Čas čítania 63 zápisnice

Aktualizované - február 18, 2023

Tento blog bude ukončený. Stránka Corona Blog 2023 sa zaoberá známymi podkladmi, najmä zo strany farmaceutického priemyslu a inštitúcií zdravotníckych orgánov na medzinárodnej úrovni.

Aktualizácia údajov je tu vždy najvyššou prioritou - nasledujú články na rôzne témy pod tejto časti. Najnovší príspevok je na začiatku a má červený nadpis.

Keďže niektoré aktualizácie sa z časových dôvodov neuskutočnili, nasledujúce videoanimácie príslušných údajov za obdobie od prvého zaznamenaného hlásenia nežiaducej reakcie až po súčasnosť sú zoradené chronologicky, najnovšie ako prvé. (Zdroj: MZV SR): Programovanie analýzy údajov EMA / EMA).

• Perikarditída

• Creutzfeldtova-Jakobova choroba

• Myokarditída

• Menštruačná porucha

• Guillainov-Barrého syndróm

• Bellova obrna

• Porucha spánku

• Halucinácie

• Trombocytopénia

• Spontánny potrat

• Bolesť očí

• Strata vedomia

• Narkolepsia

• Lymfadenopatia

• Zvýšená srdcová frekvencia

• Bolesti hlavy

• Cerebrálna trombóza

• Trombóza mozgových žíl

• Cerebrálna venózna trombóza

• Trombóza hlbokých žíl

• Trombóza mezenterických žíl

• Trombóza portálnej žily

• Trombóza horného sagitálneho sínusu

• Herpes zoster

• Trombóza

• Venózna trombóza

• Venózna trombóza končatiny

• Tinnitus

• Náhla smrť

• Intermenštruačné krvácanie

• Oneskorenie menštruácie

• Menštruácia nepravidelná

• Urtikária

---

Nasledujúca časť sa už nebude aktualizovať. Vývoj údajov EMA bude nahradený vyššie uvedenými videami!

Aktualizácia údajov - EMA - VAERS - WHO - Hlásenia o nežiaducich účinkoch

^* Zvýšenie od 13.11.2021 - 03.12.2021 na adrese 368.653 Správy

Celkový počet oznámení: EMA 1 254 029 (+ 90 673^*) / KTO 2 706 410 (+206 529^*) / CDC/FDA 951857 (+71.451^*)

Príznak: Bellova obrna (ochrnutie tváre) - Registrované správy

Zvýšenie od 30.12.2021 - 15.01.2022 / 17.12.2021 - 07.01.2022 o 6.620 Prípady

Zdroje: adrreports.eu (EMA) / vigiaccess.org (WHO) - stav 10/12/2021
Zdroj: vaers.hhs.gov (CDC / FDA) - Stav 03.12.2021

Symptóm: Menštruačné poruchy - Registrované správy

Zdroje: adrreports.eu (EMA) / vigiaccess.org (WHO) - od 13. novembra 2021
Zdroj: vaers.hhs.gov (CDC / FDA) - Stav 05.11.2021

Symptóm: spontánny potrat - Registrované správy

Zdroje: adrreports.eu (EMA) / vigiaccess.org (WHO) - od 13. novembra 2021
Zdroj: vaers.hhs.gov (CDC / FDA) - Stav 05.11.2021

Symptóm: Lymfadenopatia - Registrované správy

^* Zvýšenie od 18.12.2021 - 24.12.2021 / 10.12.2021 - 17.12.2021 na 713 Prípady

Zdroje: adrreports.eu (EMA) / vigiaccess.org (WHO) - stav 24/12/2021
Zdroj: vaers.hhs.gov (CDC / FDA) - stav 17/12/2021

Symptóm: Úmrtia - Registrované správy

Aktuálne údaje o Nadmerná úmrtnosť vo všetkých vekových skupinách sú denne aktualizované tu.

Grafy sú vytvorené na základe údajov z 29 zúčastnených krajín: Belgicko, Dánsko, Estónsko, Fínsko, Francúzsko, Nemecko, Nemecko (Berlín), Nemecko (Hesensko), Grécko, Maďarsko, Írsko, Izrael, Taliansko, Luxembursko, Malta, Holandsko, Nórsko, Portugalsko, Slovinsko, Španielsko, Švédsko, Švajčiarsko, Spojené kráľovstvo (Anglicko), Spojené kráľovstvo (Severné Írsko), Spojené kráľovstvo (Škótsko), Spojené kráľovstvo (Wales) a Ukrajina.
Ukrajina, Nemecko (Berlín) a Nemecko (Hesensko) neboli zahrnuté do súhrnných údajov.
(Zdroj: Euromomo)

^* Zvýšenie od 16.03.2022 - 26.03.2022 / 05.03.2022 - 18.03.2022 na 2.595 Úmrtia
(zdvojnásobenie v porovnaní s 15/03 / 04/03)

Zdroje: adrreports.eu (EMA) - k 26.3.2022 / vigiaccess.org (WHO) - stav 26/03/2022
Zdroj: vaers.hhs.gov (CDC / FDA) - stav 18/03/2022

Príznak: Myokarditída (zápal srdcového svalu) - Registrované správy

^* Zvýšenie od 19.11.2021 - 03.12.2021 / 12.11.2021 - 29.11.2021 na 2.088 Správy

Zdroje: adrreports.eu (EMA) / vigiaccess.org (WHO) - od 19. novembra 2021
Zdroj: vaers.hhs.gov (CDC / FDA) - od 12. novembra 2021

Príznak: Perikarditída (zápal osrdcovníka) - Registrované správy

^* Zvýšenie od 10.12.2021 - 24.12.2021 na adrese 10.367 Správy

Zdroje: adrreports.eu (EMA) / vigiaccess.org (WHO) - stav 24/12/2021
Zdroj: vaers.hhs.gov (CDC / FDA) - stav 17/12/2021

Symptóm: Herpes Zoster - Registrované správy

Zdroje: adrreports.eu (EMA) / vigiaccess.org (WHO) - od 13. novembra 2021
Zdroj: vaers.hhs.gov (CDC / FDA) - Stav 05.11.2021

Symptóm: Trombóza - Registrované správy

Zdroje: adrreports.eu (EMA) / vigiaccess.org (WHO) - od 13. novembra 2021
Zdroj: vaers.hhs.gov (CDC / FDA) - Stav 05.11.2021

Príznak: Náhla smrť - Registrované správy

Zdroje: adrreports.eu (EMA) / vigiaccess.org (WHO) - od 13. novembra 2021
Zdroj: vaers.hhs.gov (CDC / FDA) - Stav 05.11.2021

---

Hodnotenie vhodnosti techniky RT-qPCR pre
Zistenie možnej infekcie a
Infikovanosť osôb vzhľadom na SARS-CoV-2

Aktuálne odborné stanovisko Dr. rer. biol. hum. Ulrike Kämmerer

Znalecký posudok je tu z Webová lokalita . Lekári a vedci za zdravie, slobodu a demokraciu, e.V. alebo uložené tu na stiahnutie.

Falošne pozitívne výsledky PCR testov

Výskumníci Leslie C. Woodcock, P. Stallinga a Igor Khmelinskii z portugalskej Univerzity Algarve vo svojom článku uverejnenom v novembri 2021 v časopise The Lancet Respiratory Medicine uvádzajú Úloha exozómov pri falošne pozitívnych testoch kovid-19 PCR o výsledkoch ich výskumu, ktoré sú Odkaz sú k dispozícii na stiahnutie.

Aktualizácia údajov - EMA - VAERS - WHO - Hlásenia o nežiaducich účinkoch

Výskumníci Leslie C. Woodcock, P. Stallinga a Igor Khmelinskii z portugalskej Univerzity Algarve vo svojom článku uverejnenom v novembri 2021 v časopise The Lancet Respiratory Medicine uvádzajú Úloha exozómov pri falošne pozitívnych testoch kovid-19 PCR o výsledkoch ich výskumu, ktoré sú Odkaz sú k dispozícii na stiahnutie.

Porovnanie hlásených nežiaducich reakcií na vakcíny z 1 000 prípadov

Obmedzenie základných práv

V Spolkovej zbierke zákonov časť I 2021 č. 83 z 11.12.2021 Zákon na posilnenie
Prevencia očkovania proti Covid-19 a zmena ďalších predpisov v súvislosti s pandémiou Covid-19 z 10. decembra 2021 základné práva

• fyzická integrita
• sloboda osoby
• sloboda zhromažďovania
• sloboda pohybu
• nedotknuteľnosť domova

RESTRICTED (PDF na stiahnutie):

Nasledujúce zmeny nadobudnú účinnosť 25. novembra 2021:

Článok 16 - Zmena dvanástej knihy nemeckého sociálneho zákonníka "Oddiel 142 Prechodné nariadenie o spoločných obedoch pre osoby so zdravotným postihnutím v dôsledku pandémie Covid-19; splnomocnenie na vydanie nariadení".

Článok 17 - Zmena federálneho zákona o dôchodkoch

Článok 18 - Zmena zákona o žiadateľoch o azyl

Nasledujúce zmeny nadobudnú účinnosť 1.1.2022:

Článok 12a - Zmena tretej knihy sociálneho zákonníka

"V § 109 ods. 5 tretej vete sa slová "31. decembra 2021" nahrádzajú slovami "31. marca 2022".

"§ 421c sa mení a dopĺňa takto: "aa) V časti vety pred číslom 1 sa slová "do 31. decembra 2021" nahrádzajú slovami "od 1. januára 2022 do 31. marca 2022". bb) V časti vety za číslom 2 sa vypúšťajú slová "ak nárok na príspevok za prácu v skrátenom pracovnom čase vznikol do 31. marca 2021 a".".

Nasledujúce zmeny nadobúdajú účinnosť 1.1.2023:

Článok 2 - Ďalšie zmeny a doplnenia zákona o ochrane pred infekciami

"Zákon o ochrane pred infekciami, ktorý bol naposledy zmenený článkom 1 tohto zákona, sa mení a dopĺňa takto:

1. §§ 20a a 20b sú zrušené.
2. § 73 sa mení a dopĺňa takto:
   a) Odsek 1a čísla 7e až 7h sa zrušuje.
   b) V odseku 2 sa číslo "7h" nahrádza číslom "7d".
   
   
   
   

Rozhovor o povinnom očkovaní proti koronavírusom: pre a proti - MDR

Utorok, 23.11.2021 06:50 - Trvanie 06:50 min.

Stránka Rozhovor s MDR je uvedený nižšie ako prepis a uverejnený tu ako Stiahnutie zvuku k dispozícii. Prednášajúcim je Tim Deisinger, jeho partnermi v diskusii sú Prof. Peter Dabrock, profesor teológie na Univerzite v Erlangene v Norimbergu a Dr. Steffen Rabe, detský lekár v Mníchove a člen predstavenstva Lekári pre individuálne rozhodnutia o očkovaní e. V. (ÄIIE).

• Moderátor, Tim Deisinger:

Veľké tabu, všeobecné povinné očkovanie, už nie je tabu a mnohí ľudia ho podporujú. Dnes ráno sa na to chceme pozrieť bližšie a chceme poznať aj váš názor, o čom sa dozviete o chvíľu. Najskôr takpovediac základ pre diskusiu. Chceme počuť dva názory.

Druhým bude pediater. Prvým je v súčasnosti Peter Dabrock, profesor teológie na Univerzite v Erlangene v Norimbergu, ktorý bol do roku 2020 predsedom nemeckej etickej rady. Pán Dabrock, čo si o tom myslíte? Všeobecné povinné očkovanie, áno alebo nie?

• Prof. Peter Dabrock: 

Priznávam, že som v priebehu času zmenil svoj postoj, pokiaľ ide o všeobecné povinné očkovanie, a preto si aj v týchto záležitostiach uvedomujeme, že neexistuje jedno rozhodnutie, ktoré raz urobíte a potom ho jednoducho vždy dodržíte, ale musíte ho prispôsobiť okolnostiam. Strávil som mesiace kampaňou v jeho prospech a tiež som dúfal, že ľudia si uvedomia, že je to pre vás len minimálne riziko a veľký prínos pre vás a ostatných.

a že ľudia sa dávajú očkovať z dôvodu sebaochrany, okamžitej ochrany pred ostatnými a solidarity. Nebolo to tak, a keď som počul, že to veľmi stvrdlo, pred tromi týždňami sa uskutočnil príslušný prieskum. Môj postoj sa tiež zmenil, a preto sa teraz prikláňam k postoju, že potrebujeme všeobecné povinné očkovanie čo najskôr. 

• Moderátor, Tim Deisinger:

Ale chápete tých, ktorí sa nechcú dať zaočkovať alebo sa ešte nechcú dať zaočkovať?

• Prof. Peter Dabrock: 

Samozrejme, že o tom premýšľate, najmä keď cítite taký masívny odpor pri chôdzi, a potom vždy počujete dva argumenty, že je to vlastne primerané a že to nie je problém.

zásah do fyzickej integrity. Tieto dve veci spolu súvisia a ja by som povedal, že pokiaľ ide o fyzickú integritu, každý, kto je proti povinnému očkovaniu, si musí uvedomiť, že poškodenie tela, ak ochoriete, alebo ak ochorú iní, bude oveľa väčšie. Všetky seriózne vedecké poznatky hovoria, že zvyškové riziká sú jednoznačne minimálne, ale že prínosy sú podstatne väčšie.

Iná vec je, že telesná integrita sa nikdy nesmie stanoviť ako absolútna hodnota základných práv, ale musí byť v praktickom súlade s inými základnými právami, a ak je sloboda všetkých ostatných masívne obmedzená, pretože malá skupina zabezpečuje, aby sa vírus šíril takýmto spôsobom, potom telesná integrita, ktorú na prvý pohľad chápem, nesmie byť stanovená ako absolútna hodnota.

• Moderátor, Tim Deisinger:

Stanovisko Petra Daboka, bývalého predsedu nemeckej rady pre etiku. A teraz by sme chceli počuť Dr. Steffena Raabeho, pediatra a dorastového lekára a hovorcu predstavenstva Združenia lekárov pre individuálne rozhodnutia o očkovaní, pána Rabeho. Rozumiete ešte argumentácii pána Darbrocka?

• Dr. Steffen Rabe

Nie, argument v prospech povinného očkovania je pre mňa úplne nepochopiteľný, najmä v prípade vakcín Covid. A keď počúvam pána Darbrocka a on argumentuje nepriamou ochranou iných, tak to je samozrejme rozhodujúci kameň úrazu. Len takýto argument môže odôvodniť úvahy o povinnom očkovaní a práve tento aspekt vakcíny Covid nepokrývajú. Vakcíny Covid poskytujú tým, ktorí sa chcú chrániť, dočasnú ochranu pred závažnými prípadmi. Neposkytujú však žiadnu relevantnú vonkajšiu ochranu.

Tým sa vylučujú všetky argumenty v prospech povinného očkovania. A ak hovorí o nízkom a minimálnom riziku pri očkovaní, potom je to jednoducho nesprávne. Ako pediater sa stretávam s mladými mužmi vo veku 16 alebo 18 rokov, ktorým musím povedať, že ak sa nechajú zaočkovať vakcínou Biontech, jedinou v súčasnosti odporúčanou a schválenou vakcínou, riziko vzniku myokarditídy ako priameho následku tohto očkovania je minimálne v pomere 1:5000. Pán Deisinger, iný liek nepoznáme. Za 30 rokov som nevidel žiadnu inú vakcínu, ktorá by kombinovala také závažné ochorenie ako myokarditída s takým dramaticky vysokým rizikom. Toto povinné očkovanie nie je v žiadnom prípade právne, morálne ani medicínsky inteligentné, ale je, ako správne povedal pán Hans-Jürgen Pape, výrazom bezmocnosti a bezhlavosti.

• Moderátor, Tim Deisinger:

Potom si zoberme bezmocnosť, ak sa pozrieme na situáciu na jednotkách intenzívnej starostlivosti alebo v nemocniciach vo všeobecnosti, ktorá sa uvádza ako ďalší argument, že tam máte núdzový stav a neexistuje iné východisko z núdzového stavu ako povinné očkovanie.

• Dr. Steffen Rabe

Pán Deisinger, povinné očkovanie však nie je okamžité opatrenie. Právna príprava, politická realizácia a medicínska účinnosť - klameme sami seba, ak do dvoch až troch týždňov uvidíme na jednotkách intenzívnej starostlivosti nejaký účinok. Musíme konečne zastaviť rednutie jednotiek intenzívnej starostlivosti a znižovanie počtu lôžok intenzívnej starostlivosti. Namiesto toho, aby sme sestry povinným očkovaním vyhnali z profesie, musíme im konečne prejaviť uznanie, ktoré potrebujú, aby zostali vo svojej profesii. A práve v tomto politici za dva roky úplne zlyhali. táto katastrofa je katastrofou s ohlásením, pán Deisinger. Vedeli sme, že táto jeseň bude ďalšou výzvou aj pre nemocnice a pre jednotky intenzívnej starostlivosti, a s otvorenými očami sme znížili počet lôžok intenzívnej starostlivosti o tisíce. A to by sa teraz malo použiť ako argument na zásah do jedného z ústredných základných práv, a tu s pánom Dabrockom rozhodne nesúhlasím, práva na telesnú integritu, najmä v krajine ako Nemecko, ktorá má túto neblahú minulosť, a to aj v oblasti medicíny s týmito zásahmi, by sme mali byť pri tomto uvažovaní veľmi, veľmi opatrní a veľmi, veľmi opatrní.

Pomocné látky ALC-0315 a ALC-0159 "len na výskumné účely"

Pomocné látky obsiahnuté v Pfizer/BioNTech Comirnaty ALC-0315  [(4-hydroxybutyl)azanediyl]di(hexán-6,1-diyl) bis(2-hexyldekanoát) (CAS 2036272-55-4) a ALC-0159 2-[(polyetylénglykol)-2000]-N,N-ditetradecylacetamid (CAS 1849616-42-7) sú podľa výrobcu ABP Biosciences určené výlučne na použitie na výskumné účely.

V súčasnosti dostupné štúdie o týchto pomocných látkach:

• http://www.eurannallergyimm.com/cont/journals-articles/1043/volume-potential-culprits-immediate-hypersensitivity-reactions-4579allasp1.pdf (PDF-stiahnuť) 29.04.2021

• https://www.cell.com/molecular-therapy-family/molecular-therapy/fulltext/S1525-0016(21)00064-2?_returnURL=https%3A%2F%2Flinkinghub.elsevier.com%2Fretrieve%2Fpii%2FS1525001621000642%3Fshowall%3Dtrue (PDF-stiahnuť) 04.02.2021
  
  
  
  

Webová stránka federálnej vlády - vypustenie tvrdenia "Bude existovať zákonná povinnosť očkovania - NIE"

Verzia z 17.11.2021 00:39:55 bol stále

Verzia z 19.11.2021 16:44:31 je teraz (tu k dispozícii v origináli):

Vyššie uvedené odkazy sú dostupné prostredníctvom služby WayBackMachine (https://web.archive.org) zabezpečené archívne stránky.

Je zarážajúce, že "vakcíny sa naďalej monitorujú a testujú aj po ich schválení...". "Autorizácie" sú len - podmienečné - povolenia a musia sa každoročne obnovovať až do konečného schválenia (pozri ďalej).

Predĺženie - podmienečných - povolení pre vakcíny Covid-19

Príslušné dokumenty uvedené nižšie, ktoré sú k dispozícii na stiahnutie, nájdete v časti "Postupy Európskej komisie" prostredníctvom príslušného odkazu "Vykonávacie rozhodnutie Komisie" vo forme súboru ZIP kliknutím na príslušný Ikona dokumentu v pravom stĺpci.

Prvý symbol znamená "Rozhodnutia" (súbor ZIP začína "dec", druhý pre "Prílohy", čo zodpovedá "anx". Koncovka názvu rozbalených súborov predstavuje skratku jazyka (de - nemčina)

V (druhom) stĺpci "Typ postupu", napríklad sú tu položky týkajúce sa "Mesačná aktualizácia" (aktualizované informácie od výrobcu o prípravku, vedľajších účinkoch atď.), "Korigendum" (oprava prekladu), "Nápravné rozhodnutie" (rozhodnutia o komercializačnej ochrane, jej rozšírenie) a "Ročné obnovenie" (rozšírenie podmienečného povolenia).

