Время чтения 63 минут

Обновлено - 18 февраля 2023 года

Этот блог будет прекращен. The Блог Короны 2023 имеет дело с известными предпосылками, в частности, со стороны фармацевтической промышленности и учреждений здравоохранения на международном уровне.

Обновление данных всегда является главным приоритетом - статьи на различные темы следуют ниже этого раздела. Самое последнее сообщение находится вверху и выделено красным заголовком.

Поскольку некоторые обновления не были сделаны по временным причинам, следующие видеоанимации соответствующих данных за период с момента первого зарегистрированного сообщения о побочной реакции до настоящего времени расположены в хронологическом порядке, сначала - самые последние. (Источник: Программирование анализа данных EMA / EMA).

• Перикардит

00:00

00:00

00:00

• Болезнь Крейтцфельдта-Якоба

00:00

00:00

00:00

• Миокардит

00:00

00:00

00:00

• Нарушение менструального цикла

00:00

00:00

00:00

• Синдром Гийена-Барре

00:00

00:00

00:00

• Паралич Белла

00:00

00:00

00:00

• Нарушение сна

00:00

00:00

00:00

• Галлюцинации

00:00

00:00

00:00

• Тромбоцитопения

00:00

00:00

00:00

• Самопроизвольный аборт

00:00

00:00

00:00

• Боль в глазах

00:00

00:00

00:00

• Потеря сознания

00:00

00:00

00:00

• Нарколепсия

00:00

00:00

00:00

• Лимфаденопатия

00:00

00:00

00:00

• Учащенное сердцебиение

00:00

00:00

00:00

• Головные боли

00:00

00:00

00:00

• Церебральный тромбоз

00:00

00:00

00:00

• Тромбоз церебрального венозного синуса

00:00

00:00

00:00

• Церебральный венозный тромбоз

00:00

00:00

00:00

• Тромбоз глубоких вен

00:00

00:00

00:00

• Тромбоз брыжеечной вены

00:00

00:00

00:00

• Тромбоз воротной вены

00:00

00:00

00:00

• Тромбоз верхнего сагиттального синуса

00:00

00:00

00:00

• Опоясывающий герпес

00:00

00:00

00:00

• Тромбоз

00:00

00:00

00:00

• Венозный тромбоз

00:00

00:00

00:00

• Венозный тромбоз конечности

00:00

00:00

00:00

• Шум в ушах

00:00

00:00

00:00

• Внезапная смерть

00:00

00:00

00:00

• Межменструальные кровотечения

00:00

00:00

00:00

• Задержка менструации

00:00

00:00

00:00

• Нерегулярные менструации

00:00

00:00

00:00

• Крапивница

00:00

00:00

00:00

---

Следующий раздел больше не будет обновляться. Разработка данных EMA будет заменена видеороликами выше!

Обновление данных - EMA - VAERS - ВОЗ - Сообщения о побочных реакциях

^* Увеличить с 13.11.2021 по 03.12.2021 в 368.653 Сообщения

Всего уведомлений: EMA 1,254,029 (+ 90,673^*) / КТО 2,706,410 (+206,529^*) / CDC/FDA 951857 (+71.451^*)

Симптом: паралич Белла (лицевой паралич) - Зарегистрированные сообщения

Увеличение с 30.12.2021 - 15.01.2022 / 17.12.2021 - 07.01.2022 на 6.620 Случаи

Источники: adrreports.eu (EMA) / vigiaccess.org (ВОЗ) - Статус 10/12/2021
Источник: vaers.hhs.gov (CDC / FDA) - Статус 03.12.2021

Симптом: Менструальные расстройства - Зарегистрированные сообщения

Источники: adrreports.eu (EMA) / vigiaccess.org (ВОЗ) - по состоянию на 13 ноября 2021 г.
Источник: vaers.hhs.gov (CDC / FDA) - Статус 05.11.2021

Симптом: самопроизвольный аборт - Зарегистрированные сообщения

Источники: adrreports.eu (EMA) / vigiaccess.org (ВОЗ) - по состоянию на 13 ноября 2021 г.
Источник: vaers.hhs.gov (CDC / FDA) - Статус 05.11.2021

Симптом: Лимфаденопатия - Зарегистрированные сообщения

^* Увеличить с 18.12.2021 - 24.12.2021 / 10.12.2021 - 17.12.2021 в 713 Случаи

Источники: adrreports.eu (EMA) / vigiaccess.org (ВОЗ) - Статус 24/12/2021
Источник: vaers.hhs.gov (CDC / FDA) - Статус 17/12/2021

Симптом: Смерти - Зарегистрированные сообщения

Текущие данные о Повышенная смертность во всех возрастных группах обновляются ежедневно здесь.

