 7.↵Becerra-Flores M & Cardozo T (2020) SARS-CoV-2 virale piek G614-mutasie toon hoër sterftesyfer. Internasionale tydskrif vir kliniese praktyk 74(8):e13525.Google Scholar
8. 8.↵Fratev F (2020) Die N501Y- en K417N-mutasies in die spykerproteïen van SARS-CoV-2 verander die interaksies met beide hACE2 en menslike teenliggaampies: 'n Vrye energie van versteuringsstudie. bioRxiv:2020.2012.2023.424283.Google Scholar
9. 9.↵Ho D, et al. (2021) Verhoogde weerstand van SARS-CoV-2-variante B.1.351 en B.1.1.7 teen teenliggaamneutralisering. Res Sq.Google Scholar
10. 10.↵Perrotta F, Matera MG, Cazzola M, & Bianco A (2020) Ernstige respiratoriese SARS-CoV2-infeksie: Maak die ACE2-reseptor saak? Respir Med 168:105996.CrossRefGoogle Scholar
11. 11.↵ESCOP (2003) “Taraxaci folium” en “Taraxaci radix”. Monografieë oor die Medisinale Gebruike van Plantgeneesmiddels. (Thieme, Stuttgart) tweede uitgawe, Red. pp. 499–504.Google Scholar
12. 12.↵Blumenthal M, Busse WR, Goldberg A, Gruenwald J, Hall T, Riggins CW, Rister RS. (reds.) “Paardebloemkruid” en “Paardebloemwortel met krui” In: Die Volledige Duitse Kommissie E Monografieë. Terapeutiese Gids tot Kruiemedisyne. Amerikaanse Botaniese Raad, Austin, Texas 1998; 118-120.13. Vereniging BHM (1990) “Paardebloemblaar” en “Paardebloemwortel”. Britse Kruiefarmakopee 1:37–39.Google Scholar
13. 14.↵Gonzalez-Castejon M, Visioli F, & Rodriguez-Casado A (2012) Diverse biologiese aktiwiteite van paardebloem. Nutr Rev 70(9):534–547.PubMedGoogle Scholar
14. 15.↵Schutz K, Carle R, & Schieber A (2006) Taraxacum – ’n oorsig van sy fitochemiese en farmakologiese profiel. J Ethnopharmacol 107(3):313–323.CrossRefPubMedWeb van WetenskapGoogle Scholar
15. 16.↵Europese Medisinale Agentskap (EMA) CoHMPH (2009) Evalueringsverslag oor Taraxacum officinale Weber ex Wigg., folium. HMPC/579634/2008.Google Scholar
16. 17.↵Aan KK, et al. (2020) COVID-19-herinfeksie deur 'n filogeneties duidelike SARS-coronavirus-2-stam bevestig deur heelgenoomvolgordebepaling. Clin Infect Dis. 25 Aug:ciaa1275. doi: 10.1093/cid/ciaa1275.CrossRefPubMedGoogle Scholar
17. 18.↵Edridge AWD, et al. (2020) Koronavirusbeskermende immuniteit is van korte duur. medRxiv:2020.2005.2011.20086439.Google Scholar
18. 19.↵Jia H, Neptune E, & Cui H (2020) Teikenstelling van ACE2 vir COVID-19-terapie: Geleenthede en uitdagings. Amerikaanse tydskrif vir respiratoriese sel- en molekulêre biologie. 9 Desember. doi: 10.1165/rcmb.2020-0322PS.CrossRefGoogle Scholar
19. 20.↵Zhou J & Huang J (2020) Huidige bevindinge rakende natuurlike komponente met potensiële anti-2019-nCoV-aktiwiteit. Frontiers in Cell and Developmental Biology 8:589.Google Scholar
20. 21.↵Huentelman MJ, et al. (2004) Struktuurgebaseerde ontdekking van 'n nuwe angiotensien-omskakelende ensiem 2-inhibeerder. Hypertension 44(6):903–906.CrossRefGoogle Scholar
21. 22.↵Wang G, et al. (2021) Dalbavancin bind ACE2 om die interaksie daarvan met SARS-CoV-2-piekproteïen te blokkeer en is effektief in die inhibering van SARS-CoV-2-infeksie in diermodelle. Cell Res 31(1):17–24.Google Scholar