Komerčné informácie - BionTech/Pfizer

Európska komisia v Bruseli oznámila 3. novembra 2021 dokumentom K(2021) 7992 (v konečnom znení). Vykonávacie rozhodnutie Komisie od 03.11.2021, "o ročnom predĺžení platnosti podmienečného povolenia na uvedenie humánneho lieku "Comirnaty - Tozinameran, COVID-19 mRNA vakcína (modifikovaná nukleozidom)" udeleného rozhodnutím K(2020) 9598(v konečnom znení) a o zmene a doplnení uvedeného rozhodnutia", s: "Podmienečné povolenie udelené rozhodnutím C(2020) 9598(final) z 21. decembra 2020 sa predlžuje.“

Spikevax - Moderna

Európska komisia v Bruseli oznámila 4. októbra 2021 dokument K(2021) 7305 (konečné znenie). Vykonávacie rozhodnutie Komisie od 04.10.2021, "o ročnom predĺžení platnosti podmienečného povolenia na uvedenie humánneho lieku "Spikevax - COVID-19 mRNA vakcína (modifikovaná nukleozidom)" udeleného rozhodnutím K(2020) 94(v konečnom znení) a o zmene a doplnení uvedeného rozhodnutia", s: "Podmienečné povolenie udelené rozhodnutím K(2021) 94(v konečnom znení) zo 6. januára 2021 sa predlžuje.“

Vaxzevira - AstraZeneca

Európska komisia v Bruseli oznámila 9. novembra 2021 dokument K(2021) 8206 (konečné znenie). Vykonávacie rozhodnutie Komisie od 09.11.2021, "o ročnom predĺžení platnosti podmienečného povolenia na uvedenie humánneho lieku "Vaxzevira - COVID-19 mRNA vakcína (modifikovaná nukleozidom)" udeleného rozhodnutím K(2020) 698(v konečnom znení) a o zmene a doplnení uvedeného rozhodnutia", s: "Podmienečné povolenie udelené rozhodnutím K(2021) 698(v konečnom znení) z 29. januára 2021 sa predlžuje.“

Vakcína Covid-19 - Janssen

V súčasnostis dokumentom K(2021) 1763 (konečné znenie) iba Vykonávacie rozhodnutie Komisie na podmienečné povolenie vakcíny od 11. marca 2021.

Na stránke Článok 4 uvádza: "Povolenie je platné jeden rok odo dňa oznámenia tohto rozhodnutia."

Definície Inštitútu Paula Ehrlicha (PEI) o vakcínach COVID-19

Odkazy na verzie z 15.8.2021 a 7.9.2021 sú dostupné prostredníctvom WayBackMachine (https://web.archive.org) uložené archívne stránky, zatiaľ čo aktuálna verzia z 23/09/2021 * cez odkaz na Pôvodná stránka PEI. Uverejňujú sa tam aj "červené listy" vydávané farmaceutickými spoločnosťami, ako aj tu k dispozícii na stiahnutie.

Všetky uvedené webové stránky sú k dispozícii na stiahnutie vo formáte PDF.

15.08.2021 - "Vakcíny COVID-19 chránia pred "infekciami vírusom SARS-CoV-2." (Webová stránka ako PDF na stiahnutie)

07.09.2021 - "Vakcíny COVID-19 chránia pred ťažkým priebehom infekcie vírusom SARS-CoV-2.“ (Webová stránka ako PDF na stiahnutie)

23.09.2021 * - "Vakcíny COVID-19 sú určené na aktívnu imunizáciu na prevenciu ochorenia COVID-19 spôsobeného vírusom SARS-CoV-2.“ (Webová stránka ako PDF na stiahnutie)

Náš svet v údajoch - Covid-19, očkovania, úmrtia

Na webovej stránke Náš svet v údajoch Johna Hopkinsa poskytuje oficiálne zozbierané údaje o rôznych témach na celom svete, vrátane nasledujúcich štatistík pre Nemecko:

Odkaz na štatistiky - Podiel osôb, ktoré dostali aspoň jednu dávku vakcíny COVID-19

Odkaz na štatistiky - Kumulatívne potvrdené prípady COVID-19 na milión ľudí

Odkaz na štatistiky - Kumulatívne úmrtia COVID-19 na milión ľudí

Rada Európy - rezolúcia 2361/2021

Vo svojom uznesení s názvom Vakcíny Covid-19: etické, právne a praktické aspekty odporúčania, ktoré sa okrem iného týkajú spravodlivej distribúcie vakcín, dobrovoľnosti očkovania a nediskriminácie ľudí, ktorí sa z akéhokoľvek dôvodu nechcú dať zaočkovať.

"7.3.1. zabezpečiť, aby boli občania informovaní o tom, že očkovanie nie je povinné
a aby nikto nebol vystavený politickému, spoločenskému alebo inému tlaku, aby sa dal zaočkovať.
ak tak nechce urobiť sám".

"7.3.2 zabezpečiť, aby nikto nebol diskriminovaný z dôvodu, že nebol očkovaný, z dôvodu možných zdravotných rizík alebo preto, že si neželá byť očkovaný".

Keďže Rada Európy nemá legislatívne právomoci, tieto odporúčania nie sú pre žiadny z členských štátov právne záväzné.

Z týchto odporúčaní nemožno vyvodiť ani zákaz povinného očkovania, ani diskrimináciu - aj keď by to bolo v záujme zodpovedných občanov žiaduce...

Marburský vírus

Od začiatku roka 2021 sa objavuje čoraz viac článkov o víruse Marburg. Napríklad 25. februára 2021 Publikácia od spoločnosti Elsevier Inc. v Národná lekárska knižnica.

O necelé dva mesiace neskôr, 22. apríla 2021, sa v titulku GAVI Aliancia pre vakcíny „Ďalšia pandémia: Marburg?“

Už v roku 2018 Primerdesign Ltd. test PCR "Vírusový proteín 35 (VP35) gén Marburgvirus genesig Standard Kit„.

Hoci vírus Marburg, ktorý bol prvýkrát 1967 opísaln je príbuzný vírusu ebola, 376 úmrtí v tom čase a len 16 od roku 2005 bolo veľmi obmedzených.

V tejto súvislosti sa zdá byť nepochopiteľný nadmerný tlak na vývoj vakcíny proti vírusu Marburg. RiVax® prostredníctvom stránky . Soligenix Inc.. Ponáhľanie sa s obídením obvyklých testovacích fáz 1, 2 a 3 v súlade s usmerneniami FDA pre testovanie na zvieratách dáva podnet na zamyslenie.

22. septembra 2021 Kieran Morrissey, Dublin, Írsko, zhrnul svoje myšlienky na túto tému tu spoločne.

Právne stanovisko k nepriamemu povinnému očkovaniu

V 111-stranovej Právny názor zo 4. októbra 2021, Prof. Dr. Dietrich Murswiek po zvážení všetkých aspektov, ktoré treba zvážiť, dospel k nasledujúcemu súhrnnému záveru: "Diskriminácia neočkovaných osôb v rámci predpisov o prístupe k verejnému životu a v rámci karanténnych pravidiel porušuje základné práva dotknutých osôb a je protiústavná."

Článok_Li
Nemocnice by mali zamestnávať, nie prepúšťať sestry s prirodzenou imunitou

Nemecký preklad

PODĽA MARTIN KULLDORFF   OKTÓBER 1, 2021   HISTÓRIA, POLITIKA, VEREJNÉ ZDRAVIE, SPOLOČNOSŤ   4 MINÚTY

Spomedzi mnohých prekvapivých udalostí počas tejto pandémie najviac ohromilo spochybnenie prirodzene získanej imunity po prekonaní choroby Covid. 

Prirodzenej imunite rozumieme prinajmenšom od Aténsky mor v roku 430 pred n. l. Tu je Thukydides:

"Najviac súcitu však chorí a umierajúci našli u tých, ktorí sa z choroby zotavili. Tí zo skúsenosti vedeli, o čo ide, a nemali o seba strach; veď toho istého človeka nikdy nenapadla dvakrát - aspoň nie smrteľne. - Thukydides

S endemickými koronavírusmi, voči ktorým máme dlhodobú prirodzenú imunitu, žijeme už najmenej sto rokov. Podľa očakávania máme prirodzenú imunitu aj po ochorení Covid-19, keďže napriek široko cirkulujúcemu vírusu sa vyskytlo mimoriadne málo reinfekcií s vážnym ochorením alebo úmrtím. 

Pri väčšine vírusov je prirodzená imunita lepšia ako imunita vyvolaná očkovaním, čo platí aj pre Covid. V doteraz najlepšia štúdia, u očkovaných bola približne 27-krát vyššia pravdepodobnosť symptomatického ochorenia ako u osôb s prirodzenou imunitou, pričom odhadované rozpätie sa pohybovalo od 13 do 57. Keďže v žiadnej zo skupín nedošlo k úmrtiu na Covid, prirodzená aj očkovacia imunita dobre chránia pred úmrtím. 

V poslednom desaťročí som úzko spolupracoval s nemocničnými epidemiológmi. Zatiaľ čo úlohou lekárov je liečiť pacientov a zabezpečiť ich zdravie, úlohou nemocničného epidemiológa je zabezpečiť, aby pacienti počas pobytu v nemocnici neochoreli, napríklad aby sa nenakazili smrteľným vírusom od iného pacienta alebo ošetrovateľa. 

Na tento účel nemocnice používajú rôzne opatrenia, od častého umývania rúk až po úplné regálie na kontrolu infekcií pri starostlivosti o pacienta s ebolou. Očkovanie je kľúčovou súčasťou týchto kontrolných opatrení. Napríklad dva týždne pred operáciou sleziny sa pacientom podáva pneumokoková vakcína aby sa minimalizovali pooperačné infekcie, a väčšina klinického personálu je každoročne očkovaná proti chrípke.

Opatrenia na kontrolu infekcií sú obzvlášť dôležité pre starších krehkých nemocničných pacientov s oslabeným imunitným systémom. Môžu sa nakaziť a zomrieť na vírus, ktorý by väčšina ľudí ľahko prežila. Hlavným dôvodom na imunizáciu sestier a lekárov proti chrípke je zabezpečiť, aby nenakazili takýchto pacientov.  

Ako môžu nemocnice čo najlepšie chrániť svojich pacientov pred chorobou Covid? Je to nesmierne dôležitá otázka, ktorá sa týka aj domovov dôchodcov. Existuje niekoľko zrejmých štandardných riešení, ako napríklad oddelenie pacientov s ochorením Covid od ostatných pacientov, minimalizácia striedania personálu a poskytnutie veľkorysého pracovného voľna pre personál s príznakmi podobnými ochoreniu Covid. 

Ďalším cieľom by malo byť zamestnávanie zamestnancov s čo najsilnejšou imunitou voči Covidu, pretože je menej pravdepodobné, že sa nakazia a rozšíria ho na svojich pacientov. To znamená, že nemocnice a domovy dôchodcov by sa mali aktívne snažiť zamestnávať personál, ktorý má prirodzenú imunitu voči predchádzajúcemu ochoreniu Covid, a využívať takýto personál pre svojich najzraniteľnejších pacientov. 

Preto sme teraz svedkami tvrdej konkurencie, keď sa nemocnice a domovy dôchodcov zúfalo snažia zamestnať ľudí s prirodzenou imunitou. Dobre, v skutočnosti, nie. 

Namiesto toho nemocnice prepúšťajú zdravotné sestry a iný personál s vyššou prirodzenou imunitou a ponechávajú si tých, ktorí majú slabšiu imunitu vyvolanú očkovaním. Týmto spôsobom zrádzajú svojich pacientov a zvyšujú riziko nemocničných infekcií. 

Hlavný lekársky poradca Bieleho domu Dr. Anthony Fauci presadzovaním povinnosti očkovania spochybňuje existenciu prirodzenej imunity po ochorení Covid. Nasleduje tak príklad riaditeľky CDC Rochelle Walenskyovej, ktorá v roku 2020 spochybnila prirodzenú imunitu. Memorandum vydáva The Lancet. Zavedením povinného očkovania univerzitné nemocnice teraz spochybňujú aj existenciu prirodzenej imunity po ochorení Covid. 

To je ohromujúce. 

Pracujem v nemocnici Brigham and Women's Hospital v Bostone, ktorá oznámila, že všetky zdravotné sestry, lekári a ďalší poskytovatelia zdravotnej starostlivosti budú prepustení, ak sa nenechajú zaočkovať vakcínou Covid. Minulý týždeň som sa rozprávala s jednou z našich zdravotných sestier. Tvrdo pracovala a starala sa o pacientov s vakcínou Covid, aj keď niektorí jej kolegovia na začiatku pandémie v strachu odišli. 

Nie je prekvapením, že sa nakazila, ale potom sa zotavila. Teraz má silnejšiu a dlhšie trvajúcu imunitu ako zaočkovaní správcovia nemocnice, ktorí ju pre neočkovanie vyhodili z práce. 

Ak univerzitné nemocnice nedokážu správne posúdiť lekárske dôkazy v oblasti základnej vedy o imunite, ako im môžeme dôverovať v iných aspektoch nášho zdravia? 

Čo ďalej? Univerzity spochybňujúce, či je Zem guľatá alebo plochá? To by prinajmenšom spôsobilo menej škody.

Martin Kulldorff, vedúci vedecký pracovník Brownstone Institute, je profesorom medicíny na Harvard Medical School.
kulldorff@brownstone.org

Trestné oznámenia a trestné oznámenie v komplexe BioNTech

Spolkovému generálnemu prokurátorovi na Spolkovom najvyššom súde Dr. Petrovi Frankovi

Dňa 10. 6. 2021 podal pán Tobias Ulbrich, advokát advokátskej kancelárie Robert & Ulbrich, Otto Str. 12, 50859 Kolín nad Rýnom, vyššie uvedené trestné oznámenie a trestné oznámenie na "všetky osoby, ktoré vyvinuli ... experimentálnu látku mRNA od spoločnosti BioNTech/Pfizer s názvom "vakcína", vyrobili ju, distribuovali, schválili ju na očkovanie a podávali ju nevedomým ľuďom. Najmä proti:

1. Alexandra Knauerová, Generálny riaditeľ spoločnosti Knauer Wissenschaftliche Geräte GmbH, Hegauer Weg 38, 14163 Berlín (výrobca strojov na výrobu lipidových nanočastíc)
2. Vasant Nasasimhan, Generálny riaditeľ spoločnosti Novartis AG (držiteľ patentu na lipidové nanočastice AC - 0135 a AC 0159)
3 James Bradner, M.D. prezident Novartis Institutes for Bio Medical Research (NIBR), vývojár lipidov
4 Thomas D. Madden Ph.D. Generálny riaditeľ spoločnosti Acuitas Therapeutics, výrobcu lipidov pre spoločnosť Biontech 5 Ying K. Tam, Vedecký riaditeľ spoločnosti Acuitas Therapeutics,
6. Sean Semple, Senio riaditeľ pre klinický výskum
7 Dr. Dietmar Katinger, generálny riaditeľ Donaustraße 99, 3400 Klosterneuburg, Rakúsko, (výrobca a vývojár výroby v spoločnosti Biontech SE)
8 Prof. Dr. Ugur Sahin, generálny riaditeľ spoločnosti BioNTech SE, An der Goldgrube 12, 55131 Mainz
9 Sean Marett, CBO a CCO, BioNTech SE, tamtiež.
10 Dr. Sierk Poetting, finančný a prevádzkový riaditeľ, BioNTech SE, tamtiež.
11 PD Dr. Özlem Türeci, CMO, BioNTech SE, tamtiež.
12 Ryan Richardson, CSO, BioNTech SE, tamtiež.
13 Karin Samusch, Dermapharm AG, Lil-Dagover-Ring 7, 82031 Grünwald (výrobca)
14. Hilde Neumeyer, Dermapharm AG, Lil-Dagover-Ring 7, 82031 Grünwald (výrobca) 15 Dr. Hans-Georg Feldmeier, Dermapharm AG, Lil-Dagover-Ring 7, 82031 Grünwald (výrobca)
16 Dr. Jürgen Ott Dermapharm AG, Lil-Dagover-Ring 7, 82031 Grünwald (výrobca) 17. Mark Pfister, Vedúci výroby pre Biontech v spoločnosti Novartis AG v Marburgu (výrobca) 18 Dr. Sabine Brand, Siegfried Hameln, Langes Feld 13, 31789 Hameln, Nemecko (Výrobca)
19 Dr. Sven Remmerbach, Baxter Oncology GmbH, Kantstraße 2, 33790 Halle/Westphalia (výrobca)
20 Dr. Fabrizio Guidi, predseda; Sanofi-Aventis Deutschland GmbH, Industriepark Höchst, K703, Brüningstr. 50, 65926 Frankfurt (výrobca)
21 Dr. Matthias Braun, Sanofi-Aventis Deutschland GmbH
22. Oliver Coenenberg, Sanofi-Aventis Deutschland GmbH,
23 Evelyne Freitag, Sanofi-Aventis Deutschland GmbH,
24 Prof. Dr. Jochen Maas, Sanofi-Aventis Deutschland GmbH,
25 Prof. Dr. CichutekPrezident Inštitútu Paula Ehrlicha (porušenie povinnosti kontroly a varovania, neodňatie povolenia)
26 Prof. Dr. ViethsViceprezident Inštitútu Paula Ehrlicha,
27 Dr. Keller-StanislawskiOddelenie bezpečnosti liekov a zdravotníckych pomôcok Inštitútu Paula Ehrlicha.
28 Prof. Dr. Hildt, Vedúci oddelenia virológie Inštitútu Paula Ehrlicha
29 Prof. Dr. van Zandbergen, vedúci oddelenia imunológie Inštitútu Paula Ehrlicha
30. Dr. Hinz, vedúci oddelenia 3 a 4, terapeutické vakcíny Inštitútu Paula Ehrlicha 31 Matthias Groote, Zástupca agentúry EMA v Európskom parlamente, Bergmannstraße 37, 26789 Leer,
32. Karl Broich, Prezident Spolkového inštitútu pre lieky a zdravotnícke pomôcky a zástupca EMA v Nemecku, Kurt-Georg-Kiesinger-Alle 3, 53175 Bonn,
33. Pani Emer Cooke, Predseda EMA, Domenico Scarlattilaaan 6, 1083 HS Amsterdam,
34. Spolkový minister zdravotníctva Jens Spahn, Rochusstraße 1, 53123 Bonn,
35. Prof. Dr. Lothar H. Wieler, ktorú si možno stiahnuť z Inštitútu Roberta Kocha,
36. Prof. Dr. Christian Drosten, na stiahnutie prostredníctvom Inštitútu Roberta Kocha,
37 Bill a Melinda Gatesovci,
et al.

Okrem toho sú tu všetci neinformovaní očkovatelia v očkovacích centrách, ktorí podali "vakcínu" bez ohľadu na stav schválenia a následky očkovania, ktoré nie sú podpísaným známe.

Za genocídu, pokus o genocídu, porušenie § 20 KrWKG a vlastizradu spolkovej vlády atď.„

Veľmi zaujímavý úplný text (194 strán) je tu a cituje okrem iného historika Dr. Paula Schreyera, ktorý bol uvedený ako svedok, ktorý "zhrnul udalosti za posledných 20 rokov a opísal vplyv mimovládnych organizácií na prípravu pandémie".

LUBECAVAX - Prof. Dr. Winfried Stöcker, Lübeck

Stav 31. augusta 2021

Winfried Stöcker sa narodil v roku 1947 v Hornej Lužici. V rokoch 1967 až 1973 študoval medicínu vo Würzburgu, doktorát získal v roku 1976, od roku 1999 je profesorom na Tongji Medical University vo Wuhane, od roku 2011 je čestným profesorom na univerzite v Lübecku, zakladateľom spoločnosti EUROIMMUN Medizinische Labordiagnostika AG 1987, špecializuje sa na autoimunitnú a alergickú diagnostiku, ako aj na infekčnú sérológiu a molekulárnu genetiku.

Prof. Dr. Stöcker sa v počiatočnom štádiu podieľal na vývoji účinnej vakcíny proti vírusu SARS CoV2, najprv ju testoval na sebe, potom očkoval členov svojej rodiny a nakoniec dal vyrobenú vakcínu k dispozícii svojim zamestnancom.

Opisuje spôsob pôsobenia na jeho Blog takto (Citujem):

Predpokladáme, že infekcii korónou možno účinne predchádzať očkovaním. Na stránke . Očkovanie v Lübecku používa malý, na mieru upravený, geneticky upravený triviálny antigén, ktorý si telo nemusí syntetizovať samo, ako je to v prípade metód založených na génovom člne. Vyvoláva tvorbu protilátok v organizme príjemcu práve proti tým štruktúram vírusu, ktorými sa viaže na angiotenzín-2 receptory endotelových buniek u neočkovaných ľudí. Vďaka tejto blokáde protilátky zabránia infekcii buniek a vírus sa nemôže uchytiť.

