Vsebina
Posodobljeno - februar 18, 2023
Ta blog bo prekinjen. Na spletni strani Blog Corona 2023 obravnava znana ozadja, zlasti s strani farmacevtske industrije in institucij zdravstvenih organov na mednarodni ravni.
Posodobitev podatkov je pri nas vedno glavna prednostna naloga - sledijo članki o različnih temah pod tega oddelka. Najnovejša objava je na vrhu in ima rdeč naslov.
Ker nekatere posodobitve zaradi časovnih razlogov niso bile izvedene, so naslednje video animacije ustreznih podatkov v obdobju od prvega zabeleženega poročila o neželenem učinku do danes prikazane v kronološkem vrstnem redu, najprej najnovejše. (Vir: Programiranje analize podatkov EMA / EMA).
- Perikarditis
- Creutzfeldt-Jakobova bolezen
- Miokarditis
- Menstrualne motnje
- Guillain-Barrejev sindrom
- Bellova paraliza
- Motnje spanja
- Halucinacije
- Trombocitopenija
- Spontani splav
- Bolečine v očeh
- Izguba zavesti
- Narkolepsija
- Limfadenopatija
- Povečan srčni utrip
- Glavoboli
- Cerebralna tromboza
- Tromboza možganskega venskega sinusa
- Cerebralna venska tromboza
- Tromboza globokih ven
- Tromboza mezenterične vene
- Tromboza portalne vene
- Tromboza zgornjega sagitalnega sinusa
- Herpes zoster
- Tromboza
- Venska tromboza
- Venska tromboza okončine
- Tinitus
- Nenadna smrt
- Intermenstrualna krvavitev
- Zamuda menstruacije
- Nepravilna menstruacija
- Koprivnica
Naslednji razdelek se ne bo več posodabljal. Razvoj podatkov EMA bodo nadomestili zgornji videoposnetki!
Posodobitev podatkov - EMA - VAERS - WHO - Poročila o neželenih učinkih
* Povečanje od 13.11.2021 - 03.12.2021 v 368.653 Sporočila
Skupno število obvestil: EMA 1.254.029 (+ 90.673*) / KDO 2.706.410 (+206.529*) / CDC/FDA 951857 (+71.451*)
Simptom: Bellova paraliza (paraliza obraza) - Registrirana sporočila
Povečanje od 30.12.2021 - 15.01.2022 / 17.12.2021 - 07.01.2022 za 6.620 Primeri
Viri: adrreports.eu (EMA) / vigiaccess.org (WHO) - status 10/12/2021
Vir: vaers.hhs.gov (CDC / FDA) - Status 03.12.2021
EMA
6.113 (+ 1.350*)
WHO
7.875 (+ 3.650*)
VAERS
5.405 (+ 1.620*)
Simptom: Menstrualne motnje - Registrirana sporočila
Viri: adrreports.eu (EMA) / vigiaccess.org (WHO) - od 13. novembra 2021
Vir: vaers.hhs.gov (CDC / FDA) - Status 05.11.2021
EMA
9.849
WHO
15.660
VAERS
4.002
Simptom: Spontani splav - Registrirana sporočila
Viri: adrreports.eu (EMA) / vigiaccess.org (WHO) - od 13. novembra 2021
Vir: vaers.hhs.gov (CDC / FDA) - Status 05.11.2021
EMA
1.823
WHO
3.424
VAERS
2.188
Simptom: limfadenopatija - Registrirana sporočila
* Povečanje od 18.12.2021 - 24.12.2021 / 10.12.2021 - 17.12.2021 na 713 Primeri
Viri: adrreports.eu (EMA) / vigiaccess.org (WHO) - stanje 24/12/2021
Vir: vaers.hhs.gov (CDC / FDA) - Status 17/12/2021
EMA
50.222
WHO
94.166
VAERS
31.040
Simptom: smrti - Registrirana sporočila
Trenutni podatki o Prekomerna umrljivost v vseh starostnih skupinah se dnevno posodabljajo. tukaj.
Grafi so izdelani na podlagi podatkov iz 29 sodelujočih držav: Belgija, Danska, Estonija, Finska, Francija, Nemčija, Nemčija (Berlin), Nemčija (Hessen), Grčija, Madžarska, Irska, Izrael, Italija, Luksemburg, Malta, Nizozemska, Norveška, Portugalska, Slovenija, Španija, Švedska, Švica, Združeno kraljestvo (Anglija), Združeno kraljestvo (Severna Irska), Združeno kraljestvo (Škotska), Združeno kraljestvo (Wales) in Ukrajina.
Ukrajina, Nemčija (Berlin) in Nemčija (Hessen) niso bile vključene v združene podatke.
(Vir: Euromomo)
* Povečanje od 16.03.2022 - 26.03.2022 / 05.03.2022 - 18.03.2022 na 2.595 Smrtni primeri
(podvojitev v primerjavi s 15/03 / 04/03)
Viri: adrreports.eu (EMA) - na dan 26/03/2022 / vigiaccess.org (WHO) - status 26/03/2022
Vir: vaers.hhs.gov (CDC / FDA) - Status 18/03/2022
EMA
23.157 (+609*)
WHO
19.088 (+736*)
VAERS
25.051 (+1.250*)
Simptom: miokarditis (vnetje srčne mišice) - Registrirana sporočila
* Povečanje od 19.11.2021 - 03.12.2021 / 12.11.2021 - 29.11.2021 na 2.088 Sporočila
Viri: adrreports.eu (EMA) / vigiaccess.org (WHO) - od 19. novembra 2021
Vir: vaers.hhs.gov (CDC / FDA) - od 12. novembra 2021
EMA
8.292 (+1.028*)
WHO
13.371 (+1.235*)
VAERS
7.879 (+693*)
Simptom: Perikarditis (vnetje osrčnika) - Registrirana sporočila
* Povečanje od 10.12.2021 - 24.12.2021 na 10.367 Sporočila
Viri: adrreports.eu (EMA) / vigiaccess.org (WHO) - stanje 24/12/2021
Vir: vaers.hhs.gov (CDC / FDA) - Status 17/12/2021
EMA
9.932 (+3.205*)
WHO
16.234 (+5.306*)
VAERS
9.546 (+4.033*)
Simptom: Herpes Zoster - Registrirana sporočila
Viri: adrreports.eu (EMA) / vigiaccess.org (WHO) - od 13. novembra 2021
Vir: vaers.hhs.gov (CDC / FDA) - Status 05.11.2021
EMA
12.876
WHO
23.682
VAERS
9971
Simptom: Tromboza - Registrirana sporočila
Viri: adrreports.eu (EMA) / vigiaccess.org (WHO) - od 13. novembra 2021
Vir: vaers.hhs.gov (CDC / FDA) - Status 05.11.2021
EMA
8.110
WHO
11.254
VAERS
6.284
Simptom: Nenadna smrt - Registrirana sporočila
Viri: adrreports.eu (EMA) / vigiaccess.org (WHO) - od 13. novembra 2021
Vir: vaers.hhs.gov (CDC / FDA) - Status 05.11.2021
EMA
829
WHO
1.463
VAERS
729
Ocena primernosti tehnike RT-qPCR za
Odkrivanje morebitne okužbe in
Infektivnost oseb glede na SARS-CoV-2
Trenutno strokovno mnenje Dr. rer. biol. hum. Ulrike Kämmerer
Strokovno mnenje je tukaj iz Spletna stran . Zdravniki in znanstveniki za zdravje, svobodo in demokracijo, e.V. ali shranjene tukaj. za prenos.
Preizkus lažno pozitivnih rezultatov testa PCR
Raziskovalci Leslie C. Woodcock, P. Stallinga in Igor Khmelinskii s portugalske univerze Algarve v svojem članku, objavljenem novembra 2021 v reviji The Lancet Respiratory Medicine, poročajo Vloga eksosomov pri lažno pozitivnih testih kovid-19 PCR o rezultatih svojih raziskav, ki so Povezava so na voljo za prenos.
Posodobitev podatkov - EMA - VAERS - WHO - Poročila o neželenih učinkih
Raziskovalci Leslie C. Woodcock, P. Stallinga in Igor Khmelinskii s portugalske univerze Algarve v svojem članku, objavljenem novembra 2021 v reviji The Lancet Respiratory Medicine, poročajo Vloga eksosomov pri lažno pozitivnih testih kovid-19 PCR o rezultatih svojih raziskav, ki so Povezava so na voljo za prenos.
Primerjava neželenih učinkov cepiv, o katerih so poročali v 1.000 primerih
Omejitev temeljnih pravic
V Zveznem uradnem listu, del I, 2021, št. 83 z dne 11.12.2021 Zakon za okrepitev
Preventivno cepljenje proti Covid-19 in sprememba drugih predpisov v zvezi s pandemijo Covid-19 z dne 10. decembra 2021 temeljne pravice
- fizična celovitost
- svoboda osebe
- svoboda zbiranja
- svoboda gibanja
- nedotakljivost doma.
RESTRICTED (PDF-Download):
Naslednje spremembe bodo začele veljati 25. novembra 2021:
16. člen - sprememba dvanajste knjige nemškega socialnega zakonika "Oddelek 142 Prehodni predpisi za skupna kosila za invalide zaradi pandemije Covid-19; pooblastilo za izdajo odlokov".
17. člen - Sprememba zveznega zakona o pokojninah
Člen 18 - Sprememba zakona o prosilcih za azil
Naslednje spremembe bodo začele veljati 1. januarja 2022:
Člen 12a - Sprememba tretje knjige socialnega zakonika
"V tretjem stavku petega odstavka 109. člena se besedilo "31. decembra 2021" nadomesti z besedilom "31. marca 2022".
"Člen 421c se spremeni: "aa) V delu stavka pred številko 1 se besedilo "do 31. decembra 2021" nadomesti z besedilom "od 1. januarja 2022 do 31. marca 2022". bb) V delu stavka za številko 2 se črta besedilo "če je pravica do dodatka za skrajšani delovni čas nastala do 31. marca 2021 in"."
Naslednje spremembe začnejo veljati 1. januarja 2023:
Člen 2 - Nadaljnje spremembe zakona o zaščiti pred okužbami
"Zakon o varstvu pred okužbami, ki je bil nazadnje spremenjen s 1. členom tega zakona, se spremeni tako, da se glasi:
- §§ 20a in . 20b so preklicani.
- § 73 se spremeni, kot sledi:
a) Odstavek 1a, številke 7e do 7h se razveljavijo.
b) v odstavku 2 se beseda "7h" nadomesti z besedo "7d".
Intervju o obveznem cepljenju proti koronavirusom: prednosti in slabosti - MDR
Torek, 23.11.2021 06:50 - Trajanje 06:50 min.
Spletna stran Intervju z MDR je v nadaljevanju povzet kot prepis in objavljen tukaj kot Prenos zvoka na voljo. Predavatelj je Tim Deisinger, njegova sogovornika v razpravi sta profesor Peter Dabrock, profesor teologije na Univerzi Erlangen Nürnberg, in Dr. Steffen Rabe, pediater iz Münchna in član odbora Zdravniki za individualne odločitve o cepljenju e. V. (ÄIIE).
- Moderator, Tim Deisinger:
Veliki tabu, splošno obvezno cepljenje, ni več tabu in veliko ljudi ga podpira. Danes zjutraj si želimo podrobneje ogledati to temo, prav tako pa nas zanima vaše mnenje o njej, o čemer bomo več povedali v naslednjem trenutku. Najprej nekakšna podlaga za razpravo, če se tako izrazim. Želimo slišati dve stališči.
Drugi bo nato pediater. Prvi je zdaj Peter Dabrock, profesor teologije na Univerzi Erlangen Nürnberg, ki je bil do leta 2020 predsednik nemškega sveta za etiko. Gospod Dabrock, kaj menite? Splošno obvezno cepljenje, da ali ne?
- Prof. Peter Dabrock:
Priznam, da sem sčasoma spremenil svoje stališče glede splošnega obveznega cepljenja, zato se tudi pri teh zadevah zavedamo, da ni ene same odločitve, ki bi jo sprejeli enkrat in jo potem vedno upoštevali, ampak jo moramo prilagoditi okoliščinam. Več mesecev sem se zavzemal za to in tudi upal, da bodo ljudje spoznali, da je to le minimalno tveganje za vas in velika korist za vas in druge.
in da se ljudje cepijo zaradi samozaščite, neposredne zaščite pred drugimi in solidarnosti. To se ni zgodilo in ko sem slišal, da je to postalo zelo togo, je bila pred tremi tedni izvedena ustrezna raziskava. Tudi moje stališče se je spremenilo, zato se zdaj nagibam k stališču, da potrebujemo čim prej splošno obvezno cepljenje.
- Moderator, Tim Deisinger:
Toda ali razumete tiste, ki se ne želijo cepiti ali se še ne želijo cepiti?
- Prof. Peter Dabrock:
Zato seveda razmišljate o tem, še posebej ko čutite tako velik odpor pri hoji, nato pa vedno slišite dva argumenta, da je to sorazmerno in da to ni problem.
poseg v fizično celovitost. To dvoje je tudi povezano in rekel bi, da se mora vsak, ki nasprotuje obveznemu cepljenju, zavedati, da bo škoda na telesu, če boš zbolel sam ali če bodo zboleli drugi, veliko večja. Vsa resna znanost pravi, da so preostala tveganja očitno minimalna, koristi pa bistveno večje.
Druga stvar je, da telesna integriteta nikoli ne sme biti absolutna v smislu temeljnih pravic, ampak jo je treba praktično uskladiti z drugimi temeljnimi pravicami, in če je svoboda vseh drugih močno omejena, ker majhna skupina skrbi za to, da se virus še naprej širi na ta način, potem telesna integriteta, ki jo na prvi pogled razumem, ne sme biti absolutna.
- Moderator, Tim Deisinger:
Mnenje Petra Daboka, nekdanjega predsednika nemškega sveta za etiko. Zdaj pa bi radi slišali še mnenje Dr. Steffena Raabeja, pediatra in mladinskega zdravnika ter tiskovnega predstavnika odbora Združenja zdravnikov za individualne odločitve o cepljenju, g. Rabe. Ali še vedno razumete utemeljitev gospoda Darbrocka?
- Dr. Steffen Rabe
Ne, argument za obvezno cepljenje mi je popolnoma nerazumljiv, zlasti v primeru cepiv Covid. In ko poslušam gospoda Darbrocka in ta argumentira s posredno zaščito drugih, je to seveda ključni kamen spotike. Samo tak argument lahko upraviči razmišljanje o obveznem cepljenju in prav tega vidika cepiva Covid ne pokrivajo. Cepiva Covid zagotavljajo tistim, ki se želijo zaščititi, začasno zaščito pred hudimi primeri. Vendar pa sploh ne zagotavljajo ustrezne zunanje zaščite.
To odpravlja vse argumente v prid obveznemu cepljenju. In če govori o majhnem in minimalnem tveganju pri cepljenju, potem je to preprosto narobe. Kot pediater se srečujem z mladimi moškimi, starimi 16 ali 18 let, ki jim moram povedati, da če se cepijo s cepivom Biontech, edinim trenutno priporočenim in odobrenim cepivom zanje, je tveganje za razvoj miokarditisa kot neposredne posledice tega cepljenja vsaj 1 : 5000. Gospod Deisinger, ne poznamo drugega zdravila. V 30 letih nisem videl nobenega drugega cepiva, ki bi tako resno bolezen, kot je miokarditis, združevalo s tako dramatično visokim tveganjem. To obvezno cepljenje ni niti pravno, niti moralno, niti medicinsko pametno, ampak je, kot je pravilno povedal gospod Hans-Jürgen Pape, izraz nemoči in brezglavosti.
- Moderator, Tim Deisinger:
Vzemimo še nemoč, če pogledamo razmere na intenzivnih oddelkih ali v bolnišnicah na splošno, ki se navajajo kot dodaten argument, da imamo tam nujne primere in da ni drugega izhoda iz nujnih razmer kot z obveznim cepljenjem.
- Dr. Steffen Rabe
Toda, gospod Deisinger, obvezno cepljenje ni takojšen ukrep. Pravna priprava, politično izvajanje in medicinska učinkovitost - lažemo si, če v dveh do treh tednih opazimo kakršen koli učinek v enotah intenzivne terapije. Končno moramo prenehati redčiti enote intenzivne terapije in zmanjševati število postelj za intenzivno nego. Namesto da bi z obveznim cepljenjem prisilili medicinske sestre v izstop iz poklica, jim moramo končno pokazati spoštovanje, ki ga potrebujejo, da bodo ostale v svojem poklicu. In to je tisto, kjer so politiki v dveh letih popolnoma odpovedali. ta katastrofa je katastrofa z napovedjo, gospod Deisinger. Vedeli smo, da bo letošnja jesen še en izziv, tudi za bolnišnice in enote intenzivne terapije, in z odprtimi očmi smo zmanjšali na tisoče postelj za intenzivno nego. In to naj bi zdaj uporabili kot argument za poseganje v eno od osrednjih temeljnih pravic, pri čemer se odločno ne strinjam z gospodom Dabrockom, pravico do telesne integritete, zlasti v državi, kot je Nemčija, ki ima to nesrečno preteklost, tudi na medicinskem področju s temi posegi, bi morali biti zelo, zelo previdni in zelo, zelo previdni pri tem razmišljanju.
Pomožni snovi ALC-0315 in ALC-0159 "samo za raziskovalno uporabo"
Pomožne snovi, ki jih vsebuje Pfizer/BioNTech Comirnaty ALC-0315 [(4-hidroksibutil)azandiil]di(heksan-6,1-diil) bis(2-heksildekanoat) (CAS 2036272-55-4) in ALC-0159 2-[(polietilen glikol)-2000]-N,N-ditetradecilacetamid (CAS 1849616-42-7) so v skladu s podatki proizvajalca ABP Biosciences namenjeni izključno za uporabo v raziskovalne namene.
Trenutno razpoložljive študije o teh pomožnih snoveh:
- http://www.eurannallergyimm.com/cont/journals-articles/1043/volume-potential-culprits-immediate-hypersensitivity-reactions-4579allasp1.pdf (PDF)prenesi) 29.04.2021
- https://www.cell.com/molecular-therapy-family/molecular-therapy/fulltext/S1525-0016(21)00064-2?_returnURL=https%3A%2F%2Flinkinghub.elsevier.com%2Fretrieve%2Fpii%2FS1525001621000642%3Fshowall%3Dtrue (PDF)prenesi) 04.02.2021
Spletna stran zvezne vlade - črtanje izjave "Ali bo zakonsko določena obveznost cepljenja - NE"
Različica iz 17.11.2021 00:39:55 je bil še vedno
Različica iz 19.11.2021 16:44:31 je zdaj (tukaj na voljo v izvirniku):
Zgornje povezave so na voljo prek sistema WayBackMachine (https://web.archive.org) zavarovane arhivske strani.
Presenetljivo je, da se "cepiva spremljajo in preizkušajo tudi po odobritvi ...". "Dovoljenja" so le - pogojna - dovoljenja in jih je treba vsako leto podaljšati do končne odobritve (glej spodaj).
Podaljšanje pogojnih dovoljenj za cepiva Covid-19
Ustrezne dokumente, ki so navedeni spodaj in so na voljo za prenos, najdete v razdelku "Postopki Evropske komisije" prek ustrezne povezave "Izvedbeni sklep Komisije" v obliki datoteke ZIP s klikom na ustrezno Ikona dokumenta v desnem stolpcu.
Prvi simbol pomeni "Odločitve" (datoteka ZIP se začne z "dec", drugi pa za "Priloge", ki ustreza "anx". Konec imena razpakiranih datotek predstavlja okrajšavo jezika (de - nemščina).