Графики созданы на основе данных из 29 стран-участниц: Бельгия, Дания, Эстония, Финляндия, Франция, Германия, Германия (Берлин), Германия (Гессен), Греция, Венгрия, Ирландия, Израиль, Италия, Люксембург, Мальта, Нидерланды, Норвегия, Португалия, Словения, Испания, Швеция, Швейцария, Великобритания (Англия), Великобритания (Северная Ирландия), Великобритания (Шотландия), Великобритания (Уэльс) и Украина.
Украина, Германия (Берлин) и Германия (Гессен) не были включены в объединенные данные.
(Источник: Euromomo)

^* Увеличить с 16.03.2022 - 26.03.2022 / 05.03.2022 - 18.03.2022 в 2.595 Смерти
(удвоение по сравнению с 15/03 / 04/03)

Источники: adrreports.eu (EMA) - по состоянию на 26/03/2022 / vigiaccess.org (ВОЗ) - Статус 26/03/2022
Источник: vaers.hhs.gov (CDC / FDA) - Статус 18/03/2022

Симптом: Миокардит (воспаление сердечной мышцы) - Зарегистрированные сообщения

^* Увеличить с 19.11.2021 - 03.12.2021 / 12.11.2021 - 29.11.2021 в 2.088 Сообщения

Источники: adrreports.eu (EMA) / vigiaccess.org (ВОЗ) - по состоянию на 19 ноября 2021 г.
Источник: vaers.hhs.gov (CDC / FDA) - По состоянию на 12 ноября 2021 г.

Симптом: Перикардит (воспаление перикарда) - Зарегистрированные сообщения

^* Увеличить с 10.12.2021 по 24.12.2021 в 10.367 Сообщения

Источники: adrreports.eu (EMA) / vigiaccess.org (ВОЗ) - Статус 24/12/2021
Источник: vaers.hhs.gov (CDC / FDA) - Статус 17/12/2021

Симптом: Опоясывающий герпес - Зарегистрированные сообщения

Источники: adrreports.eu (EMA) / vigiaccess.org (ВОЗ) - по состоянию на 13 ноября 2021 г.
Источник: vaers.hhs.gov (CDC / FDA) - Статус 05.11.2021

Симптом: Тромбоз - Зарегистрированные сообщения

Источники: adrreports.eu (EMA) / vigiaccess.org (ВОЗ) - по состоянию на 13 ноября 2021 г.
Источник: vaers.hhs.gov (CDC / FDA) - Статус 05.11.2021

Симптом: внезапная смерть - Зарегистрированные сообщения

Источники: adrreports.eu (EMA) / vigiaccess.org (ВОЗ) - по состоянию на 13 ноября 2021 г.
Источник: vaers.hhs.gov (CDC / FDA) - Статус 05.11.2021

---

Оценка пригодности метода RT-qPCR для
Обнаружение возможной инфекции и
Инфицированность людей в отношении SARS-CoV-2

Современное экспертное мнение доктора биол. наук, проф. Ульрике Кеммерер

Экспертное заключение здесь из Сайт сайт Врачи и ученые за здоровье, свободу и демократию, e.V. или хранится здесь можно скачать.

Ложноположительные результаты ПЦР-тестов подвергаются проверке

Исследователи Лесли К. Вудкок, П. Сталлинга и Игорь Хмелинский из португальского Университета Алгарве сообщают в своей статье, опубликованной в ноябре 2021 года в журнале The Lancet Respiratory Medicine Роль экзосом в ложноположительных тестах ПЦР на ковид-19 о результатах своих исследований, которые Ссылка доступны для скачивания.

Обновление данных - EMA - VAERS - ВОЗ - Сообщения о побочных реакциях

Исследователи Лесли К. Вудкок, П. Сталлинга и Игорь Хмелинский из португальского Университета Алгарве сообщают в своей статье, опубликованной в ноябре 2021 года в журнале The Lancet Respiratory Medicine Роль экзосом в ложноположительных тестах ПЦР на ковид-19 о результатах своих исследований, которые Ссылка доступны для скачивания.