Očkovanie sa zvyčajne podáva trikrát: v prvý deň, potom približne po 14 dňoch a znova približne po štyroch týždňoch. Koncentrácia protilátok sa meria po 14 dňoch, pretože nemáme oficiálne predpísanú istotu, že sa dovtedy vytvorí imunitná ochrana. Viac ako 95% pacientov vykazuje na konci vysokú koncentráciu protilátok imunoglobulínovej triedy IgG proti proteínom hrotu koróny, takže sú pravdepodobne voči koróne imúnni. Imunokompromitovaní pacienti sú raz alebo dvakrát preočkovaní dvojitou dávkou - to sa dá rozpoznať len vyšetrením séra - a polovica z nich stále dosahuje vysoké titre. Okrem toho merania ukázali, že protilátky boli schopné neutralizovať (inaktivovať) koronavírusy a že v troch štvrtinách prípadov sa vyvinula T-bunková imunita.

Informuje aj o téme výroby a aplikácie vakcín lekármi vo všeobecnosti (Citujem):

To znamená, že každý lekár v Nemecku môže zmiešať antigén s adiuvans (až teraz je to vakcína) a legálne ho aplikovať alebo podať individuálne svojim pacientom. Adiuvans uchováva antigén a predkladá ho imunitnému systému. Bez adiuvantu by sa antigén rozšíril po celom organizme, a tak by sa zriedil do takej miery, že by bol neúčinný. Z funkčných dôvodov sa musia obe zložky uchovávať oddelene a musia sa čerstvo zmiešať. Podľa zákona však lekár nesmie pripravenú vakcínu ďalej poskytovať (uvádzať na trh) tretím osobám.

Zdroj dodávok je uvedený na jeho blogu:

medidoc GmbH
Jakob-Haringer-Straße 1
5020 Salzburg
RAKÚSKO

E-mail: info@medidoc.uk
Telefónne číslo: +43 59333 2000

medidoc.uk
medidoc.us
medidoc.gmbh

UID: ATU33905904
Daňový úrad Salzburg City 114/8583
Register spoločnosti: 45971F
Súd pre obchodný register: Krajinský súd Salzburg

Problém, že táto vakcína ešte nie je uznaná EÚ (v porovnaní s núdzovým schválením mRNA a vektorových prípravkov), sa kompenzuje tým, že vedie k imunite T-buniek podobnej imunite konvaliniek.

T-bunkovú imunitu stanovujú a certifikujú vhodne vybavené laboratóriá. Tento certifikát slúži ako právne záväzný dôkaz imunity.

Pokiaľ tí, ktorí sa uzdravili, sú a zostanú na rovnakej úrovni ako tí, ktorí boli očkovaní, pokiaľ ide o rôzne obmedzenia/úľavy, táto vakcína je - teraz už dobre otestovanou - alternatívou bez porovnateľných vedľajších účinkov mRNA alebo vektorových prípravkov.

Vakcína BNT162b2: možné chybné čítanie kodónov, chyby syntézy proteínov a abnormality alternatívneho spájania

Kira Smith

Vo vedeckom Komentár z 25. marca 2021, publikované ako preprint v AUTHOREA, na stiahnutie ako PDF v angličtine sa upozorňuje na možné vedľajšie účinky vakcíny BioNTec/Pfizer BNT162b2 a uvádza sa všeobecný účinok mRNA vakcín. Nasleduje nemecký preklad:

Abstrakt

Vakcína BNT162b2 proti Covid-19 pozostáva z RNA so 4284 nukleotidmi rozdelenými do 6 častí, ktoré poskytujú informácie na vytvorenie továrne na S-špičaté proteíny, ktoré využíva Sars-CoV-2 (Covid-19) ako hostiteľ. Tieto proteíny sa potom dostanú mimo bunky a spustia imunitnú odpoveď a tvorbu protilátok.

Problémom je silná modifikácia mRNA: uracil je nahradený na oklamanie imunitného systému Ψ (pseudouridínom); písmená všetkých kodónových trojíc sú nahradené C alebo G, aby sa extrémne zvýšila rýchlosť syntézy proteínov; nahradenie niektorých aminokyselín prolínom; pridanie sekvencie (3′-UTR) s neznámou modifikáciou.

Tieto poruchy by mohli vyvolať silné pochybnosti o prítomnosti chýb v používaní kodónov. Prípadná chybná translácia má dôsledky na patofyziológiu rôznych ochorení. Okrem toho vstreknutá mRNA je pre-mRNA, ktorá môže viesť k viacerým zrelým mRNA; ide o abnormality alternatívneho zostrihu, ktoré sú priamym zdrojom vážneho dlhodobého poškodenia ľudského zdravia.

V podstate to, čo sa vyrába, nemusí byť identické s proteínom S spike: len chyba v translačnom dekódovaní, nesprávne čítanie kodónov, produkcia rôznych aminokyselín, potom proteíny spôsobiť vážne dlhodobé poškodenie ľudského zdravia, hoci DNA nie je modifikovaná, ale v jadre a nie v cytoplazme, kde sa dostane modifikovaná mRNA.

V tomto prípade však korelácia medzi rýchlosťou syntézy a expresiou proteínov s chybami syntézy, ako aj mechanizmus, ktorý by mohol ovplyvniť preklad sekvencie, zostávajú nejasné a mnoho štúdií sa zatiaľ neuskutočnilo.

Úvod

Informácie o spôsobe účinku vakcíny

Vakcína Sars-CoV-2 (Covid-19) od spoločnosti BioNTec/Pfizer s názvom BNT162b2, ale aj Tozinameran alebo Comirnaty, obsahuje približne 30 µg RNA, ktorá sa vstrekuje do lipidovej gule v ľudskom tele, najmä do cytoplazmy buniek, ale mimo jadra (kde sa nachádza DNA); táto RNA má modifikovanú genetickú informáciu (preto modRNA), t. j. mRNA (messenger RNA) obsahujúcu inštrukcie na vybudovanie továrne na proteíny, klony proteínového hrotu S, t. j. proteínu (a len proteínu, nie celého vírusu), ktorý Covid-19 používa na napadnutie a infikovanie hostiteľa. Po ich sériovej výrobe ribozómami sú transportované von z bunky cez lipidový obal; imunitný systém tak identifikuje tieto proteíny ako útočníkov bunky a napadne ich produkciou protilátok. Preto nie je možné predpokladať, že by vakcína vyvolávala Covid-19 alebo menila ľudskú DNA.

Poznámky k syntéze bielkovín

Preklad sa vo všeobecnosti delí na tri fázy: Začiatok, rozšírenie a koniec.

1. Ribozóm sa viaže na mRNA v počiatočnom kodóne;
2. Polypeptidový reťazec sa predlžuje v jednom smere pohybu ribozómu postupným pridávaním aminokyselín;
3. Ak sa nájde stop kodón, polypeptid sa uvoľní a ribozóm sa rozpadne.

Chyby pri zostavovaní a preklade sekvencií

Premena sekvencie mRNA na polypeptid závisí od transferovej RNA (tRNA), ktorá prenáša aminokyseliny do ribozómu. Na ribozómoch sa tRNA páruje s mRNA prostredníctvom komplementárneho párovania báz medzi nukleotidmi kodónu mRNA a nukleotidmi antikodónu tRNA. Keď sa správna tRNA naviaže na kodón, prenesie jeho aminokyselinu na koniec rastúceho polypeptidového reťazca.

Dekódovanie kodónov mRNA prenosovými RNA (tRNA) v ribozóme zahŕňa Watsonovo-Crickovo párovanie báz.

Odhaduje sa, že celková chybovosť genómovej replikácie (približne 10-8) je približne 10 000-krát nižšia ako chybovosť syntézy proteínov (približne 10-4), a preto je vo väčšine prípadov kľúčovým procesom, ktorý prispieva k nepresnosti bunkového proteómu, translácia mRNA. Rozdiel medzi chybovosťou pri replikácii DNA a translácii mRNA môže byť čiastočne spôsobený tým, že replikácia DNA prebieha na úrovni jednotlivých nukleotidov (so 41 = 4 možnými permutáciami), zatiaľ čo translačný mechanizmus interpretuje kodóny mRNA do tripletov (so 43 = 64 možnými permutáciami)(1).

Účinnosť dekódovacieho mechanizmu mRNA je do veľkej miery regulovaná aj chybou v používaní kodónov, ktorá je charakterizovaná nadmerným alebo nedostatočným zastúpením synonymných kodónov. Preto optimalizácia chvenia tRNA a používania kodónov v mRNA môže výrazne zlepšiť účinnosť a presnosť translácie(1).

Pre- alebo post-mRNA translácia môže nepriamo zaviesť chyby syntézy proteínov počas transkripcie a post-translačného spracovania. Translačný mechanizmus však môže priamo prispieť k chybnej translácii prostredníctvom chybného dekódovania tRNA (vedúceho k nesprávnej inkorporácii alebo prečítaniu stop kodónu), chybnej acylácie tRNA (vedúcej k nesprávnemu spojeniu tRNA s aminokyselinou), zmeny zaradenia kodónu alebo posunu rámcov vyvolaného transláciou ribozómov(1).

Metóda skúmania

Analýza genetickej sekvencie

Vakcína pozostáva zo 4284 nukleotidov rozdelených do 6 častí: Cap je začiatok sekvencie začínajúci dvoma nukleotidmi GA, ktoré falošne naznačujú, že mRNA pochádza z ľudskej bunky, a preto je akceptovaná; 5´ označuje smer, ktorým sa má translácia uberať, zatiaľ čo UTR označuje oblasť, kde musí ribozóm odpočívať, aby mohol produkovať proteíny. V tejto časti bolo U uracilu nahradené molekulou 1-metyl-3′-pseudouridínu označenou znakom Ψ, aby sa vyhlo imunitnému systému a zabránilo sa degradácii práve vstúpenej mRNA; to je však faktor, ktorý môže viesť k chybám pri výrobe proteínov. Na modifikácii špecifických pozícií sa podieľa niekoľko Ψ-syntáz a defekty viacerých z nich sú spojené s ľudskými ochoreniami(2).

Potom je tu časť sig, známa ako rozšírená štartovacia sekvencia signálneho peptidu S-glykoproteínu, ktorej informácie sú potrebné na vedenie novovytvoreného proteínu von z bunky cez endoplazmatické retikulum; opäť sa robia zmeny v trojiciach nukleotidov, aby RNA mohla byť akceptovaná imunitným systémom, niektoré písmená tvoriace informáciu sa "zamiešajú" s inými (zvyčajne na tretej pozícii), zdanlivo "neškodnými synonymami" (najmä zvýšením počtu písmen C a G, ktoré kódujú rýchlosť syntézy bielkovín). Hoci špecifikujú identické aminokyseliny, tieto dve synonymá nie sú úplne rovnaké, aspoň z hľadiska prekladu. Mechanistické štúdie ukazujú, že existujú jemné, ale významné rozdiely v interakcii každého z nich s príslušnou transferovou RNA (tRNA), rozdiely, ktoré ovplyvňujú rýchlosť aj presnosť translácie.3 Hoci je pravda, že 3 písmená tvoria kodón a viac ako jeden kodón kóduje tú istú aminokyselinu, je tiež pravda, že neúmerným zvýšením rýchlosti tvorby bielkovín by mohlo vzniknúť riziko závažných chýb pri translácii.

Taktiež znaky, ktoré tvoria sekvenciu súvisiacu s konštrukciou skutočného špicatého proteínu S protein_mut, boli upravené o ďalšie C a G, ktoré bolo možné pridať, pričom sa rešpektovali synonymá v štandardnej tabuľke genetického kódu, so zámenou aminokyselín lyzínu ( AAA) a valínu (GUU) za prolín (CUU), aby sa zabránilo kolapsu skonštruovaného proteínu. Na konci tejto sekvencie sú 2 stop kodóny. Nebolo úplne dokázané, že pri tejto zámene vznikajú rovnaké prvky a že nedochádza k nesprávnej interpretácii.

3′-UTR (nepreložená oblasť 3 prvá): Jeho funkcia je však stále neznáma, preto nie je možné overiť jeho bezpečnosť. To, čo je známe, uvádza WHO a je to táto veta: 3′ UTR pre vakcínu BioNTech/Pfizer bol prevzatý z "amino-terminálneho zosilňovača delenia (AES) mRNA a mitochondriálne kódovanej 12S ribozomálnej RNA".

poly(A): Potom sa dostaneme na koniec sekvencie a narazíme na 30 A, potom na 10-nukleotidovú väzbu GCAUAUGACU, po ktorej nasleduje ďalších 70 A, pretože každú mRNA môže organizmus použiť viackrát.
Keď sa A spotrebuje, mRNA sa rozloží.

Všetko sú to patentované modifikácie na zvýšenie expresie proteínov, o ktorých sa nevie nič o skutočnej translácii vykonávanej organizmom.

Anomálie a iné chyby v alternatívnom spájaní

Ďalším súvisiacim problémom je, že tá istá pre-mRNA môže viesť k rôznym zrelým mRNA, a teda k mierne odlišným proteínom (alternatívne anomálie pri spájaní). Zistilo sa, že zmena v procese syntézy bielkovín je príčinou vzniku a rastu niektorých druhov rakoviny a iných ochorení bez toho, aby sa akokoľvek menila DNA.
Všetky prípady spájania identifikované v troch génoch série PHT zahŕňajú stratu čítacieho rámca posolovej sekvencie a zavedenie predčasného terminačného kodónu (PTC), ktorý sa vždy nachádza viac ako 50-55 nukleotidov pred posledným exón-exónovým spojením alternatívnych transkriptov systému sledovania rozpadu mRNA sprostredkovaného nezmyslom (NMD). V prípade ľudského a potkaních slc15a4/PHT1 sa to preukázalo experimentmi s inhibíciou NMD v rôznych bunkových líniách, v ktorých sa po inhibícii vždy stabilizovala expresia alternatívnych variantov kanonických transkriptov(4).

Závery

Možné dlhodobé riziká pre ľudské zdravie

Môžeme povedať, že okrem toho, že sekvencia nie je optimalizovaná, vzbudzuje silné pochybnosti o prítomnosti chýb v použití kodónov. Je možné vysloviť hypotézu, že zdrojom chyby pri zostavovaní sekvencie génu mRNA môže byť nadmerná modifikácia zameraná na extrémne zvýšenie expresie proteínu.

Zmena dostupnosti tRNA môže viesť k neurodegeneratívnym ochoreniam (Ishimura et al., 2014) a regulácia špecifických tRNA podporuje metastázovanie zvýšením stability transkriptov, ktoré sú obohatené o ich kognátne kodóny(5).

Chyby v translácii majú veľmi závažné dôsledky pre patofyziológiu rôznych ochorení vrátane sklerózy multiplex, neurodegenerácie, mitochondriálnej myopatie, encefalopatie, laktátovej acidózy, príhod podobných mŕtvici, Parkinsonovej choroby a rakoviny (genéza, urýchlenie rastu a metastázovanie)(6).

Súvislosť medzi zvýšenou rýchlosťou syntézy bielkovín 100 % s translačnými chybami sekvencie, ako aj mechanizmus, ktorý ovplyvňuje produkciu aminokyselín, zatiaľ zostávajú v neistote, pretože ešte nebolo vykonaných mnoho experimentov.

V podstate sa dá povedať, že kód celkovej sekvencie je vnútorne nevyvážený, príliš v porovnaní s prirodzeným vírusovým náprotivkom, a príliš na to, aby sa dalo povedať, že ľudský organizmus reprodukuje presne proteíny S-špičiek ako presnú kópiu, čo okrem nedostatočnej imunizácie predstavuje riziko vážneho dlhodobého poškodenia ľudského zdravia.

To, čo sa z tejto sekvencie vytvorí, nie je ani zďaleka presne definované, ale v génoch každého jedinca je prostredníctvom ribozomálneho profilu zapísané, ako sa prekladá a čo sa vytvára, teda aký úžitok alebo škoda sa spôsobuje.

Odkazy

1. Ou X, Cao J, Cheng A, Peppelenbosch MP, Pan Q (2019) Chyby v translačnom dekódovaní: tRNA wobbling alebo misincorporation? PLoS Genet 15(3): e1008017. https://doi.org/10.1371/journal.pgen.1008017
2 Biomolekuly 2020, 10(5),729; https://doi.org/10.3390/biom10050729
3 Robinson R (2014) Ktoré synonymum kodónu je najlepšie? Môže to závisieť od toho, čo je v ponuke. PLoS Biol 12(12): e1002014. doi:10.1371/journal.pbio.1002014
4. Andries, O. (2015). mRNA modifikácia a stratégie doručenia na vytvorenie platformy pre bezpečnú a účinnú génovú terapiu. Univerzita v Gente. Fakulta veterinárnej medicíny, Merelbeke, Belgicko.
5. eLife 2019;8:e45396 DOI: 10.7554/eLife.45396
6. Mafalda Santos, Patricia M. Pereira, A. Sofia Varanda, Joana Carvalho, Mafalda Azevedo, Denisa D. Mateus, Nuno Mendes, Patricia Oliveira, Fábio Trindade, Marta Teixeira Pinto, Renata Bordeira-Carriço, Fátima Carneiro, Carl Rui Vitira .ino, Olive & Manuel AS Santos (2018) Codon misreading tRNAs promote tumour growth in mice, RNA Biology, 15:6, 773-786, DOI: 10.1080/15476286.2018.1454244

Štúdie potvrdzujú preprogramovanie imunitného systému pomocou mRNA a vektorových vakcín

Stephanie Seneffová z Massachusettského technologického inštitútu a Greg Nigh z Naturopathic Oncology v Portlande, tím výskumníkov z Helmholtzovho centra pre výskum infekcií, Lekárskej fakulty v Hannoveri, Univerzity v Bonne a lekári a výskumníci z Erasmus Medical Center v Rotterdame dospeli k rovnakým záverom

Tenor štúdií je zníženie ľudského imunitného systému vyvolané látkami mRNA so zreteľom na tzv. receptory podobné nástrojom. Tie sú zodpovedné za rozpoznávanie štruktúr bakteriálnych a vírusových patogénov.
Štúdia Stephanie Seneff e.a. a Výskumné tímy v Helmholtzovom inštitúte sú k dispozícii na stiahnutie tu.

Taktiež PEI (Paul-Ehrlich-Institut) už upozorňuje na protilátky, ktoré zvyšujú vírusovú záťaž od 30.07.2020(!) (webová stránka ako PDF na stiahnutie):

"Protilátky posilňujúce infekciu nespúšťajú elimináciu alebo neutralizáciu vírusu, ale umožňujú vírusu naviazať sa na takzvané receptory Fcγ, ktoré sa okrem iného nachádzajú na špecializovaných imunitných bunkách (takzvaných fagocytoch). To následne umožňuje, aby bol vírus týmito bunkami prijatý, kde sa potom vírusy môžu množiť. Tento proces môže viesť k zvýšeniu vírusovej záťaže."

Ďalšou komplikáciou je zvýšené riziko trombózy spôsobené látkami mRNA a vektormi. Pravdepodobnosť zvýšeného rizika trombózy možno odhadnúť a zistiť mikroskopicky pomocou D-dimérového testu.
Referenčná hodnota pre dospelých je 4,0 mg/l ako silne zvýšené.