V (drugem) stolpcu "Vrsta postopka", na primer, obstajajo vnosi, ki se nanašajo na "Mesečna posodobitev" (posodobljene informacije proizvajalca o pripravku, neželenih učinkih itd.), "Popravek" (popravki prevodov), "Popravljalni sklep" (sklepi o zaščiti pri komercializaciji, njeni razširitvi) in "Letno podaljšanje" (podaljšanje pogojnega dovoljenja).
Kombinacija - BionTech/Pfizer
Evropska komisija v Bruslju je 3. novembra 2021 z dokumentom C(2021) 7992 (končno). Izvedbeni sklep Komisije od 03.11.2021, "o letnem podaljšanju pogojnega dovoljenja za promet z zdravilom za uporabo v humani medicini "Comirnaty - Tozinameran, COVID-19 mRNA cepivo (modificirano z nukleozidi)", izdanega z Odločbo C(2020) 9598(konč.), in spremembi navedene odločbe", z: "Pogojno dovoljenje, izdano z Odločbo C(2020) 9598(konč.) z dne 21. decembra 2020, se podaljša.“
Spikevax - Moderna
Evropska komisija je 4. oktobra 2021 v Bruslju objavila dokument C(2021) 7305 (končno). Izvedbeni sklep Komisije od 04.10.2021, "o letnem podaljšanju pogojnega dovoljenja za promet z zdravilom za uporabo v humani medicini "Spikevax - COVID-19 mRNA cepivo (modificirano z nukleozidi)", izdanega z Odločbo C(2020) 94(konč.), in o spremembi navedene odločbe", z: "Pogojno dovoljenje, izdano z Odločbo C(2021) 94(konč.) z dne 6. januarja 2021, se podaljša.“
Vaxzevira - AstraZeneca
Evropska komisija v Bruslju je 9. novembra 2021 z dokumentom C(2021) 8206 (končno). Izvedbeni sklep Komisije od 09.11.2021, "o letnem podaljšanju pogojnega dovoljenja za promet z zdravilom za uporabo v humani medicini "Vaxzevira - COVID-19 mRNA cepivo (modificirano z nukleozidi)", izdanega z Odločbo C(2020) 698(konč.), in o spremembi navedene odločbe", z: "Pogojno dovoljenje, izdano z Odločbo C(2021) 698(konč.) z dne 29. januarja 2021, se podaljša.“
Cepivo Covid-19 - Janssen
Trenutno z dokumentom C(2021) 1763 (končno) samo Izvedbeni sklep Komisije za pogojno odobritev cepiva od 11. marca 2021.
Na spletnem mestu Člen 4 navaja: "Dovoljenje velja eno leto od datuma uradnega obvestila o tej odločbi."
Opredelitve Inštituta Paula Ehrlicha (PEI) o cepivih COVID-19
Povezavi do različic z datumoma 15/08/2021 in 07/09/2021 sta na voljo prek aplikacije WayBackMachine (https://web.archive.org) shranjene arhivske strani, medtem ko je trenutna različica iz 23/09/2021 * prek povezave do Izvirna stran PEI. Tam so objavljena tudi pisma z rdečo roko, ki jih izdajajo farmacevtska podjetja, in tukaj na voljo za prenos.
Vsa navedena spletna mesta so na voljo v obliki datotek PDF.
15.08.2021 - "Cepiva COVID-19 ščitijo pred 'okužbami z virusom SARS-CoV-2." (Spletna stran kot PDF-Download)
07.09.2021 - "Cepiva COVID-19 ščitijo pred hudim potekom okužbe z virusom SARS-CoV-2.“ (Spletna stran kot PDF-Download)
23.09.2021 * - "Cepiva COVID-19 so indicirana za aktivno imunizacijo za preprečevanje bolezni COVID-19, ki jo povzroča virus SARS-CoV-2.“ (Spletna stran kot PDF-Download)
Naš svet v podatkih - Covid-19, cepljenja, smrti
Na spletnem mestu Naš svet v podatkih Univerze John Hopkins zagotavlja uradno zbrane podatke o različnih temah po vsem svetu, vključno z naslednjimi statističnimi podatki za Nemčijo:
Povezava do statističnih podatkov - Delež oseb, ki so prejele vsaj en odmerek cepiva COVID-19
Povezava do statističnih podatkov - Kumulativni potrjeni primeri COVID-19 na milijon prebivalcev
Povezava do statističnih podatkov - Kumulativna smrtnost zaradi COVID-19 na milijon prebivalcev
Svet Evrope - Resolucija 2361/2021
V svoji resoluciji z naslovom Cepiva Covid-19: etični, pravni in praktični vidiki priporočila, ki med drugim obravnavajo pravično razdeljevanje cepiv, prostovoljno naravo cepljenja in nediskriminacijo ljudi, ki se iz kakršnega koli razloga ne odločijo za cepljenje.
"7.3.1 zagotoviti, da so državljani obveščeni, da cepljenje ni obvezno
in da se na nikogar ne izvaja politični, družbeni ali drug pritisk, naj se cepi.
če tega ne želi storiti sam".
"7.3.2 zagotoviti, da nihče ni diskriminiran, ker ni bil cepljen, zaradi morebitnih zdravstvenih tveganj ali ker ne želi biti cepljen."
Ker Svet Evrope nima zakonodajnih pooblastil, ta priporočila niso pravno zavezujoča za nobeno od držav članic.
Iz teh priporočil ni mogoče izpeljati niti prepovedi obveznega cepljenja niti diskriminacije, čeprav bi bilo to zaželeno v interesu odgovornih državljanov ...
Virus Marburg
Od začetka leta 2021 je bilo objavljenih vse več člankov o virusu Marburg. 25. februarja 2021 je bil na primer objavljen Publikacija pri podjetju Elsevier Inc. v Nacionalna medicinska knjižnica.
Slaba dva meseca pozneje, 22. aprila 2021, je naslovnica GAVI Zavezništvo za cepiva „Naslednja pandemija: Marburg?“
Že v letu 2018 bo Primerdesign Ltd. test PCR "Virusni protein 35 (VP35) gen Marburgvirus genesig Standardni komplet„.
Čeprav je virus Marburg, ki je bil prvič 1967 opisanon je sorodnik virusa ebola, je bilo takrat 376 smrtnih primerov, od leta 2005 pa le 16.
Glede na to se zdi pretirano prizadevanje za razvoj cepiva proti virusu Marburg v tem kontekstu nerazumljivo. RiVax® prek spletne strani . Soligenix Inc.. Hitenje, da se zaobidejo običajne faze testiranja 1, 2 in 3 v skladu s smernicami FDA za testiranje na živalih, je razlog za razmislek.
Kieran Morrissey, Dublin, Irska, 22. septembra 2021, je povzel svoje misli o tej temi tukaj skupaj.
Pravno mnenje o posrednem obveznem cepljenju
Na 111 straneh Pravno mnenje z dne 4. oktobra 2021 prof. dr. Dietrich Murswiek po pretehtanju vseh vidikov, ki jih je treba upoštevati, prišel do naslednjega povzetka: "Diskriminacija necepljenih oseb v okviru predpisov o dostopu do javnega življenja in v okviru pravil o karanteni krši temeljne pravice prizadetih oseb in je protiustavna."
Člen_Li
Bolnišnice bi morale zaposlovati, ne pa odpuščati medicinske sestre z naravno imunostjo
PO MARTIN KULLDORFF 1. OKTOBER 2021 ZGODOVINA, POLICIJA, JAVNO ZDRAVJE, SOCIETY 4 MINUTE
Med številnimi presenetljivimi dogodki v času te pandemije je bilo najbolj osupljivo vprašanje naravno pridobljene imunosti po preboleli bolezni Covid.
Naravno imunost razumemo že vsaj od Atenska kuga leta 430 pred našim štetjem. Tu je Tukidid:
"Vendar so bolniki in umirajoči največ sočutja našli pri tistih, ki so ozdraveli od bolezni. Ti so iz izkušenj vedeli, za kaj gre, in se niso bali zase; saj isti človek ni bil nikoli napaden dvakrat - vsaj ne usodno. - Tukidid
Z endemičnimi koronavirusi živimo že vsaj sto let in imamo proti njim dolgotrajno naravno odpornost. Po pričakovanjih imamo naravno odpornost tudi po bolezni Covid-19, saj je bilo kljub razširjenosti virusa izredno malo ponovnih okužb s hudo boleznijo ali smrtjo.
Pri večini virusov je naravna imunost boljša od imunosti, ki jo povzroči cepivo, kar velja tudi za Covid. V najboljša študija do zdaj, je bila pri cepljenih približno 27-krat večja verjetnost za simptomatsko bolezen kot pri tistih z naravno imunostjo, z ocenjenim razponom med 13 in 57. Ker v nobeni od skupin ni bilo smrtnih primerov Covida, tako naravna kot cepilna imunost dobro ščitita pred smrtjo.
V zadnjem desetletju sem tesno sodeloval z bolnišničnimi epidemiologi. Naloga zdravnikov je zdraviti bolnike in poskrbeti, da bodo zdravi, naloga bolnišničnega epidemiologa pa je zagotoviti, da bolniki med bivanjem v bolnišnici ne zbolijo, na primer, da se ne bi okužili s smrtonosnim virusom od drugega bolnika ali negovalca.
V ta namen bolnišnice uporabljajo različne ukrepe, od pogostega umivanja rok do popolnega regalije za obvladovanje okužb pri oskrbi bolnika z ebolo. Cepljenje je ključni del teh prizadevanj za nadzor. Na primer, dva tedna pred operacijo vranice bolniki prejmejo pnevmokokno cepivo da bi zmanjšali število pooperativnih okužb, večina kliničnega osebja pa se vsako leto cepi proti gripi.
Ukrepi za obvladovanje okužb so še posebej pomembni pri starejših šibkih bolnikih z oslabljenim imunskim sistemom. Ti se lahko okužijo in umrejo zaradi virusa, ki bi ga večina ljudi zlahka preživela. Ključni razlog za cepljenje medicinskih sester in zdravnikov proti gripi je zagotoviti, da ne bodo okužili takšnih bolnikov.
Kako lahko bolnišnice najbolje zaščitijo svoje bolnike pred boleznijo Covid? To je izjemno pomembno vprašanje, ki se nanaša tudi na domove za ostarele. Obstaja nekaj očitnih standardnih rešitev, kot so ločevanje bolnikov z boleznijo Covid od drugih bolnikov, zmanjšanje rotacije osebja in zagotavljanje izdatnega bolniškega dopusta za osebje s simptomi, podobnimi bolezni Covid.
Drug cilj bi moral biti zaposliti osebje z najmočnejšo možno odpornostjo proti kaviidu, saj je manj verjetno, da se bodo okužili in ga prenesli na svoje bolnike. To pomeni, da si morajo bolnišnice in domovi za ostarele aktivno prizadevati za zaposlovanje osebja, ki ima naravno imunost proti predhodni bolezni Covid, in takšno osebje uporabljati za svoje najranljivejše bolnike.
Zato smo zdaj priča hudi konkurenci, v kateri si bolnišnice in domovi za ostarele obupno prizadevajo zaposliti ljudi z naravno odpornostjo. Dobro, dejansko, ne.
Namesto tega bolnišnice odpuščajo medicinske sestre in drugo osebje z boljšo naravno odpornostjo, medtem ko ohranjajo tiste s šibkejšo, s cepljenjem povzročeno odpornostjo. S tem izdajajo svoje paciente in povečujejo tveganje za bolnišnične okužbe.
Glavni medicinski svetovalec Bele hiše Dr. Anthony Fauci s spodbujanjem obveznega cepljenja postavlja pod vprašaj obstoj naravne imunosti po bolezni Covid. S tem sledi direktorici CDC Rochelle Walensky, ki je v letu 2020 podvomila o naravni imunosti. Memorandum ki ga je objavila založba The Lancet. Z uvedbo obveznega cepljenja univerzitetne bolnišnice zdaj postavljajo pod vprašaj tudi obstoj naravne imunosti po bolezni Covid.
To je presenetljivo.
Delam v bolnišnici Brigham and Women's Hospital v Bostonu, ki je napovedala, da bodo vse medicinske sestre, zdravniki in drugi zdravstveni delavci odpuščeni, če ne bodo prejeli cepiva Covid. Prejšnji teden sem govorila z eno od naših medicinskih sester. Težko je skrbela za bolnike s cepivom Covid, čeprav so nekateri njeni kolegi na začetku pandemije v strahu odšli.
Ni presenetljivo, da se je okužila, vendar si je opomogla. Zdaj ima močnejšo in dolgotrajnejšo imunost kot cepljeni upravitelji bolnišnic, ki delajo od doma in jo odpuščajo, ker ni bila cepljena.
Če univerzitetne bolnišnice ne znajo pridobiti pravih medicinskih dokazov o osnovni znanosti o imunosti, kako jim lahko zaupamo druge vidike našega zdravja?
Kaj sledi? Univerze se bodo spraševale, ali je Zemlja okrogla ali ploščata? To bi vsaj naredilo manj škode.
Martin Kulldorff, višji znanstvenik inštituta Brownstone, je profesor medicine na Medicinski fakulteti Harvard.
ku*******@********ne.org
Kazenske ovadbe in kazenska prijava v kompleksu BioNTech
Zveznemu generalnemu državnemu tožilcu pri zveznem vrhovnem sodišču Dr. Petru Franku
Tobias Ulbrich, odvetnik v odvetniški pisarni Robert & Ulbrich, Otto Str. 12, 50859 Köln, je 10. junija 2021 vložil zgoraj navedeno kazensko ovadbo in kazensko prijavo zoper "vse osebe, ki so razvile ... poskusno snov mRNA podjetja BioNTech/Pfizer, imenovano 'cepivo', jo izdelale, distribuirale, odobrile za cepljenje in jo dajale nevednim ljudem. Zlasti proti:
1. Alexandra Knauer, direktor podjetja Knauer Wissenschaftliche Geräte GmbH, Hegauer Weg 38, 14163 Berlin (proizvajalec strojev za proizvodnjo lipidnih nanodelcev)
2. Vasant Nasasimhan, generalni direktor družbe Novartis AG (imetnik patenta za lipidne nanodelce AC - 0135 in AC 0159)
3 James Bradner, dr. medicine, predsednik Novartisovih inštitutov za biomedicinske raziskave (NIBR), razvijalca lipidov
4 Thomas D. Madden Ph.D. izvršni direktor družbe Acuitas Therapeutics, proizvajalca lipidov za družbo Biontech 5 Ying K. Tam, glavni znanstveni direktor družbe Acuitas Therapeutics,
6. Sean Semple, Senio Direktor pred kliničnimi raziskavami
7 Dr. Dietmar Katinger, generalni direktor Donaustraße 99, 3400 Klosterneuburg, Avstrija, (proizvajalec in razvijalec proizvodnje v podjetju Biontech SE)
8 Prof. Dr. Ugur Sahin, generalni direktor družbe BioNTech SE, An der Goldgrube 12, 55131 Mainz
9 Sean Marett, CBO in CCO, BioNTech SE, ibid.
10 Dr. Sierk Poetting, finančni in operativni direktor družbe BioNTech SE, ibid.
11 PD Dr. Özlem Türeci, CMO, BioNTech SE, ibid.
12 Ryan Richardson, direktor podjetja BioNTech SE, ibid.
13 Karin Samusch, Dermapharm AG, Lil-Dagover-Ring 7, 82031 Grünwald (proizvajalec)
14. Hilde Neumeyer, Dermapharm AG, Lil-Dagover-Ring 7, 82031 Grünwald (proizvajalec) 15 Dr. Hans-Georg Feldmeier, Dermapharm AG, Lil-Dagover-Ring 7, 82031 Grünwald (proizvajalec)
16 Dr. Jürgen Ott Dermapharm AG, Lil-Dagover-Ring 7, 82031 Grünwald (proizvajalec) 17. Mark Pfister, Vodja proizvodnje za Biontech pri Novartis AG v Marburgu (proizvajalec) 18 Dr. Sabine Brand, Siegfried Hameln, Langes Feld 13, 31789 Hameln, Nemčija (proizvajalec)
19 Dr. Sven Remmerbach, Baxter Oncology GmbH, Kantstraße 2, 33790 Halle/Westphalia (proizvajalec)
20 Dr. Fabrizio Guidi, Predsednik; Sanofi-Aventis Deutschland GmbH, Industriepark Höchst, K703, Brüningstr. 50, 65926 Frankfurt (proizvajalec)
21 Dr. Matthias Braun, Sanofi-Aventis Deutschland GmbH
22. Oliver Coenenberg, Sanofi-Aventis Deutschland GmbH,
23 Evelyne Freitag, Sanofi-Aventis Deutschland GmbH,
24 Prof. Dr. Jochen Maas, Sanofi-Aventis Deutschland GmbH,
25 Prof. Dr. CichutekPredsednik inštituta Paul Ehrlich (kršitev obveznosti nadzora in opozarjanja, neodvzem dovoljenja)
26 Prof. Dr. Viethspodpredsednik Inštituta Paula Ehrlicha,
27 Dr. Keller-StanislawskiOddelek za varnost zdravil in medicinskih pripomočkov Inštituta Paula Ehrlicha.
28 Prof. Dr. Hildt, Vodja oddelka za virologijo na Inštitutu Paula Ehrlicha
29 Prof. dr. van Zandbergen, vodja oddelka za imunologijo na Inštitutu Paula Ehrlicha
30. Dr. Hinz, vodja oddelka 3 in 4 za terapevtska cepiva na Inštitutu Paula Ehrlicha 31 Matthias Groote, Predstavnik agencije EMA v Evropskem parlamentu, Bergmannstraße 37, 26789 Leer,
32. Karl Broich, Predsednik Zveznega inštituta za zdravila in medicinske pripomočke ter predstavnik agencije EMA v Nemčiji, Kurt-Georg-Kiesinger-Alle 3, 53175 Bonn,
33. Gospa Emer Cooke, Predsednik EMA, Domenico Scarlattilaaan 6, 1083 HS Amsterdam,
34. Zvezni minister za zdravje Jens Spahn, Rochusstraße 1, 53123 Bonn,
35. Prof. Dr. Lothar H. Wieler, ki ga je mogoče prenesti z Inštituta Robert Koch,
36. Prof. Dr. Christian Drosten, za prenos prek Inštituta Robert Koch,
37 Bill in Melinda Gates,
et al.
Poleg tega so v centrih za cepljenje vsi neinformirani cepitelji, ki so "cepivo" dajali brez upoštevanja statusa odobritve in posledic cepljenja, ki jih spodaj podpisani ne poznamo.
Za genocid, poskus genocida, kršitev člena 20 KrWKG, veleizdajo zvezne vlade itd.„
Zelo zanimivo celotno besedilo (194 strani) je tukaj in med drugim navaja zgodovinarja Dr. Paula Schreyerja, ki je bil naveden kot priča in je "povzel dogodke zadnjih 20 let ter opisal vpliv nevladnih organizacij na priprave na pandemijo".
LUBECAVAX - Prof. Dr. Winfried Stöcker, Lübeck
Status 31. avgust 2021
Winfried Stöcker se je rodil leta 1947 v Zgornji Lužici. Med letoma 1967 in 1973 je študiral medicino v Würzburgu, doktoriral leta 1976, od leta 1999 je profesor na Medicinski univerzi Tongji v Wuhanu, od leta 2011 častni profesor na Univerzi v Lübecku, ustanovitelj podjetja EUROIMMUN Medizinische Labordiagnostika AG 1987, specializiran za avtoimunsko in alergijsko diagnostiko ter infekcijsko serologijo in molekularno genetiko.
Prof. Dr. Stöcker je že zgodaj sodeloval pri razvoju učinkovitega cepiva proti SARS CoV2, ki ga je najprej preizkusil na sebi, nato je cepil svoje družinske člane in nazadnje dal cepivo, ki ga je izdelal, na voljo svojim zaposlenim.