22. 23.↵Tito A, et al. (2020) 'n Granaatskil-ekstrak as inhibeerder van SARS-CoV-2-spikebinding aan menslike ACE2: 'n belowende bron van nuwe antivirale middels. bioRxiv:2020.2012.2001.406116.Google Scholar
23. 24.↵Korber B, et al. (2020) Opsporing van veranderinge in SARS-CoV-2-piek: Bewyse dat D614G die infektiwiteit van die COVID-19-virus verhoog. Sel 182(4):812–827 e819.CrossRefPubMedGoogle Scholar
24. 25.↵Santos JC & Passos GA (2021) Die hoë infektiwiteit van SARS-CoV-2 B.1.1.7 word geassosieer met verhoogde interaksiekrag tussen Spike-ACE2 wat veroorsaak word deur die virale N501Y-mutasie. bioRxiv:2020.2012.2029.424708.Google Scholar
25. 26.↵Hook I, McGee A, & Henman M (1993) Evaluering van Paardebloem vir Diuretiese Aktiwiteit en Variasie in Kaliuminhoud. Internasionale Tydskrif vir Farmakognosie 31(1):29–34.Google Scholar
26. 27.↵Escudero NL, De Arellano ML, Fernández S, Albarracín G, & Mucciarelli S (2003) Taraxacum officinale as 'n voedselbron. Plantaardige voedsel vir menslike voeding 58(3):1–10.PubMedWeb van WetenskapGoogle Scholar
27. 28.↵Imai Y, et al. (2005) Angiotensien-omskakelende ensiem 2 beskerm teen ernstige akute longversaking. Nature 436(7047):112–116.CrossRefPubMedWeb van WetenskapGoogle Scholar
28. 29.↵Kuba K, et al. (2005) 'n Belangrike rol van angiotensien-omskakelende ensiem 2 (ACE2) in SARS-koronavirus-geïnduseerde longbesering. Nat Med 11(8):875–879.CrossRefPubMedWeb van WetenskapGoogle Scholar
29. 30.↵Zhong M, et al. (2020) ACE2- en Furin-ekspressies in orale epiteelselle fasiliteer moontlik COVID-19-infeksie via respiratoriese en fekaal-orale roetes. Front Med (Lausanne) 7:580796.Google Scholar
30. 31.↵ Aan KK-W, et al. (2020) Konsekwente Opsporing van 2019 Nuwe Koronavirus in Speeksel. Kliniese aansteeklike siektes: 'n amptelike publikasie van die Infectious Diseases Society of America 71(15):841–843.CrossRefPubMedGoogle Scholar
31. 32.↵Yoon JG, et al. (2020) Kliniese Betekenis van 'n Hoë SARS-CoV-2 Virale Lading in die Speeksel. J Korean Med Sci 35(20):e195–e195.CrossRefGoogle Scholar
32. 33.↵Wolfel R, et al. (2020) Virologiese assessering van gehospitaliseerde pasiënte met COVID-2019. Nature 581(7809):465–469.CrossRefPubMedGoogle Scholar
33. 34.↵Seneviratne CJ, et al. (2020) Doeltreffendheid van kommersiële mondspoelmiddels op SARS-CoV-2 virale lading in speeksel: gerandomiseerde beheerde proefneming in Singapoer. Infeksie: 1–7.Google Scholar
34. 35.↵ de Toledo Telles-Araujo G, Caminha RDG, Kallas MS, Sipahi AM, & da Silva Santos PS (2020) Potensiële mondspoelmiddels en neussproeie wat die virale lading van SARS-CoV-2 verminder: Wat weet ons tot dusver? Klinieke (Sao Paulo) 75:e2328.Google Scholar
35. 36. Carrouel F, et al. (2021) Antivirale aktiwiteit van reagense in mondspoelmiddels teen SARS-CoV-2. Tydskrif vir tandheelkundige navorsing 100(2):124–132.Google Scholar
36. 37.↵Joglekar AV & Sandoval S (2017) Pseudo-getipeerde Lentivirale Vektore: Een Vektor, Baie Gedaante. Hum Gene Ther Methods 28(6):291–301.CrossRefGoogle Scholar
37. 38.↵Krammer F (2020) SARS-CoV-2-entstowwe in ontwikkeling. Nature 586(7830):516–527.CrossRefPubMedGoogle Scholar