Štúdia MIT

- Abstrakt (DE-preklad)

"Operácia Warp Speed" uviedla na trh v Spojených štátoch dve mRNA vakcíny od spoločností Pfizer a Moderna. Predbežné údaje naznačovali, že tieto dve vakcíny sú vysoko účinné, čo pomohlo legitimizovať povolenie na mimoriadne použitie (EUA) zo strany FDA.
EUA (Emergency Use Authorisation) od FDA. Mimoriadne rýchly vývoj týchto vakcín prostredníctvom kontrolovaných skúšok a ich masové nasadenie však vyvoláva početné obavy o bezpečnosť. V tomto prehľade najprv podrobne opisujeme technológiu, ktorá je základom týchto vakcín. Potom sa zaoberáme zložkami týchto vakcín a zamýšľanou biologickou odpoveďou na tieto vakcíny vrátane výroby samotného proteínu hrotu a ich potenciálnym vzťahom k širokému spektru akútnych a dlhodobých patologických stavov, ako sú poruchy krvi, neurodegeneratívne ochorenia a autoimunitné ochorenia. V súvislosti s týmito potenciálne vyvolanými patológiami diskutujeme o význame aminokyselinových sekvencií v rámci proteínu spike, ktoré sú príbuzné s priónovým proteínom. Uvádzame aj stručný prehľad
Štúdie, ktoré preukázali možnosť "vylučovania" proteínu hrotu, teda prenosu proteínu z očkovaného na neočkovaného
neočkovanej osoby, ktorá u nej spôsobuje príznaky. Nakoniec sa venujeme často diskutovanej otázke, a to či tieto vakcíny môžu alebo nemôžu zmeniť DNA očkovaných osôb. Hoci neexistujú štúdie, ktoré by to definitívne dokazovali, predkladáme pravdepodobný scenár podporený už zavedenými cestami transformácie a prenosu genetického materiálu, podľa ktorého by sa vstreknutá mRNA mohla nakoniec začleniť do DNA zárodočných buniek a prenášať sa naprieč generáciami. Na záver uvádzame naše odporúčania na monitorovanie s cieľom objasniť dlhodobý vplyv týchto experimentálnych liekov a lepšie posúdiť skutočný pomer rizika a prínosu týchto nových technológií.„

...

- Záver (preklad do nemčiny)

„Experimentálne mRNA vakcíny majú údajne veľké výhody, ale nesú so sebou aj riziko tragických a dokonca katastrofických nepredvídaných následkov. Vakcíny mRNA proti SARS-CoV-2 boli zavedené s veľkými fanfárami, ale existuje mnoho aspektov ich rozšíreného používania, ktoré vyvolávajú obavy. Niektorými z týchto obáv, ale nie všetkými, sme sa zaoberali tu a chceli by sme zdôrazniť, že tieto obavy sú potenciálne vážne a môžu sa prejaviť až po rokoch alebo dokonca po generáciách. Aby sa predišlo nepriaznivým rizikám opísaným v tomto dokumente, odporúčame, aby sa zvážili aspoň nasledujúce výsledky výskumu a odporúčania týkajúce sa monitorovania:

• Národný prieskum podrobných údajov o nežiaducich udalostiach spojených s mRNA vakcínami, s rozsiahlou finančnou podporou a ďaleko za prvými týždňami po očkovaní.
• Opakované testy autoprotilátok v očkovanej populácii. Testované autoprotilátky
  by mohli byť štandardizované a mali by byť založené na predtým zdokumentovaných protilátkach a autoprotilátkach, ktoré môžu byť vyvolané hrotovým proteínom. Patria sem autoprotilátky proti fosfolipidom, kolagénu, aktínu, tyreoperoxidáze (TPO), základnému myelínovému proteínu, tkanivovej transglutamináze, transglutamináze a prípadne ďalším.
• Imunologické profilovanie týkajúce sa rovnováhy cytokínov a súvisiacich biologických účinkov. Testy by mali zahŕňať aspoň IL-6, INF-α, D-diméry, fibrinogén a C-reaktívny proteín.
• Štúdie porovnávajúce populáciu očkovanú mRNA vakcínami a populáciu, ktorá nebola očkovaná, aby sa potvrdila očakávaná nižšia miera infekcie a miernejšie príznaky v skupine očkovaných, pričom sa porovnávala miera zaznamenaných autoimunitných ochorení.
• Štúdie na posúdenie toho, či je možné, aby neočkovaná osoba získala vakcínovo špecifické formy hrotových proteínov od očkovanej osoby v tesnej blízkosti.
• Štúdie in vitro na objasnenie, či nanočastice mRNA môžu byť prijaté spermiami a premenené na plazmidy cDNA.„
  
  

Štúdia Helmholtzovho inštitútu

- Zhrnutie (DE preklad)

„Vakcína BNT162b2 na báze mRNA spoločnosti Pfizer/BioNTech bola prvou registrovanou vakcínou proti COVID-19 a preukázala sa jej účinnosť pri prevencii infekcií SARS-CoV-2 až do 95 %.
O širokých účinkoch novej triedy mRNA vakcín sa vie málo, najmä o tom, či majú kombinované účinky na vrodenú a adaptívnu imunitnú odpoveď. Tu sme potvrdili, že očkovanie zdravých jedincov vakcínou BNT162b2 vyvoláva účinnú humorálnu a bunkovú imunitu proti viacerým variantom SARS-CoV-2. Zaujímavé však je, že vakcína BNT162b2 modulovala aj produkciu zápalových cytokínov bunkami vrodenej imunity po produkcii zápalových cytokínov bunkami vrodenej imunity, a to pri stimulácii špecifickými (SARS-CoV-2) aj nešpecifickými (vírusovými, mykotickými a bakteriálnymi) stimulmi.
Odpoveď buniek vrodenej imunity na ligandy TLR4 a TLR7/8 bola po vakcinácii BNT162b2 nižšia, zatiaľ čo cytokínové odpovede vyvolané hubami boli silnejšie. Záverom možno konštatovať, že mRNA vakcína BNT162b2 vedie ku komplexnému funkčnému preprogramovaniu vrodených imunitných odpovedí, čo by sa malo zohľadniť pri vývoji a používaní tejto novej triedy vakcín.

...

Celkovo naše údaje ukazujú, že vakcína BNT162b2 má účinky na adaptívnu aj vrodenú imunitu a že tieto účinky sú rozdielne pre rôzne kmene SARS-CoV-2.
Je zaujímavé, že vakcína BNT162b2 spôsobuje aj preprogramovanie vrodenej imunitnej odpovede. To by sa malo vziať do úvahy: V kombinácii so silnou adaptívnou imunitnou odpoveďou by to mohlo prispieť k vyváženejšej zápalovej odpovedi počas infekcie vírusom COVID-19, alebo by to mohlo prispieť k zníženej vrodenej imunitnej odpovedi na vírus. Vakcína BNT162b2 jednoznačne chráni pred vírusom COVID-19, ale trvanie tejto ochrany zatiaľ nie je známe a je možné predpokladať, že tieto poznatky by sa mohli zapracovať do budúcich generácií vakcíny s cieľom zlepšiť rozsah a trvanie ochrany. Naše zistenia je potrebné potvrdiť vykonaním väčších kohortových štúdií s populáciami z rôznych prostredí, zatiaľ čo ďalšie štúdie skúmajú potenciálne interakcie medzi BNT162b2 a inými vakcínami.„

Písmená s červenou rukou

Červené listy vydávajú farmaceutické spoločnosti okrem iného vtedy, ak sa objavili predtým neznáme riziká spojené s liekmi alebo ak sa z bezpečnostných dôvodov sťahujú šarže liekov.

To platí aj pre všetky lieky (vakcíny) COVID-19:

BionTech/Pfizer

• 19.07.2021 - https://csiag.de/wp-content/uploads/2021/09/Rote-Hand-Moderna-BioNTech-19.07.2021.pdf

Janssen

• 26.04.2021 - https://csiag.de/wp-content/uploads/2021/09/Rote-Hand-Janssen-26.042021.pdf
• 19.07.2021 - https://csiag.de/wp-content/uploads/2021/09/Rote-Hand-Janssen-19.07.2021.pdf

Spoločnosť Astra Zeneca

• 24.03.2021 - https://csiag.de/wp-content/uploads/2021/09/Rote-Hand-AstraZeneca-24.03.2021.pdf
• 02.06.2021 - https://csiag.de/wp-content/uploads/2021/09/Rote-Hand-AstraZeneca-02.06.2021.pdf
• 23.06.2021 - https://csiag.de/wp-content/uploads/2021/09/Rote-Hand-AstraZeneca-23.06.2021.pdf

Informácie o lieku / príbalový leták pre vakcíny COVID

Každá dávka vakcín sa dodáva s príbalovým letákom a lekárskou informáciou. Tie by mali tvoriť základ informácií pred vykonaním očkovania.

Lekárske informácie výrobcu sú tu uvedené vo forme odkazu na EMA a ako odkaz na stiahnutie vo formáte PDF. Príbalové letáky v súčasnosti nie sú alebo už nie sú dostupné online.

• Komerčné informácie - BioNTech
  • Príbalový leták (PDF)
  • Lekárske informácie (príloha I - EMA) - Informácie pre používateľov - (PDF)
    
• Johnson & Johnson / Janssen
  • Príbalový leták (PDF)
  • Lekárske informácie (príloha I - EMA) - (PDF)
    
• Spikevax - Moderna
  • Príbalový leták (PDF)
  • Lekárske informácie (príloha I - EMA) - (PDF)
    
• Vaxzevria - AstraZeneca
  • Príbalový leták (PDF)
  • Lekárske informácie (príloha I - EMA) - Lekárske informácie (výrobca) - (PDF)
    

V informáciách poskytnutých uvedenými výrobcami je účel vakcíny definovaný prevažne ako "prevencia ochorenia COVID". Úplná ochrana pred budúcou infekciou COVID nie je zaručená.

Spoločnosť AstraZeneca sa tiež odvoláva na tému "Náboženské presvedčenie":

"Každý by sa mal sám rozhodnúť, či je jeho liečba v súlade s jeho náboženským presvedčením."

Výsledky pitvy osoby, ktorá zomrela krátko po očkovaní BioNTech

Pod názvom Prvý prípad postmortálnej štúdie u pacienta očkovaného proti SARS-CoV-2 výsledok pitvy vykonanej v spolupráci s Ústavom patológie Univerzitnej nemocnice OWL Univerzity v Bielefelde, Campus Lippe, Röntgenstr. 18, D-32756 Detmold a Ústavom patológie Nemocnice KRH Nordstadt, Hannover, Nemecko, bol uverejnený 16. apríla 2021. tu je k dispozícii vo formáte PDF v origináli.

Úplný text v nemeckom preklade:

Zhrnutie

Predtým asymptomatický 86-ročný muž dostal prvú dávku vakcíny COVID-19 s mRNA BNT162b2. O 4 týždne neskôr zomrel na akútne zlyhanie obličiek a dýchania. Hoci nemal žiadne príznaky špecifické pre COVID-19, pred smrťou bol pozitívne testovaný na SARS-CoV-2. Väzba antigénu na proteín hrotu (S1) vykazovala významné koncentrácie pre imunoglobulín (Ig) G, zatiaľ čo nukleokapsidový IgG/IgM sa nevyvolal. Pri pitve bola ako príčina smrti priradená akútna bronchopneumónia a tubulárne zlyhanie; charakteristické morfologické znaky COVID-19 sme však nezaznamenali. Posmrtné molekulárne mapovanie pomocou polymerázovej reťazovej reakcie v reálnom čase odhalilo príslušné prahové hodnoty cyklu SARS-CoV-2 vo všetkých analyzovaných orgánoch (orofarynx, čuchová sliznica, priedušnica, pľúca, srdce, obličky a mozog) okrem pečene a čuchového bulbu. Tieto výsledky by mohli naznačovať, že prvé očkovanie vyvoláva imunogénnosť, ale nie sterilnú imunitu.

Uvádzame prípad 86-ročného muža z domova dôchodcov, ktorý bol očkovaný proti SARS-CoV-2. Predchádzajúca anamnéza zahŕňala systémovú arteriálnu hypertenziu, chronickú žilovú insuficienciu, demenciu a rakovinu prostaty. Dňa 9. januára 2021 dostal muž vakcínu BNT162b2 vo forme lipidových nanočastíc s nukleozidom modifikovanou RNA v dávke 30 μg. V tento deň a počas nasledujúcich 2 týždňov nevykazoval žiadne klinické príznaky (tabuľka 1). V 18. deň bol prijatý do nemocnice kvôli zhoršujúcej sa hnačke. Keďže nevykazoval žiadne klinické príznaky COVID-19, nebol izolovaný v špecifickom prostredí. Laboratórne testy odhalili hypochrómnu anémiu a zvýšenú hladinu kreatinínu v sére. Antigénový test a polymerázová reťazová reakcia (PCR) na SARS-CoV-2 boli negatívne.

Na ďalšie vyšetrenie príčiny hnačky bola vykonaná gastroskopia a kolonoskopia. Kolonoskopia odhalila najmä ulceróznu léziu ľavej flexúry hrubého čreva, ktorá bola histologicky diagnostikovaná ako ischemická kolitída. Analýza PCR na vzorkách biopsie podľa skôr uvedenej metódy (Kaltschmidt et al., 2021) bola negatívna na SARS-CoV-2. Liečba bola podporná s mesalazínom a intravenóznou suplementáciou železa. Následne sa stav pacienta zhoršil s rozvojom renálnej insuficiencie. Na 24. deň bol pacient v rovnakej nemocničnej izbe ako náš prípad pozitívne testovaný na SARS-CoV-2. Na 25. deň bol náš pacient pozitívne testovaný na SARS-CoV-2 pomocou PCR v reálnom čase (RT-PCR), pričom nízka prahová hodnota cyklu (Ct) naznačovala vysokú vírusovú záťaž. Pri ďalšej analýze vzorky výteru sa nepreukázali mutantné varianty SARS-CoV-2 B.1.1.7, B.1.351 ani B.1.1.28.1. Celkovo sa zdá, že pacient sa nakazil od pacienta v nemocničnej izbe. Náš pacient teraz vykazoval horúčku a respiračnú tieseň a auskultácia pľúc ukázala praskanie. Napriek nasadeniu prídavného kyslíka (2 litre za minútu) a antibiotickej liečbe ceftriaxónom pacient nasledujúci deň zomrel na akútne zlyhanie obličiek a dýchania.

Hodnotenie imunogénnosti meraním globulínu G viažuceho antigén (Ig) špicatého proteínu (S1) vo vzorkách séra získaných 25. deň ukázalo protilátkovú odpoveď (8,7 U/ml, referenčná hodnota 1,0 U/ml; Roche ECLIA™). Tieto výsledky naznačujú, že u pacienta sa v dôsledku očkovania už vyvinula relevantná imunogenita.

Postmortálne vyšetrenia ukázali akútnu bilaterálnu bronchopneumóniu s abscesmi niekedy obklopenými bakteriálnymi kockami (obrázok 1). Neboli zistené žiadne bežne opisované prejavy pneumonitídy spojenej s COVID-19. V srdci sme zistili biventrikulárnu hypertrofiu (hmotnosť 580 g) a histologicky sme diagnostikovali ischemickú kardiomyopatiu. V srdci a v menšej miere v pľúcach sme zistili amyloidózu transtyretinového typu. Obličky vykazovali chronické poškodenie s arteriolosklerózou a intersticiálnou fibrózou, ako aj akútne zlyhanie obličiek s hydropickou tubulárnou degeneráciou. Pri vyšetrení mozgu sa zistila pseudocystická nekróza tkaniva ľavého temena, ktorá bola diagnostikovaná ako stará infarktová oblasť.

Uvedený obrázok znamená tu je k dispozícii na stiahnutie vo formáte PDF s vysokým rozlíšením.

Vykonali sme molekulárne mapovanie 9 rôznych anatomických častí formalínom fixovaného parafínového tkaniva podľa predchádzajúceho opisu (Kaltschmidt et al., 2021). RNA bola extrahovaná z parafínových rezov pomocou Maxwell RSC (Promega, Madison, WI, USA). Multiplexná analýza RT-PCR bola zameraná na 2 nezávislé gény genómu SARS-CoV-2 (súprava Fluorotype SARS-CoV-2 plus; HAIN/Bruker, Nehren, Nemecko): RNA-dependentná RNA polymeráza (cieľ 1) a nukleopeptid (cieľ 2). Negatívna hraničná hodnota bola Ct >45. Analyzovali sme 9 rôznych vzoriek tkanív na známe a relevantné cesty šírenia vírusu v ľudskom tele (obrázok 1). Aby sa zabránilo krížovej kontaminácii, každá vzorka bola priamo vložená do samostatných tkanivových kaziet a fixovaná samostatne vo formalíne 4% s fosfátovým tlmivým roztokom. Vírusovú RNA sme zistili takmer vo všetkých analyzovaných orgánoch okrem pečene a čuchového bulbu (obrázok 1).

Podrobná pitevná štúdia vrátane molekulárneho mapovania vírusu u pacienta očkovaného proti SARS-CoV-2 s pozitívnym testom na SARS-CoV-2 po očkovaní nebola podľa vedomostí autorov doteraz zaznamenaná. Predpokladáme, že jednorazové ošetrenie vakcínou BNT162b2b2 RNA vyvolalo významnú imunogénnosť, čo sa prejavilo v hlásených neutralizačných hladinách IgG v sére na báze špicatého proteínu. Od týždňov pred očkovaním cez očkovanie (1. deň) až po krátko pred smrťou (24. deň) bol pacient bez klinických príznakov typických pre COVID-19. Okrem toho krvné testy nepreukázali žiadny titer IgM, ktorý sa vo všeobecnosti pozoruje 7 - 14 dní po nástupe príznakov (Kim et al., 2020). Pacient však bol pozitívne testovaný na SARS-CoV-2. Hodnota ct nameraná vo výteroch z nosohltanu aj hodnoty namerané vo vzorkách z pitvy fixovaných formalínom a zaliatych parafínom poukazujú na vírusovú záťaž a naznačujú prenosnosť. Keďže náš pacient zomrel približne 2 dni po prvom pozitívnom výsledku testu SARS-CoV-2, predpokladáme, že údaje z molekulárneho mapovania odrážajú skoré štádium vírusovej infekcie. Včasné štádium infekcie by tiež mohlo vysvetliť, prečo rôzne oblasti, ako napríklad čuchový bulbus a pečeň, neboli (zatiaľ) postihnuté systémovým šírením vírusu.

Charakteristické morfologické znaky COVID-19 uvádzané v rozsiahlych morfologických pitevných štúdiách (Schaller et al., 2020, Edler et al., 2020, Ackermann et al., 2020) sme zatiaľ nepozorovali. V pľúcach sme nenašli typické znaky difúzneho alveolárneho poškodenia, ale identifikovali sme rozsiahlu akútnu bronchopneumóniu, pravdepodobne bakteriálneho pôvodu. Dospeli sme k záveru, že pacient zomrel na bronchopneumóniu a akútne zlyhanie obličiek.

Naše výsledky sú v súlade s predchádzajúcimi zisteniami zo zvieracích modelov, podľa ktorých sa zdá, že imunizácia proti SARS-CoV-2 očkovaním znižuje závažnosť patogenézy, najmä pokiaľ ide o závažné pľúcne ochorenie, zatiaľ čo vírusová RNA pretrváva v nosových výteroch (Van Doremalen a kol., 2020, Vogel a kol., 2021). Nedávno Amit et al. publikovali (2021) výsledky klinickej štúdie u zdravotníckych pracovníkov s použitím vakcíny BNT162b2, ktorá preukázala významné skoré zníženie výskytu infekcie SARS-CoV-2 a symptomatickej COVID-19 po podaní prvej dávky vakcíny.

Medzi hlavnými vedľajšími účinkami u pacientov očkovaných proti SARS-CoV-2 prevládajú lokálne účinky a zriedkavo sa opisujú závažné systémové reakcie (Yuan a kol., 2020). Nedávne správy o zvýšenom riziku vzniku krvných zrazenín, najmä trombózy mozgových žíl v prípade vakcíny Oxford-AstraZeneca (Mahase 2021), však vyvolali diskusiu o bezpečnosti vakcíny COVID-19 vo všeobecnosti. Je potrebné vykonať komplexnú analýzu pitevných údajov, aby sa získali podrobnejšie informácie o fatálnych vedľajších účinkoch a úmrtiach súvisiacich s očkovaním.

Súhrnne možno povedať, že výsledky našej štúdie prípadu pitvy u pacienta s mRNA vakcínou potvrdzujú názor, že imunogenitu možno navodiť už pri prvom očkovaní proti SARS-CoV-2, zatiaľ čo sterilná imunita nie je dostatočne vyvinutá.

Poďakovanie

Radi by sme poďakovali Ralfovi Bodeovi a Nadine Weberovej (Univerzitná nemocnica OWL Univerzity Bielefeld, Campus Lippe, Detmold) za ich odbornú technickú podporu.