Način delovanja je opisal v svojem Blog na naslednji način (Citat):
Predvidevamo, da je okužbo s korono mogoče učinkovito preprečiti s cepljenjem. Na spletni strani . Cepljenje v Lübecku uporablja majhen, prilagojen, gensko spremenjen trivialen antigen, ki ga telesu ni treba sintetizirati samemu, kot je to v primeru metod, ki temeljijo na genskem shuttlu. V organizmu prejemnika povzroči nastanek protiteles proti točno tistim strukturam virusa, s katerimi se ta veže na receptorje za angiotenzin-2 endotelijskih celic pri necepljenih ljudeh. S to blokado protitelesa preprečijo okužbo celic in virus se ne more uveljaviti.
Cepljenje se običajno opravi trikrat: prvi dan, nato čez približno 14 dni in nato še enkrat čez približno štiri tedne. Koncentracijo protiteles merimo 14 dni pozneje, ker nimamo uradno predpisane gotovosti, da se bo do takrat vzpostavila imunska zaščita. Pri več kot 95% bolnikih se na koncu pokaže visoka koncentracija protiteles imunoglobulinskega razreda IgG proti beljakovinam koronaste špice, zato so verjetno imuni na korono. Imunokompromitirane bolnike enkrat ali dvakrat ponovno cepimo z dvojnim odmerkom - to lahko prepoznamo le s pregledom seruma - in polovica od njih še vedno doseže visoke titre. Poleg tega so meritve pokazale, da so protitelesa lahko nevtralizirala (inaktivirala) koronaviruse in da se je v treh četrtinah primerov razvila imunost celic T.
Poroča tudi o tem, kako zdravniki na splošno izdelujejo in uporabljajo cepiva (Citat):
To pomeni, da lahko vsak zdravnik v Nemčiji zmeša antigen z adiuvantom (šele zdaj je to cepivo) in ga zakonito injicira ali aplicira svojim pacientom. Adiuvant ohrani antigen in ga predstavi imunskemu sistemu. Brez adiuvanta bi se antigen razširil po organizmu in bi se tako razredčil do te mere, da bi bil neučinkovit. Zaradi funkcionalnih razlogov je treba obe komponenti hraniti ločeno in ju sveže zmešati. V skladu z zakonom pa zdravnik cepiva, ki ga je pripravil, ne sme posredovati (tržiti) tretjim osebam.
Vir dobave je naveden na njegovem blogu:
medidoc GmbH
Jakob-Haringer-Strasse 1
5020 Salzburg
AVSTRIJA
Elektronska pošta: na spletnem mestu**@*****oc.uk
Telefonska številka: +43 59333 2000
medidoc.uk
medidoc.us
medidoc.gmbh
UID: ATU33905904
Davčni urad Salzburg mesto 114/8583
Register podjetij: 45971F
Sodišče za gospodarske registre: deželno sodišče v Salzburgu
Težavo, da EU tega cepiva še ni priznala (v primerjavi z nujnimi odobritvami pripravkov mRNA in vektorjev), kompenzira z dejstvom, da povzroči podobno odpornost celic T kot pri rekonvalescentih.
Imuniteto celic T določajo in potrjujejo ustrezno opremljeni laboratoriji. To potrdilo je pravno zavezujoč dokaz o imunosti.
Dokler so in ostanejo ozdravljeni v enakopravnem položaju s tistimi, ki so bili cepljeni v smislu različnih omejitev/sprostitev, je to cepivo - zdaj že dobro preizkušena - alternativa brez primerljivih stranskih učinkov pripravkov mRNA ali vektorjev.
Cepivo BNT162b2: možno napačno branje kodonov, napake pri sintezi beljakovin in nepravilnosti pri alternativnem spajanju
V znanstvenem Komentar: z dne 25. marca 2021, objavljeno kot predtisk pri AUTHOREA, ki ga je mogoče prenesti kot PDF v angleščini so poudarjeni možni neželeni učinki cepiva BioNTec/Pfizer BNT162b2 in predstavljen splošni učinek cepiv mRNA. Nemški prevod sledi tukaj:
Povzetek
Cepivo BNT162b2 proti Covid-19 je sestavljeno iz RNK z 4284 nukleotidi, razdeljenimi na 6 delov, ki zagotavljajo informacije za izdelavo tovarne proteinov S-spike, ki jih Sars-CoV-2 (Covid-19) uporablja za gostitelja. Te beljakovine se nato usmerijo zunaj celice in sprožijo imunski odziv ter proizvodnjo protiteles.
Težava je v močni modifikaciji mRNA: uracil se zaradi zavajanja imunskega sistema nadomesti z Ψ (psevdouridin); črke vseh kodonskih trojčkov se nadomestijo s C ali G, da se izredno poveča hitrost sinteze beljakovin; nekatere aminokisline se nadomestijo s prolinom; doda se zaporedje (3′-UTR) z neznano modifikacijo.
Te motnje bi lahko sprožile močan dvom o prisotnosti napak pri uporabi kodonov. Morebitna napaka pri prevajanju ima posledice za patofiziologijo različnih bolezni. Poleg tega je vbrizgana mRNA pre-mRNA, ki lahko privede do več zrelih mRNA; to so nepravilnosti alternativnega spajanja, ki so neposreden vir resne dolgoročne škode za zdravje ljudi.
V bistvu to, kar se proizvaja, morda ni identično beljakovini S spike: samo napaka v translacijskem dekodiranju, napačno branje kodonov, proizvajanje različnih aminokislin, nato beljakovine, ki povzročajo resno dolgoročno škodo za zdravje ljudi, čeprav DNK ni spremenjena, vendar v jedru in ne v citoplazmi, kjer prispe spremenjena mRNA.
Vendar pa v tem primeru korelacija med hitrostjo sinteze in izražanjem proteinov z napakami pri sintezi ter mehanizem, ki bi lahko vplival na prevajanje zaporedja, ostajajo nejasni in številne študije še niso bile izvedene.
Uvod
Informacije o načinu delovanja cepiva
Cepivo Sars-CoV-2 (Covid-19) podjetja BioNTec/Pfizer, imenovano BNT162b2, imenovano tudi Tozinameran ali Comirnaty, vsebuje približno 30 µg RNK, ki se vbrizga v lipidno kroglo v človeško telo, zlasti v citoplazmo celic, vendar zunaj jedra (kjer je DNK); ta RNK ima spremenjeno genetsko informacijo (zato modRNA), tj. mRNA (messenger RNA), ki vsebuje navodila za izgradnjo tovarne beljakovin, klonov beljakovine S spike, tj. beljakovine (in samo beljakovine, ne celotnega virusa), ki jo Covid-19 uporablja za prodor in okužbo gostitelja. Ko jih ribosomi serijsko izdelajo, se prek lipidne prevleke prenesejo iz celice; na ta način imunski sistem prepozna te beljakovine kot celične vsiljivce in jih napade s proizvodnjo protiteles. Zato si ni mogoče predstavljati, da bi cepivo povzročilo Covid-19 ali spremenilo človeško DNK.
Opombe o sintezi beljakovin
Prevajanje je na splošno razdeljeno na tri faze: Začetek, nadaljevanje in konec.
- Ribosom se veže na mRNA pri začetnem kodonu;
- Polipeptidna veriga se z zaporednim dodajanjem aminokislin podaljšuje v eni smeri gibanja ribosomov;
- Če se najde stop kodon, se polipeptid sprosti in ribosom se razdruži.
Napake pri sestavljanju zaporedja in prevajanju
Pretvorba zaporedja mRNA v polipeptid je odvisna od prenosne RNK (tRNA), ki prenaša aminokisline do ribosoma. Na ribosomih se tRNA pari z mRNA s komplementarnim parjenjem baz med nukleotidi kodona mRNA in nukleotidi antikodona tRNA. Ko se pravilna tRNA poveže s kodonom, prenese svojo aminokislino na konec rastoče polipeptidne verige.
Pri dekodiranju kodonov mRNA s prenosnimi RNK (tRNA) v ribosomu se baze parijo Watson-Crick.
Ocenjuje se, da je skupna stopnja napak pri replikaciji genoma (približno 10-8) približno 10.000-krat nižja kot pri sintezi beljakovin (približno 10-4), zato je v večini primerov prevajanje mRNA ključni proces, ki prispeva k nenatančnosti celičnega proteoma. Razlika med stopnjo napak pri replikaciji DNK in prevajanju mRNA je lahko delno posledica dejstva, da se replikacija DNK izvaja na ravni posameznih nukleotidov (z 41 = 4 možnimi permutacijami), medtem ko prevajalni mehanizem interpretira kodone mRNA v triplete (s 43 = 64 možnimi permutacijami)(1).
Učinkovitost mehanizma za dekodiranje mRNA v veliki meri uravnava tudi pristranskost uporabe kodonov, za katero je značilna prevelika ali premajhna zastopanost sinonimnih kodonov. Zato lahko optimizacija nihanja tRNA in uporabe kodonov v mRNA bistveno izboljša učinkovitost in natančnost prevajanja(1).
Pre- ali post-mRNA prevajanje lahko posredno povzroči napake pri sintezi beljakovin med transkripcijo in posttranslacijsko obdelavo. Vendar lahko prevajalni mehanizem neposredno prispeva k napaki pri translaciji z dekodiranjem manjkajoče tRNA (kar vodi v napačno vključitev ali branje stop kodona), napačno lacilacijo tRNA (kar vodi v napačno povezavo tRNA z aminokislinami), prerazporeditvijo kodonov ali premiki okvirjev, ki jih povzroči translokacija ribosomov(1).
Raziskovalna metoda
Analiza genetskega zaporedja
Cepivo je sestavljeno iz 4284 nukleotidov, razdeljenih na 6 delov: Kap je začetek zaporedja, ki se začne z dvema nukleotidoma GA, kar lažno nakazuje, da mRNA izvira iz človeške celice in je zato sprejeta; 5′ označuje smer, ki ji je treba slediti pri prevajanju, UTR pa označuje območje, kjer mora ribosom počivati, da lahko proizvede beljakovine. V tem delu je bil U uracil zamenjan z molekulo 1-metil-3′-pseudouridina, označenega z znakom Ψ, da bi se izognili imunskemu sistemu in preprečili razgradnjo pravkar vnesene mRNA; vendar je to dejavnik, ki lahko povzroči napake pri proizvodnji beljakovin. Pri spreminjanju določenih položajev sodeluje več Ψ-sintaz, okvare več od njih pa so povezane s človeškimi boleznimi(2).
Potem je tu še del sig, znan kot podaljšano začetno zaporedje signalnega peptida S-glikoproteina, katerega podatki so potrebni za vodenje novo nastale beljakovine iz celice prek endoplazemskega retikuluma; ponovno se spremenijo tripleti nukleotidov, da imunski sistem sprejme RNK, nekatere črke, ki tvorijo informacijo, se "premešajo" z drugimi (običajno na tretjem mestu), na videz "neškodljivimi sopomenkami" (predvsem s povečanjem števila črk C in G, ki kodirata hitrost sinteze beljakovin). Čeprav določata enake aminokisline, sinonima nista povsem enaka, vsaj kar zadeva prevajanje. Mehanistične študije kažejo, da obstajajo subtilne, a pomembne razlike v interakciji vsakega od njih z ustrezno transferno RNK (tRNA), razlike, ki vplivajo na hitrost in natančnost prevajanja.3 Čeprav je res, da tri črke tvorijo kodon in da več kot en kodon kodira isto aminokislino, je tudi res, da lahko z nesorazmernim povečanjem hitrosti proizvodnje beljakovin pride do nevarnosti resnih napak pri prevajanju.
Tudi znaki, ki sestavljajo zaporedje, povezano s konstrukcijo pravega proteina bodice S protein_mut, so bili spremenjeni z več C in G, ki jih je bilo mogoče dodati, ob upoštevanju sinonimov v standardni tabeli genske kode, z zamenjavo aminokislin lizina ( AAA) in valina (GUU) s prolinom (CUU), da se prepreči propadanje konstruiranega proteina. Na koncu tega zaporedja sta dva stop kodona. Ni bilo popolnoma dokazano, da s to zamenjavo nastanejo enaki elementi in da ne pride do napačnih interpretacij.
3′-UTR (prva netranslatirana regija 3): Vendar pa številne njegove funkcije ostajajo neznane, zato je nemogoče preveriti njegovo varnost. Kar je znano, navaja SZO, in sicer naslednji stavek: 3′ UTR za cepivo BioNTech/Pfizer je bil vzet iz "amino-terminal enhancer of split (AES) mRNA in mitohondrijsko kodirane 12S ribosomalne RNA".
poli(A): Nato dosežemo konec zaporedja in naletimo na 30 A, nato na 10-nukleotidno povezavo GCAUAUGACU, ki ji sledi še 70 A, saj lahko organizem vsako mRNA uporabi večkrat.
Ko se A porabi, se mRNA razgradi.
Vse to so lastniške modifikacije za povečanje izražanja beljakovin, o dejanskem prevajanju, ki ga opravi organizem, pa ni nič znanega.
Anomalije in druge napake pri alternativnem spajanju
Druga povezana težava je, da lahko ista pre-mRNA vodi do različnih zrelih mRNA in s tem do nekoliko različnih beljakovin (alternativne anomalije spajanja). Ugotovljeno je bilo, da je sprememba v procesu sinteze beljakovin vzrok za razvoj in rast nekaterih vrst raka in drugih bolezni, ne da bi se pri tem kakor koli spremenila DNK.
Vsi dogodki spajanja, ugotovljeni v treh genih serije PHT, vključujejo izgubo bralnega okvira sporočilnega zaporedja in uvedbo prezgodnjega terminacijskega kodona (PTC), ki se vedno nahaja več kot 50-55 nukleotidov pred zadnjim eksonsko-eksonskim stičiščem alternativnih transkriptov sistema nadzora nesmiselnega razpadanja mRNA (NMD). Pri človeškem in podganjem slc15a4/PHT1 je bilo to dokazano s poskusi zaviranja NMD v različnih celičnih linijah, v katerih se je izražanje alternativnih različic kanoničnih transkriptov po zaviranju vedno stabiliziralo(4).
Sklepi
Možna dolgoročna tveganja za zdravje ljudi
Poleg tega, da zaporedje ni optimizirano, lahko rečemo, da močno dvomi o prisotnosti napak pri uporabi kodonov. Mogoče je domnevati, da je vir napake pri sestavljanju genskega zaporedja mRNA lahko pretirana modifikacija, katere cilj je skrajno povečanje izražanja beljakovin.
Spremembe v razpoložljivosti tRNA lahko povzročijo nevrodegenerativne bolezni (Ishimura et al., 2014), regulacija specifičnih tRNA pa spodbuja metastaziranje s povečanjem stabilnosti transkriptov, ki so obogateni s pripadajočimi kodoni(5).
Napačne translacije imajo zelo resne posledice za patofiziologijo različnih bolezni, vključno z multiplo sklerozo, nevrodegeneracijo, mitohondrijsko miopatijo, encefalopatijo, laktatno acidozo, možgansko kapjo, Parkinsonovo boleznijo in rakom (nastanek, pospeševanje rasti in metastaziranje)(6).
Povezava med povečano hitrostjo sinteze beljakovin s 100 % z napakami pri prevajanju zaporedja in mehanizmom, ki vpliva na proizvodnjo aminokislin, zaenkrat ostaja v temi, saj še ni bilo opravljenih veliko poskusov.
V bistvu lahko rečemo, da je koda celotnega zaporedja notranje neuravnotežena, preveč v primerjavi z naravnim virusnim ustreznikom, in preveč, da bi lahko rekli, da človeški organizem razmnožuje natančno beljakovine S-spike kot natančno repliko, kar poleg neustrezne imunizacije predstavlja tveganje za resno dolgoročno škodo za zdravje ljudi.
Kaj nastane iz tega zaporedja, še zdaleč ni natančno opredeljeno, vendar je v genih vsakega posameznika prek ribosomskega profila zapisano, kako se prevede in kaj nastane, torej kakšna je korist ali škoda.
Reference
1. Ou X, Cao J, Cheng A, Peppelenbosch MP, Pan Q (2019) Napake pri translacijskem dekodiranju: tRNA wobbling ali misincorporation? PLoS Genet 15(3): e1008017. https://doi.org/10.1371/journal.pgen.1008017
2 Biomolekule 2020, 10(5),729; https://doi.org/10.3390/biom10050729
3 Robinson R (2014) Katera kodonska sopomenka je najboljša? Odvisno od tega, kaj je na jedilniku. PLoS Biol 12(12): e1002014. doi:10.1371/journal.pbio.1002014
4. Andries, O. (2015). mRNA modifikacija in dostavne strategije za vzpostavitev platforme za varno in učinkovito gensko zdravljenje. Univerza v Gentu. Veterinarska fakulteta, Merelbeke, Belgija.
5. eLife 2019;8:e45396 DOI: 10.7554/eLife.45396
6 Mafalda Santos, Patricia M. Pereira, A. Sofia Varanda, Joana Carvalho, Mafalda Azevedo, Denisa D. Mateus, Nuno Mendes, Patricia Oliveira, Fábio Trindade, Marta Teixeira Pinto, Renata Bordeira-Carriço, Fátima Carneiro, Carl Rui Vitira .ino, Olive & Manuel AS Santos (2018) Codon misreading tRNAs promote tumour growth in mice, RNA Biology, 15:6, 773-786, DOI: 10.1080/15476286.2018.1454244
Študije potrjujejo reprogramiranje imunskega sistema z mRNA in vektorskimi cepivi
Stephanie Seneff s Tehnološkega inštituta v Massachusettsu in Greg Nigh iz Naturopatske onkologije v Portlandu, skupina raziskovalcev iz Helmholtzevega centra za raziskave okužb, Medicinske fakultete v Hannovru, Univerze v Bonnu ter zdravniki in raziskovalci iz medicinskega centra Erasmus v Rotterdamu so prišli do enakih zaključkov.
Bistvo študij je zmanjšanje človeškega imunskega sistema, ki ga povzročajo snovi mRNA v zvezi s tako imenovanimi receptorji, podobnimi orodju. Ti so odgovorni za prepoznavanje struktur bakterijskih in virusnih patogenov.
Študija, ki jo je opravila Stephanie Seneff e.a. in Raziskovalne skupine na Inštitutu Helmholtz so na voljo za prenos tukaj.
Prav tako PEI (Paul-Ehrlich-Institut) že opozarja na protitelesa, ki povečujejo virusno obremenitev od 30.07.2020(!) (spletna stran kot PDF-Download):
"Protitelesa, ki pospešujejo okužbo, ne sprožijo odstranitve ali nevtralizacije virusa, temveč virusu omogočijo, da se veže na tako imenovane receptorje Fcγ, ki se med drugim nahajajo na specializiranih imunskih celicah (tako imenovanih fagocitih). To pa omogoča, da te celice prevzamejo virus, v katerem se lahko nato razmnožujejo. Ta proces lahko privede do povečanja virusnega bremena."
Povečano tveganje za trombozo zaradi snovi mRNA in vektorjev je dodaten zaplet. Verjetnost povečanega tveganja za trombozo je mogoče oceniti in mikroskopsko odkriti s testom D-dimer.
Referenčna vrednost za odrasle je 4,0 mg/l pa kot močno povišane.
Študija MIT
- Povzetek (nemški prevod)
"Operacija Warp Speed je v ZDA uvedla dve cepivi mRNA podjetij Pfizer in Moderna. Predhodni podatki so pokazali, da sta cepivi zelo učinkoviti, kar je pripomoglo k temu, da je FDA izdala dovoljenje za uporabo v nujnih primerih (EUA).