Raad van Europa – Resolusie 2361 (2021) – Geen verpligte inenting nie

Titel: Covid-19-entstowwe: etiese, wetlike en praktiese oorwegings

In hierdie resolusie kan u onder 7.1.1 lees “verseker hoëgehalte-proewe wat deeglik is en op 'n etiese wyse uitgevoer word in ooreenstemming met die relevante bepalings van die Konvensie vir die Beskerming van Menseregte en Waardigheid van die Mens met betrekking tot die Toepassing van Biologie en Geneeskunde: Konvensie oor Menseregte en Biogeneeskunde (ETS No. 164, Oviedo-konvensie) en sy Addisionele Protokol rakende Biomediese Navorsing (CETS No. 195), en wat toenemend kinders, swanger vroue en borsvoedende moeders insluit;”.

Artikel 7.1.1 vereis dat hoëgehalte- en eties gesonde studies verseker word in ooreenstemming met die relevante bepalings van die Konvensie vir die Beskerming van Menseregte en Waardigheid van die Mens met betrekking tot die toepassing van biologie en medisyne, in ooreenstemming met die Konvensie vir die Beskerming van Menseregte en Biogeneeskunde (ETS Nr. 164, Oviedo-konvensie (Skakel) – PDF) en die Addisionele Protokol oor Biomediese Navorsing (ETS Nr. 195 (Skakel) – PDF), wat kinders, swanger vroue en moeders wat borsvoed insluit.

Die Oviedo-ooreenkoms CETS 164 (ETS 1164) van 4 April 1997 vereis in Hoofstuk IV, Artikel 13, – “Intervensies op die menslike genoom – 'n Intervensie wat daarop gemik is om die menslike genoom te wysig, mag slegs vir voorkomende,
diagnostiese of terapeutiese doeleindes en slegs indien die doel daarvan nie is om enige verandering in die genoom van enige afstammelinge aan te bring nie.”

Hier word dit duidelik gedefinieer dat 'n intervensie om die menslike genoom te verander slegs vir voorkomende,
diagnostiese of terapeutiese doeleindes en slegs indien dit nie daarop gemik is om die genoom van die nageslag te wysig nie.

Artikel 13 – Intervensies op die menslike genoom
'n Intervensie wat die menslike genoom wil wysig, mag slegs vir voorkomende,
diagnostiese of terapeutiese doeleindes en slegs indien die doel daarvan nie is om enige wysiging in te bring nie
die genoom van enige afstammelinge.

Punt 7.3.1 sê “verseker dat burgers ingelig word dat die inenting nie verpligtend is nie en dat niemand onder politieke, sosiale of ander druk verkeer om ingeënt te word as hulle dit nie wil doen nie”.

Met ander woorde, dit is bedoel om te verseker dat burgers ingelig word dat inenting NIE verpligtend is nie en dat niemand polities, sosiaal of andersins onder druk geplaas word om ingeënt te word as hulle dit nie wil doen nie.

Punt 7.5.1 wys daarop dat "onafhanklike entstofvergoedingsprogramme ingestel moet word om vergoeding vir onnodige skade en nadeel as gevolg van inenting te verseker;" onafhanklike vergoedingsprogramme moet ingestel word waaruit vergoeding betaal moet word vir onnodige entstofskade en -skade as gevolg van inenting.

Punt 7.5.2 bepaal “gebruik inentingsertifikate slegs vir die aangewese doel om entstofdoeltreffendheid, potensiële newe-effekte en nadelige gebeurtenisse te monitor;”

Inentingsertifikate is uitsluitlik bedoel om die doeltreffendheid van entstowwe, sowel as hul newe-effekte en nadelige gebeurtenisse, te monitor.

Daarbenewens is die ander inhoud ook die moeite werd om te lees en aandag aan te skenk.

Portugal – 0.9 Covid-19-sterftes in plaas van die amptelike 17 000

Danksy 'n petisie van die Portugese bevolking moes die hof in Portugal die vraag hanteer oor hoeveel mense as Covid-19-sterftes geregistreer is en amptelik op ongeveer geraam is. 17.000 was eintlik dood aan Covid-19.

Die hof het getuienis aangehoor en tot die gevolgtrekking gekom Uitspraak van 19 Mei 2021, het bevind dat slegs 152 mense aan Covid-19 gesterf het.

Volgens die gewone interpretasie moet elke oorledene wat binne die laaste 28 dae 'n positiewe PCR-toets gehad het of as 'n kontakpersoon geregistreer was, as 'n Covid-19-sterfte getel word.

Op 11 November 2020 het die appèlhof van Lissabon reeds die regsgeding teen die kwarantynmaatreëls wat op grond van PCR-toetsresultate ingestel is, behandel. In 'n uitspraak van 34 bladsye het dit Uitspraak, gebaseer op verskeie wetenskaplike bronne, rakende die twyfelagtige geldigheid van die PCR-toetsprosedure, is die kwarantynbevel opgehef.

Rapporteringsentrum vir die ondersoek van sterftes na CORONA-inenting 

Die Unie Dokters en Wetenskaplikes vir Gesondheid, Vryheid en Demokrasie bied 'n wye reeks inligting, wenke en voorstelle oor die outopsie van oorledenes na korona-inenting op sy webwerf. Die volgende is ook hier beskikbaar vir aflaai: PDF Daar word uitdruklik gestel dat die outopsie uitgevoer is in ooreenstemming met die aanbevelings van

Prof. Dr. Arne Burkhardt
Patologie Laboratorium Reutlingen
Bo-Waters 3-7
72764 Reutlingen

uitgevoer moet word.