Odkazy

1. Ackermann M., Verleden S.E., Kuehnel M., Haverich A., Welte T., Laenger F. Pulmonary vascular endothelialitis, thrombosis, and angiogenesis in Covid-19. N Engl J Med. 2020;383:120-128. doi: 10.1056/NEJMoa2015432. [Článok bez PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
2. Amit S., Regev-Yochay G., Afek A., Kreiss Y., Leshem E. Skoré zníženie miery výskytu infekcie SARS-CoV2 a COVID-19 u príjemcov vakcíny BNT162b2. Lancet. 2021;397(10277):875-877. doi: 10.1016/S0140-6736(21)00448-7. [Článok bez PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
3. Edler C., Schröder A.S., Aepfelbacher M., Fitzek A., Heinemann A., Heinrich F. Úmrtie na infekciu SARS-CoV2 - pitevná štúdia prvých po sebe nasledujúcich 80 prípadov v Hamburgu, Nemecko. Int J Legal Med. 2020;134:1275-1284. doi: 10.1007/s00414-020-02336-7. [Článok bez PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
4. Kaltschmidt B., Fitzek A.D.E., Schaedler J., Förster C., Kaltschmidt C., Hansen T. Hepatálna vaskulopatia a regernatívne reakcie pečene v smrteľných prípadoch COVID-19. Clin Gastroenterol Hepatol. 2021 doi: 10.1016/j.cgh.2021.01.044. [Článok bez PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
5. Kim D.S., Rowland-Jones S., Gea-Mallorqui E. Vyvolá infikovanie SARS-CoV-2 dlhotrvajúcu ochrannú alebo sterilizačnú imunitu? Dôsledky pre vakcinačné stratégie. Front Immunol. 2020;11:571481. doi: 10.3389/fimmu.2020.571481.eCollection2020. [Článok bez PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
6. Mahase E. Covid-19: Vakcína spoločnosti AstraZeneca nie je spojená so zvýšeným rizikom vzniku krvných zrazenín, zistila Európska agentúra pre lieky. BMJ. 2021;372:n774. doi: 10.1136/bmj.n774. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
7. Schaller T., Hirschbühl K., Burkhardt K., Braun G., Trepel M., Märkl B. Posmrtné vyšetrenia pacientov s COVID19. JAMA. 2020;323:2518-2520. doi: 10.1001/jama.2020.8907.Článok bez PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
8. Van Doremalen N., Lambe T., Spencer A., Belij-Rammersdorfer S., Purushotham J.N., Port J.R. Vakcína ChAdOx1 nCoV-19 zabraňuje pneumónii SARS-CoV-2 u makakov rhesus. Príroda. 2020;586:578-582. doi: 10.1101/2020.05.13.093195. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
9. Vogel A.B., Kanevsky I., Che Y., Swanson K.A., Muik A., Vormehr M. Imunogénne vakcíny BNT162b chránia makaky rhesus pred SARS-CoV-2. Príroda. 2021;592(7853):283-289. doi: 10.1101/2020.12.11.421008. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
10. Yuan P., Ai P., Liu Y., Ai Z., Wang Y., Cao W. Bezpečnosť, znášanlivosť a imunogenicita vakcín COVID19: systematický prehľad a metaanalýza. medRxiv. 2020 doi: 10.1101/2020.11.03.20224998. Preprint. [CrossRef] [Google Scholar]
    
    
    

Výsledky výskumu extraktu z púpavy - inhibuje väzbu proteínov hrotu

Úryvok textu / preklad článku "VÝSKUM: Extrakt z listov púpavy blokuje väzbu proteínov hrotov na povrchový receptor ACE2„:

Špicaté proteíny vírusu SARS-CoV-2 môžu byť zneškodnené bežnou "burinou", ktorá je každoročne zakázaná na trávnikoch. Nemecký Univerzitná štúdia ukázali, že púpava lekárska (Taraxacum officinale) môže blokovať väzbu proteínov hrotu na povrchové receptory ACE2 v ľudských pľúcnych a obličkových bunkách. Vodný extrakt z púpavy, ktorý sa získava zo sušených listov rastliny, bol účinný proti proteínu bodliaka D614 a rôznym mutantným kmeňom vrátane D614G, N501Y, K417N a E484K.

Tu je nemecký preklad pôvodnej štúdie (PDF - Angličtina) :

Zhrnutie:

Svetová zdravotnícka organizácia (WHO) vyhlásila 11. marca 2020 koronavírusové ochorenie 2019 (COVID-19) spôsobené vírusom SARS-CoV-2 za globálnu pandémiu. K dnešnému dňu sa rýchlo šíria nové "varianty vyvolávajúce obavy" SARS-CoV-2, britský (B.1.1.7), juhoafrický (B.1.351) alebo brazílsky (P.1) variant. Všetky obsahujú viacero mutácií v mieste rozpoznávania receptora ACE2 proteínu hrotu v porovnaní s pôvodnou sekvenciou Wuhan, ktorá má veľký význam z dôvodu jej potenciálu pre imunitnú obranu. V tejto práci uvádzame účinnosť púpavy lekárskej (Taraxacum officinale) na blokovanie proteín-proteínovej interakcie hrotu S1 s povrchovým receptorom ľudského ACE2. Toto sa podarilo preukázať pre pôvodný bodec D614, ale aj pre jeho mutované formy (D614G, N501Y a zmes K417N, E484K, N501Y) v ľudských obličkových bunkách HEK293-hACE2 a pľúcnych bunkách A549-hACE2-TMPRSS2. Za tento účinok sú zodpovedné vysokomolekulové zlúčeniny vo vodnom extrakte. Extrakt účinne zabránil infekcii pľúcnych buniek pseudotypovými časticami lentivírusu SARS-CoV-2 spike, ako aj vírusom indukovanej prozápalovej sekrécii interleukínu-6. Moderné bylinné monografie považujú používanie tejto liečivej rastliny za bezpečné. Preto by tu uvedené výsledky in vitro mali podnietiť ďalší výskum klinického významu a použiteľnosti extraktu ako stratégie prevencie infekcie SARS-CoV-2.

SARS-CoV-2 počas prenosu medzi ľuďmi neustále mutuje. To by nakoniec mohlo viesť k tomu, že vírus obíde existujúce terapeutické a profylaktické prístupy, ktoré sú zamerané na proteín hrotu. Zistili sme účinnú inhibíciu interakcie proteín-proteín medzi receptorom ACE2 pre vstup ľudského vírusu do bunky a proteínom SARS-CoV-2 vrátane piatich relevantných mutácií pomocou vodných extraktov z púpavy lekárskej (Taraxacum officinale). Toto sa preukázalo in vitro s použitím ľudských obličkových (HEK293) a pľúcnych (A549) buniek nadmerne exprimujúcich proteíny ACE2 a ACE2/TMPRSS2. Extrakt účinne zabránil infekcii pľúcnych buniek pseudotypizovaným lentivírusom SARS-CoV-2. Výsledky si vyžadujú podrobnejšiu analýzu účinnosti púpavy pri prevencii SARS-CoV-2 a potvrdzujúce klinické dôkazy.

K dnešnému dňu existujú tri rýchlo sa šíriace nové varianty SARS-CoV-2, ktoré boli prvýkrát hlásené v Spojenom kráľovstve (variant B.1.1.7), Južnej Afrike (variant B.1.351) a Brazílii (variant P.1), pričom všetky majú spoločnú mutáciu N501Y v proteíne hrotu (5). V súčasnosti celosvetovo prevládajú varianty SARS-CoV-2 s mutáciou D614G v proteíne hrotu. Okrem mutácie D614G obsahuje B.1.351 aj ďalšie mutácie hrotu vrátane troch mutácií (K417N, E484K a N501Y) v RBD (6). Predbežné údaje naznačujú možnú súvislosť medzi pozorovanou zvýšenou úmrtnosťou s mutáciou D614G a predpokladá sa, že konformačná zmena v proteíne hrotu vedie k zvýšenej infekčnosti (7). Výpočty perturbácie voľnej energie pre interakcie mutácií N501Y a K417N s receptorom ACE2 aj s protilátkou získanou od pacientov s COVID-19 vyvolávajú dôležité otázky týkajúce sa potenciálnej ľudskej imunitnej odpovede a úspešnosti už dostupných vakcín (8). Okrem toho bola zaznamenaná zvýšená rezistencia variantov B.1.351 a B.1.1.7 voči neutralizácii protilátkami; v prípade B.1.351 to bolo spôsobené najmä mutáciou E484K v proteíne hrotu (9).

Interferencia s miestom interakcie medzi podjednotkou hrotu S1 a ACE2 môže byť dôležitým cieľom pre terapiu alebo prevenciu (10). Zlúčeniny prírodného pôvodu môžu poskytovať určitú ochranu pred inváziou vírusových buniek a zároveň mať malé alebo žiadne vedľajšie účinky. V tejto práci uvádzame inhibičný potenciál púpavy na väzbu RBD proteínu spike S1 na povrchový receptor buniek hACE2 a porovnávame účinok pôvodného proteínu spike D614 s jeho mutáciami D614G, N501Y a zmesou (K417N, E484K, N501Y) .

Púpava lekárska (Taraxacum officinale) patrí do čeľade rastlín Asteraceae, podčeľade Cichorioideae s mnohými odrodami a menšími druhmi. Je to trváca bylina, ktorá pochádza z teplejších miernych pásiem severnej pologule a obýva polia, okraje ciest a ruderálne miesta. T. officinale sa konzumuje ako rastlinná potravina, ale používa sa aj v európskej fytoterapii pri ochoreniach pečene, žlčníka, tráviaceho traktu alebo reumatických ochoreniach. Moderné bylinné monografie považujú používanie rastliny za bezpečné a empirické použitie T. officinale vyhodnotili s pozitívnym výsledkom. Indikácie na použitie T. officinale sú uvedené v monografiách nemeckej Komisie E, Európskeho vedeckého družstva pre fytoterapiu (ESCOP) (11, 12) a Britskej asociácie pre bylinnú medicínu (13). Rastlina obsahuje široké spektrum fytochemikálií vrátane terpénov (seskviterpénové laktóny, ako je kyselina taraková a triterpény), fenolových zlúčenín (fenolové kyseliny, flavonoidy a kumaríny) a polysacharidov (14). Zistilo sa, že prevládajúcou fenolovou zlúčeninou je kyselina čakanová (kyselina dikafeoylvinná). Ostatné boli mono- a dikafeoylchinínové kyseliny, deriváty kyseliny vínnej, flavóny a flavonolové glykozidy. Okrem týchto tried zlúčenín obsahujú korene aj veľké množstvo inulínu (15). Dávkovacie formy sú vodný odvar a nálev, čerpaná čerstvá rastlinná šťava, hydroalkoholová tinktúra a obalené tablety zo suchých extraktov, ktoré sa používajú ako monopreparáty (16), ale aj ako integrálne zložky liekov. Náš výskum sa uskutočnil s vodnými extraktmi z listov rastlín. Zistili sme, že výťažky z listov účinne blokujú hrotový proteín alebo jeho mutantné formy receptora ACE2 použité buď pred inkubáciou, alebo po nej, a že za tento účinok sú zodpovedné vysokomolekulárne zlúčeniny. Rastlina toho istého kmeňa (Cichorium intybus) by mohla mať podobné účinky, ale s menšou účinnosťou. Infekcii ľudských pľúcnych buniek A549-hACE2-TMPRSS2 pseudotypizovaným lentivírusom SARS-CoV-2 extrakt účinne zabránil.

Výsledky

T. officinale inhibuje väzbu hrotu S1 - ACE2
Najprv sme skúmali inhibíciu interakcie medzi hrotovým proteínom SARS-CoV-2 RBD a ACE2 pomocou extraktov z listov T. officinale. Na obrázku 1A je znázornená inhibícia väzby S1-ACE2 pri ošetrení extraktom z T. officinale v závislosti od koncentrácie (EC50 = 12 mg/ml). Extrakty C. intybus tiež vykazovali inhibíciu väzby v závislosti od koncentrácie, ale s nižšou účinnosťou ako T. officinale (EC50 = 30 mg/ml) ( 1B ). Potom sme pripravili dve frakcie sušených listov T. officinale a čakanky a rozdelili sme extrakty na frakciu s vysokou molekulovou hmotnosťou (>5 kDa) a frakciu s nízkou molekulovou hmotnosťou (<5 kDa). Ako ukazuje obrázok 1C, bioaktívne zlúčeniny boli prítomné najmä v HMW frakcii. Vo frakcii LMW sa pozorovala len nízka aktivita.

.

Vplyv T. officinale a čakanky na inhibíciu Sars-CoV-2 hrotu - ACE 2.
A-B) Účinok extraktu T. officinale (TO) a C. intybus (CI) v závislosti od koncentrácie. C-D) Účinok frakcií extraktu z listov TO a CI. Extrakty boli lyofilizované a následne frakcionované podľa molekulovej hmotnosti. Hraničná hodnota bola stanovená na 5 kDa (HMW > 5 kDa, LMW < 5 kDa). H+L: HMW a LMW frakcie; ako referencia sa použilo 50 mg sušených listov na ml vody. Použili sa množstvá HMW a LMW frakcií zodpovedajúce množstvu sušených listov. Inhibícia väzby sa hodnotila pomocou techniky ELISA. Stĺpce sú priemerné hodnoty + SD. Kontrola rozpúšťadla: destilovaná voda (a.d.).

Pomocou buniek HEK293 s nadmernou expresiou hACE2 sa ďalej skúmal potenciál extraktov T. officinale a C. intybus blokovať väzbu hrotov na bunky. Ako je znázornené na obrázku 2, predinkubácia buniek s T. officinale počas 1 min. účinne blokovala väzbu hrotu na bunky o 76,67 % ± 2,9 a jeho HMW frakcie o 62,5 ± 13,4% v porovnaní s kontrolou vodou. Po 3 h bola inhibícia stále 50 ± 13,6 % pre extrakt a 35,0 ± 20 % pre HMW frakciu T. officinale. Extrakt z čakanky bol v tomto testovacom systéme menej účinný; inhibícia väzby bola pozorovaná pri 37 ± 20 % po 1 min. a 5,6 ± 9,9 %.

Inhibícia väzby proteínu S1 spike na ľudské bunky HEK293-hACE2 predinkubáciou extraktu.
Bunky boli predinkubované na uvedený čas s extraktom 10 mg/ml T. officinale (TO), jeho HMW frakciou rovnajúcou sa 10 mg/ml extraktu (HMW) a 10 mg/ml C. intybus (CI) alebo kontrolným rozpúšťadlom (ad) a potom boli ošetrené HIS-značeným proteínom S1 spike počas 1 hodiny bez premytia pri 4 °C. Inhibícia väzby sa stanovila prietokovou cytometriou. N=3, stĺpce sú stredné hodnoty + SD. Vľavo hore: Cytogram buniek HEK-hACE2 s gated. V strede: Prekrytie reprezentatívnych histogramov intenzity fluorescencie pre povrchovú expresiu ACE2. Vpravo hore: Prekrytie reprezentatívnych histogramov intenzity fluorescencie pre inhibíciu väzby hrotu extraktmi alebo a.d.; pozitívna kontrola: 20 µg/ml rozpustného hACE2. Bunky boli farbené monoklonálnou protilátkou konjugovanou s anti-His-tag Alexa Fluor 647.

Ošetrenie buniek rovnakými množstvami hrotu D614 a jeho variantov D614G a N501Y potvrdilo silnejšiu väzbovú afinitu D614G (približne 1,5-násobnú) a N501Y (približne 3- až 4-násobnú) ako proteínu hrotu D614 k povrchovému receptoru ACE2 buniek HEK293 ( obr. 3A). Rýchla predbežná úprava s T. officinale (do 30 sekúnd) zablokovala väzbu hrotu na povrchový receptor ACE2 (obr. 3B-C). Po 30 s to bolo 58,2 ± 28,7% pre D614, 88,2 ± 4,6% pre D614G a 88 ± 1,3% pre N501Y inhibícia väzby extraktom T. officinale. Hoci sa pri extrakte z C. intybus pozorovala inhibícia väzby na hrot, bola nižšia približne o 30 - 70% v porovnaní s T. officinale v závislosti od testovaného proteínu hrotu. Keď sa väzba analyzovala pri 37 °C namiesto 4 °C, výsledky boli porovnateľné pre T. officinale, ale ešte slabšie pre extrakt z čakanky v tejto bunkovej línii (obrázok 3D). V prípade extraktov z T. officinale a C. intybus bola inhibícia väzby hrotov 47,90 ± 14,72 a 13,12 ± 12,37 (D614), 68,42 ± 14,53 a 8,86 ± 15,29 (D614G), 71,66 ± 7,66 a 37,56 ± 16,14 (N501Y), v uvedenom poradí. Položili sme si tiež otázku, či by extrakty mohli nahradiť väzbu hrotu na povrchový receptor ACE2 ľudských buniek. Na tento účel sme bunky najprv inkubovali s proteínom D614, D614G alebo N501Y a potom s extraktmi. Ako je znázornené v 3D, T. officinale dokázala účinne odstrániť hrot z receptora (v priemere 50%); čakanka bola v tom čase oveľa slabšia (v priemere 25 %). Naše experimenty sme rozšírili na ľudské bunky A549-hACE2-TMPRSS2 a podarilo sa nám potvrdiť výsledky pozorované v bunkách HEK293-hACE2 pre T. officinale (obrázok 3D-G). Táto bunková línia bola stabilne transfekovaná ľudskými génmi ACE2 aj TMPRSS2 a zaujímavé je, že extrakt z C. intybus bol účinnejší v porovnaní s bunkami HEK-hACE2. Po predbežnej úprave extraktom sa inhibícia väzby hrotu na bunky pohybovala v rozmedzí od 73,5% ± 5,2 (D614) do 86,3% ± 3,23 (N501Y) pre extrakt T. officinale a od 56,1% ± 5,28 (D614) do 63,07% ± 14,55 (N501Y) pre extrakt C. intybus. Už pri 0,6 mg/ml T. officinale významne blokoval väzbu na proteín hrotu D614G približne 40% (IC50 = 1,73 mg/ml). Keď boli bunky pred ošetrením extraktom vopred inkubované s proteínom hrotu, výsledky pre D614 a D614G boli porovnateľné pre extrakt T. officinale, ale o niečo nižšie pre N501Y ( 3C - D ). V tomto prostredí sa testovala aj zmes mutantov hrotu N501Y, K417N a E484K a extrakt z T. officinale opäť blokoval väzbu 82,97 % ± 6,31 (extrakt pred inkubáciou) a 79,7 % ± 9,15 (extrakt po inkubácii).

Inhibícia väzby hrotu D614 a jeho mutantov D614G, N501Y alebo zmesi (N501Y, K417N a E484K) na ľudské bunky HEK293-hACE2 a A549-hACE2-TMPRSS2 extraktom pred alebo po inkubácii.
Prekrytie histogramu intenzity fluorescencie pre A) nefarbené HEK bunky, kontrolné farbenie (anti-His-tag A647) a bunky inkubované s His-tagom značeným hrotom D614, D614G alebo N501Y počas 1 hodiny pri 4 °C. B) Bunky vopred inkubované s kontrolou rozpúšťadla (ad), 10 mg/ml T. officinale (TO) alebo 10 mg/ml C. intybus (CI) počas 30 - 60 sekúnd a potom ošetrené proteínom S1 označeným His-tagom . špicom D614, D614G alebo N501Y počas 1 h bez premytia medzi nimi pri 4 °C. D-G) Vplyv inkubácie extraktu na bunky HEK alebo A549 pred inkubáciou alebo po inkubácii s His-tagom značeným hrotom D614, D614G, N501Y alebo zmiešaným proteínom (N501Y, K417N a E484K) pri 37 °C. H) Rastlinné extrakty boli inkubované v slinách 4 ľudských darcov počas 30 min. pri 37 °C. Bunky boli potom predspracované 5 mg/ml extraktov počas 60 sekúnd pri 37 °C pred inkubáciou s proteínom D614 označeným His-tagom počas 0,5 h pri 37 °C. Inhibícia väzby hrotu na ľudské bunky sa hodnotila pomocou prietokovej cytometrickej analýzy buniek zafarbených monoklonálnou protilátkou konjugovanou s anti-His-tag Alexa Fluor 647. Stĺpce predstavujú priemerné hodnoty +SD.

Extrakty inkubované v ľudských slinách počas 30 minút pri 37 °C pred ošetrením buniek mali porovnateľný účinok na inhibíciu hrotu D614G (obr. 3H), čo naznačuje dobrú stabilitu bioaktívnych zlúčenín v slinách.