EUA (dovoljenje za uporabo v nujnih primerih), ki ga je izdala FDA. Izjemno hiter razvoj teh cepiv z nadzorovanimi preskusi in množična uporaba teh cepiv pa vzbujata številne pomisleke glede varnosti. V tem pregledu najprej podrobno opisujemo tehnologijo, na kateri temeljijo ta cepiva. Nato obravnavamo sestavine teh cepiv in predvideni biološki odziv na ta cepiva, vključno s proizvodnjo samega proteina spike, ter njihovo morebitno povezavo s številnimi akutnimi in dolgoročnimi patologijami, kot so krvne bolezni, nevrodegenerativne bolezni in avtoimunske bolezni. V zvezi s temi potencialno povzročenimi patologijami obravnavamo pomen aminokislinskih zaporedij v beljakovini spike, ki so povezane z beljakovino prion. Podajamo tudi kratek pregled
Študije, ki so pokazale možnost "izločanja" beljakovine spike, prenosa beljakovine s cepljenega na necepljenega
necepljene osebe, ki pri slednji povzroči simptome. Na koncu obravnavamo pogosto obravnavano vprašanje, in sicer ali lahko ta cepiva spremenijo DNK cepljenih oseb ali ne. Čeprav ni študij, ki bi to dokončno dokazale, predstavljamo verjeten scenarij, ki ga podpirajo že uveljavljene poti transformacije in prenosa genskega materiala, po katerem bi se lahko vbrizgana mRNA na koncu vključila v DNK zarodnih celic in se prenesla med generacijami. Na koncu podajamo priporočila za spremljanje, da bi pojasnili dolgoročni vpliv teh eksperimentalnih zdravil in bolje ocenili resnično razmerje med tveganjem in koristjo teh novih tehnologij.„
…
- Zaključek (nemški prevod)
„Eksperimentalna cepiva mRNA naj bi imela velike prednosti, vendar pa prinašajo tudi tveganje tragičnih in celo katastrofalnih nepredvidenih posledic. Cepiva mRNA proti SARS-CoV-2 so bila predstavljena z velikim navdušenjem, vendar je veliko vidikov njihove široke uporabe, ki vzbujajo skrb. Nekatere od teh pomislekov, vendar ne vseh, smo obravnavali tukaj in želimo poudariti, da so ti pomisleki potencialno resni in se lahko pokažejo šele čez leta ali celo generacije. Da bi se izognili škodljivim tveganjem, opisanim v tem dokumentu, priporočamo, da se upoštevajo vsaj naslednje ugotovitve raziskav in priporočila za spremljanje:
- Nacionalna raziskava podrobnih podatkov o neželenih dogodkih, povezanih s cepivi mRNA, z obsežno finančno podporo in precej dlje od prvih tednov po cepljenju.
- Ponavljajoči se testi na avtoprotitelesa pri cepljeni populaciji. Testirana avtoprotitelesa
bi lahko bili standardizirani in bi morali temeljiti na predhodno dokumentiranih protitelesih in avtoprotitelesih, ki jih lahko sproži protein spike. Ta vključujejo avtoprotitelesa proti fosfolipidom, kolagenu, aktinu, tiroperoksidazi (TPO), osnovnemu mielinskemu proteinu, tkivni transglutaminazi, transglutaminazi in morda še drugim. - Imunološko profiliranje, povezano z ravnovesjem citokinov in povezanimi biološkimi učinki. Preiskave morajo vključevati vsaj IL-6, INF-α, D-dimerje, fibrinogen in C-reaktivni protein.
- Študije, v katerih so primerjali populacije, cepljene s cepivi mRNA, in tiste, ki niso bile cepljene, da bi potrdili pričakovano nižjo stopnjo okužb in blažje simptome v cepljeni skupini, hkrati pa primerjali stopnjo zabeleženih avtoimunskih bolezni.
- Študije za oceno, ali lahko necepljena oseba od cepljene osebe v neposredni bližini pridobi cepivu specifične oblike proteinov bodic.
- Študije in vitro za razjasnitev, ali lahko spermiji sprejmejo nanodelce mRNA in jih pretvorijo v plazmide cDNA.„
Študija Inštitut Helmholtz
- Povzetek (nemški prevod)
„Cepivo BNT162b2 na osnovi mRNA družbe Pfizer/BioNTech je bilo prvo registrirano cepivo COVID-19 in se je izkazalo za učinkovito pri preprečevanju okužb s SARS-CoV-2 do 95 %.
O širših učinkih novega razreda cepiv mRNA je malo znanega, zlasti o tem, ali imajo kombinirane učinke na prirojene in prilagodljive imunske odzive. Tu smo potrdili, da cepljenje zdravih posameznikov s cepivom BNT162b2 povzroči učinkovito humoralno in celično imunost proti več različicam SARS-CoV-2. Zanimivo pa je, da je cepivo BNT162b2 moduliralo tudi nastajanje vnetnih citokinov pri prirojenih imunskih celicah po nastanku vnetnih citokinov pri prirojenih imunskih celicah, tako pri stimulaciji s specifičnimi (SARS-CoV-2) kot nespecifičnimi (virusnimi, mikotičnimi in bakterijskimi) dražljaji.
Odziv celic prirojenega imunskega sistema na ligande TLR4 in TLR7/8 je bil po cepljenju s cepivom BNT162b2 manjši, medtem ko so bili odzivi na citokine, ki jih povzročajo glive, močnejši. Skratka, cepivo mRNA BNT162b2 povzroči kompleksno funkcionalno reprogramiranje prirojenih imunskih odzivov, kar je treba upoštevati pri razvoju in uporabi tega novega razreda cepiv.
…
Naši podatki kažejo, da cepivo BNT162b2 vpliva tako na prilagodljivo kot na prirojeno vejo imunosti in da se ti učinki razlikujejo pri različnih sevih SARS-CoV-2.
Zanimivo je, da cepivo BNT162b2 povzroči tudi reprogramiranje prirojenega imunskega odziva. To je treba upoštevati: V kombinaciji z močnim adaptivnim imunskim odzivom bi to lahko prispevalo k bolj uravnoteženemu vnetnemu odzivu med okužbo z virusom COVID-19 ali pa k zmanjšanemu prirojenemu imunskemu odzivu na virus. Cepivo BNT162b2 jasno ščiti pred virusom COVID-19, vendar trajanje te zaščite še ni znano, zato si je mogoče predstavljati, da bi to znanje lahko vključili v prihodnje generacije cepiva, da bi izboljšali obseg in trajanje zaščite. Naše ugotovitve je treba potrditi z izvedbo večjih kohortnih študij s populacijami iz različnih okolij, v nadaljnjih študijah pa raziskati morebitne interakcije med cepivom BNT162b2 in drugimi cepivi.„
Pisma z rdečo roko
Farmacevtska podjetja izdajajo pisma z rdečo roko, če se med drugim pojavijo prej neznana tveganja za zdravila ali če so serije zdravil odpoklicane iz varnostnih razlogov.
To velja tudi za vsa zdravila (cepiva) COVID-19:
BionTech/Pfizer
Janssen
- 26.04.2021 – https://csiag.de/wp-content/uploads/2021/09/Rote-Hand-Janssen-26.042021.pdf
- 19.07.2021 – https://csiag.de/wp-content/uploads/2021/09/Rote-Hand-Janssen-19.07.2021.pdf
Astra Zeneca
- 24.03.2021 – https://csiag.de/wp-content/uploads/2021/09/Rote-Hand-AstraZeneca-24.03.2021.pdf
- 02.06.2021 – https://csiag.de/wp-content/uploads/2021/09/Rote-Hand-AstraZeneca-02.06.2021.pdf
- 23.06.2021 – https://csiag.de/wp-content/uploads/2021/09/Rote-Hand-AstraZeneca-23.06.2021.pdf
Medicinske informacije / navodila za uporabo za cepiva COVID
Vsaka serija cepiv je opremljena z navodili za uporabo in navodili za uporabo. Na njiju je treba opreti informacije pred cepljenjem.
Proizvajalčeve zdravstvene informacije so na voljo tukaj v obliki povezave EMA in povezave za prenos PDF. Navodila za uporabo trenutno niso ali niso več na voljo na spletu.
- Komercialne storitve - BioNTech
- Vložek za pakiranje (PDF)
- Zdravstveni podatki (Priloga I - EMA) - Informacije za uporabnike – (PDF)
- Johnson & Johnson / Janssen
- Vložek za pakiranje (PDF)
- Zdravstveni podatki (Priloga I - EMA) - (PDF)
- Spikevax - Moderna
- Vložek za pakiranje (PDF)
- Zdravstveni podatki (Priloga I - EMA) - (PDF)
- Vaxzevria - AstraZeneca
- Vložek za pakiranje (PDF)
- Zdravstveni podatki (Priloga I - EMA) - Zdravstveni podatki (proizvajalec) - (PDF)
V informacijah, ki so jih predložili zgoraj navedeni proizvajalci, je namen cepiva opredeljen predvsem kot "preprečevanje bolezni COVID". Popolna zaščita pred prihodnjo okužbo s COVID ni zagotovljena.
Tudi družba AstraZeneca se sklicuje na temo "verska prepričanja":
"Vsakdo se mora sam odločiti, ali je njegovo zdravljenje združljivo z njegovimi verskimi prepričanji."
Rezultati obdukcije osebe, ki je umrla kmalu po cepljenju s cepivom BioNTech
Pod naslovom Prvi primer postmortalne študije pri bolniku, cepljenem proti SARS-CoV-2 rezultat obdukcije, opravljene v sodelovanju z Inštitutom za patologijo Univerzitetne bolnišnice OWL Univerze Bielefeld, Campus Lippe, Röntgenstr. 18, D-32756 Detmold, in Inštitutom za patologijo bolnišnice KRH Nordstadt, Hannover, Nemčija, je bil objavljen 16. aprila 2021. tukaj je na voljo v izvirniku v formatu PDF.
Celotno besedilo je v nemškem prevodu:
Povzetek
Prej asimptomatski 86-letni moški je prejel prvi odmerek cepiva BNT162b2 mRNA COVID-19. Čez 4 tedne je umrl zaradi akutne ledvične in dihalne odpovedi. Čeprav ni imel simptomov, značilnih za COVID-19, je bil pred smrtjo pozitiven na SARS-CoV-2. Vezava antigena na beljakovino spike (S1) je pokazala znatne koncentracije za imunoglobulin (Ig) G, medtem ko se nukleokapsid IgG/IgM ni sprožil. Pri obdukciji sta bila kot vzrok smrti določena akutna bronhopnevmonija in odpoved tubulov, vendar značilnih morfoloških znakov COVID-19 nismo opazili. Posmrtno molekularno kartiranje z verižno reakcijo s polimerazo v realnem času je pokazalo ustrezne pragove cikla SARS-CoV-2 v vseh analiziranih organih (ustnem žrelu, sluznici čutil, sapniku, pljučih, srcu, ledvicah in možganih), razen v jetrih in čutilnem bulbu. Ti rezultati bi lahko kazali, da prvo cepljenje povzroči imunogenost, ne pa sterilne imunosti.
Poročamo o 86-letnem moškem, stanovalcu doma za ostarele, ki je bil cepljen proti SARS-CoV-2. Predhodna anamneza je vključevala sistemsko arterijsko hipertenzijo, kronično vensko insuficienco, demenco in raka prostate. Moški je 9. januarja 2021 prejel cepivo BNT162b2 v obliki lipidnih nanodelcev z nukleozidi modificirano RNA v odmerku 30 μg. Na ta dan in v naslednjih dveh tednih ni kazal nobenih kliničnih simptomov (preglednica 1). Na 18. dan je bil sprejet v bolnišnico zaradi poslabšanja diareje. Ker ni kazal kliničnih znakov COVID-19, ni bil izoliran v posebnem okolju. Laboratorijske preiskave so pokazale hipokromno anemijo in povišano raven kreatinina v serumu. Test na antigen in verižna reakcija s polimerazo (PCR) za SARS-CoV-2 sta bila negativna.
Za nadaljnjo preiskavo vzroka driske so opravili gastroskopijo in kolonoskopijo. Zlasti kolonoskopija je razkrila ulcerativno spremembo na fleksiji levega kolona, ki je bila histološko diagnosticirana kot ishemični kolitis. Analiza PCR na biopsijskih vzorcih po predhodno opisani metodi (Kaltschmidt et al., 2021) je bila negativna za SARS-CoV-2. Zdravljenje je bilo podporno z mesalazinom in intravenskim dodajanjem železa. Kasneje se je bolnikovo stanje poslabšalo z razvojem ledvične insuficience. Na 24. dan je bil bolnik v isti bolniški sobi kot naš primer pozitiven na SARS-CoV-2. 25. dan je bil naš bolnik pozitiven na SARS-CoV-2 s PCR v realnem času (RT-PCR), pri čemer je nizka mejna vrednost cikla (Ct) kazala na visoko virusno obremenitev. Pri nadaljnji analizi vzorca brisov ni bilo dokazov za mutantne različice SARS-CoV-2 B.1.1.7, B.1.351 ali B.1.1.28.1. Skupaj se zdi, da se je bolnik okužil pri bolniku v bolniški sobi. Naš bolnik je zdaj kazal vročino in dihalno stisko, pri avskultaciji pljuč pa so se pokazale razpoke. Kljub temu da smo začeli dodajati kisik (2 litra na minuto) in antibiotično zdravljenje s ceftriaksonom, je bolnik naslednji dan umrl zaradi akutne ledvične in dihalne odpovedi.
Ocena imunogenosti z merjenjem globulina G, ki veže antigen (Ig), v vzorcih seruma, pridobljenih 25. dan, je pokazala odziv protiteles (8,7 U/ml, referenčna vrednost 1,0 U/ml; Roche ECLIA™). Ti rezultati kažejo, da se je pri bolniku zaradi cepljenja že razvila ustrezna imunogenost.
Posmrtne preiskave so pokazale akutno obojestransko bronhopnevmonijo z abscesi, ki so bili včasih obdani z bakterijskimi koki (slika 1). Običajno opisanih manifestacij s COVID-19 povezanega pnevmonitisa ni bilo ugotovljenih. V srcu smo našli biventrikularno hipertrofijo (teža 580 g) in histološko diagnosticirali ishemično kardiomiopatijo. V srcu in v manjši meri v pljučih smo odkrili amiloidozo transtiretinskega tipa. V ledvicah je bila ugotovljena kronična poškodba z arteriolosklerozo in intersticijsko fibrozo ter akutna ledvična odpoved s hidropično tubularno degeneracijo. Pregled možganov je pokazal psevdocistično nekrozo levega parietalnega tkiva, ki je bila diagnosticirana kot staro infarktno območje.
Zgornja ilustracija pomeni tukaj je na voljo za prenos v formatu PDF visoke ločljivosti.
Molekularno kartiranje 9 različnih anatomskih delov v formalinu fiksiranega in v parafin vgrajenega tkiva smo izvedli, kot je bilo že opisano (Kaltschmidt et al., 2021). RNA je bila ekstrahirana iz parafinskih rezov z napravo Maxwell RSC (Promega, Madison, WI, ZDA). Multipleksna analiza RT-PCR je bila usmerjena na 2 neodvisna gena genoma SARS-CoV-2 (komplet Fluorotype SARS-CoV-2 plus; HAIN/Bruker, Nehren, Nemčija): (tarča 1) in nukleopeptid (tarča 2). Negativna mejna vrednost je bila Ct >45. Analizirali smo 9 različnih tkivnih vzorcev za znane in pomembne poti širjenja virusa v človeškem telesu (slika 1). Da bi se izognili navzkrižni kontaminaciji, je bil vsak vzorec neposredno vložen v ločene tkivne kasete in ločeno fiksiran v 4% formalinu, pripravljenem s fosfatno puferirano fiziološko raztopino. Virusno RNK smo odkrili v skoraj vseh analiziranih organih, razen v jetrih in čutilnem bulbu (slika 1).
Avtorji še niso poročali o podrobni študiji obdukcije, ki bi vključevala molekularno kartiranje virusa pri bolniku, cepljenem proti SARS-CoV-2, pri katerem je bil test SARS-CoV-2 po cepljenju pozitiven. Predlagamo, da je enkratno zdravljenje s cepivom BNT162b2b2 RNA povzročilo pomembno imunogenost, kar se odraža v sporočenih ravneh nevtralizacijskega IgG v serumu, ki temeljijo na beljakovini spike. Od tednov pred cepljenjem prek cepljenja (1. dan) do tik pred smrtjo (24. dan) je bil bolnik brez kliničnih simptomov, ki jih običajno pripisujemo COVID-19. Poleg tega krvni testi niso pokazali titra IgM, ki ga običajno opazimo 7-14 dni po pojavu simptomov (Kim et al., 2020). Vendar je bil bolnik pozitiven na teste za SARS-CoV-2. Tako vrednost ct, izmerjena v brisih nosnega žrela, kot vrednosti, izmerjene v vzorcih obdukcije, fiksiranih s formalinom in vdelanih v parafin, kažejo na virusno obremenitev in kažejo na prenosljivost. Ker je naš bolnik umrl približno 2 dni po prvem pozitivnem rezultatu testa SARS-CoV-2, domnevamo, da podatki molekularnega kartiranja odražajo zgodnjo fazo virusne okužbe. Zgodnja faza okužbe bi lahko pojasnila tudi, zakaj različna območja, kot sta čutilna bulica in jetra, (še) niso bila prizadeta zaradi sistemskega širjenja virusa.
Značilnih morfoloških značilnosti COVID-19, o katerih so poročali v obsežnih morfoloških študijah obdukcij (Schaller et al., 2020, Edler et al., 2020, Ackermann et al., 2020), še nismo opazili. V pljučih nismo našli značilnih znakov difuzne alveolarne poškodbe, smo pa ugotovili obsežno akutno bronhopnevmonijo, verjetno bakterijskega izvora. Zaključili smo, da je bolnik umrl zaradi bronhopnevmonije in akutne ledvične odpovedi.
Naši rezultati so skladni s prejšnjimi ugotovitvami na živalskih modelih, da je imunizacija proti SARS-CoV-2 s cepljenjem zmanjšala resnost patogeneze, zlasti glede hude pljučne bolezni, medtem ko je virusna RNK v nosnih brisih ostala (Van Doremalen et al., 2020, Vogel et al., 2021). Nedavno so Amit et al. (2021) objavili rezultate kliničnega preskušanja pri zdravstvenih delavcih s cepivom BNT162b2, ki so pokazali znatno zgodnje zmanjšanje števila okužb s SARS-CoV-2 in simptomatskih COVID-19 po aplikaciji prvega odmerka cepiva.
Med najpomembnejšimi neželenimi učinki pri bolnikih, cepljenih proti SARS-CoV-2, prevladujejo lokalni učinki, hude sistemske reakcije pa so redko opisane (Yuan et al., 2020). Vendar pa so nedavna poročila o povečanem tveganju za nastanek krvnih strdkov, zlasti tromboze možganskih venskih sinusov v primeru cepiva družbe Oxford-AstraZeneca (Mahase, 2021), sprožila razpravo o varnosti cepiva COVID-19 na splošno. Za podrobnejši vpogled v usodne neželene učinke in smrti, povezane s cepljenjem, je treba opraviti celovito analizo podatkov o obdukcijah.
Če povzamemo, rezultati naše študije primera obdukcije pri bolniku s cepivom mRNA potrjujejo stališče, da je imunogenost mogoče povzročiti že s prvim cepljenjem proti SARS-CoV-2, medtem ko sterilna imunost še ni dovolj razvita.
Zahvala
Za strokovno tehnično podporo se zahvaljujemo Ralfu Bode in Nadine Weber (Univerzitetna bolnišnica OWL Univerze Bielefeld, Campus Lippe, Detmold).