Die vereniging se raad bestaan uit prof. dr. Sucharit Bhakdi, spesialis in mikrobiologie en epidemiologie van aansteeklike siektes, emeritus professor aan die Johannes Gutenberg Universiteit Mainz, hoof van die Instituut vir Mediese Mikrobiologie en Higiëne daar van 1991 tot 2012; dr. Ronald Weikl, ginekoloog; prof. dr. Stefan Homburg, professor in openbare finansies aan die Leibniz Universiteit Hannover; en Daniela Folkinger, sielkundige berader en dosent aan Thurmansbang.

Osteopatie en Korona-inenting

Jens Oskamp*, 'n osteopaat in Keulen, het die volgende pasiëntinligting geskryf, wat verwys na die risiko's van vektor- en mRNA-entstowwe in verband met osteopatiese behandeling en dus ingeënte persone oorsaaklik uitsluit.

„Ek is jammer om u mee te deel dat ek nie mense kan behandel wat sogenaamde mRNA- en vektor-entstowwe teen SARS-CoV-2 ontvang het nie. Anders as tradisionele inentings, behels dit genetiese manipulasiemetodes wat die liggaam se eie selle manipuleer om self dele van 'n virus te produseer, met die doel om 'n immuunrespons te veroorsaak. Hierdie "entstowwe" is slegs vir noodgebruik goedgekeur. Kruisreaksies met ander medikasie en terapieë is min of glad nie nagevors nie. (Video – Prof. Dr. Hockertz, 2020)

Die volgende probleme ontstaan tydens osteopatiese behandelings:

Dit is nog nie duidelik watter areas van die liggaam deur trombose geraak word nie. Die bekende newe-effek van serebrale veneuse trombose kom voor omdat bloed relatief stadig in hierdie area van die liggaam vloei (Chen et al. 2021Stadig vloeiende bloed kom ook in ander dele van die liggaam voor. Bloedklonte kan ook daar vorm.Kadkhoda, 2021Byvoorbeeld, as osteopatiese tegnieke die deurlaatbaarheid van die bloedvate in die veneuse stelsel van die bene verhoog, kan voorheen gevormde trombi losbreek, wat in die ergste geval tot pulmonale embolie kan lei. Trombusvorming vind dikwels sonder simptome plaas.

Verder kan dit nie uitgesluit word dat verdere onbeheerde immuunreaksies kan voorkom sodra patogene tydens osteopatiese behandeling uit die weefsel vrygestel word nie. Normaalweg kan die immuunstelsel hierdie reaksies maklik hanteer. 'n Oorreaktiewe immuunstelsel kan egter tot ernstige komplikasies lei en die liggaam se eie weefsel vernietig (Vojdania en Kharrazianb, 2020), (Talotta, 2021).

'n Goeie osteopatiese behandeling verwyder blokkasies in die limfstelsel. As gevolg van mRNA-manipulasie word 'n onnatuurlike hoeveelheid spesifieke teenliggaampies egter daar neergelê (Kamer 2020). Dit kan nie uitgesluit word dat beduidende reaksies kan voorkom nie (Hotez et al. 2020) sodra hierdie weefsels tydens osteopatiese behandeling verander. Die senuweestelsel kan ook aangetas word, soos in gevalle van gesigverlamming (Shemer et al. 2021),(Renould et al., 2021) of oogprobleme as gevolg van Papille-opeenhoping (Duitse Oftalmologiese Vereniging, 2021)) wys.

Verdere probleme ontstaan as gevolg van die nanopartikels wat in mRNA-entstowwe gebruik word (Chen et al. 2021). Hulle lei onder andere tot vakuolisering (in wese edeemvorming op sellulêre vlak) van sekere weefseltipes, veral die lewer. Dit is 'n teken dat die ooreenstemmende selle dood is as gevolg van reaksies met nanopartikels (Video – Dr. Vanessa Schmidt-Krüger, 2021*). Ook hier is dit nie duidelik wat gebeur wanneer osteopatiese tegnieke veroorsaak dat die vloeistof van hierdie "edeems" of die dooie weefsel die bloedstroom binnedring nie.

*Plaaslike aflaaiskakels na die video's van Dr. Vanessa Schmidt-Krüger is hier (Video 1_2) en hier (Video 2_2) beskikbaar.

Indien u reeds genetiese modifikasies deur die mRNA/vektor-entstowwe ondergaan het, moet asseblief nie u afsprake met my herskeduleer tot ten minste 10 maande na hierdie prosedures nie. Ons sal dan bespreek watter laboratoriumtoetse en beeldprosedures nodig is om komplikasies uit te sluit.bv. ondersoek vir papilledeem – Duitse Oftalmologiese Vereniging, 2021)
Veelvuldige inspuitings verhoog die intensiteit en waarskynlikheid van die bogenoemde effekte. Daarom behou ek die reg voor om behandeling te weier, selfs na 'n tydperk van 10 maande.