Aby sme zistili, či extrakt z T. officinale zasahuje do katalytickej aktivity receptora ACE2 alebo ovplyvňuje expresiu proteínu ACE2, pôsobili sme na bunky A549-hACE2-TMPRSS2 extraktom 1-24 h pred lýzou buniek a detekciou. Po 84 h expozície buniek s extraktom sa nepozorovala žiadna strata životaschopnosti buniek ( 4A ). Po 1 alebo 24 h sa nezistilo žiadne zhoršenie enzýmovej aktivity (4B). Špička významne znížila proteín ACE2 po 6 h (4C, čierne stĺpce), čo platilo aj pre extrakt, buď samotný (4C, biele stĺpce), alebo v kombinácii so špicou (čierne stĺpce). Po 24 h sa tento účinok zrušil (4D).

Vplyv extraktu T. officinale na aktivitu enzýmu ACE2 a expresiu proteínov.
A) Životaschopnosť buniek A549-hACE2-TMPRSS2 sa stanovila farbením buniek trypanovou modrou po 84 hodinách pôsobenia extraktu. B) Bunky boli inkubované s extraktom TO alebo 500 ng/ml proteínu S1 a analyzované na enzýmovú aktivitu pomocou fluorescenčnej súpravy. C-D) Bunky boli vystavené 6 hodín alebo 24 hodín pôsobeniu extraktu bez (biele stĺpce) alebo s (čierne stĺpce) 500 ng/ml proteínu S1 a analyzované na expresiu proteínu ACE2 pomocou súpravy ELISA pre ľudský ACE2; a. d.: kontrola rozpúšťadlom. Stĺpce sú priemerné hodnoty + SD, N ≥ 3 nezávislé experimenty.

Pomocou pseudotypu lentivírusu SARS-CoV-2 s hrotom sme potom skúmali, či extrakt môže blokovať vstup vírusu inhibíciou hrotu. Pri predbežnom ošetrení extraktom sa vírusová transdukcia znížila približne o 85% pri 20 mg/ml (obr. 5A). Pri rôznych podmienkach ošetrenia bol luminiscenčný signál generovaný transdukciou vírusu inhibovaný o 70 % ± 16,7 (A), 58 % ± 9,6 (B) a 53 % ± 8,1 (C) pri 10 mg/ml extraktu. Táto inhibícia vírusovej transdukcie extraktom bola sprevádzaná výrazným potlačením zápalovej reakcie vyvolanej vírusom, ako sa určilo na základe zníženej sekrécie prozápalového cytokínu IL-6 v bunkách A549-hACE2-TMPRSS2 (obr. 5D).

Inhibícia vírusovej transdukcie buniek A549-hACE2-TMPRSS2 extraktom z T. officinale.
Bunky boli transdukované 2,5 µl pseudotypového lentivírusu SARS-CoV-2 spike (Luc reporter) počas 24 h A) po predošlom ošetrení extraktom T. officinale (TO) počas 0,5 h, B) 3 h pred pridaním TO alebo C) bez extraktu. Potom sa médium zmenilo na čerstvé a bunky sa inkubovali ďalších 60 h spolu s extraktom. Luminiscencia sa zisťovala po 1 h. (-) Negatívna kontrola: hladký pseudovírusový lentivírus; (+) pozitívna kontrola: lentivírus svetlušky luciferázy. D) Analýza sekrécie prozápalového cytokínu IL-6 sa vykonala buď po 24 h transdukcii vírusu spolu s extraktom (vľavo), po 24 h + 60 h po infekcii s extraktom (uprostred) alebo po 60 h po infekcii s extraktom (vpravo) pomocou multiplexnej prietokovej cytometrickej analýzy. Kontrola rozpúšťadla: destilovaná voda (a.d.). N ≥ 3 nezávislé experimenty.

Diskusia

Vývoj účinných stratégií prevencie a liečby infekcie SARS-CoV-2 je stále v plienkach. Hoci prvé vakcíny už získali povolenie na uvedenie na trh, stále pretrvávajú problémy, pokiaľ ide o obavy týkajúce sa distribúcie alebo trvalej účinnosti a rizika opätovnej infekcie (17, 18). Následné infekcie však môžu byť miernejšie ako prvé. Okrem očkovania proti COVID-19 je alternatívnou stratégiou prevencie COVID-19 blokovanie dostupnosti vírusu k membránovo viazanému ACE2 ako primárnemu receptoru pre vstup do cieľovej bunky SARS-CoV-2. Existujú tu rôzne prístupy (19), ale samozrejme, každá z týchto liečebných stratégií má aj svoje základné a translačné problémy, ktoré je potrebné prekonať, aby priniesla klinický úžitok. Medzi technické prekážky patrí potenciál mimo cieľa, účinky nezávislé od ACE2, stabilita alebo toxicita (19). Zlúčeniny prírodného pôvodu by tu mohli byť dôležitým zdrojom, keďže boli dlhodobo popísané a mnohé z nich sa považujú za bezpečné. Hoci dokovacie experimenty in silico navrhli niekoľko bežných prírodných zlúčenín ako inhibítory ACE2, u väčšiny z nich sa nepreukázalo, že by inhibovali väzbu hrotu na ACE2, čo by sa mohlo vysvetliť nedostatočným úplným pokrytím väzbových zvyškov ACE2 zlúčeninami (20) . V prípade glycyrrhizínu, nobiletínu a neohesperidínu však väzba na ACE2 čiastočne spadá do kontaktnej oblasti RBD, a preto sa predpokladá, že tieto látky dodatočne blokujú väzbu hrotu na ACE2 (20). To isté platí aj pre syntetické inhibítory ACE2, ako je N-(2-aminoetyl)-1 aziridín-etanamín (NAAE) (21). Naopak, lipoglykopeptidové antibiotikum dalbavancín bolo v súčasnosti identifikované ako väzivo ACE2 a zároveň ako inhibítor ACE2 s hrotom SARS-CoV-2 (22); infekcia SARS-CoV-2 bola touto zlúčeninou účinne inhibovaná na myšacom modeli aj na modeli opice rhesus. Ukázalo sa tiež, že hydroalkoholový extrakt zo šupiek granátového jablka blokuje interakciu hrot-ACE2 so 74 %, jeho hlavné zložky punicalagín so 64 % a kyselina ellagová s 36 %. Pri použití pseudotypovej lentivírusovej infekcie buniek ľudskej obličky 2 (HK-2) vírusom SARS-CoV-2 bol potom vstup vírusu účinne blokovaný extraktom zo šupiek (23). V tejto štúdii sme preukázali silnú inhibíciu proteínu ACE2 spike S1 RBD extraktmi z T. officinale pomocou bezbunkového testu a toto zistenie sme potvrdili preukázaním účinnej inhibície väzby ACE2 na povrch buniek v dvoch ľudských bunkových líniách. Pozorovali sme silnejšiu väzbu variantov D614G a N501Y na povrchový receptor ACE2 ľudských buniek, ale všetky testované varianty boli citlivé na inhibíciu väzby pomocou T. officinale, použitého buď pred alebo po. Doteraz viaceré štúdie naznačujú, že línia vírusu D614G je infekčnejšia ako vírus D614 (24). Aj prítomnosť charakteristických mutácií, ako je N501Y napr. tzv. variantu UK B.1.1.7, vedie k vyššej infekčnosti ako rodičovský kmeň, čo by mohlo byť spôsobené vyššou väzbovou afinitou medzi proteínom hrotu a ACE2 (25). Preto naše zistenia o extraktoch T. officinale môžu byť v tomto prípade dôležité, pretože s postupujúcou pandémiou sa objavia nové potenciálne znepokojujúce varianty vírusu, ktoré môžu tiež znížiť účinnosť niektorých vakcín alebo viesť k zvýšenej miere reinfekcie. Ako sa uvádza vyššie, jedným z problémov pri vývoji prípravkov na prevenciu infekcie vírusom SARS-CoV-2 alebo na spomalenie systémového šírenia vírusu je selektivita pre vstup vírusov s nízkou toxicitou pre hostiteľa. Pri súčasných lekárskych indikáciách nebol zaznamenaný žiadny prípad predávkovania T. officinale (11, 13, 16). Odporúčané dávkovanie je 4-10 g (približne 20-30 mg na ml horúcej vody) až 3-krát denne (Komisia E a ESCOP). Podľa Európskej agentúry pre lieky (EMA) medzi kontraindikácie užívania T. officinale patrí precitlivenosť na rastlinu z čeľade Asteraceae alebo jej účinné látky, poruchy pečene a žlčových ciest vrátane obštrukcie žlčových ciest, žlčových kameňov a cholangitídy alebo aktívne gastrointestinálne vredy (16). Rastlina je významným zdrojom draslíka (26, 27), a preto sa uvádzajú varovania kvôli možnému riziku hyperkaliémie. Použitie u detí do 12 rokov, počas tehotenstva a dojčenia nebolo stanovené pre nedostatok alebo nedostatočné údaje.

Zatiaľ čo aktivita enzýmu ACE2 nebola v tejto štúdii ovplyvnená extraktom z T. officinale, proteín ACE2 bol prechodne znížený v pľúcnej bunkovej línii s expresiou ACE2, čo si vyžaduje väčšiu pozornosť v prebiehajúcich štúdiách. ACE2 je dôležitá monokarboxypeptidáza závislá od zinku v renín-angiotenzínovej signálnej dráhe, ktorá je rozhodujúca pre kardiovaskulárne účinky a účinky na imunitný systém. Je známe, že narušenie rovnováhy angiotenzín II/angiotenzín (1-7) prostredníctvom inhibície aktivity enzýmu ACE2 alebo deplécie proteínu a väčšieho množstva cirkulujúceho angiotenzínu II v systéme podporuje poškodenie pľúc spojené s ochorením COVID-19 (28, 29).

Za primárny cieľ sa považujú pľúca, ale expresia mRNA a proteínu ACE2 sa zistila v epiteliálnych bunkách všetkých tkanív ústnej dutiny, najmä v ústnej sliznici, perách a jazyku (30). Tieto údaje sú v súlade s pozorovaním veľmi vysokej vírusovej záťaže v slinách u pacientov infikovaných SARS-CoV-2 (31, 32). Ústna dutina ako podstatná časť horného aerodigestívneho traktu sa preto považuje za miesto, ktoré zohráva kľúčovú úlohu pri prenose a patogenite SARS-CoV-2. Existuje vysoký potenciál, že prevencia vírusovej kolonizácie na sliznici ústnej dutiny a hltana by mohla byť kľúčová na odvrátenie ďalšej infekcie iných orgánov a prepuknutia COVID-19 (33). Komerčné virucidné ústne vody, predovšetkým povidón-jód, boli preto navrhnuté ako potenciálne zníženie vírusovej záťaže SARS-CoV-2 u infikovaných osôb (34-36), ale doteraz nie sú k dispozícii žiadne významné klinické štúdie (36) . Blokovanie väzby vírusu SARS-CoV-2 na bunky ústnej dutiny pomocou výťažkov z T. officinale môže byť pre spotrebiteľa tolerovateľné len počas obmedzeného obdobia (napr. aplikácia prípravku po kontakte s infikovanými osobami alebo počas infekcie). Ďalšie fyziologicky relevantné experimenty in vitro, ktoré sme uskutočnili, ukázali, že na účinné blokovanie väzby hrotov SARS-CoV-2 alebo na odstránenie už naviazaných hrotov z povrchu buniek bol potrebný len krátky čas kontaktu s extraktom T. officinale. Ďalšie dôkazy o relevantnosti poskytli experimenty s pseudotypizovaným vírusom SARS-CoV-2 s hrotmi. Hoci použitie týchto pseudotypizovaných vírusov neumožňuje posúdiť podiel vlastností viriónu, ako sú membránové alebo obalové proteíny, na bunkovom tropizme (37), považujú sa za užitočný nástroj na zdokumentovanie významu ACE2 pre kroky vstupu do bunky sprostredkované proteínom hrotu.

Cieľom všetkých vyvinutých vakcín je vytvoriť protilátky (a T-bunky) proti proteínu hrotu a ako základ tu slúžili sekvencie hrotu z raného kmeňa Wuhan (38). SARS-CoV-2 však počas nepretržitého prenosu medzi ľuďmi neustále mutuje. Antigénny drift vírusu jasne dokazuje nedávny vznik kmeňov B.1.1.7, B.1.351 alebo B.1.1.28 (P.1). Vyvíja sa takým spôsobom, že môže potenciálne obísť naše existujúce terapeutické a profylaktické prístupy zamerané na vrchol vírusu. Preto faktory, ako je nízka toxicita u ľudí a účinná inhibícia väzby piatich relevantných mutácií hrotu na ľudskom receptore ACE2, ako sa tu uvádza in vitro, nabádajú k hlbšej analýze účinnosti T. officinales v prevencii SARS-CoV-2 a teraz si vyžadujú ďalšie potvrdzujúce klinické dôkazy.

Materiály a metodika

Rastlinný materiál

Štúdia sa uskutočnila so sušenými listami T. officinale (vom Achterhof, Uplengen, Nemecko; č. šarže 37259, B370244 a P351756). Testované pozitívne na troch rôznych miestach v regióne Freiburg i. Gebr. (Nemecko), 12. júla 2020 a v teste väzby bezbunkového hrotu S1-ACE2 (údaje nie sú uvedené). C. intybus bol získaný od spoločnosti Naturideen (Nemecko).

Bunkové línie a kultúry

Bunky ľudských embryonálnych obličiek 293 (HEK293) stabilne exprimujúce hACE2 boli veľkoryso poskytnuté Prof. Dr. Stefanom Pöhlmannom (Göttingen, Nemecko). Bunky boli udržiavané v Dulbeccovom modifikovanom médiu Eagle (DMEM) s vysokým obsahom glukózy doplnenom o 10 % fetálneho teľacieho séra (FCS), 100 E/ml penicilínu/streptomycínu a 50 µg/ml zeocínu (Life Technologies, Darmstadt, Nemecko). Ľudské bunky A549-hACE2-TMPRSS2 vytvorené z ľudskej pľúcnej bunkovej línie A549 boli zakúpené od spoločnosti InvivoGen SAS (Toulouse Cedex 4, Francúzsko) a udržiavané v DMEM doplnenom o 10 % tepelne inaktivovaného FCS, 100 U/ml penicilínu/streptomycínu, 100 µg/ml normocínu, 0,5 µg/ml puromycínu a 300 µg/ml hygromycínu. Pri subkultivácii sa všetky bunky najprv opláchli fosfátom pufrovaným fyziologickým roztokom (PBS) a potom sa inkubovali s 0,25% trypsínom-EDTA až do oddelenia. Všetky bunky sa kultivovali pri 37 °C vo zvlhčenom inkubátore s atmosférou 5 % CO2/95 % vzduchu.

Rastlinné výťažky

Sušený rastlinný materiál sa odvážil do jantárovej sklenenej fľaštičky (Carl Roth GmbH, Nemecko) a zmiešaný s vodou HPLC kvality (a.d.) pri izbovej teplote (RT). Extrakty sa potom inkubovali 1 h a odstredili pri 16 000 g (3 min, RT). Supernatant sa pred použitím v experimentoch prefiltroval (0,22 µm).

Analýza inhibície interakcie hrot SARS-COV2 - ACE2 pomocou ELISA a prietokovej cytometrie

Na bezbunkovú detekciu inhibície interakcie SARS-CoV-2 hrot - ACE2 sa použila komerčne dostupná súprava na skríning inhibítorov SARS-CoV-2 (Kat#: 16605302, Fisher Scientific GmbH, Schwerte, Nemecko). Tento kolorimetrický test ELISA meria väzbu medzi imobilizovaným proteínom SARS-CoV-2 spike RBD a biotinylovaným ľudským proteínom ACE2. Kolorimetrická detekcia sa vykonáva pomocou streptavidínu-HRP s následnou inkubáciou TMB. Inhibítor SARS-CoV-2 (hACE2) slúžil ako metodicky overená referencia.

Expresia ACE2 na povrchu buniek sa stanovila pomocou ľudskej protilátky ACE2 konjugovanej s PE (Bio-Techne GmbH, Wiesbaden-Nordenstadt, Nemecko) a prietokovej cytometrickej analýzy. Na analýzu väzby SARS-CoV-2 S1 spike RBD -ACE2 sa 2 x 105 buniek (5 x 106 buniek/ml) predošetrilo rastlinnými extraktmi v rôznych časových bodoch. Potom sa ku každej vzorke pridalo 500 ng/ml SARS-CoV-2 Spike S1 (Trenzyme GmbH, Konstanz, Nemecko), Spike S1 D614G, N50Y alebo zmes K417N, E484K a N501Y (Sino Biological Europe GmbH, Eschborn, Nemecko) -His rekombinantného proteínu a vzorky sa ďalej inkubovali 30 - 60 min. V inom nastavení boli bunky pred inkubáciou s rastlinným extraktom počas 30 - 60 sekúnd pri 4 °C alebo 37 °C vopred ošetrené 500 ng/ml rekombinantného proteínu SARS-CoV-2 Spike-His počas 30 min. Vzorky sa inkubovali v PBS pufri obsahujúcom 5% FCS. Bunky sa potom raz premyli PBS pufrom obsahujúcim 1% FCS pri 500 x g, 5 min pred farbením s His-tag A647 mAb (Bio-Techne GmbH, Wiesbaden-Nordenstadt, Nemecko) počas 30 min pri RT. Bunky sa potom dvakrát premyli, ako je opísané vyššie. Bunky sa analyzovali pomocou prístroja FACSCalibur (BD Biosciences, Heidelberg, Nemecko), zaznamenalo sa 10 000 udalostí. Priemerná intenzita fluorescencie (MFI) každej vzorky sa stanovila pomocou softvéru FlowJo (Ashland, Oregon, USA).

Aktivita ľudského enzýmu ACE2 a kvantifikácia proteínov

Bunky A549-hACE2-TMPRSS2 (2 × 105) boli nasadené do 24-jamkovej platne v médiu DMEM s vysokým obsahom glukózy, ktoré obsahovalo 10 % tepelne aktivovaného FCS pri 37 °C, 5 % CO2. Bunky boli potom ošetrené extraktom T. officinale s/bez 500 ng/ml SARS-CoV-2 S1 spike RBD proteínu počas 1-24 hodín. Bunky sa potom premyli PBS a lyzovali. Na kvantifikáciu proteínu ACE2 sa použilo 25 µg proteínu (ACE2 ELISA Kit), na enzýmovú aktivitu ACE2 5 µg (ACE2 Activity Assay Kit, Abcam, Cambridge, UK) podľa pokynov výrobcu.

Infikovanie buniek A549-hACE2-TMPRSS2 pseudotypizovaným lentivírusom SARS-CoV-2

Pseudotypové lentivírusové častice SARS-CoV-2 spike vyrobené so SARS-CoV-2 spike (Genbank Accession #QHD43416.1) ako obalové glykoproteíny namiesto bežne používaných VSV-G boli získané od spoločnosti BPS Bioscience (Catalogue#: 7994299). Biomol, Hamburg). Tieto pseudovirióny obsahujú aj gén svetlušky luciferázy riadený promótorom CMV. Vstup do buniek sprostredkovaný hrotmi sa teda môže kvantifikovať prostredníctvom aktivity luciferázového reportéra. Ako negatívna kontrola sa použil pseudovirión plešatého lentivírusu (BPS Bioscience #79943), v ktorom sa neexprimuje žiadny obalový glykoproteín. Ako pozitívna kontrola transdukcie sa použil lentivírus s luciferázou svetlušky (puromycín) od spoločnosti BPS Bioscience (katalóg #: 79692-P). Tieto vírusy konštitutívne exprimujú svetlušku luciferázu pod CMV promótorom. Pľúcne bunky boli nasadené v množstve 0,1 × 106 buniek/cm2 do 96-jamkových platničiek v DMEM obsahujúcom 10 % tepelne aktivovaného FCS, 100 E/ml penicilínu/streptomycínu, 100 µg/ml normocínu, 0,5 µg/ml puromycínu a 300 µg/ml hygromycínu na noc. Médium sa nahradilo DMEM + 10 % tepelne aktivovaného FCS a bunky sa inkubovali s a.d. alebo extraktom T. officinale buď 30 min pred alebo 3 h po pridaní 2,5 µl častíc lentivírusu. Po 24 h inkubácie vírusových častíc sa médium odstránilo premytím PBS, pridalo sa čerstvé médium a bunky sa inkubovali ďalších 60 h s pridaním extraktu a.d. alebo T. officinale. Luminiscencia sa zisťovala do 1 h pomocou jednokrokového luciferázového činidla od BPS podľa protokolu výrobcu v multiplatňovej čítačke Tecan (Tecan Group Ltd, Crailsheim, Nemecko).