Reference
- Ackermann M., Verleden S.E., Kuehnel M., Haverich A., Welte T., Laenger F. Pljučni žilni endotelialitis, tromboza in angiogeneza pri Covidu-19. N Engl J Med. 2020;383:120-128. doi: 10.1056/NEJMoa2015432. [Brezplačni članek PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
- Amit S., Regev-Yochay G., Afek A., Kreiss Y., Leshem E. Zgodnje zmanjšanje stopnje okužbe s SARS-CoV2 in COVID-19 pri prejemnikih cepiva BNT162b2. Lancet. 2021;397(10277):875-877. doi: 10.1016/S0140-6736(21)00448-7. [Brezplačni članek PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
- Edler C., Schröder A.S., Aepfelbacher M., Fitzek A., Heinemann A., Heinrich F. Umiranje zaradi okužbe s SARS-CoV2 - študija obdukcije prvih zaporednih 80 primerov v Hamburgu v Nemčiji. Int J Legal Med. 2020;134:1275-1284. doi: 10.1007/s00414-020-02336-7. [Brezplačni članek PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
- Kaltschmidt B., Fitzek A.D.E., Schaedler J., Förster C., Kaltschmidt C., Hansen T. Jetrna vaskulopatija in regenerativni odzivi jeter pri smrtnih primerih COVID-19. Clin Gastroenterol Hepatol. 2021 doi: 10.1016/j.cgh.2021.01.044. [Brezplačni članek PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
- Kim D.S., Rowland-Jones S., Gea-Mallorqui E. Ali bo okužba s SARS-CoV-2 povzročila dolgotrajno zaščitno ali sterilizacijsko imunost? Posledice za strategije cepljenja. Front Immunol. 2020;11:571481. doi: 10.3389/fimmu.2020.571481.eCollection2020. [Brezplačni članek PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
- Mahase E. Covid-19: cepivo družbe AstraZeneca ni povezano s povečanim tveganjem za nastanek krvnih strdkov, ugotavlja Evropska agencija za zdravila. BMJ. 2021;372:n774. doi: 10.1136/bmj.n774. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
- Schaller T., Hirschbühl K., Burkhardt K., Braun G., Trepel M., Märkl B. Posmrtni pregledi bolnikov s COVID19. JAMA. 2020;323:2518-2520. doi: 10.1001/jama.2020.8907.Brezplačni članek PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
- Van Doremalen N., Lambe T., Spencer A., Belij-Rammersdorfer S., Purushotham J.N., Port J.R. Cepivo ChAdOx1 nCoV-19 preprečuje pljučnico SARS-CoV-2 pri makakih rezus. Narava. 2020;586:578-582. doi: 10.1101/2020.05.13.093195. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
- Vogel A.B., Kanevsky I., Che Y., Swanson K.A., Muik A., Vormehr M. Imunogena cepiva BNT162b ščitijo makake rezus pred SARS-CoV-2. Narava. 2021;592(7853):283-289. doi: 10.1101/2020.12.11.421008. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
- Yuan P., Ai P., Liu Y., Ai Z., Wang Y., Cao W. Varnost, prenašanje in imunogenost cepiv COVID19: sistematični pregled in metaanaliza. medRxiv. 2020 doi: 10.1101/2020.11.03.20224998. Preprint. [CrossRef] [Google Scholar]
Rezultati raziskav o izvlečku regrata - zavira vezavo proteinov spike
Odlomek besedila / prevod iz članka "RAZISKAVE: Izvleček regratovih listov blokira vezavo proteinov spike na celični površinski receptor ACE2„:
Beljakovine s konicami virusa SARS-CoV-2 se lahko naredijo neškodljive z navadnim "plevelom", ki ga vsako leto prepovemo na travnikih. Nemški Univerzitetna študija so pokazali, da lahko regrat (Taraxacum officinale) blokira vezavo proteinov spike na receptorje na površini celic ACE2 v človeških pljučnih in ledvičnih celicah. Izvleček regrata na vodni osnovi, pridobljen iz posušenih listov rastline, je bil učinkovit proti beljakovini spike D614 in različnim mutantnim sevom, vključno z D614G, N501Y, K417N in E484K.
Tukaj je nemški prevod izvirne študije (PDF - Angleščina) :
Povzetek:
Svetovna zdravstvena organizacija (WHO) je 11. marca 2020 koronavirusno bolezen 2019 (COVID-19), ki jo povzroča virus SARS-CoV-2, razglasila za globalno pandemijo. Do danes se hitro širijo nove "zaskrbljujoče različice" virusa SARS-CoV-2, britanska (B.1.1.7), južnoafriška (B.1.351) ali brazilska (P.1) različica. Vse vsebujejo številne mutacije na mestu prepoznavanja receptorja ACE2 beljakovine spike v primerjavi z originalnim zaporedjem Wuhan, ki je zelo pomembno zaradi možnosti imunske obrambe. Tukaj poročamo o učinkovitosti regrata (Taraxacum officinale) pri blokiranju interakcije proteina in proteina spike S1 s človeškim receptorjem na površini celic ACE2. To je bilo mogoče dokazati za izvirni spik D614 in tudi za njegove mutirane oblike (D614G, N501Y in mešanica K417N, E484K, N501Y) v človeških ledvičnih celicah HEK293-hACE2 in pljučnih celicah A549-hACE2-TMPRSS2. Za ta učinek so odgovorne visokomolekularne spojine v izvlečku na vodni osnovi. Ekstrakt je učinkovito preprečil okužbo pljučnih celic s psevdotipiziranimi lentivirusnimi delci SARS-CoV-2 spike, prav tako pa tudi z virusom povzročeno proinflamatorno izločanje interlevkina-6. V sodobnih monografijah o zeliščih je uporaba te zdravilne rastline varna. Zato bi morali tukaj navedeni rezultati in vitro spodbuditi nadaljnje raziskave o kliničnem pomenu in uporabnosti izvlečka kot strategije preprečevanja okužbe s SARS-CoV-2.
SARS-CoV-2 med prenosom med ljudmi nenehno mutira. Zaradi tega bi se lahko virus izognil obstoječim terapevtskim in preventivnim pristopom, ki so usmerjeni proti beljakovini spike. Z vodnimi izvlečki navadnega regrata (Taraxacum officinale) smo ugotovili učinkovito zaviranje interakcije protein-protein med receptorjem za vstop človeškega virusa v celico ACE2 in proteinom spike SARS-CoV-2, vključno s petimi pomembnimi mutacijami. To je bilo dokazano in vitro z uporabo človeških ledvičnih (HEK293) in pljučnih (A549) celic, ki prekomerno izražajo beljakovine ACE2 oziroma ACE2/TMPRSS2. Izvleček je učinkovito preprečil okužbo pljučnih celic s psevdotipiziranim lentivirusom SARS-CoV-2. Rezultati zahtevajo bolj poglobljeno analizo učinkovitosti regrata pri preprečevanju SARS-CoV-2 in potrditvene klinične dokaze.
Doslej so se hitro razširile tri nove različice virusa SARS-CoV-2, o katerih so prvič poročali v Združenem kraljestvu (različica B.1.1.7), Južni Afriki (različica B.1.351) in Braziliji (različica P.1), vsem pa je skupna mutacija N501Y v beljakovini spike (5). Po svetu zdaj prevladujejo različice SARS-CoV-2 z mutacijo D614G v beljakovini spike. Poleg D614G vsebuje B.1.351 še druge mutacije v beljakovini spike, vključno s tremi mutacijami (K417N, E484K in N501Y) v RBD (6). Predhodni podatki kažejo na možno povezavo med opaženo povečano smrtnostjo z mutacijo D614G in domnevajo, da konformacijska sprememba v beljakovini spike vodi do povečane infektivnosti (7). Izračuni motenj proste energije za interakcije mutacij N501Y in K417N, tako z receptorjem ACE2 kot s protitelesom, pridobljenim od bolnikov s COVID-19, odpirajo pomembna vprašanja o možnem imunskem odzivu ljudi in uspešnosti že razpoložljivih cepiv (8). Poleg tega so poročali o povečani odpornosti različic B.1.351 in B.1.1.7 na nevtralizacijo protiteles; pri B.1.351 je bila to predvsem posledica mutacije E484K v beljakovini spike (9).
Vmešavanje v mesto interakcije med podenoto S1 spike in ACE2 je lahko pomembna tarča za zdravljenje ali preprečevanje (10). Spojine naravnega izvora lahko zagotavljajo določeno zaščito pred vdorom virusnih celic, hkrati pa imajo malo ali nič stranskih učinkov. Tu poročamo o zaviralnem potencialu regrata na vezavo beljakovine RBD spike S1 na celični površinski receptor hACE2 in primerjamo učinek prvotne beljakovine spike D614 z njenimi mutacijami D614G, N501Y in mešanico (K417N, E484K, N501Y) .
Navadni regrat (Taraxacum officinale) spada v družino rastlin Asteraceae, poddružino Cichorioideae s številnimi sortami in manjšimi vrstami. Je trajno zelišče, ki izvira iz toplejših zmernih pasov severne poloble in raste na poljih, ob cestah in ruderalnih rastiščih. T. officinale se uživa kot rastlinska hrana, uporablja pa se tudi v evropski fitoterapiji pri boleznih jeter, žolčnika, prebavnega trakta ali revmatičnih obolenjih. V sodobnih monografijah o zeliščih je uporaba rastline varna, empirična uporaba T. officinale pa je bila ocenjena pozitivno. Indikacije za uporabo T. officinale so navedene v monografijah nemške Komisije E, Evropske znanstvene kooperative za fitoterapijo (ESCOP) (11, 12) in Britanskega združenja za zeliščno medicino (13). Rastlina vsebuje širok spekter fitokemikalij, vključno s terpeni (seskviterpenski laktoni, kot so taraksična kislina in triterpeni), fenolnimi spojinami (fenolne kisline, flavonoidi in kumarini) in polisaharidi (14). Ugotovljeno je bilo, da je prevladujoča fenolna spojina cikorna kislina (dikafeoilvinska kislina). Druge so bile mono- in dikafeoilkvinske kisline, derivati vinske kisline, flavoni in flavonolni glikozidi. Poleg teh razredov spojin korenine vsebujejo tudi veliko inulina (15). Zdravilne oblike so vodni poparek in infuzija, prečrpan svež rastlinski sok, hidroalkoholna tinktura in obložene tablete iz suhih ekstraktov, ki se uporabljajo kot monopreparati (16), pa tudi kot sestavni deli zdravil. Naša raziskava je bila izvedena z vodnimi izvlečki iz rastlinskih listov. Ugotovili smo, da listni izvlečki učinkovito blokirajo beljakovino spike ali njene mutantne oblike receptorja ACE2, ki smo jih uporabili pred ali po inkubaciji, in da so za ta učinek odgovorne visokomolekularne spojine. Rastlina iste vrste (Cichorium intybus) bi lahko imela podobne učinke, vendar z manjšo močjo. Okužbo človeških pljučnih celic A549-hACE2-TMPRSS2 s psevdotipiziranim lentivirusom SARS-CoV-2 je izvleček učinkovito preprečil.
Rezultati
T. officinale zavira spike S1 - vezavo ACE2
Najprej smo raziskali zaviranje interakcije med proteinom spike RBD SARS-CoV-2 in ACE2 z izvlečki listov T. officinale. Slika 1A prikazuje od koncentracije odvisno inhibicijo vezave S1-ACE2 pri obdelavi z izvlečkom T. officinale (EC50 = 12 mg/ml). Tudi izvlečki C. intybus so pokazali od koncentracije odvisno zaviranje vezave, vendar z manjšo močjo kot T. officinale (EC50 = 30 mg/ml) ( 1B ). Nato smo pripravili dve frakciji posušenih listov T. officinale in cikorije ter ekstrakte ločili na frakcijo z visoko molekulsko maso (>5 kDa) in frakcijo z nizko molekulsko maso (<5 kDa). Kot je prikazano na sliki 1C, so bile bioaktivne spojine večinoma prisotne v frakciji HMW. V frakciji LMW je bila opažena le nizka aktivnost.
.
Vpliv T. officinale in cikorije na zaviranje ACE 2 pri Sars-CoV-2.
A-B) Od koncentracije odvisen učinek izvlečka T. officinale (TO) in C. intybus (CI). C-D) Učinek frakcij izvlečka listov TO in CI. Ekstrakti so bili liofilizirani in nato frakcionirani po molekulski masi. Mejna vrednost je bila 5 kDa (HMW > 5 kDa, LMW < 5 kDa). H+L: frakciji HMW in LMW; kot referenca je bilo uporabljenih 50 mg posušenih listov na ml vode. Uporabljene so bile količine frakcij HMW in LMW, enakovredne količinam posušenih listov. Inhibicija vezave je bila ocenjena s tehniko ELISA. Stolpci so povprečja + SD. Kontrola topila: destilirana voda (a.d.).
Z uporabo celic HEK293, ki prekomerno izražajo hACE2, smo dodatno raziskali potencial izvlečkov T. officinale in C. intybus za blokiranje vezave trna na celice. Kot je prikazano na sliki 2, je predhodna inkubacija celic s T. officinale za 1 minuto učinkovito blokirala vezavo trna na celice za 76,67 % ± 2,9 in njegovo HMW frakcijo za 62,5 ± 13,4% v primerjavi s kontrolno vodo. Po 3 urah je bila inhibicija še vedno 50 ± 13,6 % za ekstrakt in 35,0 ± 20 % za HMW frakcijo T. officinale. Izvleček cikorije je bil v tem preskusnem sistemu manj učinkovit; inhibicija vezave je bila po 1 min. 37 ± 20 %, po 1 min. pa 5,6 ± 9,9 %.
Zaviranje vezave proteina S1 spike na človeške celice HEK293-hACE2 s predhodno inkubacijo z ekstraktom.
Celice so bile v navedenem času predhodno inkubirane z izvlečkom 10 mg/ml T. officinale (TO), njegovo HMW frakcijo, enako 10 mg/ml izvlečka (HMW), in 10 mg/ml C. intybus (CI) ali kontrolo s topilom (ad), nato pa so bile 1 uro brez vmesnega izpiranja pri 4 °C obdelane s HIS-označenim proteinom S1 spike. Inhibicijo vezave smo določili s pretočno citometrijo. N=3, stolpci so povprečja + SD. Zgoraj levo: Citogram celic HEK-hACE2, ki so bile zajete. V sredini: Prekrivanje reprezentativnih histogramov intenzivnosti fluorescence za površinsko izražanje ACE2. Desno zgoraj: prekrivanje reprezentativnih histogramov intenzivnosti fluorescence za inhibicijo vezave trna z ekstrakti ali a.d.; pozitivna kontrola: 20 µg/ml topnega hACE2. Celice so bile obarvane z monoklonskim protitelesom anti-His-tag, konjugiranim z Alexa Fluor 647.
Obdelava celic z enakimi količinami spike D614 in njenih različic D614G in N501Y je potrdila večjo afiniteto D614G (približno 1,5-krat) in N501Y (približno 3- do 4-krat) kot protein spike D614 do površinskega receptorja ACE2 celic HEK293 (slika 3A). Hitra predhodna obdelava s T. officinale (v 30 sekundah) je blokirala vezavo trna na površinski receptor ACE2 (slike 3B-C). Po 30 sekundah je bilo to 58,2 ± 28,7% za D614, 88,2 ± 4,6% za D614G in 88 ± 1,3% za N501Y zaviranje vezave z izvlečkom T. officinale. Čeprav je bila pri izvlečku C. intybus opažena inhibicija vezave na trne, je bila v primerjavi s T. officinale nižja za približno 30-70%, odvisno od testirane beljakovine trna. Če smo vezavo analizirali pri 37 °C namesto pri 4 °C, so bili rezultati za T. officinale primerljivi, za izvleček cikorije pa v tej celični liniji še šibkejši (slika 3D). Za izvlečke T. officinale in C. intybus je bila inhibicija vezave bodic 47,90 ± 14,72 in 13,12 ± 12,37 (D614), 68,42 ± 14,53 in 8,86 ± 15,29 (D614G), 71,66 ± 7,66 in 37,56 ± 16,14 (N501Y). Zanimalo nas je tudi, ali lahko izvlečki nadomestijo vezavo špice na površinski receptor ACE2 v človeških celicah. V ta namen smo celice najprej inkubirali z beljakovinami D614, D614G ali N501Y in nato z izvlečki. Kot je prikazano v 3D, je T. officinale lahko učinkovito odstranil trpotec z receptorja (v povprečju 50%); cikorija je bila takrat veliko šibkejša (v povprečju 25 %). Poskuse smo razširili na človeške celice A549-hACE2-TMPRSS2 in za T. officinale smo lahko potrdili rezultate, opažene v celicah HEK293-hACE2 (slika 3D-G). Ta celična linija je bila stabilno transfundirana s človeškima genoma ACE2 in TMPRSS2 in zanimivo je, da je bil izvleček C. intybus učinkovitejši v primerjavi s celicami HEK-hACE2. Po predhodni obdelavi z izvlečkom se je zaviranje vezave trna na celice gibalo od 73,5% ± 5,2 (D614) do 86,3% ± 3,23 (N501Y) za izvleček T. officinale in od 56,1% ± 5,28 (D614) do 63,07% ± 14,55 (N501Y) za izvleček C. intybus. Že pri 0,6 mg/ml je T. officinale znatno blokiral vezavo na beljakovino D614G spike za približno 40% (IC50 = 1,73 mg/ml). Če so bile celice pred obdelavo z izvlečkom predhodno inkubirane z beljakovino spike, so bili rezultati za D614 in D614G primerljivi za izvleček T. officinale, vendar nekoliko nižji za N501Y ( 3C - D ). V tem okolju je bila testirana tudi mešanica mutant N501Y, K417N in E484K, pri čemer je ekstrakt T. officinale ponovno blokiral vezavo za 82,97 % ± 6,31 (ekstrakt pred inkubacijo) in 79,7 % ± 9,15 (ekstrakt po inkubaciji).
Inhibicija vezave spike D614 in njenih mutantov D614G, N501Y ali mešanice (N501Y, K417N in E484K) na človeške celice HEK293-hACE2 in A549-hACE2-TMPRSS2 z ekstraktom pred in po inkubaciji.
Prekrivanje histograma intenzivnosti fluorescence za A) neobarvane celice HEK, kontrolno barvanje (anti-His-tag A647) in celice, inkubirane s pikom D614, D614G ali N501Y, označenim s His-tagom, 1 uro pri 4 °C. B) Celice, predhodno inkubirane s kontrolo s topilom (ad), 10 mg/ml T. officinale (TO) ali 10 mg/ml C. intybus (CI) za 30-60 sekund in nato obdelane z beljakovino S1 . s His-tagom označenim pikom D614, D614G ali N501Y za 1 uro brez vmesnega izpiranja pri 4 °C. D-G) Vpliv inkubacije ekstrakta na celice HEK ali A549 pred ali po inkubaciji s pikom D614, D614G, N501Y ali mešanim proteinom (N501Y, K417N in E484K) pri 37 °C. H) Rastlinski ekstrakti so bili inkubirani v slini 4 človeških darovalcev 30 min pri 37 °C. Celice so bile nato 60 s pri 37 °C predhodno obdelane s 5 mg/ml ekstraktov, preden so bile 0,5 h pri 37 °C inkubirane z beljakovino D614, označeno s His-tagom. Zaviranje vezave trna na človeške celice smo ocenili s pretočno citometrično analizo celic, obarvanih s konjugiranim monoklonskim protitelesom anti-His-tag Alexa Fluor 647. Stolpci so povprečne vrednosti +SD.
Izvlečki, ki so jih pred obdelavo celic 30 minut inkubirali v človeški slini pri 37 °C, so imeli primerljiv učinek na inhibicijo spike D614G (slika 3H), kar kaže na dobro stabilnost bioaktivnih spojin v slini.