'n Sterk immuunstelsel as alternatief vir inenting vereis kennis! Ek beveel die volgende videomateriaal aan:

• Dr. rer. nat. Markus Stark – Versterking van die immuunstelsel en verdediging
• Dr. med. Mathias Rath – Beëindig die huidige pandemie – voorkom toekomstige pandemies!
• Prof. Dr. Jörg Spitz – Vitamien D – Hype of Hoop„

• Jens Oskamp se webwerf (word tans opgedateer)*

Wysiging van die Wet op Infeksiebeskerming en die Basiese Wet

Met die resolusie wat op 22 Junie 2021 deur die Duitse Bundestag gepubliseer is Gedrukte materiaal 19/30938 word vir die 23.07.2023 die BEPERKING van die reg op fisiese integriteit, wat voorheen deur die grondwet gewaarborg was, word aangekondig!

' Artikel 9
Wysiging van die Wet op Infeksiebeskerming
Artikel 36 paragraaf 12 van die Wet op Infeksiebeskerming van 20 Julie 2000 (Federale Wetskoerant).
I bl. 1045), laas gewysig deur Artikel 1 van die Wet van 28 Mei 2021
(Federale Regskoerant I bl. 1174) word soos volg gewysig:
“(12) 'n Besluit geneem ingevolge paragraaf 8, sin 1 of paragraaf 10, sin 1
Die uitgevaardigde regulasie tree in werking uiterlik een jaar na die herroeping van die
Bepaling van die epidemiese situasie van nasionale belang deur die
Duitse Bundestag ingevolge Artikel 5 Paragraaf 1 Sin 2. Totdat dit
'n Regsbevel wat op grond van paragraaf 8, sin 1, of paragraaf 10, sin 1, uitgereik is, kan gewysig word selfs nadat die epidemiese situasie van nasionale belang opgehef is.

Artikel 10
Beperking van fundamentele regte
Deur Artikel 9 die fundamentele regte van fisiese integriteit (Artikel 2 paragraaf 2 sin 1 van die Basiese Wet), die vryheid van die persoon
(Artikel 2 paragraaf 2 sin 2 van die Basiese Wet), vryheid van beweging (Artikel 11
Paragraaf 1 van die Basiese Wet) en die onskendbaarheid van die woning (Artikel 13 Paragraaf 1 van die Basiese Wet) beperk.

7. Die huidige Artikel 9 word Artikel 11 en paragraaf 2 word soos volg bewoord:
(2) ‘Artikels 1, 2, 6, 7(1), (2) en (4) en Artikel 8 tree in werking op Julie 2023.’

Evaluering van 109 studies oor die dra van maskers

Op 20 April 2021, 'n evaluering van 109 studies oor gesondheidsaspekte van die dra van maskers gedurende pandemietye in Internasionale Tydskrif vir Omgewingsnavorsing en Openbare Gesondheid gepubliseer, die hier as PDF in die oorspronklike (Engels) en hier is beskikbaar vir aflaai in die Duitse weergawe.

Die navorsers het tot 'n resultaat gekom wat hulle self nie as moontlik geag het met hierdie vlak van skade nie.

Benewens die negatiewe effekte wat reeds bekend is, moet die masker-geïnduseerde moegheidsindroom (MIES) uitgelig word.

Effekte van MIES kan insluit verswakte konsentrasie, denke en spraak, sowel as verlaagde hartklop en asemhalingstempo en diepte van asemhaling, wat weer skade aan bloedvate en kransslagare kan veroorsaak, wat lei tot neurologiese en hartsiektes. Langtermyn-effekte is steeds die onderwerp van voortgesette navorsing.

WGO – Verandering in inentingsaanbevelings vir kinders

In die Weergawe Die aanbeveling van 3 Junie 2021 was om kinders tans nie in te ent nie, aangesien daar nog geen betroubare bewyse is om die inenting van kinders teen COVID-19 te ondersteun nie, veral omdat hulle, soos adolessente, oor die algemeen milder verloop van die siekte ervaar as volwassenes. Die gewone aanbevole inentings vir kinders moet voortduur.

In die huidige weergawe, gepubliseer op 20 Junie 2021, is die bogenoemde gedeelte gewysig sodat, alhoewel daar verwys word na die ligter verloop van die siekte en inenting nie noodwendig uitgevoer hoef te word solank die kinders nie deel van 'n risikogroep is nie, meer inligting steeds nodig is om 'n algemene inentingsaanbeveling te maak.
Nietemin word die Pfizer BioNTech-entstof gedefinieer as geskik vir kinders ouer as 12 jaar. Kinders tussen 12 en 15 jaar wat lede van hoërisikogroepe is, sal ook hierdie entstof aangebied word, saam met ander prioriteitsgroepe.
Soos in die ou weergawe, word daarop gewys dat daar nog nie voldoende data van proewe met kinders is nie. Sodra verdere bevindinge beskikbaar word, sal toepaslike aanbevelings uitgereik word.