Kvantifikácia uvoľňovania cytokínov pomocou techniky multiplexných guličiek

Kvantifikácia uvoľňovania cytokínov technikou multiplexných guľôčokPo 24 h transdukcie pseudotypového lentivírusu SARS-CoV-2 spike a 60 h po infekcii buniek A549-hACE2-TMPRSS2 boli supernatanty odobraté a uskladnené pri -80 °C až do analýzy vylučovania cytokínov pomocou súpravy human MACSplex . cytokine 12 (Miltenyi Biotec GmbH, Bergisch Gladbach, Nemecko) podľa protokolu výrobcu.

Frakcionácia molekulovej hmotnosti z rastlinných extraktov

Extrakty zo sušených listov rastlín sa pripravili pridaním dvakrát destilovanej vody (5 ml) k rastlinnému materiálu (po 500 mg). Vzorky sa inkubovali v tme pri izbovej teplote (RT) počas 60 minút, po čom nasledovala centrifugácia pri 16 000 g počas 3 minút. Supernatanty sa zozbierali a prefiltrovali membránou (0,45 µm), čím vznikli extrakty. Alikvóty sa sušili mrazom 48 hodín, aby sa stanovila ich výťažnosť na základe hmotnosti. Extrakty sa potom ďalej rozdelili na frakciu s vysokou molekulovou hmotnosťou (HMW) a frakciu s nízkou molekulovou hmotnosťou (LMW) pomocou centrifugačnej skúmavky s vložkou obsahujúcou filter s oddeľovačom molekulovej hmotnosti (5 kDa, Sartorius Stedim Biotech, Göttingen, Nemecko). . Každá HMW frakcia sa prečistila prepláchnutím 20 ml vody, čím sa získali HMW frakcie a LMW. Frakcie sa vysušili lyofilizáciou, ich výťažok sa stanovil na hmotnosť a až do použitia sa skladovali pri -20 °C.

Stanovenie životaschopnosti buniek pomocou farbenia trypanovou modrou

Stanovenie životaschopnosti buniek pomocou trypanovej modrej Životaschopnosť buniek sa hodnotila pomocou testu vylúčenia farbiva trypanovej modrej, ako už bolo opísané (Odongo et al., 2017). Stručne povedané, bunky A549-hACE2-TMPRSS2 sa kultivovali 24 h a potom boli vystavené pôsobeniu extraktov alebo kontrolného rozpúšťadla počas 84 h (a. d.).

Štatistická analýza

Výsledky boli analyzované pomocou softvéru GraphPad Prism 6.0 (La Jolla, Kalifornia, USA). Údaje boli prezentované ako priemer + SD. Štatistická významnosť sa stanovila pomocou jednocestného testu ANOVA s následnou Bonferroniho korekciou. P-hodnoty < 0,05 () boli štatisticky významné a < 0,01 (*) sa považuje za vysoko štatisticky významný.

Autorské príspevky

Plán a koncepcia štúdie: E.L.; experimentálny dizajn, získavanie údajov, analýza údajov: H.T.T., E.L., N.P.K.L.; príprava frakcií extraktu: C.D., M.G.; napísanie prvej verzie rukopisu: E.L. Všetci autori pripomienkovali predchádzajúce verzie rukopisu.

Poďakovanie

Autori ďakujú Prof. Dr. Stefanovi Pöhlmannovi (Nemecké centrum pre primáty, Göttingen, Nemecko) za poskytnutie buniek ľudských embryonálnych obličiek 293 (HEK293) stabilne exprimujúcich hACE2.

Odkazy

1. 1.↵Lu R a i. (2020) Genomická charakterizácia a epidemiológia nového koronavírusu z roku 2019: dôsledky pre pôvod vírusu a väzbu na receptory. Lancet 395(10224):565-574.CrossRefPubMedGoogle Scholar
2. 2.↵Paules CI, Marston HD a Fauci AS (2020) Coronavírusové infekcie - viac ako len obyčajné prechladnutie. JAMA 323(8):707-708.CrossRefPubMedGoogle Scholar
3. 3.↵Berlin DA, Gulick RM, & Martinez FJ (2020) Severe Covid-19. N Engl J Med 383(25):2451-2460.CrossRefPubMedGoogle Scholar
4. 4.↵Huang Y, Yang C, Xu XF, Xu W a Liu SW (2020) Štrukturálne a funkčné vlastnosti špicatého proteínu SARS-CoV-2: potenciálny vývoj antivírusového lieku COVID-19. Acta Pharmacol Sin 41(9):1141-1149.CrossRefPubMedGoogle Scholar
5. 5.↵Grubaugh ND, Hodcroft EB, Fauver JR, Phelan AL a Cevik M (2021) Opatrenia v oblasti verejného zdravia na kontrolu nových variantov SARS-CoV-2. Cell.Google Scholar
6. 6.↵Zhou D, et al. (2021) Dôkaz úniku variantu SARS-CoV-2 B.1.351 z prirodzených a vakcínou indukovaných sér. Cell.Google Scholar
7. 7.↵Becerra-Flores M & Cardozo T (2020) Mutácia G614 vírusového hrotu SARS-CoV-2 vykazuje vyššiu mieru úmrtnosti. International journal of clinical practice 74(8):e13525.Google Scholar
8. 8.↵Fratev F (2020) Mutácie N501Y a K417N v hrotovom proteíne SARS-CoV-2 menia interakcie s hACE2 aj s protilátkou odvodenou od človeka: Štúdia voľnej energie perturbácie. bioRxiv:2020.2012.2023.424283.Google Scholar
9. 9.↵Ho D a i. (2021) Zvýšená odolnosť variantov SARS-CoV-2 B.1.351 a B.1.1.7 voči neutralizácii protilátkami. Res Sq.Google Scholar
10. 10.↵Perrotta F, Matera MG, Cazzola M, & Bianco A (2020) Ťažká respiračná infekcia SARS-CoV2: Má receptor ACE2 význam? Respir Med 168:105996.CrossRefGoogle Scholar
11. 11.↵ESCOP (2003) "Taraxaci folium" a "Taraxaci radix". Monografie o liečebnom využití rastlinných drog. (Thieme, Stuttgart) druhé vydanie, Ed s. 499-504.Google Scholar
12. 12.↵Blumenthal M, Busse WR, Goldberg A, Gruenwald J, Hall T, Riggins CW, Rister RS. (eds) "Púpavová bylina" a "Púpavový koreň s bylinou" In: The Complete German Commission E Monographs. Terapeutický sprievodca rastlinnými liekmi. American Botanical Council, Austin, Texas 1998; 118-120. 13 Association BHM (1990) "Dandelion Leaf" and "Dandelion Root". British Herbal Pharmacopoeia 1:37-39.Google Scholar
13. 14.↵Gonzalez-Castejon M, Visioli F, & Rodriguez-Casado A (2012) Diverse biological activities of dandelion. Nutr Rev 70(9):534-547.PubMedGoogle Scholar
14. 15.↵Schutz K, Carle R, & Schieber A (2006) Taraxacum - prehľad fytochemického a farmakologického profilu. J Ethnopharmacol 107(3):313-323.CrossRefPubMedWeb of ScienceGoogle Scholar
15. 16.↵Európska agentúra pre lieky (EMA) CoHMPH (2009) Hodnotiaca správa o Taraxacum officinale Weber ex Wigg., folium. HMPC/579634/2008.Google Scholar
16. 17.↵To KK, et al. (2020) Opätovná infekcia COVID-19 fylogeneticky odlišným kmeňom SARS-koronavírusu-2 potvrdená sekvenovaním celého genómu. Clin Infect Dis. Aug 25:ciaa1275. doi: 10.1093/cid/ciaa1275.CrossRefPubMedGoogle Scholar
17. 18.↵Edridge AWD, et al. (2020) Coronavirus protective immunity is short-lasting (Ochranná imunita proti koronavírusom je krátkodobá). medRxiv:2020.2005.2011.20086439.Google Scholar
18. 19.↵Jia H, Neptune E, & Cui H (2020) Targeting ACE2 for COVID-19 Therapy: Opportunities and Challenges (Cielenie na ACE2 pre terapiu COVID-19: príležitosti a výzvy). American journal of respiratory cell and molecular biology. Dec 9. doi: 10.1165/rcmb.2020-0322PS.CrossRefGoogle Scholar
19. 20.↵Zhou J & Huang J (2020) Current Findings Regarding Natural Components With Potential Anti-2019-nCoV Activity (Súčasné poznatky o prírodných zložkách s potenciálnou anti-2019-nCoV aktivitou). Frontiers in Cell and Developmental Biology 8:589.Google Scholar
20. 21.↵Huentelman MJ a i. (2004) Objav nového inhibítora angiotenzín konvertujúceho enzýmu 2 na základe štruktúry. Hypertenzia 44(6):903-906.CrossRefGoogle Scholar
21. 22.↵Wang G a i. (2021) Dalbavancín viaže ACE2 a blokuje jeho interakciu s proteínom SARS-CoV-2 a je účinný pri inhibícii infekcie SARS-CoV-2 na zvieracích modeloch. Cell Res 31(1): 17-24.Google Scholar
22. 23.↵Tito A, et al. (2020) Extrakt zo šupky granátového jablka ako inhibítor väzby hrotu SARS-CoV-2 na ľudský ACE2: sľubný zdroj nových antivírusových liečiv. bioRxiv:2020.2012.2001.406116.Google Scholar
23. 24.↵Korber B, et al. (2020) Sledovanie zmien v SARS-CoV-2 Spike: Dôkaz, že D614G zvyšuje infekčnosť vírusu COVID-19. Cell 182(4):812-827 e819.CrossRefPubMedGoogle Scholar
24. 25.↵Santos JC & Passos GA (2021) Vysoká infekčnosť SARS-CoV-2 B.1.1.7 je spojená so zvýšenou interakčnou silou medzi Spike-ACE2 spôsobenou vírusovou mutáciou N501Y. bioRxiv:2020.2012.2029.424708.Google Scholar
25. 26.↵Hook I, McGee A, & Henman M (1993) Hodnotenie púpavy na diuretickú aktivitu a zmeny v obsahu draslíka. International Journal of Pharmacognosy 31(1):29-34.Google Scholar
26. 27.↵Escudero NL, De Arellano ML, Fernández S, Albarracín G, & Mucciarelli S (2003) Taraxacum officinale as a food source. Plant Foods for Human Nutrition 58(3):1-10.PubMedWeb of ScienceGoogle Scholar
27. 28.↵Imai Y a i. (2005) Angiotenzín konvertujúci enzým 2 chráni pred ťažkým akútnym zlyhaním pľúc. Nature 436(7047):112-116.CrossRefPubMedWeb of ScienceGoogle Scholar
28. 29.↵Kuba K a i. (2005) Kľúčová úloha angiotenzín konvertujúceho enzýmu 2 (ACE2) pri poškodení pľúc spôsobenom koronavírusom SARS. Nat Med 11(8):875-879.CrossRefPubMedWeb of ScienceGoogle Scholar
29. 30.↵Zhong M, et al. (2020) Expresia ACE2 a furínu v orálnych epitelových bunkách pravdepodobne uľahčuje infekciu COVID-19 respiračnou a fekálno-orálnou cestou. Front Med (Lausanne) 7:580796.Google Scholar
30. 31.↵ To KK-W, et al. (2020) Consistent Detection of 2019 Novel Coronavirus in Saliva. Clinical infectious diseases: an official publication of the Infectious Diseases Society of America 71(15):841-843.CrossRefPubMedGoogle Scholar
31. 32.↵Yoon JG a i. (2020) Klinický význam vysokej vírusovej záťaže SARS-CoV-2 v slinách. J Korean Med Sci 35(20):e195-e195.CrossRefGoogle Scholar
32. 33.↵Wolfel R, et al. (2020) Virologické hodnotenie hospitalizovaných pacientov s COVID-2019. Nature 581(7809):465-469.CrossRefPubMedGoogle Scholar
33. 34.↵Seneviratne CJ a i. (2020) Účinnosť komerčných ústnych výplachov na vírusovú záťaž SARS-CoV-2 v slinách: randomizovaná kontrolná štúdia v Singapure. Infection:1-7.Google Scholar
34. 35.↵ de Toledo Telles-Araujo G, Caminha RDG, Kallas MS, Sipahi AM, & da Silva Santos PS (2020) Potenciálne výplachy úst a nosové spreje, ktoré znižujú vírusovú záťaž SARS-CoV-2: Čo zatiaľ vieme? Clinics (Sao Paulo) 75:e2328.Google Scholar
35. 36. Carrouel F, et al. (2021) Antivírusová aktivita činidiel v ústnych výplachoch proti SARS-CoV-2. Journal of dental research 100(2):124-132.Google Scholar
36. 37.↵Joglekar AV & Sandoval S (2017) Pseudotypové lentivírusové vektory: jeden vektor, mnoho podôb. Hum Gene Ther Methods 28(6):291-301.CrossRefGoogle Scholar
37. 38.↵Krammer F (2020) SARS-CoV-2 vakcíny vo vývoji. Nature 586(7830):516-527.CrossRefPubMedGoogle Scholar

Rada Európy - Rezolúcia 2361 (2021) - Žiadne povinné očkovanie

Názov: Vakcíny Covid-19: etické, právne a praktické aspekty

V tomto uznesení sa v bode 7.1.1 uvádza: "zabezpečiť vysokokvalitné skúšky, ktoré sú spoľahlivé a vykonávané etickým spôsobom v súlade s príslušnými ustanoveniami Dohovoru o ochrane ľudských práv a dôstojnosti ľudskej bytosti v súvislosti s aplikáciou biológie a medicíny: Dohovor o ľudských právach a biomedicíne (ETS č. 164, Oviedsky dohovor) a jeho dodatkového protokolu týkajúceho sa biomedicínskeho výskumu (CETS č. 195) a ktoré postupne zahŕňajú deti, tehotné ženy a dojčiace matky;".

V bode 7.1.1 sa vyžaduje, aby sa zabezpečili vysokokvalitné a eticky správne štúdie v súlade s príslušnými ustanoveniami Dohovoru o ochrane ľudských práv a dôstojnosti ľudskej bytosti v súvislosti s aplikáciou biológie a medicíny, v súlade s Dohovorom o ochrane ľudských práv a biomedicíne (ETS č. 164, Oviedsky dohovor (Odkaz) - PDF) a Dodatkový protokol o biomedicínskom výskume (SEV č. 195 (Odkaz) - PDF), medzi ktoré patria deti, tehotné ženy a dojčiace matky.

Dohoda z Ovieda CETS 164 (SEV 1164) zo 4. apríla 1997 vyžaduje v kapitole IV, článku 13, - "Zásahy do ľudského genómu - Zásah zameraný na modifikáciu ľudského genómu sa môže vykonať len na preventívne účely,
diagnostické alebo terapeutické účely a len vtedy, ak jeho cieľom nie je vniesť do genómu potomkov žiadnu modifikáciu."

Tým sa jasne definuje, že zásahy do ľudského genómu sú povolené len na preventívne účely,
na diagnostické alebo terapeutické účely a len vtedy, ak nie je určená na modifikáciu genómu potomstva.

Článok 13 - Zásahy do ľudského genómu
Zásah zameraný na modifikáciu ľudského genómu sa môže vykonať len na preventívne účely,
diagnostické alebo terapeutické účely a len vtedy, ak jej cieľom nie je zaviesť akúkoľvek zmenu v
genóm všetkých potomkov.

V bode 7.3.1 sa uvádza: "Zabezpečiť, aby občania boli informovaní o tom, že očkovanie nie je povinné a že nikto nie je vystavený politickému, spoločenskému alebo inému tlaku, aby sa dal zaočkovať, ak si to neželá."

Inými slovami, cieľom je zabezpečiť, aby občania boli informovaní o tom, že očkovanie NIE JE povinné a aby nikto nebol pod politickým, spoločenským alebo iným tlakom, aby sa dal zaočkovať, ak si to neželá.

V bode 7.5.1 sa uvádza, že "zaviesť nezávislé kompenzačné programy na zabezpečenie odškodnenia za neprimerané škody a poškodenia spôsobené očkovaním"; majú sa zaviesť nezávislé kompenzačné programy, z ktorých sa bude vyplácať odškodnenie za neprimerané škody a poškodenia spôsobené očkovaním.

V bode 7.5.2 sa uvádza, že "očkovacie preukazy sa používajú len na určený účel, ktorým je monitorovanie účinnosti očkovacej látky, potenciálnych vedľajších účinkov a nežiaducich účinkov".

Jediným účelom očkovacích preukazov je monitorovanie účinnosti vakcín, ako aj ich vedľajších účinkov a nežiaducich účinkov.

Okrem toho stojí za prečítanie a pozornosť aj ďalší obsah.

Portugalsko - 0,9 % Covid-19 úmrtí namiesto oficiálnych 17 000

Vďaka petícii portugalského obyvateľstva sa súd v Portugalsku musel zaoberať otázkou, koľko ľudí, ktorí boli zaregistrovaní ako Covid-19 a oficiálne uznaní za mŕtvych z približne 17.000 skutočne zomrel na Covid-19.

Súdny dvor vykonal dôkazy a dospel k záveru, že Rozsudok z 19. mája 2021 sa dospelo k záveru, že na Covid-19 zomrelo len 152 ľudí.

Podľa bežného výkladu sa každá zosnulá osoba, ktorá mala pozitívny PCR test počas posledných 28 dní alebo bola registrovaná ako kontaktná osoba, musí považovať za mŕtvu osobu Covid-19.

Odvolací súd v Lisabone sa 11. novembra 2020 už zaoberal odvolaním proti karanténnym opatreniam, ktoré boli nariadené na základe výsledkov PCR testov. V 34-stranovom rozsudku RozsudokNa základe viacerých vedeckých zdrojov sa v správe kritizuje karanténne opatrenie vzhľadom na pochybnú platnosť testov PCR.

Centrum hlásenia pre objasnenie úmrtí po očkovaní CORONA 

Združenie Lekári a vedci za zdravie, slobodu a demokraciu e.V. ponúka na svojej webovej stránke širokú škálu informácií, tipov a návrhov pre posmrtné vyšetrenia zosnulých osôb po očkovaní proti koronavírusu. Tu je k dispozícii na stiahnutie aj PDF uverejnené. Okrem iného sa výslovne uvádza, že pitva by sa mala vykonať v súlade s odporúčaniami

Prof. Dr. Arne Burkhardt
Laboratórium patológie Reutlingen
Obere Wässere 3-7
72764 Reutlingen

sa majú vykonať.

Správnu radu združenia tvoria Prof. Sucharit Bhakdi, Dr. h. c., odborník na mikrobiológiu a epidemiológiu infekcií, emeritný profesor Univerzity Johannesa Gutenberga v Mainzi, v rokoch 1991 až 2012 vedúci tamojšieho Ústavu lekárskej mikrobiológie a hygieny, Dr. Ronald Weikl, Dr. h. c., gynekológ, Prof. Stefan Homburg, profesor verejných financií na Leibnizovej univerzite v Hannoveri a Daniela Folkingerová, psychologická poradkyňa, učiteľka, Thurmansbang.

Osteopatia a očkovanie korunou

Jens Oskamp*, osteopat v Kolíne nad Rýnom, napísal nasledujúce informácie pre pacientov, ktoré sa týkajú rizík vektorových a mRNA vakcín v súvislosti s osteopatickou liečbou, a preto kauzálne vylučujú očkované osoby.

„S poľutovaním vás musím informovať, že ľudí, ktorí dostali takzvané mRNA a vektorové vakcíny proti SARS CoV2, nemôžem liečiť. Na rozdiel od tradičného očkovania ide o metódy génového inžinierstva, ktoré manipulujú s vlastnými bunkami tela, aby samy produkovali časti vírusu s cieľom vyvolať imunitnú odpoveď organizmu. Tieto "vakcíny" majú povolenie len na mimoriadne situácie. Výskum krížových reakcií s inými liekmi a terapiami sa uskutočnil len v malej miere alebo vôbec. (Video - Prof.Dr.Hockertz, 2020)

V tejto súvislosti vznikajú pri osteopatickej liečbe nasledujúce problémy:

Zatiaľ nie je jasné, ktoré oblasti tela sú postihnuté vznikom trombózy. Dobre známa mozgová žilová trombóza ako vedľajší účinok vzniká preto, že krv v tejto oblasti tela prúdi relatívne pomaly (Chen et al. 2021). Pomaly tečúca krv sa však vyskytuje aj v iných častiach tela. Aj tam sa môžu tvoriť tromby. (Kadkhoda,2021). Ak sa napríklad cievy v žilovom systéme dolných končatín stanú v dôsledku osteopatických techník priepustnejšími, pôvodne vytvorené tromby sa môžu uvoľniť a v najhoršom prípade viesť k pľúcnej embólii. Tvorba trombov je často asymptomatická.