Da bi preverili, ali izvleček T. officinale vpliva na katalitično aktivnost receptorja ACE2 ali na izražanje beljakovin ACE2, smo celice A549-hACE2-TMPRSS2 obdelali z izvlečkom za 1-24 ur pred lizo celic in detekcijo. Po 84 urah izpostavljenosti celic izvlečku nismo opazili izgube viabilnosti celic ( 4A ). Po 1 ali 24 urah ni bilo zaznati zmanjšanja encimske aktivnosti (4B). Ščepec je po 6 urah znatno znižal beljakovino ACE2 (4C, črne črte), kar je veljalo tudi za izvleček, bodisi samostojno (4C, bele črte) bodisi v kombinaciji s ščepcem (črne črte). Po 24 urah se je ta učinek izničil (4D).
Vpliv izvlečka T. officinale na aktivnost encima ACE2 in izražanje beljakovin.
A) Viabilnost celic A549-hACE2-TMPRSS2 smo določili z barvanjem celic s tripanovim modrim po 84 urah izpostavljenosti ekstraktu. B) Celice smo inkubirali z izvlečkom TO ali 500 ng/ml proteina S1 in analizirali encimsko aktivnost z uporabo fluorescenčnega kompleta. C-D) Celice so bile 6 ur ali 24 ur izpostavljene ekstraktu brez (bele črte) ali s (črne črte) 500 ng/ml proteina S1 in analizirane na izražanje proteina ACE2 z uporabo kompleta ELISA za človeški ACE2; a. d.: kontrola s topilom. Stolpci so povprečja + SD, N ≥ 3 neodvisni poskusi.
Z uporabo lentivirusnega psevdotipa SARS-CoV-2 smo nato preverili, ali lahko ekstrakt blokira vstop virusa z zaviranjem vboda. Po predhodnem tretiranju z izvlečkom se je virusna transdukcija pri 20 mg/ml zmanjšala za približno 85% (slika 5A). Pri različnih pogojih obdelave je bil luminiscenčni signal, ki je nastal pri prenosu virusa, pri 10 mg/ml ekstrakta zavrnjen za 70 % ± 16,7 (A), 58 % ± 9,6 (B) in 53 % ± 8,1 (C). To zaviranje virusne transdukcije z izvlečkom je spremljalo znatno zaviranje vnetnega odziva, ki ga je povzročil virus, kar je bilo ugotovljeno z zmanjšanim izločanjem provnetnega citokina IL-6 v celicah A549-hACE2-TMPRSS2 (slika 5D).
Zaviranje virusnega prenosa celic A549-hACE2-TMPRSS2 z izvlečkom T. officinale.
Celice so bile 24 ur transducirane z 2,5 µl SARS-CoV-2 spike psevdotipiziranega lentivirusnega programa (Luc reporter) A) po predhodni obdelavi z izvlečkom T. officinale (TO) za 0,5 h, B) 3 h pred dodajanjem TO ali C) brez izvlečka. Gojišče smo nato zamenjali s svežim gojiščem in celice inkubirali nadaljnjih 60 h skupaj z izvlečkom. Luminiscenco smo zaznali po 1 uri. (-) Negativna kontrola: glagolski lentivirični psevdo-virus; (+) pozitivna kontrola: lentivirični program za lentilno luciferazo. D) Analiza izločanja provnetnih citokinov IL-6 je bila opravljena po 24-urni transdukciji virusa skupaj z izvlečkom (levo), po 24-urni + 60-urni okužbi z izvlečkom (sredina) ali po 60-urni okužbi z izvlečkom (desno) z uporabo multipleksne pretočne citometrične analize. Kontrola topila: destilirana voda (a.d.). N ≥ 3 neodvisni poskusi.
Razprava
Razvoj učinkovitih strategij preprečevanja in zdravljenja okužbe s SARS-CoV-2 je še vedno v povojih. Čeprav so prva cepiva že pridobila dovoljenje za promet, ostajajo izzivi v zvezi s skrbjo za distribucijo ali trajno učinkovitostjo in tveganjem ponovne okužbe (17, 18). Vendar so lahko nadaljnje okužbe blažje od prve. Poleg cepljenja proti COVID-19 je alternativna strategija za preprečevanje COVID-19 blokiranje dostopnosti virusa do membransko vezanega ACE2 kot primarnega receptorja za vstop v tarčno celico SARS-CoV-2. Pri tem obstajajo različni pristopi (19), seveda pa ima vsaka od teh strategij zdravljenja tudi svoje temeljne in translacijske izzive, ki jih je treba premagati za klinično korist. Tehnične ovire vključujejo možnost delovanja zunaj cilja, učinke, neodvisne od ACE2, stabilnost ali toksičnost (19). Spojine naravnega izvora bi lahko bile pri tem pomemben vir, saj so bile opisane v daljšem časovnem obdobju in mnoge med njimi veljajo za varne. Čeprav so poskusi in silico dockanja predlagali več običajnih naravnih spojin kot zaviralce ACE2, se je izkazalo, da večina od njih ne zavira vezave špice na ACE2, kar bi lahko razložili s pomanjkanjem popolne pokritosti vezavnih ostankov za ACE2 s spojinami (20) . Pri glicirizinu, nobiletinu in neohesperidinu pa vezava na ACE2 delno spada v kontaktno območje RBD, zato so domnevali, da dodatno blokirajo vezavo bodic na ACE2 (20). Enako velja za sintetične zaviralce ACE2, kot je N-(2-aminoetil)-1 aziridin-etanamin (NAAE) (21). Nasprotno pa je bil lipoglikopeptidni antibiotik dalbavancin zdaj identificiran kot veznilec ACE2 in zaviralec ACE2 s pikom SARS-CoV-2 (22); ta spojina je učinkovito zavirala okužbo s SARS-CoV-2 tako pri miših kot pri opicah rhesus. Dokazano je bilo tudi, da hidroalkoholni izvleček lupine granatnega jabolka blokira interakcijo spike-ACE2 s 74 %, njegove glavne sestavine punicalagin s 64 % in elagična kislina s 36 %. Pri okužbi celic človeške ledvice 2 (HK-2) s psevdotipiziranim lentivirusom SARS-CoV-2 je izvleček lupine učinkovito blokiral vstop virusa (23). V pričujoči študiji smo z uporabo testa brez celic dokazali močno zaviranje beljakovine RBD S1 spike ACE2 z izvlečki T. officinale in to ugotovitev potrdili z dokazom učinkovitega zaviranja vezave ACE2 na celično površino v dveh človeških celičnih linijah. Opazili smo močnejšo vezavo različic D614G in N501Y na površinski receptor ACE2 človeških celic, vendar so bile vse testirane različice občutljive na zaviranje vezave s T. officinale, uporabljenim pred ali po. Do zdaj je več študij pokazalo, da je linija virusa D614G bolj nalezljiva kot virus D614 (24). Tudi prisotnost značilnih mutacij, kot je N501Y, npr. tako imenovane britanske različice B.1.1.7, povzroči večjo nalezljivost kot starševski sev, kar bi lahko bila posledica večje afinitete vezave med beljakovino spike in ACE2 (25). Zato so naše ugotovitve o izvlečkih T. officinale morda pomembne tudi v tem primeru, saj se bodo z napredovanjem pandemije pojavile nove potencialno nevarne različice virusa, ki lahko zmanjšajo tudi učinkovitost nekaterih cepiv ali povzročijo povečano stopnjo ponovne okužbe. Kot je bilo omenjeno zgoraj, je eno od vprašanj pri razvoju izdelkov za preprečevanje okužbe s SARS-CoV-2 ali upočasnitev sistemskega širjenja virusa selektivnost za vstop virusov z nizko toksičnostjo za gostitelja. Za trenutne medicinske indikacije niso poročali o nobenem primeru prevelikega odmerjanja T. officinale (11, 13, 16). Priporočeni odmerek je 4-10 g (približno 20-30 mg na ml vroče vode) do 3-krat na dan (Komisija E in ESCOP). Po podatkih Evropske agencije za zdravila (EMA) so kontraindikacije za uporabo T. officinale preobčutljivost na rastlinsko družino Asteraceae ali njene učinkovine, motnje jeter in žolčnika, vključno z zaporo žolčnih vodov, žolčnimi kamni in holangitisom, ali aktivne razjede prebavil (16). Rastlina je pomemben vir kalija (26, 27), zato so opozorila podana zaradi možne nevarnosti hiperkaliemije. Uporaba pri otrocih, mlajših od 12 let, med nosečnostjo in dojenjem zaradi pomanjkanja ali nezadostnih podatkov ni bila določena.
Medtem ko izvleček T. officinale v tej študiji ni vplival na aktivnost encima ACE2, se je beljakovina ACE2 prehodno zmanjšala v pljučni celični liniji, ki izraža ACE2, kar zahteva več pozornosti v trenutnih študijah. ACE2 je pomembna od cinka odvisna monokarboksipeptidaza v renin-angiotenzinski signalni poti, ki je ključna za učinke na srce in ožilje ter imunski sistem. Znano je, da motnje ravnovesja med angiotenzinom II in angiotenzinom (1-7) z zaviranjem aktivnosti encima ACE2 ali izčrpavanjem beljakovin in več krožečega angiotenzina II v sistemu spodbujajo poškodbe pljuč, povezane z boleznijo COVID-19 (28, 29).
Pljuča naj bi bila glavna tarča, vendar so izražanje mRNA in beljakovin ACE2 našli v epitelijskih celicah vseh ustnih tkiv, zlasti v ustni sluznici, ustnicah in jeziku (30). Ti podatki so skladni z opažanjem zelo visoke virusne obremenitve v slini pri bolnikih, okuženih s SARS-CoV-2 (31, 32). Ustna votlina kot bistveni del zgornjega aerodigestivnega trakta naj bi zato imela ključno vlogo pri prenosu in patogenosti SARS-CoV-2. Obstaja velika verjetnost, da bi bilo preprečevanje virusne kolonizacije na ustni sluznici in sluznici žrela ključnega pomena za preprečitev nadaljnje okužbe drugih organov in izbruha COVID-19 (33). Komercialne virucidne ustne vode, predvsem povidon-jod, naj bi zato potencialno zmanjšale virusno obremenitev SARS-CoV-2 pri okuženih osebah (34-36), vendar do zdaj ni na voljo nobenih pomembnih kliničnih študij (36) . Blokiranje vezave virusa SARS-CoV-2 na celice ustne votline z izvlečki T. officinale je lahko za potrošnika sprejemljivo le za omejen čas (npr. uporaba izdelka po stiku z okuženimi osebami ali med okužbo). Nadaljnji fiziološko ustrezni poskusi in vitro, ki smo jih izvedli, so pokazali, da je za učinkovito blokiranje vezave pik SARS-CoV-2 ali odstranitev že vezanih pik s površine celic potreben le kratek čas stika z izvlečkom T. officinale. Nadaljnji dokazi o pomembnosti so bili pridobljeni s poskusi s psevdotipiziranim virusom SARS-CoV-2. Čeprav uporaba teh psevdotipiziranih virusov ne omogoča ocene prispevka lastnosti virusa, kot so membranski ali ovojnični proteini, k celičnemu tropizmu (37), veljajo za uporabno orodje za dokazovanje pomena ACE2 za korake vstopa v celico, ki jih posreduje protein spike.
Cilj vseh razvitih cepiv je ustvariti odziv protiteles (in celic T) proti beljakovini spike, pri čemer so bila osnova za cepljenje zaporedja spike iz zgodnjega seva Wuhan (38). Vendar pa SARS-CoV-2 med stalnim prenosom med ljudmi nenehno mutira. Virusni antigenski drift je jasno razviden iz nedavnega pojava B.1.1.7, B.1.351 ali B.1.1.28 (P.1). Razvija se tako, da lahko potencialno zaobide naše obstoječe terapevtske in profilaktične pristope, usmerjene v vrh virusa. Zato dejavniki, kot sta nizka toksičnost pri ljudeh in učinkovito zaviranje vezave petih pomembnih mutacij pikov na človeškem receptorju ACE2, kot so poročali tukaj in vitro, spodbujajo poglobljeno analizo učinkovitosti T. officinales pri preprečevanju SARS-CoV-2 in zdaj zahtevajo nadaljnje potrditvene klinične dokaze.
Materiali in metodologija
Rastlinski material
Študija je bila izvedena s posušenimi listi T. officinale (vom Achterhof, Uplengen, Nemčija; št. serije 37259, B370244 in P351756). Testiranje je bilo pozitivno na treh različnih lokacijah v regiji Freiburg i. Gebr. (Nemčija), 12. julija 2020, in v testu vezave S1-ACE2 na brezcelični trn (podatki niso prikazani). C. intybus je bil pridobljen pri podjetju Naturideen (Nemčija).
Celične linije in kulture
Celice človeške embrionalne ledvice 293 (HEK293), ki stabilno izražajo hACE2, je velikodušno priskrbel prof. dr Stefan Pöhlmann (Göttingen, Nemčija). Celice so bile vzdrževane v Dulbeccovem modificiranem gojišču Eagle (DMEM) z visoko vsebnostjo glukoze, dopolnjenem z 10 % fetalnega telečjega seruma (FCS), 100 E/ml penicilina/streptomicina in 50 µg/ml zeocina (Life Technologies, Darmstadt, Nemčija). Človeške celice A549-hACE2-TMPRSS2, ustvarjene iz človeške pljučne celične linije A549, so bile kupljene pri podjetju InvivoGen SAS (Toulouse Cedex 4, Francija) in vzdrževane v DMEM, dopolnjenem z 10 % toplotno aktiviranega FCS, 100 E/ml penicilina/streptomicina, 100 µg/ml normocina, 0,5 µg/ml puromicina in 300 µg/ml higromicina. Za subkulturacijo so bile vse celice najprej splaknjene s fosfatno puferirano fiziološko raztopino (PBS), nato pa inkubirane z 0,25% tripsinom-EDTA, dokler se niso odcepile. Vse celice so bile gojene pri 37 °C v navlaženem inkubatorju z atmosfero 5 % CO2/95 % zraka.
Rastlinski izvlečki
Posušen rastlinski material smo stehtali v stekleničko iz jantarnega stekla (Carl Roth GmbH, Nemčija) in ga pri sobni temperaturi (RT) zmešali z vodo razreda HPLC (a.d.). Izvlečke smo nato inkubirali 1 uro in centrifugirali pri 16 000 g (3 min, RT). Supernatant smo pred uporabo v poskusih filtrirali (0,22 µm).
Analiza inhibicije interakcije SARS-COV2 in ACE2 z ELISA in pretočno citometrijo
Za brezcelično odkrivanje inhibicije interakcije SARS-CoV-2 spike - ACE2 je bil uporabljen komercialno dostopen set za pregledovanje inhibitorjev SARS-CoV-2 (Kat#: 16605302, Fisher Scientific GmbH, Schwerte, Nemčija). Ta kolorimetrični test ELISA meri vezavo med imobilizirano beljakovino RBD SARS-CoV-2 spike in biotinilirano človeško beljakovino ACE2. Barvno zaznavanje se izvede z uporabo streptavidina-HRP, ki mu sledi inkubacija s TMB. Inhibitor SARS-CoV-2 (hACE2) je služil kot metodološko preverjena referenca.
Izražanje ACE2 na površini celic smo določili s človeškim protitelesom ACE2, konjugiranim s PE (Bio-Techne GmbH, Wiesbaden-Nordenstadt, Nemčija), in pretočno citometrično analizo. Za analizo vezave SARS-CoV-2 S1 spike RBD -ACE2 smo 2 x 105 celic (5 x 106 celic/ml) predhodno obdelali z rastlinskimi izvlečki v različnih časovnih točkah. Nato smo vsakemu vzorcu dodali 500 ng/ml rekombinantnega proteina SARS-CoV-2 Spike S1 (Trenzyme GmbH, Konstanz, Nemčija), Spike S1 D614G, N50Y ali mešanico K417N, E484K in N501Y (Sino Biological Europe GmbH, Eschborn, Nemčija) -His in vzorce inkubirali še 30-60 min. V drugem primeru so bile celice pred inkubacijo z rastlinskim izvlečkom za 30-60 s pri 4 °C ali 37 °C predhodno obdelane s 500 ng/ml rekombinantnega proteina SARS-CoV-2 Spike-His za 30 min. Vzorci so bili inkubirani v pufru PBS, ki je vseboval 5% FCS. Celice so bile nato enkrat sprane s pufrom PBS, ki vsebuje 1% FCS, pri 500 x g, 5 min, preden so bile obarvane z mAb z oznako His A647 (Bio-Techne GmbH, Wiesbaden-Nordenstadt, Nemčija) 30 min pri RT. Celice smo nato dvakrat oprali, kot je opisano zgoraj. Celice so bile analizirane z napravo FACSCalibur (BD Biosciences, Heidelberg, Nemčija), zabeleženih je bilo 10 000 dogodkov. Srednja intenzivnost fluorescence (MFI) vsakega vzorca je bila določena s programsko opremo FlowJo (Ashland, Oregon, ZDA).
Kvantitativno določanje aktivnosti človeškega encima ACE2 in beljakovin
Celice A549-hACE2-TMPRSS2 (2 × 105) so bile posejane v ploščo s 24 jamicami v gojišče DMEM z visoko vsebnostjo glukoze, ki je vsebovalo 10 % toplotno aktiviranega FCS pri 37 °C in 5 % CO2. Celice so bile nato 1-24 ur obdelane z izvlečkom T. officinale s 500 ng/ml SARS-CoV-2 S1 spike RBD proteina ali brez njega. Celice smo nato oprali s PBS in jih lizirali. 25 µg proteina je bilo uporabljenih za kvantifikacijo proteina ACE2 (ACE2 ELISA Kit), 5 µg za encimsko aktivnost ACE2 (ACE2 Activity Assay Kit, Abcam, Cambridge, UK) v skladu z navodili proizvajalca.
Okužba celic A549-hACE2-TMPRSS2 s psevdotipiziranim lentivirusom SARS-CoV-2
SARS-CoV-2 spike psevdotipizirani lentivirusni delci, proizvedeni s SARS-CoV-2 spike (Genbank Accession #QHD43416.1) kot glikoproteini ovojnice namesto običajno uporabljenega VSV-G, so bili kupljeni pri BPS Bioscience (Katalog#: 7994299). Biomol, Hamburg). Ti psevdo-virusi vsebujejo tudi gen za luciferazo, ki ga poganja promotor CMV. Tako lahko vstop v celice, ki ga posredujejo bodice, kvantificiramo z aktivnostjo luciferaznega reporterja. Kot negativna kontrola je bil uporabljen gladek lentivirusni psevdirion (BPS Bioscience #79943), v katerem ni izražen ovojnični glikoprotein. Kot pozitivna kontrola za transdukcijo je bil uporabljen lentivirus z luciferazo Firefly (puromicin) podjetja BPS Bioscience (katalog #: 79692-P). Ti virusi konstitutivno izražajo luciferazo svetlika pod promotorjem CMV. Pljučne celice so bile posejane po 0,1 × 106 celic/cm2 v plošče s 96 jamicami v DMEM, ki je vseboval 10 % toplotno aktiviranih FCS, 100 E/ml penicilina/streptomicina, 100 µg/ml normocina, 0,5 µg/ml puromicina in 300 µg/ml higromicina čez noč. Gojišče je bilo zamenjano z DMEM + 10 % toplotno aktiviranih FCS, celice pa so bile inkubirane z a.d. ali ekstraktom T. officinale 30 minut pred ali 3 ure po dodatku 2,5 µl delcev lentivirusov. Po 24 urah inkubacije z virusnimi delci je bilo gojišče odstranjeno s spiranjem s PBS, dodano je bilo sveže gojišče in celice so bile inkubirane nadaljnjih 60 ur z dodatkom a.d. ali ekstrakta T. officinale. Luminiscenca je bila zaznana v 1 uri z enostopenjskim luciferaznim reagentom BPS v skladu s protokolom proizvajalca v večplastnem čitalniku Tecan (Tecan Group Ltd, Crailsheim, Nemčija).