Veranderde gedeeltes word in geel in die bogenoemde dokumente uitgelig.

Hard Besluit van die STIKO oor die 6de opdatering van die COVID-19-inentingsaanbeveling en die gepaardgaande wetenskaplike regverdiging in Epidemiologiese Bulletin 23/2021 Dit word aanbeveel (in ooreenstemming met huidige WGO-aanbevelings) dat "kinders en adolessente met voorafbestaande mediese toestande ingeënt word met die mRNA-entstof Comirnaty (BioNTech/Pfizer) as gevolg van 'n veronderstelde verhoogde risiko van 'n ernstige verloop van COVID-19-siekte." "Die gebruik van Comirnaty by kinders en adolessente van 12-17 jaar sonder voorafbestaande mediese toestande word tans nie algemeen aanbeveel nie, maar is moontlik na mediese advies en met individuele begeerte en risiko-aanvaarding."

PEI – Veiligheidsverslag

Vanaf 10 Junie 2021

Die PEI (Paul Ehrlich Instituut), 'n federale agentskap van die Ministerie van Gesondheid wat gebonde is aan riglyne, publiseer elke paar weke sogenaamde veiligheidsverslae rakende die entstowwe wat gebruik word en hul newe-effekte.

Die RKI (Robert Koch Instituut), 'n onafhanklike federale owerheid gebonde aan instruksies binne die betekenis van Artikel 87, paragraaf 3, sin 1 van die GrondwetDit huisves "verskeie wetenskaplike kommissies, soos die Staande Komitee oor Inenting, wat inentingsaanbevelings ontwikkel. Dit is ook verantwoordelik vir die inhoudverwerking en koördinering van federale gesondheidsverslaggewing en vir die goedkeuring van die invoer en gebruik van menslike embrioniese stamselle."

Opsomming van gevalle:

Verdere inligting oor hierdie owerhede kan gevind word op die Federale Ministerie van Gesondheid.

Die Amerikaanse databasis VAERS gee die volgende syfers vir die VSA:

Ter vergelyking, sedert inentings teen difterie, masels, pampoentjies, rubella, polio en tetanus begin het, is 4 050 mense in die Verenigde State oorlede. Die eerste difterie-entstof is in 1936 in Duitsland goedgekeur, die maselsentstof in die Verenigde State in 1963, die pampoentjies- en rubella-entstof in 1969, die polio-entstof in 1955 en die tetanus-entstof in 1930.

Dit wil sê, die regering het aangewys "veilig" en "hoogs effektief" Die verklaarde Covid-19-entstowwe, gebaseer op die data wat in die VSA beskikbaar is, het 150% van hierdie sterftes binne ses maande(!) gegenereer, iets wat al die bogenoemde inentings saam nie in ses tot agt dekades bereik het nie!

Doeltreffendheid van Covid-19-entstowwe

Vanaf 1 Junie 2021 stel die RKI in sy FAQ rakende mRNA-entstowwe die volgende: "Hoe lank die entstofbeskerming duur, is tans onbekend. Beskerming begin nie onmiddellik na inenting nie, en sommige ingeënte mense bly onbeskermd."

Wat vektorgebaseerde entstowwe betref, word gerapporteer: "Hoe lank die entstofbeskerming duur, is tans onbekend. Beskerming begin nie onmiddellik na inenting nie, en sommige ingeënte mense bly onbeskermd."

Dit laat die vraag ontstaan oor die mate waarin die "nadelige newe-effekte" en "sterftes" wat in die veiligheidsverslae van die PEI of ander databasisse aangeteken is, geregverdig kan word indien openlik erken word dat nóg onmiddellike beskerming nóg beskerming na veelvuldige inentings verskaf word nie en dat geen inligting beskikbaar is oor die duur van enige moontlike beskerming nie.

Geargiveerde plasings:

Gereelde vrae – Korona-toetse

Plasing vanaf 31 Maart 2021 08:43

Toetsing is deesdae 'n byna daaglikse gebeurtenis. Dit laat dikwels die vraag ontstaan oor wat elke toets toets, hoe en met watter vlak van betekenis. Hieronder is 'n lys van beskikbare toetsprosedures en kenmerke:

PCR-toets

... word gebruik om SARS-CoV-2 RNA op te spoor, d.w.s. dele van die genetiese materiaal van die Covid-19-virus, maar nie om die aktiewe, d.w.s. reproduceerbare virus, op te spoor nie.