Okrem toho nemožno vylúčiť, že sa môžu objaviť ďalšie nekontrolované imunitné reakcie, len čo sa patogény uvoľnia z tkaniva počas osteopatickej liečby. Za normálnych okolností to imunitný systém zvládne bez problémov. Príliš reaktívny imunitný systém však môže viesť k vážnym komplikáciám a zničiť vlastné tkanivo (Vojdania a Kharrazianb, 2020), (Talotta,2021).

Dobrá osteopatická liečba odstraňuje blokády v lymfatickom systéme. V dôsledku manipulácie s mRNA sa tam však ukladá neprirodzené množstvo špecifických protilátok (Izba 2020). Nie je vylúčené, že dôjde k značným reakciám (Hotez et al. 2020), akonáhle sa tieto tkanivá počas osteopatickej liečby zmenia. Nervový systém môže byť tiež postihnutý, ako napríklad prípady ochrnutia tváre (Shemer a kol. 2021),(Renould et al,2021) alebo problémy s očami spôsobené Kongestívna papila (Nemecká oftalmologická spoločnosť, 2021).

Ďalšie problémy vyplývajú z nanočastíc používaných vo vakcínach s mRNA (Chen et al. 2021). Okrem iného vedú k vakuolizácii (prakticky k tvorbe edému na úrovni buniek) niektorých typov tkanív, najmä pečene. Je to znak toho, že príslušné bunky odumreli v dôsledku reakcie s nanočasticami (Video - Dr. Vanessa Schmidt-Krüger, 2021*). Ani v tomto prípade nie je jasné, čo sa stane, keď sa tekutina z týchto "edémov" alebo odumretého tkaniva dostane do krvného obehu v dôsledku osteopatických techník.

*Miestne odkazy na stiahnutie videí Dr. Vanessy Schmidt-Krüger sú tu (Video 1_2) a tu (Video 2_2) k dispozícii.

Ak ste už podstúpili genetické úpravy v dôsledku vakcín mRNA/vektorov, žiadam vás, aby ste sa u mňa opäť stretli najskôr 10 mesiacov po týchto opatreniach. Potom sa dohodneme, ktoré laboratórne testy a zobrazovacie postupy sú potrebné na vylúčenie komplikácií. (napr. vyšetrenie na kongestívnu papilu - Nemecká oftalmologická spoločnosť, 2021)
Viacnásobné injekcie zvyšujú intenzitu a pravdepodobnosť vyššie opísaných korelácií. Preto si vyhradzujem právo všeobecne odmietnuť liečbu aj po uplynutí 10 mesiacov.

Silný imunitný systém ako alternatíva k očkovaniu potrebuje vedomosti!!! Odporúčam nasledujúci videomateriál:

• Dr. rer. nat. Markus Stark - Posilnenie imunitného systému a obranyschopnosti
• Dr. Mathias Rath - Ukončite súčasnú pandémiu - zabráňte budúcim pandémiám!
• Prof. Dr. Jörg Spitz - Vitamín D - Hype alebo nádej„

• Webová stránka Jens Oskamp (v súčasnosti sa aktualizuje)*

Zmena a doplnenie zákona o ochrane pred infekciami a základného zákona

Uznesenie nemeckého Bundestagu z 22. júna 2021 Tlačovina 19/30938 sa stáva na 23.07.2023 OBMEDZENIE ústavou zaručeného práva na telesnú integritu!

' Článok 9
Zmena a doplnenie zákona o ochrane pred infekciami
§ 36 ods. 12 zákona o ochrane pred infekciami z 20. júla 2000 (BGBl.
I s. 1045), ktorý bol naposledy zmenený článkom 1 zákona z 28. mája 2021
(BGBl. I s. 1174) sa mení a dopĺňa takto:
"(12) Povolenie vydané na základe odseku 8 prvej vety alebo odseku 10 prvej vety
Vyhláška nadobudne účinnosť najneskôr do jedného roka od zrušenia
Určenie epidemiologickej situácie národného významu
Nemeckého spolkového snemu v súlade s § 5 ods. 1 veta 2. Až do jeho
Vyhlášku vydanú na základe odseku 8 prvej vety alebo odseku 10 prvej vety možno zmeniť aj po zrušení epidemiologickej situácie celoštátneho významu."

Článok 10
Obmedzenie základných práv
Prostredníctvom článku 9 základné práva na telesnú integritu sú (článok 2 ods. 2 veta 1 základného zákona), sloboda osoby
(článok 2 ods. 2 druhá veta základného zákona), sloboda pohybu (článok 11
odsek 1 základného zákona) a nedotknuteľnosť obydlia (článok 13 odsek 1 základného zákona) obmedzené.

7. Doterajší článok 9 sa označuje ako článok 11 a odsek 2 znie takto:
(2)" Články 1, 2, 6, 7 čísla 1, 2 a 4 a článok 8 nadobúdajú účinnosť v júli 2023."

Vyhodnotenie 109 štúdií o nosení masiek

Dňa 20. apríla 2021 bolo uverejnené hodnotenie 109 štúdií o zdravotných aspektoch nosenia masiek počas pandémie. Medzinárodný časopis pre environmentálny výskum a verejné zdravie uverejnené, ktoré tu ako PDF v origináli (angličtina) a tu sú k dispozícii na stiahnutie v nemeckej verzii.

Výskumníci dospeli k záveru, ktorý by pri takomto rozsahu škôd sami nepovažovali za možný.

Okrem už známych negatívnych účinkov by sa mal zdôrazniť syndróm vyčerpania vyvolaný maskou (MIES).

Účinky MIES môžu zahŕňať poruchy koncentrácie, myslenia a reči, zníženie srdcovej a dychovej frekvencie a hĺbky dýchania, čo môže spôsobiť poškodenie ciev a koronárnych tepien a následne neurologické a srdcové ochorenia. Dlhodobé účinky sú stále predmetom prebiehajúceho výskumu.

WHO - Zmena odporúčania pre očkovanie detí

V Verzia zo dňa 3. júna 2021 bolo odporúčanie v súčasnosti neočkovať deti, pretože stále neexistujú spoľahlivé dôkazy o očkovaní detí proti Covid-19, najmä preto, že podobne ako u dospievajúcich majú zvyčajne miernejší priebeh v porovnaní s dospelými. Obvyklé odporúčané očkovanie detí by malo naďalej pokračovať.

V aktuálna verziauverejnenej 20. júna 2021, bola uvedená pasáž zmenená v tom zmysle, že hoci sa v nej odkazuje na miernejšie priebehy a očkovanie sa nemusí nevyhnutne vykonať, ak deti nepatria do rizikovej skupiny, na všeobecné odporúčanie očkovania je stále potrebných viac informácií.
Napriek tomu je liek Pfizer BioNTech definovaný ako vhodný pre deti staršie ako 12 rokov. Deťom vo veku 12 až 15 rokov, ako členom rizikových skupín, bude táto vakcína ponúknutá spolu s ďalšími prioritnými skupinami.
Rovnako ako v predchádzajúcej verzii sa upozorňuje, že zatiaľ nie je k dispozícii dostatok údajov zo štúdií s deťmi. Príslušné odporúčania budú vydané hneď, ako budú k dispozícii ďalšie zistenia.

Zmenené pasáže sú v uvedených dokumentoch zvýraznené žltou farbou.

Podľa Rozhodnutie STIKO o 6. aktualizácii odporúčania o očkovaní proti COVID-19 a o súvisiacom vedeckom odôvodnení v Epidemiologický bulletin 23/2021 sa odporúča (v súlade s aktuálnymi odporúčaniami WHO) "očkovať deti a dospievajúcich s už existujúcimi ochoreniami mRNA vakcínou Comirnaty (BioNTech/Pfizer) z dôvodu predpokladaného zvýšeného rizika závažného priebehu ochorenia COVID-19". ktoré sa majú vykonať. "Použitie vakcíny Comirnaty u detí a dospievajúcich vo veku 12 - 17 rokov bez už existujúcich ochorení sa v súčasnosti vo všeobecnosti neodporúča, ale je možné po lekárskom objasnení a pri individuálnom želaní a akceptovaní rizika."

PEI - Bezpečnostná správa

Stav 10.06.2021

PEI (Paul-Ehrlich-Institut), spolkový orgán ministerstva zdravotníctva, ktorý je viazaný pokynmi, zverejňuje v niekoľkotýždňových intervaloch tzv. bezpečnostné správy o používaných vakcínach a ich vedľajších účinkoch.

RKI (Inštitút Roberta Kocha), nezávislý vyšší spolkový orgán, ktorý je viazaný smernicami v zmysle Článok 87 ods. 3 veta 1 GG. Je sídlom "niekoľkých vedeckých komisií, napríklad Stálej komisie pre očkovanie, ktorá vypracúva odporúčania týkajúce sa očkovania. Je tiež zodpovedná za spracovanie a koordináciu obsahu federálnych zdravotných správ a za povoľovanie dovozu a používania ľudských embryonálnych kmeňových buniek."

Zhrnutie prípadov:

Ďalšie informácie o týchto orgánoch nájdete na Spolkové ministerstvo zdravotníctva.

Databáza USA VAERS uvádza tieto údaje pre USA:

Pre porovnanie: od začiatku očkovania proti záškrtu, osýpkam, príušniciam, ružienke, detskej obrne a tetanu zomrelo v USA 4 050 ľudí. Prvá vakcína proti záškrtu bola prvýkrát schválená v Nemecku v roku 1936, vakcína proti osýpkam v USA v roku 1963, vakcína proti príušniciam a ružienke v roku 1969, vakcína proti detskej obrne v roku 1955, vakcína proti tetanu v roku 1930.

T.j. vládna definícia "bezpečné" a "vysoko účinné" deklarované vakcíny Covid-19, spôsobili 150 % týchto úmrtí v priebehu šiestich mesiacov(!), na základe údajov dostupných v USA, čo všetky vyššie uvedené vakcíny spolu nedosiahli za šesť až osem desaťročí!

Účinnosť vakcín Covid-19

Od 1. júna 2021 RKI vo svojich často kladených otázkach týkajúcich sa mRNA vakcín uvádza: "Zatiaľ nie je známe, ako dlho ochrana pred očkovaním trvá. Ochrana sa nezačne okamžite po očkovaní a niektorí očkovaní ľudia zostanú nechránení."

Pokiaľ ide o vektorové vakcíny, uvádza sa: "Zatiaľ nie je známe, ako dlho ochrana pred očkovaním trvá. Ochrana sa nezačne okamžite po očkovaní a niektorí očkovaní ľudia zostanú nechránení."

To vyvoláva otázku, do akej miery možno odôvodniť "nežiaduce reakcie" a "úmrtia" zaznamenané v správach o bezpečnosti PEI alebo v iných databázach, ak sa otvorene priznáva, že neexistuje ani okamžitá ochrana, ani ochrana po viacnásobnom očkovaní a nie sú k dispozícii žiadne informácie o trvaní možnej ochrany.

Archivované príspevky:

Často kladené otázky - Testy Corona

Príspevok od 31 marca 2021 08:43

Testovanie" je v týchto dňoch takmer každodenným spoločníkom. A často sa objavuje otázka, aké testy, ktoré testy ako a s akým významom. Nižšie uvádzame zoznam dostupných testovacích metód a vlastností:

Test PCR

... sa používa na detekciu RNA SARS-CoV-2, t. j. častí genetického materiálu vírusu Covid-19, ale nie na detekciu aktívneho, t. j. replikovateľného vírusu.

Na detekciu špecifickej fluorescenčnej línie sa musí genetický materiál obsiahnutý vo vzorke amplifikovať. Frekvenciu priechodov amplifikácie predstavuje takzvaná hodnota Ct (cycle-threshold value).

V ideálnom prípade je táto hodnota Ct zdokumentovaná v správe o laboratórnych výsledkoch.

Pozitívny test PCR s hodnotou Ct 30 ... 35 znamená nízku vírusovú záťaž, hodnota Ct > 35 znamená veľmi nízku vírusovú záťaž.

Napríklad hodnota Ct 25 znamená významnú vírusovú záťaž. (Zdroj: PCR test - hodnota Ct Význam)

Keďže však hodnoty Ct nie sú v praxi rôznych laboratórií zdokumentované ani štandardizované a niektoré pracujú s hodnotami Ct 40 alebo vyššími (až 50), výsledky PCR testov nie sú porovnateľné ani zmysluplné. Riziko zvyšovania falošne pozitívnych výsledkov testov stúpa so zvyšujúcimi sa hodnotami Ct so všetkými negatívnymi dôsledkami, ako napr. The Lancet v súvislosti s vyšetrovaním v Spojenom kráľovstve.

Nie nadarmo sa odporúčania WHO výsledok PCR testu vždy posudzujte v kontexte existujúcich symptómov ochorenia a klinickej diagnostiky.

Test na antigén

... je určený na detekciu akútnej infekcie (proteínové štruktúry vírusu corona), ale vyžaduje vysokú vírusovú záťaž. Preto je potrebné potvrdenie následným testom PCR (s nízkou hodnotou Ct).

Zoznam vozidiel so špeciálnym povolením v Nemecku (Platnosť do polovice mája 2021) je k dispozícii na webovej stránke Spolkového inštitútu pre lieky a zdravotnícke pomôcky (BfArM) na adrese BfArM - Antigénové testy s osobitným povolením.

Test môže viesť k falošne pozitívnym výsledkom, ak bolo testovacie zariadenie skladované pri nižšej ako odporúčanej skladovacej teplote a potom sa použije.

Test na protilátky (krvný test - Elisa test / rýchlotest)

... detekciu špecifických protilátok produkovaných organizmom v reakcii na koronavírus.
Nie je dôležité, či imunitná odpoveď (tvorba zistených protilátok) bola spôsobená predchádzajúcou infekciou Covid-19 alebo očkovaním proti Covd-19.

Rozhovor s Dr. Greinerom, laboratórna diagnostika, Viedeň

Covid-19 - Čo nám môžu povedať protilátky.

Vymýtiť Covid-19?

Príspevok od 31 marca 2021 09:06

Je možné vyhubiť vírus?

- Ako dlho trvalo, kým bol vírus osýpok (napoly) "porazený"?

Prvá vakcína proti osýpkam s inaktivovanou delenou vakcínou bola v USA povolená v roku 1963 a ďalej sa neustále vyvíjala. Napriek tomu sa ani po takmer 60 rokoch nepodarilo osýpky eradikovať (zdroj: MZV SR, napr: Vírus osýpok).

- Ako dlho trvalo odstránenie vírusu detskej obrny?

Prvé očkovanie proti detskej obrne inaktivovaným vírusom sa uskutočnilo v roku 1955 (zdroj: Očkovanie proti detskej obrneV roku 2015, po 60 rokoch (!), WHO vyhlásila detskú obrnu za eradikovanú.

A dnes sa predpokladá, že vakcíny vyvinuté v priebehu niekoľkých mesiacov, ktoré využívajú nové technológie vektorov alebo mRNA, ktoré neboli úspešne testované na zvieratách alebo ľuďoch v konvenčne navrhnutej fáze I ... III skúškach, ktorých vedľajšie účinky a dlhodobé vedľajšie účinky neboli hlásené a ktorých výrobky boli uvedené na trh len s mimoriadnym povolením, ktoré sa neuvádza vo formulároch súhlasu, sú schopné poraziť alebo dokonca zlikvidovať vírus - v priebehu niekoľkých mesiacov!

Podobne ako v prípade vírusov detskej obrny a osýpok sa dá predpokladať, že bude trvať najmenej dve generácie, kým sa Covid-19 vyhubí alebo aspoň dostane pod kontrolu.

Chceme zaviesť uzáveru, povinné očkovanie (stále len nepriame), karanténu, izoláciu, povinné masky atď. a dokonca digitálny očkovací preukaz?

Jediným zaručeným účinným spôsobom eradikácie vírusu je preto buď takmer 60 rokov trvajúca blokáda, alebo odstránenie hostiteľa vírusu, t. j. eradikácia každého človeka. Potom sa odstráni aj možnosť prežitia vírusu.

B.t.w.: to tiež vysvetľuje, prečo sa vírus vždy snaží nezabiť svojho hostiteľa, aby sa mohol ďalej množiť. Mutácie preto vždy sledujú cieľ optimalizovať rozmnožovanie bez toho, aby sa stali pre hostiteľa nebezpečnejšími. Niet pochýb o tom, že vírusy sa stále môžu stať smrteľnými pre ľudí, ktorí sú už chorí.

Ako môžeme porozumieť tomu, čo vláda robí tam a späť?

Príspevok od03. apríla 2021 22:11

Predtým, ako sa pokúsime odpovedať na túto otázku s cieľom vypracovať jednu z možných odpovedí, je užitočné pozrieť sa na rok 2012.

V roku 2012 si nemecký Bundestag objednal "Analýzu rizík v oblasti civilnej ochrany", ktorej správa bola zverejnená 3. januára 2013 vo forme tlačoviny 17/12051, ktorá je dostupná na Správa o analýze rizík - Tlač 17/12051 z 03.01.2013 možno vyvolať a stiahnuť vo formáte PDF.

Kapitola 2.3 na strane 5 obsahuje tému "Analýza rizika "Pandémia spôsobená vírusom Modi-SARS".

Nasledoval 17-stranový dokument s názvom "Ako dostávame COVID-19 pod kontrolu", ktorý bol utajený len pre úradné použitie a 20. mája 2020 zverejnený na webovej stránke spolkového ministerstva vnútra. Ako sme dostali COVID-19 pod kontrolu bol prístupný a stiahnuteľný. Dnes už tam nie je prístupná, ale cez tento záložný odkaz Utajovaný dokument COVID-19 zo scény Spolkového ministerstva vnútra.

Od toho sa odvíjajú všetky predchádzajúce, súčasné a budúce kroky federálnej vlády v súvislosti s COVID-a9.

Súčasné snahy vlády postupne obmedziť vplyv všetkých vyššie postavených inštitúcií na rozhodovanie kancelára, vylúčiť ich, zbaviť zákonodarnú moc jej ústavou garantovanej funkcie, štrukturálne personálne zmeny na súdoch SRN, to všetko smeruje rovnakým smerom ako v roku 1933. Tentoraz však nie sú po ruke žiadni spojenci, ktorí by inštalovali nový základný zákon, ktorý by tieto snahy zastavil!

EMA - Pozadie

Príspevok od 20 apríl 2021 02:43

Tu sú uvedené súvislosti medzi funkciou EMA (Európskej agentúry pre lieky) a kariérou a z nej vyplývajúcim konfliktom záujmov prezidenta EMA Emera Cooka, ako o tom informoval portál epochtimes.de 7. apríla 2021: Predseda EMA Emer Cooke bol dlhé roky lobistom najväčšej európskej farmaceutickej organizácie

Nadmerná úmrtnosť

Príspevok od 20 apríla 2021 08:09

Otázka nadmernej úmrtnosti je opakujúcou sa témou. Okrem nedostatočnej kapacity lôžok intenzívnej starostlivosti je argument nadmernej úmrtnosti stálym spoločníkom pri zdôvodňovaní opatrení nariadených vládou.

Človek by si myslel, že na spolkových tlačových konferenciách by mali byť známe vlastné údaje Spolkového štatistického úradu (pozri: Počet úmrtí v marci 2021: 11 % pod priemerom predchádzajúcich rokov).

Hanno Kautz, hovorca ministra zdravotníctva Jensa Spahna, však vie, že Federálna tlačová konferencia z 19.04.2021 nič o týchto číslach. Na otázku pána Reitschustera: "Pán Kautz, podľa Spolkového štatistického úradu sme mali minulý mesiac nižšiu úmrtnosť. V marci zomrelo o 11 percent menej ľudí, ako bol priemer za roky 2017 až 2020. Ako si to vysvetľujete?" odpovedá jednoducho: "Nevyjadrujem sa k číslam, ktoré som predtým nevidel." A ďalej: "Uvádzate veľmi konkrétne číslo, ktoré nepoznám a ktorého kontext nepoznám. V tejto chvíli to nemôžem komentovať.".

To vyvoláva otázku: ak sú tieto údaje také nezaujímavé, ak nie sú ani uznávané alebo známe, prečo sa neustále uvádzajú ako odôvodnenie stále prísnejších opatrení?