Kvantifikacija sproščanja citokinov s tehniko multipleksnih kroglic
Kvantifikacija sproščanja citokinov s tehniko multipleksnih kroglicPo 24 urah transdukcije s psevdotipiziranim lentivirusom SARS-CoV-2 spike in 60 urah po okužbi celic A549-hACE2-TMPRSS2 smo zbrali supernatante in jih shranili pri -80 °C do analize izločanja citokinov s kompletom human MACSplex . cytokine 12 (Miltenyi Biotec GmbH, Bergisch Gladbach, Nemčija) v skladu s protokolom proizvajalca.
Frakcioniranje molekulske mase iz rastlinskih ekstraktov
Izvlečke iz posušenih listov rastlin smo pripravili tako, da smo rastlinskemu materialu (po 500 mg) dodali dvakrat destilirano vodo (5 ml). Vzorce smo 60 min inkubirali v temi pri sobni temperaturi (RT), nato smo jih 3 min centrifugirali pri 16 000 g. Supernatante smo zbrali in filtrirali z membrano (0,45 µm), tako da smo dobili ekstrakte. Alikvote smo 48 ur sušili z zamrzovanjem, da bi določili njihov izkoristek na podlagi mase. Ekstrakti so bili nato dodatno ločeni na frakcijo z visoko molekulsko maso (HMW) in frakcijo z nizko molekulsko maso (LMW) z uporabo centrifugirne epruvete z vložkom, ki je vseboval filter za zmanjšanje molekulske mase (5 kDa, Sartorius Stedim Biotech, Göttingen, Nemčija). . Vsaka frakcija HMW je bila prečiščena z izpiranjem z 20 ml vode, pri čemer smo dobili frakcije HMW in LMW. Frakcije so bile liofilizirane, njihov izkoristek je bil določen z maso, do uporabe pa shranjene pri -20 °C.
Ugotavljanje vitalnosti celic z barvanjem s tripanovim modrim
Ugotavljanje viabilnosti celic z uporabo tripanovega modra Viabilnost celic smo ocenili s testom izključitve barvila tripanovega modra, kot je bilo že opisano (Odongo et al., 2017). Na kratko, celice A549-hACE2-TMPRSS2 smo gojili 24 ur, nato pa smo jih 84 ur (a. d.) izpostavljali ekstraktom ali kontrolnemu topilu.
Statistična analiza
Rezultate smo analizirali s programsko opremo GraphPad Prism 6.0 (La Jolla, Kalifornija, ZDA). Podatki so bili predstavljeni kot povprečje + SD. Statistična pomembnost je bila določena z enosmernim testom ANOVA, ki mu je sledil Bonferronijev popravek. Vrednosti P < 0,05 () so bili statistično značilni in < 0,01 (*) se šteje za zelo statistično pomembno.
Prispevki avtorjev
Zasnova in koncept študije: E.L.; načrtovanje eksperimenta, pridobivanje podatkov, analiza podatkov: H.T.T., E.L., N.P.K.L.; priprava frakcij izvlečkov: C.D., M.G.; pisanje prvega osnutka rokopisa: C.D., M.G: E.L.. Vsi avtorji so podali pripombe na prejšnje različice rokopisa.
Zahvala
Prof. Dr. Stefanu Pöhlmannu (Nemški center za primate, Göttingen, Nemčija) se avtorji zahvaljujejo za zagotovitev celic človeških embrionalnih ledvic 293 (HEK293), ki stabilno izražajo hACE2.
Reference
- 1.↵Lu R in drugi (2020) Genomska karakterizacija in epidemiologija novega koronavirusa iz leta 2019: posledice za izvor virusa in vezavo receptorjev. Lancet 395(10224):565-574.CrossRefPubMedGoogle Scholar
- 2.↵Paules CI, Marston HD in Fauci AS (2020) Koronavirusne okužbe - več kot le prehlad. JAMA 323(8):707-708.CrossRefPubMedGoogle Scholar
- 3.↵Berlin DA, Gulick RM in Martinez FJ (2020) Huda kovida-19. N Engl J Med 383(25):2451-2460.CrossRefPubMedGoogle Scholar
- 4.↵Huang Y, Yang C, Xu XF, Xu W in Liu SW (2020) Strukturne in funkcionalne lastnosti beljakovine spike SARS-CoV-2: potencialni razvoj protivirusnega zdravila COVID-19. Acta Pharmacol Sin 41(9):1141-1149.CrossRefPubMedGoogle Scholar
- 5.↵Grubaugh ND, Hodcroft EB, Fauver JR, Phelan AL in Cevik M (2021) Ukrepi javnega zdravja za nadzor novih različic SARS-CoV-2. Cell.Google Scholar
- 6.↵Zhou D, et al. (2021) Dokaz o pobegu različice SARS-CoV-2 B.1.351 iz naravnih serumov in serumov, pridobljenih s cepljenjem. Cell.Google Scholar
- 7.↵Becerra-Flores M & Cardozo T (2020) Mutacija G614 virusne špice SARS-CoV-2 kaže večjo smrtnost primerov. International journal of clinical practice 74(8):e13525.Google Scholar
- 8.↵Fratev F (2020) Mutaciji N501Y in K417N v beljakovini spike virusa SARS-CoV-2 spremenita interakcije s hACE2 in protitelesi, pridobljenimi iz človeka: študija proste energije motenj. bioRxiv:2020.2012.2023.424283.Google Scholar
- 9.↵Ho D in drugi (2021) Povečana odpornost različic SARS-CoV-2 B.1.351 in B.1.1.7 na nevtralizacijo protiteles. Res Sq.Google Scholar
- 10.↵Perrotta F, Matera MG, Cazzola M in Bianco A (2020) Huda respiratorna okužba s SARS-CoV2: Ali je receptor ACE2 pomemben? Respir Med 168:105996.CrossRefGoogle Scholar
- 11.↵ESCOP (2003) "Taraxaci folium" in "Taraxaci radix". Monografije o zdravilnih uporabah rastlinskih zdravil. (Thieme, Stuttgart) druga izdaja, izd. str. 499-504.Google Scholar
- 12.↵Blumenthal M, Busse WR, Goldberg A, Gruenwald J, Hall T, Riggins CW, Rister RS. (eds) "Dandelion herb" in "Dandelion root with herb" In: Monografije nemške komisije E. Terapevtski vodnik po zdravilih rastlinskega izvora. American Botanical Council, Austin, Texas 1998; 118-120. 13 Association BHM (1990) "Dandelion Leaf" and "Dandelion Root". British Herbal Pharmacopoeia 1:37-39.Google Scholar
- 14.↵Gonzalez-Castejon M, Visioli F in Rodriguez-Casado A (2012) Različne biološke aktivnosti regrata. Nutr Rev 70(9):534-547.PubMedGoogle Scholar
- 15.↵Schutz K, Carle R in Schieber A (2006) Taraxacum - pregled fitokemičnega in farmakološkega profila. J Ethnopharmacol 107(3):313-323.CrossRefPubMedSplet znanostiGoogle Scholar
- 16.↵Evropska agencija za zdravila (EMA) CoHMPH (2009) Poročilo o oceni zdravila Taraxacum officinale Weber ex Wigg., folium. HMPC/579634/2008.Google Scholar
- 17.↵To KK, et al. (2020) Ponovna okužba COVID-19 s filogenetsko različnim sevom SARS-koronavirusa-2, potrjena s sekvenciranjem celotnega genoma. Clin Infect Dis. Aug 25:ciaa1275. doi: 10.1093/cid/ciaa1275.CrossRefPubMedGoogle Scholar
- 18.↵Edridge AWD, et al. (2020) Coronavirusna zaščitna imunost je kratkotrajna. medRxiv:2020.2005.2011.20086439.Google Scholar
- 19.↵Jia H, Neptune E in Cui H (2020) Ciljno usmerjanje ACE2 za terapijo COVID-19: priložnosti in izzivi. American journal of respiratory cell and molecular biology. Dec 9. doi: 10.1165/rcmb.2020-0322PS.CrossRefGoogle Scholar
- 20.↵Zhou J & Huang J (2020) Trenutne ugotovitve o naravnih sestavinah s potencialno aktivnostjo proti 2019-nCoV. Frontiers in Cell and Developmental Biology 8:589.Google Scholar
- 21.↵Huentelman MJ, et al. (2004) Odkritje novega inhibitorja angiotenzin konvertirajočega encima 2 na podlagi strukture. Hipertenzija 44(6):903-906.CrossRefGoogle Scholar
- 22.↵Wang G in drugi (2021) Dalbavancin veže ACE2 in blokira njegovo interakcijo z beljakovino spike SARS-CoV-2 ter učinkovito zavira okužbo s SARS-CoV-2 na živalskih modelih. Cell Res 31(1):17-24.Google Scholar
- 23.↵Tito A, et al. (2020) Izvleček lupine granatnega jabolka kot zaviralec vezave špice SARS-CoV-2 na človeški ACE2: obetaven vir novih protivirusnih zdravil. bioRxiv:2020.2012.2001.406116.Google Scholar
- 24.↵Korber B, et al. (2020) Spremljanje sprememb v spiku SARS-CoV-2: dokaz, da D614G poveča nalezljivost virusa COVID-19. Cell 182(4):812-827 e819.CrossRefPubMedGoogle Scholar
- 25.↵Santos JC & Passos GA (2021) Visoka nalezljivost SARS-CoV-2 B.1.1.7 je povezana s povečano interakcijsko silo med Spike-ACE2, ki jo povzroča virusna mutacija N501Y. bioRxiv:2020.2012.2029.424708.Google Scholar
- 26.↵Hook I, McGee A in Henman M (1993) Ocena diuretične aktivnosti regrata in spremembe v vsebnosti kalija. International Journal of Pharmacognosy 31(1):29-34.Google Scholar
- 27.↵Escudero NL, De Arellano ML, Fernández S, Albarracín G, & Mucciarelli S (2003) Taraxacum officinale kot vir hrane. Plant Foods for Human Nutrition 58(3):1-10.PubMedSplet znanostiGoogle Scholar
- 28.↵Imai Y, et al. (2005) Angiotenzinske konvertaze 2 ščitijo pred hudo akutno pljučno odpovedjo. Nature 436(7047):112-116.CrossRefPubMedSplet znanostiGoogle Scholar
- 29.↵Kuba K in drugi (2005) Ključna vloga angiotenzinske konvertaze 2 (ACE2) pri poškodbi pljuč, ki jo povzroči koronavirus SARS. Nat Med 11(8):875-879.CrossRefPubMedSplet znanostiGoogle Scholar
- 30.↵Zhong M in sod. (2020) Izražanje ACE2 in furina v epitelnih celicah ustne votline morda olajša okužbo s COVID-19 po respiratorni in fekalno-oralni poti. Front Med (Lozana) 7:580796.Google Scholar
- 31.↵ To KK-W, et al. (2020) Dosledno odkrivanje novega koronavirusa iz leta 2019 v slini. Clinical infectious diseases: an official publication of the Infectious Diseases Society of America 71(15):841-843.CrossRefPubMedGoogle Scholar
- 32.↵Yoon JG, et al. (2020) Klinični pomen visoke vsebnosti virusa SARS-CoV-2 v slini. J Korean Med Sci 35(20):e195-e195.CrossRefGoogle Scholar
- 33.↵Wolfel R, et al. (2020) Virološka ocena hospitaliziranih bolnikov s COVID-2019. Nature 581(7809):465-469.CrossRefPubMedGoogle Scholar
- 34.↵Seneviratne CJ in drugi (2020) Učinkovitost komercialnih ustnih vodic na virusno obremenitev SARS-CoV-2 v slini: randomizirano kontrolno preskušanje v Singapurju. Infection:1-7.Google Scholar
- 35.↵ de Toledo Telles-Araujo G, Caminha RDG, Kallas MS, Sipahi AM in da Silva Santos PS (2020) Potencialna ustna in nosna pršila, ki zmanjšujejo virusno obremenitev SARS-CoV-2: Kaj vemo do zdaj? Clinics (Sao Paulo) 75:e2328.Google Scholar
- 36. Carrouel F in drugi (2021) Protivirusna aktivnost reagentov v ustnih vodicah proti SARS-CoV-2. Journal of dental research 100(2): 124-132.Google Scholar
- 37.↵Joglekar AV & Sandoval S (2017) Psevdotipski lentivirusni vektorji: en vektor, veliko podob. Hum Gene Ther Methods 28(6):291-301.CrossRefGoogle Scholar
- 38.↵Krammer F (2020) SARS-CoV-2 cepiva v razvoju. Nature 586(7830):516-527.CrossRefPubMedGoogle Scholar
Svet Evrope - Resolucija 2361 (2021) - Brez obveznega cepljenja
Naslov: Cepiva Covid-19: etični, pravni in praktični vidiki
V tej resoluciji se točka 7.1.1. glasi: "zagotoviti visokokakovostna preskušanja, ki so utemeljena in izvedena na etičen način v skladu z ustreznimi določbami Konvencije o varstvu človekovih pravic in dostojanstva človeškega bitja v zvezi z uporabo biologije in medicine: Konvencija o človekovih pravicah in biomedicini (ETS št. 164, Oviedska konvencija) in njenega dodatnega protokola o biomedicinskih raziskavah (CETS št. 195) ter postopoma vključujejo otroke, nosečnice in doječe matere;"
Oddelek 7.1.1 zahteva, da je treba zagotoviti visokokakovostne in etično neoporečne študije v skladu z ustreznimi določbami Konvencije o varstvu človekovih pravic in dostojanstva človeškega bitja v zvezi z uporabo biologije in medicine v skladu s Konvencijo o varstvu človekovih pravic in biomedicine (ETS št. 164, Oviedska konvencija (Povezava) - PDF) in Dodatni protokol o biomedicinskih raziskavah (SEV št. 195 (Povezava) - PDF), ki vključujejo otroke, nosečnice in doječe matere.
Oviedski sporazum CETS 164 (SEV 1164) z dne 4. aprila 1997 v členu 13 poglavja IV zahteva: "Posegi v človeški genom - Poseg, s katerim se želi spremeniti človeški genom, se lahko izvede le v preventivne namene,
v diagnostične ali terapevtske namene in le, če njegov cilj ni vnašanje sprememb v genom katerega koli potomca."
S tem je jasno opredeljeno, da so posegi za spreminjanje človeškega genoma dovoljeni le v preventivne namene,
za diagnostične ali terapevtske namene in le, če ni namenjen spreminjanju genoma potomcev.
Člen 13 - Posegi v človeški genom
Poseg, s katerim se spreminja človeški genom, se lahko izvede le v preventivne namene,
diagnostične ali terapevtske namene in le, če njegov namen ni uvesti kakršno koli spremembo v
genom vseh potomcev.
V točki 7.3.1 je navedeno: "Zagotoviti, da so državljani obveščeni, da cepljenje ni obvezno in da nihče ni pod političnim, družbenim ali drugim pritiskom, naj se cepi, če tega ne želi."
Z drugimi besedami, cilj je zagotoviti, da so državljani obveščeni, da cepljenje NI obvezno in da nihče ni pod političnim, družbenim ali drugim pritiskom, da se cepi, če tega ne želi.
V točki 7.5.1 je poudarjeno, da je treba "vzpostaviti neodvisne programe odškodnin za cepiva, da se zagotovi odškodnina za neprimerno škodo in poškodbe zaradi cepljenja"; vzpostaviti je treba neodvisne programe odškodnin, iz katerih se bodo izplačevale odškodnine za neprimerno škodo in poškodbe zaradi cepljenja.
V točki 7.5.2 je navedeno: "Potrdila o cepljenju uporabljajte samo za namen spremljanja učinkovitosti cepiva, morebitnih stranskih učinkov in neželenih dogodkov."
Edini namen potrdil o cepljenju je spremljanje učinkovitosti cepiv ter njihovih stranskih učinkov in neželenih učinkov.
Poleg tega so vredne branja in pozornosti tudi druge vsebine.
Portugalska - 0,9 % Covid-19 smrtnih primerov namesto uradno 17.000
Zaradi peticije portugalskega prebivalstva se je moralo portugalsko sodišče ukvarjati z vprašanjem, koliko ljudi, ki so bili registrirani kot umrli po Covidu-19 in uradno priznani kot umrli zaradi okoli 17.000 je dejansko umrl zaradi Covida-19.
Sodišče je izvedlo dokaze in sklenilo, da Sodba z dne 19. maja 2021 je bilo ugotovljeno, da je zaradi Covida-19 umrlo le 152 ljudi.
Po običajni razlagi je treba vsako umrlo osebo, ki je imela pozitiven test PCR v zadnjih 28 dneh ali je bila registrirana kot kontaktna oseba, šteti za mrtvo osebo Covid-19.
Pritožbeno sodišče v Lizboni je 11. novembra 2020 že obravnavalo pritožbo zoper karantenske ukrepe, ki so bili odrejeni na podlagi rezultatov testa PCR. V sodbi na 34 straneh SodbaPoročilo, ki temelji na številnih znanstvenih virih, kritizira ureditev karantene zaradi dvomljive veljavnosti testnega postopka PCR.
Center za poročanje za razjasnitev smrti po cepljenju CORONA
Združenje Zdravniki in znanstveniki za zdravje, svobodo in demokracijo e.V. na svoji spletni strani ponuja številne informacije, nasvete in predloge v zvezi z obdukcijo umrlih oseb po cepljenju s korono. Tukaj je na voljo tudi za prenos PDF objavljeno. Med drugim je izrecno navedeno, da je treba obdukcijo opraviti v skladu s priporočili
Prof. Dr. Arne Burkhardt
Laboratorij za patologijo Reutlingen
Obere Wässere 3-7
72764 Reutlingen
je treba izvesti.
Upravni odbor združenja sestavljajo profesor Sucharit Bhakdi, dr. med., specialist za mikrobiologijo in epidemiologijo okužb, zaslužni profesor na Univerzi Johannesa Gutenberga v Mainzu, ki je bil med letoma 1991 in 2012 predstojnik Inštituta za medicinsko mikrobiologijo in higieno, doktor Ronald Weikl, dr. med., ginekolog, profesor Stefan Homburg, profesor javnih financ na Univerzi Leibniz v Hannovru, in Daniela Folkinger, psihološka svetovalka, učiteljica, Thurmansbang.
Osteopatija in cepljenje s korono
Jens Oskamp*, osteopat v Kölnu, je napisal naslednje informacije za bolnike, ki se nanašajo na tveganja vektorskih in mRNA cepiv v povezavi z osteopatskim zdravljenjem in zato vzročno izključujejo cepljene osebe.
„Obžalujem, da vas moram obvestiti, da ljudi, ki so prejeli tako imenovana cepiva mRNA in vektorska cepiva proti SARS CoV2, ne morem zdraviti. V nasprotju s tradicionalnimi cepljenji so to metode genskega inženiringa, ki manipulirajo s telesnimi celicami, da same proizvajajo dele virusa z namenom, da bi v telesu sprožile imunski odziv. Ta "cepiva" imajo dovoljenje le za cepljenje v nujnih primerih. O navzkrižnih reakcijah z drugimi zdravili in terapijami je bilo opravljenih le malo raziskav ali pa sploh nobenih. (Video - Prof.Dr.Hockertz, 2020)
V zvezi s tem se pri osteopatskem zdravljenju pojavljajo naslednje težave:
Ni še jasno, na katera področja telesa vpliva nastanek tromboze. Znana je možganska venska tromboza kot neželeni učinek, ki se pojavi, ker kri v tem delu telesa teče razmeroma počasi (Chen et al. 2021). Vendar se počasi tekoča kri pojavlja tudi v drugih delih telesa. Tudi tam lahko nastanejo trombi. (Kadkhoda, 2021). Če na primer krvne žile v venskem sistemu nog zaradi osteopatskih tehnik postanejo bolj prepustne, se lahko prvotno nastali trombi odcepijo in v najslabšem primeru povzročijo pljučno embolijo. Nastanek trombov je pogosto asimptomatski.