Vir opsporing deur 'n spesifieke fluoresensielyn is amplifikasie van die genetiese materiaal wat in die monster voorkom, nodig. Die frekwensie van hierdie amplifikasiesiklusse word uitgedruk deur die sogenaamde Ct-waarde (siklusdrempelwaarde).

Ideaal gesproke word hierdie Ct-waarde op die laboratoriumverslag gedokumenteer.

'n Positiewe PCR-toets met 'n Ct-waarde van 30 .. 35 dui op 'n lae viruslading, terwyl 'n Ct-waarde > 35 'n baie lae viruslading aandui.

'n Ct-waarde van 25 dui byvoorbeeld op 'n beduidende viruslading. (Bron: PCR-toets – Ct-waarde-relevansie)

Aangesien die Ct-waardes egter in die praktyk nie deur die verskillende laboratoriums gedokumenteer of gestandaardiseer word nie, sommige werk met Ct-waardes van 40 of hoër (tot 50), is PCR-toetsresultate nie vergelykbaar of betekenisvol nie. Die risiko van vals-positiewe toetsresultate neem toe met toenemende Ct-waardes, met al die negatiewe gevolge, soos Die Lancet gerapporteer in verband met 'n Britse ondersoek.

Dit is nie verniet dat die aanbevelings van die WHO 'n PCR-toetsresultaat moet altyd geëvalueer word in die konteks van bestaande siektesimptome en kliniese diagnostiek.

Antigeentoets

...is bedoel om 'n akute infeksie (proteïenstrukture van die koronavirus) op te spoor, maar vereis 'n hoë viruslading. Daarom is bevestiging deur 'n daaropvolgende PCR-toets (met 'n lae Ct-waarde) nodig.

'n Lys van voertuie met spesiale goedkeuring in Duitsland (Vervaldatum middel Mei 2021) antigeentoetse wat op die mark geplaas word, kan gevind word op die webwerf van die "Federale Instituut vir Geneesmiddels en Mediese Toestelle (BfArM)" by BfArM – Antigeentoetse met spesiale goedkeuring.

Die toets kan vals-positiewe resultate lewer indien die toetstoerusting onder die aanbevole bergingstemperatuur gestoor is en dan gebruik word.

Teenliggaamtoets (bloedmonster – ELISA-toets / vinnige toets)

... spesifieke teenliggaampies opspoor wat deur die organisme geproduseer word in reaksie op die koronavirus.
Dit is irrelevant of die immuunrespons (vorming van die opgespoorde teenliggaampies) plaasgevind het as gevolg van 'n vorige infeksie met Covid-19 of 'n inenting teen Covid-19.

Onderhoud met Dr. Greiner, Laboratoriumdiagnostiek, Wene

Covid-19 – Wat teenliggaampies jou kan vertel.

Covid-19 uitroei?

Plasing vanaf 31 Maart 2021 09:06

Is dit moontlik om 'n virus uit te roei?

– Hoe lank het dit geneem voordat die maselsvirus (gedeeltelik) “verslaaf” was?

Die eerste maselsentstof, wat 'n geïnaktiveerde gesplete entstof gebruik het, is in 1963 in die VSA goedgekeur en word voortdurend ontwikkel. Byna 60 jaar later is masels egter steeds nie uitgeroei nie (bron: Maselsvirus).

– Hoe lank het dit geneem om die poliovirus uit te roei?

Die eerste polio-inenting met 'n geïnaktiveerde virus is in 1955 uitgevoer (bron: Polio-inenting) is goedgekeur, 'n tweede het in 1960 gevolg. In 2015, 60 jaar later(!), het die WGO polio as uitgeroei verklaar.

En vandag word geglo dat entstowwe wat in net 'n paar maande ontwikkel is, wat nuwe vektor- of mRNA-tegnologieë gebruik wat nie suksesvol op diere of op mense getoets is met behulp van konvensionele Fase I tot III-studies nie, waarvoor geen inligting beskikbaar is oor hul newe-effekte en langtermyn newe-effekte nie, en waarvoor die produkte slegs onder noodmagtiging bemark is, 'n feit wat nie in die toestemmingsvorms genoem word nie, in staat is om 'n virus te verslaan of selfs uit te roei – en dit alles binne net 'n paar maande?!

Soortgelyk aan die polio/maselsvirusse, kan aanvaar word dat Covid-19 nie minder nie as twee generasies sal neem om uitgeroei te word, of ten minste onder beheer te bring.

Wil ons voortgaan om inperkings, verpligte inentings (selfs indirek), kwarantyn, isolasie, verpligte maskers, ens. in te stel, tot en met die digitale inentingsertifikaat?!

Die enigste gewaarborgde effektiewe manier om die virus uit te roei, bly óf 'n byna 60 jaar lange inperking óf die verwydering van die virus se gasheer, d.w.s. die uitroeiing van elke mens. Dit sou ook die virus se oorlewing uitskakel.

Terloops: dit verklaar ook waarom 'n virus altyd daarna streef om nie sy gasheer dood te maak nie, sodat hy kan voortplant. Mutasies sal dus altyd daarna streef om optimaal voort te plant, maar nie gevaarliker vir hul gasheer te word nie. Dat virusse steeds dodelik kan wees vir mense – diegene met voorafbestaande toestande – is onbetwisbaar.

Hoe kan mens die regering se heen-en-weer-gesprekke verstaan?

Plasing vanaf 03 April 2021 22:11

Voordat ons probeer om hierdie vraag te beantwoord om een van die moontlike antwoorde uit te werk, is dit nuttig om onsself in die jaar 2012 voor te stel.

In 2012 het die Duitse Bundestag 'n "Risiko-analise in Burgerlike Beskerming" opdrag gegee, waarvan die verslag op 03.01.2013 gepubliseer is in die vorm van 'n gedrukte saak 17/12051, wat beskikbaar is onder Risiko-analiseverslag – Dokument 17/12051 gedateer 03.01.2013 is beskikbaar en aflaaibaar as 'n PDF.

In Hoofstuk 2.3 op bladsy 5 vind u die onderwerp “Risiko-analise “Pandemie veroorsaak deur die Modi-SARS-virus”.

Dit is gevolg deur 'n 17-bladsy dokument geklassifiseer as "geklassifiseer slegs vir amptelike gebruik" getiteld "Hoe ons COVID-19 onder beheer kan kry", wat steeds op 20 Mei 2020 op die webwerf van die Federale Ministerie van Binnelandse Sake beskikbaar was. Hoe ons COVID-19 onder beheer kan kry Dit is nie meer daar toeganklik nie, maar via hierdie rugsteunskakel Geklassifiseerde COVID-19-toneeldokument van die Federale Ministerie van Binnelandse Sake.

Alle vorige, huidige en toekomstige optrede van die Federale Regering in verband met COVID-19 is hieruit afgelei.

Die regering se huidige pogings om alle stroomop-instellings se invloed op die Kanselier se besluite geleidelik te beperk, hulle uit te sluit, die wetgewer van sy grondwetlik gewaarborgde funksie te ontneem, en strukturele personeelveranderinge in die howe van die Bondsrepubliek Duitsland te implementeer, beweeg alles in die rigting wat in 1933 begin het. Hierdie keer is daar egter geen Geallieerdes byderhand om 'n nuwe Basiese Wet te installeer wat juis hierdie poging sou stopsit nie!

EMA – Agtergrond

Plasing vanaf 20 April 2021 02:43

Hier word die verbande tussen die funksie van die EMA (Europese Medisyne-agentskap) en die loopbaan, sowel as die gevolglike belangebotsings, van EMA-president Emer Cooke aangebied, soos berig deur epochtimes.de op 7 April 2021: EMA-president Emer Cooke was jare lank 'n lobbyis vir die grootste Europese farmaseutiese organisasie.

Oormatige mortaliteit

Plasing vanaf 20 April 2021 08:09

Die onderwerp van oortollige mortaliteit word dikwels oor en oor geopper. Saam met die gebrek aan intensiewe sorgbedkapasiteit, is die argument van oortollige mortaliteit 'n konstante metgesel in die regverdiging van die regering se maatreëls.

’n Mens sou dink dat die Federale Statistiekkantoor se eie syfers ook by federale perskonferensies bekend sou wees (sien: Sterftesyfers in Maart 2021: 11% onder die gemiddelde van vorige jare).

Nietemin weet mnr. Hanno Kautz, woordvoerder van die minister van gesondheid, Jens Spahn, by die Federale perskonferensie van 19 April 2021 niks oor hierdie syfers nie. Toe mnr. Reitschuster hom vra: "Mnr. Kautz, volgens die Federale Statistiekkantoor het ons verlede maand 'n laer sterftesyfer gehad. In Maart het 11 persent minder mense gesterf as die gemiddelde vir die jare 2017 tot 2020. Hoe verklaar u dit?" antwoord hy eenvoudig: "Ek lewer nie kommentaar op syfers wat ek nog nie voorheen gesien het nie." "U noem 'n baie spesifieke syfer wat ek nie ken nie, en waarvan ek nie die konteks ken nie. Ek kan op hierdie stadium nie daaroor kommentaar lewer nie."

Dit vra die vraag: as hierdie syfers so oninteressant is, as ons dit nie eers opgemerk of geken het nie, waarom haal ons dit dan voortdurend aan as 'n regverdiging vir toenemend strenger maatreëls?