Poleg tega ni mogoče izključiti, da lahko pride do drugih nenadzorovanih imunskih reakcij, takoj ko se med osteopatskim zdravljenjem iz tkiva sprostijo patogeni. Običajno se imunski sistem s tem spopade brez težav. Vendar pa lahko pretirano reaktiven imunski sistem povzroči resne zaplete in uniči telesu lastno tkivo (Vojdania in Kharrazianb, 2020), (Talotta,2021).
Z dobrim osteopatskim zdravljenjem odstranimo blokade v limfnem sistemu. Zaradi manipulacije z mRNA pa se v njem shrani nenaravna količina specifičnih protiteles (Soba 2020). Ni izključeno, da bo prišlo do znatnih reakcij (Hotez et al. 2020) takoj, ko se ta tkiva med osteopatskim zdravljenjem spremenijo. Prizadenejo lahko tudi živčni sistem, kot so primeri paralize obraza (Shemer et al. 2021),(Renould et al,2021) ali težave z očmi zaradi Zastojna papila (Nemško oftalmološko društvo, 2021) kažejo.
Dodatne težave se pojavljajo zaradi nanodelcev, ki se uporabljajo v cepivih z mRNA (Chen et al. 2021). Med drugim povzročajo vakuolizacijo (praktično nastanek edema na celični ravni) nekaterih vrst tkiva, zlasti jeter. To je znak, da so ustrezne celice odmrle zaradi reakcije z nanodelci (Video - Dr. Vanessa Schmidt-Krüger, 2021*). Tudi v tem primeru ni jasno, kaj se zgodi, ko tekočina iz teh "edemov" ali odmrlega tkiva zaradi osteopatskih tehnik vstopi v krvni obtok.
*Lokalne povezave za prenos videoposnetkov Dr. Vanesse Schmidt-Krüger so tukaj (videoposnetek 1_2) in tukaj (Video 2_2) je na voljo.
Če so vam zaradi cepiv mRNA/vektorjev že spremenili genski zapis, vas prosim, da se k meni ponovno oglasite najhitreje 10 mesecev po teh ukrepih. Takrat se bova pogovorila, katere laboratorijske preiskave in slikovni postopki so potrebni za izključitev zapletov. (npr. pregled za zaporno papilo - Nemško oftalmološko združenje, 2021)
Večkratno vbrizgavanje poveča intenzivnost in verjetnost zgoraj opisanih korelacij. Zato si pridržujem pravico do splošne zavrnitve zdravljenja tudi po 10 mesecih.
Močan imunski sistem kot alternativa cepljenju potrebuje znanje!!! Priporočam naslednje video gradivo:
- Dr. rer. nat. Markus Stark - Krepitev imunskega sistema in obrambe
- Dr. Mathias Rath - Končaj sedanjo pandemijo - prepreči prihodnje pandemije!
- Prof. Dr. Jörg Spitz - Vitamin D - hipe ali upanje„
- Spletna stran Jens Oskamp (trenutno se posodablja)*
Sprememba zakona o zaščiti pred okužbami in osnovnega zakona
Z resolucijo, ki jo je nemški Bundestag objavil 22. junija 2021 Tiskovine 19/30938 postane . na 23.07.2023 omejevanje ustavno zajamčene pravice do telesne integritete!
' Člen 9
Sprememba zakona o zaščiti pred okužbami
§ Člen 36(12) Zakona o zaščiti pred okužbami z dne 20. julija 2000 (BGBl.
I, str. 1045), ki je bil nazadnje spremenjen s členom 1 zakona z dne 28. maja 2021
(BGBl. I, str. 1174) se spremeni, kot sledi:
"(12) Dovoljenje, izdano na podlagi prvega stavka odstavka 8 ali prvega stavka odstavka 10
Odlok začne veljati najpozneje eno leto po razveljavitvi
Določitev epidemioloških razmer nacionalnega pomena z
nemškega Bundestaga v skladu s členom 5, odstavek 1, stavek 2. Do njegovega
Odlok, izdan na podlagi prvega stavka odstavka 8 ali prvega stavka odstavka 10, se lahko spremeni tudi po odpravi epidemioloških razmer državnega pomena."
Člen 10
Omejitev temeljnih pravic
S členom 9 temeljne pravice do telesne nedotakljivosti so (prvi stavek drugega odstavka 2. člena temeljnega zakona), svoboda osebe
(drugi stavek drugega odstavka 2. člena temeljnega zakona), svoboda gibanja (11. člen temeljnega zakona)
odstavka 1 temeljnega zakona) in nedotakljivost stanovanja (člen 13(1) temeljnega zakona). omejeno.
7. prejšnji člen 9 postane člen 11, odstavek 2 pa se glasi:
(2) Členi 1, 2, 6, 7, številke 1, 2 in 4 ter člen 8 začnejo veljati julija 2023."
Ocena 109 študij o nošenju mask
20. aprila 2021 je bila objavljena ocena 109 študij o zdravstvenih vidikih nošenja mask med pandemijo. Mednarodna revija za okoljske raziskave in javno zdravje objavljen, ki tukaj kot PDF v izvirniku (v angleščini) in tukaj so na voljo za prenos v nemški različici.
Raziskovalci so prišli do zaključka, ki si ga sami ne bi predstavljali kot možnega pri takšnem obsegu poškodb.
Poleg že znanih negativnih učinkov je treba poudariti tudi sindrom izčrpanosti zaradi maske (MIES).
Posledice MIES lahko vključujejo motnje koncentracije, mišljenja in govora, zmanjšanje srčnega in dihalnega utripa ter globine dihanja, kar lahko povzroči poškodbe krvnih žil in koronarnih arterij ter posledično nevrološke in srčne bolezni. Dolgoročni učinki so še vedno predmet tekočih raziskav.
SZO - Sprememba priporočil za cepljenje otrok
V Različica z dne 3. junija 2021, je bilo priporočilo, da se otrok trenutno ne cepi, saj še vedno ni zanesljivih dokazov za cepljenje otrok proti Covid-19, zlasti ker imajo otroci, tako kot mladostniki, v primerjavi z odraslimi običajno blažji potek. Običajna priporočena cepljenja za otroke je treba še vedno nadaljevati.
V trenutna različicaobjavljenem 20. junija 2021, je bil zgornji odlomek spremenjen tako, da je kljub temu, da se omenja blažji potek bolezni in da cepljenja ni treba nujno opraviti, če otroci niso del rizične skupine, za splošno priporočilo za cepljenje še vedno potrebnih več informacij.
Kljub temu je zdravilo Pfizer BioNTech opredeljeno kot primerno za otroke, starejše od 12 let. To cepivo bo skupaj z drugimi prednostnimi skupinami na voljo tudi otrokom, starim od 12 do 15 let, ki spadajo v ogrožene skupine.
Tako kot v prejšnji različici je poudarjeno, da še ni dovolj podatkov iz preskusov z otroki. Takoj ko bodo na voljo dodatne ugotovitve, bodo izdana ustrezna priporočila.
Spremenjeni deli so v zgornjih dokumentih označeni z rumeno barvo.
Po podatkih Odločitev STIKO o šesti posodobitvi priporočila za cepljenje proti COVID-19 in s tem povezani znanstveni utemeljitvi v Epidemiološki bilten 23/2021 se priporoča (v skladu z veljavnimi priporočili Svetovne zdravstvene organizacije) "cepljenje otrok in mladostnikov z že obstoječimi boleznimi s cepivom mRNA Comirnaty (BioNTech/Pfizer) zaradi domnevno povečanega tveganja za hud potek bolezni COVID-19". ki jih je treba izvesti. "Uporaba cepiva Comirnaty pri otrocih in mladostnikih, starih od 12 do 17 let, brez že obstoječih bolezni, trenutno ni splošno priporočljiva, vendar je možna po zdravniških pojasnilih ter ob individualni želji in sprejemanju tveganja."
PEI - Varnostno poročilo
PEI (Paul-Ehrlich-Institut), zvezni organ ministrstva za zdravje, ki je zavezan navodilom, v nekajtedenskih presledkih objavlja tako imenovana varnostna poročila o uporabljenih cepivih in njihovih stranskih učinkih.
RKI (Inštitut Roberta Kocha), neodvisni višji zvezni organ, ki ga zavezujejo direktive v smislu Člen 87, odstavek 3, stavek 1 GG. V njem deluje "več znanstvenih komisij, na primer Stalna komisija za cepljenje, ki pripravlja priporočila za cepljenje. Odgovorna je tudi za obdelavo in usklajevanje vsebine zveznih zdravstvenih poročil ter za odobritev uvoza in uporabe človeških embrionalnih matičnih celic."
Povzetek primerov:
Dodatne informacije o teh organih so na voljo na Zvezno ministrstvo za zdravje.
Podatkovna zbirka ZDA VAERS navaja naslednje podatke za ZDA:
Za primerjavo: od začetka cepljenja proti davici, ošpicam, mumpsu, rdečkam, otroški paralizi in tetanusu je v ZDA umrlo 4 050 ljudi. Prvo cepivo proti davici je bilo odobreno v Nemčiji leta 1936, cepivo proti ošpicam v ZDA leta 1963, cepivo proti mumpsu in rdečkam leta 1969, cepivo proti otroški paralizi leta 1955, cepivo proti tetanusu pa leta 1930.
To pomeni, da je vladna opredelitev "Varen" in "zelo učinkovit" prijavljena cepiva Covid-19 so na podlagi podatkov, ki so na voljo v ZDA, v šestih mesecih(!) povzročila 150 % teh smrti, česar vsa zgoraj navedena cepiva skupaj niso dosegla v šestih do osmih desetletjih!
Učinkovitost cepiv Covid-19
Od 1. junija 2021 RKI v pogosto zastavljenih vprašanjih glede cepiv z mRNA navaja: "Kako dolgo traja zaščita s cepljenjem, še ni znano. Zaščita se ne začne takoj po cepljenju in nekatere cepljene osebe ostanejo nezaščitene."
V zvezi s cepivi, ki temeljijo na vektorjih, so poročali: "Kako dolgo traja zaščita s cepljenjem, še ni znano. Zaščita se ne začne takoj po cepljenju in nekatere cepljene osebe ostanejo nezaščitene."
Zato se postavlja vprašanje, v kolikšni meri je mogoče upravičiti "neželene učinke" in "smrtne primere", zabeležene v poročilih o varnosti v PEI ali drugih zbirkah podatkov, če se odkrito priznava, da ni niti takojšnje zaščite niti zaščite po večkratnem cepljenju in da ni na voljo nobenih informacij o trajanju morebitne zaščite.
Arhivirani prispevki:
Pogosta vprašanja - Corona testi
Objava od 31 marec 2021 08:43
Testiranje" je danes skoraj vsakodnevni spremljevalec. Pri tem se pogosto pojavlja vprašanje, kateri testi, kateri testi, kako in s kakšnim pomenom. V nadaljevanju je na voljo seznam razpoložljivih testnih metod in lastnosti:
Test PCR
... se uporablja za odkrivanje RNK SARS-CoV-2, tj. delov genskega materiala virusa Covid-19, ne pa za odkrivanje aktivnega, tj. razmnožljivega virusa.
Za zaznavanje določene fluorescenčne linije je treba genetski material v vzorcu pomnožiti. Pogostost prehodov amplifikacije predstavlja tako imenovana vrednost Ct (vrednost praga cikla).
V idealnem primeru je ta vrednost Ct dokumentirana v poročilu o laboratorijskih rezultatih.
Pozitiven test PCR z vrednostjo Ct 30 ... 35 pomeni nizko virusno obremenitev, vrednost Ct >35 pa zelo nizko virusno obremenitev.
Vrednost Ct 25 na primer pomeni znatno virusno obremenitev. (Vir: Test PCR - vrednost Ct Pomen)
Ker pa vrednosti Ct v praksi različnih laboratorijev niso niti dokumentirane niti standardizirane in ker nekateri delajo z vrednostmi Ct 40 ali več (do 50), rezultati testov PCR niso niti primerljivi niti smiselni. Tveganje za povečanje lažno pozitivnih rezultatov testov narašča z večanjem vrednosti Ct, kar ima vse negativne posledice, kot so The Lancet v zvezi s preiskavo v Združenem kraljestvu.
Ne zaman so bila priporočila WHO rezultat testa PCR vedno ocenite v okviru obstoječih simptomov bolezni in klinične diagnostike.
Test z antigeni
... je namenjen odkrivanju akutne okužbe (beljakovinske strukture virusa corona), vendar zahteva visoko virusno obremenitev. Zato je potrebna potrditev z naknadnim testom PCR (z nizko vrednostjo Ct).
Seznam vozil s posebnim dovoljenjem v Nemčiji (Potek sredi maja 2021) je na voljo na spletni strani Zveznega inštituta za zdravila in medicinske pripomočke (BfArM) BfArM - Antigeni s posebnim dovoljenjem.
Test lahko privede do lažno pozitivnih rezultatov, če je bila oprema za testiranje shranjena pri temperaturi, nižji od priporočene, in je nato uporabljena.
Test na protitelesa (krvni test - test Elisa / hitri test)
... zaznajo specifična protitelesa, ki jih organizem proizvede kot odgovor na koronavirus.
Ni pomembno, ali je bil imunski odziv (tvorba odkritih protiteles) posledica predhodne okužbe s Covid-19 ali cepljenja proti Covd-19.
Intervju z Dr. Greinerjem, Laboratorijska diagnostika, Dunaj
Covid-19 - Kaj nam lahko povedo protitelesa.
Izkoreniniti Covid-19?
Objava od 31 marec 2021 09:06
Ali je mogoče izkoreniniti virus?
- Koliko časa je trajalo, da je bil virus ošpic (napol) "premagan"?
Prvo cepivo proti ošpicam z inaktiviranim deljenim cepivom je bilo odobreno v ZDA leta 1963 in se je nenehno razvijalo naprej. Kljub temu ošpice po skoraj 60 letih še vedno niso bile izkoreninjene (vir: Virus ošpic).
- Koliko časa je trajalo, da je bil virus otroške paralize izkoreninjen?
Prvo cepljenje proti otroški paralizi z inaktiviranim virusom je bilo opravljeno leta 1955 (vir: Cepljenje proti otroški paraliziLeta 2015, 60 let pozneje (!), je Svetovna zdravstvena organizacija razglasila, da je otroška paraliza izkoreninjena.
Danes pa velja, da bodo cepiva, razvita v samo nekaj mesecih, ki uporabljajo nove tehnologije vektorjev ali mRNA, ki še niso bila uspešno preizkušena na živalih ali ljudeh v konvencionalno zasnovanih fazah I, ... III, o katerih stranskih učinkih in dolgoročnih neželenih učinkih niso poročali in katerih izdelki so bili dani na trg le z dovoljenjem za uporabo v nujnih primerih, ki ni navedeno v obrazcih soglasja, lahko premagajo ali celo izkoreninijo virus - v nekaj mesecih!
Podobno kot pri virusih otroške paralize in ošpic je mogoče domnevati, da bo za izkoreninjenje ali vsaj obvladovanje Covid-19 potrebnih najmanj dve generaciji.
Ali želimo uvesti zaporo, obvezno cepljenje (še vedno le posredno), karanteno, izolacijo, obvezne maske itd. in celo digitalno cepilno kartico?
Zato je edini zajamčeno učinkovit način za izkoreninjenje virusa skoraj 60 let trajajoča zapora ali odstranitev gostitelja virusa, tj. izkoreninjenje vseh ljudi. Takrat bo odpravljeno tudi preživetje virusa.
B.t.w.: to tudi pojasnjuje, zakaj si virus vedno prizadeva, da ne bi ubil svojega gostitelja, da bi se lahko še naprej razmnoževal. Mutacije bodo zato vedno zasledovale cilj optimizacije razmnoževanja, ne da bi postale nevarnejše za gostitelja. Ni dvoma, da lahko virusi še vedno postanejo smrtonosni za ljudi, ki so že zboleli.
Kako lahko razumemo vladne poteze sem in tja?
Objava od03. april 2021 22:11
Preden poskušamo odgovoriti na to vprašanje in najti enega od možnih odgovorov, si je treba ogledati leto 2012.
Leta 2012 je nemški Bundestag naročil "Analizo tveganj v civilni zaščiti", poročilo o njej pa je bilo objavljeno 3. januarja 2013 v obliki tiskovine 17/12051, ki je na voljo na Poročilo o analizi tveganja - Tisk 17/12051 z dne 03.01.2013 lahko prikličete in prenesete v obliki PDF.
Poglavje 2.3 na strani 5 vsebuje temo "Analiza tveganja "Pandemija zaradi virusa Modi-SARS".
Temu je sledil dokument na 17 straneh z naslovom "Kako nadzorujemo COVID-19", ki je bil označen kot zaupen samo za uradno uporabo in objavljen na spletni strani zveznega ministrstva za notranje zadeve 20. maja 2020. Kako obvladamo COVID-19 je bil dostopen in ga je bilo mogoče prenesti. Danes ni več dostopen tam, temveč prek te rezervne povezave. Tajni dokument zveznega ministrstva za notranje zadeve o prizorišču COVID-19.
Vsi prejšnji, sedanji in prihodnji ukrepi zvezne vlade v zvezi s COVID-a9 izhajajo iz tega.
Sedanja prizadevanja vlade, da bi postopoma omejila vpliv vseh višjih institucij na odločitve kanclerja, jih izključila, odvzela zakonodajni oblasti njeno ustavno zagotovljeno funkcijo, strukturne kadrovske spremembe na sodiščih ZRN, gredo v isto smer kot leta 1933. Vendar tokrat ni zaveznikov, ki bi lahko sprejeli nov temeljni zakon, ki bi ta prizadevanja zaustavil!
EMA - Ozadja
Objava od 20 april 2021 02:43
Predstavljamo povezave med delovanjem Evropske agencije za zdravila (EMA) ter kariero in posledičnimi konflikti interesov predsednika EMA Emerja Cooka, kot je 7. aprila 2021 poročal portal epochtimes.de: Predsednik EMA Emer Cooke je bil vrsto let lobist največje evropske farmacevtske organizacije.
Prekomerna umrljivost
Objava od 20 april 2021 08:09
Vprašanje prekomerne umrljivosti je ponavljajoča se tema. Poleg pomanjkanja postelj za intenzivno nego je argument prekomerne umrljivosti stalen spremljevalec utemeljitev ukrepov, ki jih je odredila vlada.
Človek bi mislil, da bi morali biti podatki Zveznega statističnega urada znani tudi na zveznih tiskovnih konferencah (gl: Število smrtnih primerov marca 2021: 11 % pod povprečjem prejšnjih let).
Hanno Kautz, tiskovni predstavnik ministra za zdravje Jensa Spahna, se kljub temu zaveda, da Zvezna tiskovna konferenca z dne 19.04.2021 ničesar o teh številkah. Na vprašanje gospoda Reitschusterja: "Gospod Kautz, po podatkih Zveznega statističnega urada smo imeli prejšnji mesec prenizko stopnjo umrljivosti. Marca je umrlo 11 odstotkov manj ljudi, kot je povprečje v letih 2017-2020. Kako si to razlagate?" preprosto odgovori: "Ne komentiram številk, ki jih še nisem videl." in "Navajate zelo specifično številko, ki je ne poznam in katere kontekst mi ni znan. Tega v tem trenutku ne morem komentirati.".
Zato se postavlja vprašanje: če so te številke tako nezanimive, če niso niti priznane ali znane, zakaj se nenehno navajajo kot utemeljitev za vse strožje ukrepe?
Slovenian 
German 
English 
French 
Swedish 
Spanish 
Portuguese 
Italian 
Dutch 
Norwegian 
Finnish 
Danish 
Czech 
Hungarian 
Greek 
Russian 
Turkish 
Japanese 
Lithuanian 
Latvian 
Slovak