Сравнение зарегистрированных побочных реакций на вакцины с 1 000 случаев

Ограничение основных прав

В Бюллетене федеральных законов Часть I 2021 № 83 от 11.12.2021 Закон об укреплении
Вакцинопрофилактика против Ковид-19 и внесение изменений в другие нормативные акты в связи с пандемией Ковид-19 от 10 декабря 2021 года основные права

• физическая целостность
• свобода личности
• свобода собраний
• свобода передвижения
• неприкосновенность жилища

ЗАПРЕЩЕНО (Скачать в формате PDF):

Следующие изменения вступят в силу 25 ноября 2021 года:

Статья 16 - Поправка к двенадцатой книге Социального кодекса Германии "Раздел 142 Временное положение о коммунальных обедах для людей с ограниченными возможностями в связи с пандемией Ковид-19; разрешение на издание постановлений".

Статья 17 - Внесение изменений в Федеральный закон о пенсионном обеспечении

Статья 18 - Поправка к Закону о просителях убежища

Следующие изменения вступят в силу с 01.01.2022:

Статья 12a - Поправка к третьей книге Социального кодекса

"В предложении 3 раздела 109 (5) слова "31 декабря 2021 года" заменены словами "31 марта 2022 года".

"В раздел 421c вносятся следующие изменения: "aa) В части предложения перед цифрой 1 слова "до 31 декабря 2021 года" заменяются словами "с 1 января 2022 года по 31 марта 2022 года". bb) В части предложения после цифры 2 слова "если право на пособие за работу в течение короткого времени возникло до 31 марта 2021 года и" исключены.".

Следующие изменения вступают в силу с 01.01.2023:

Статья 2 - Дальнейшие поправки к Закону о защите от инфекций

"В Закон о защите от инфекций, который в последний раз был изменен статьей 1 настоящего Закона, вносятся следующие изменения:

1. §§ 20a и 20b отменены.
2. § 73 изменен следующим образом:
   a) параграф 1a, номера 7e-7h отменяются
   b) В пункте 2 "7h" заменяется на "7d".
   
   
   
   

Интервью об обязательной вакцинации против коронавируса: за и против - MDR

Вторник, 23.11.2021 06:50 - Продолжительность 06:50 мин.

Сайт Интервью MDR воспроизводится ниже в виде стенограммы и публикуется здесь как Скачать аудиозапись Доступно. Ведущий - Тим Дайзингер, его партнеры по дискуссии - профессор теологии Эрланген-Нюрнбергского университета Петер Даброк и доктор Штеффен Рабе, педиатр из Мюнхена и член правления Врачи для принятия индивидуальных решений о вакцинации e. V. (ÄIIE).

• Ведущий, Тим Дайсингер:

Большое табу - всеобщая обязательная вакцинация - больше не является табу, и многие люди высказываются в его пользу. Сегодня утром мы хотим рассмотреть этот вопрос поближе, а также узнать ваше мнение по этому поводу, о чем мы расскажем чуть позже. Прежде всего, это, так сказать, основа для дискуссии. Мы хотим услышать две точки зрения.

Вторым будет педиатр. Первый - это Петер Даброк, профессор теологии в Нюрнбергском университете Эрлангена, который до 2020 года был председателем Немецкого совета по этике. Господин Даброк, что вы думаете? Всеобщая обязательная вакцинация, да или нет?

• Профессор Питер Даброк: 

Поэтому я признаю, что с течением времени моя позиция в отношении всеобщей обязательной вакцинации менялась, и именно поэтому мы также понимаем, что в таких вопросах не существует единого решения, которое вы принимаете один раз и затем просто всегда следуете ему, но вы должны адаптировать его к обстоятельствам. Я провел несколько месяцев в кампании в пользу этой прививки и надеялся, что люди поймут, что это лишь минимальный риск для вас и огромная польза для вас и других людей.

и что люди делают прививки из соображений самозащиты, непосредственной защиты от других и солидарности. Это не так, и когда я услышал, что это стало очень жестким, три недели назад был проведен соответствующий опрос. Моя позиция также изменилась, и поэтому сейчас я склоняюсь к тому, что нам нужна всеобщая обязательная вакцинация как можно скорее. 

• Ведущий, Тим Дайсингер:

Но понимаете ли вы тех, кто не хочет делать прививки или пока не хочет их делать?

• Профессор Питер Даброк: 

Конечно, вы задумываетесь об этом, особенно когда чувствуете такое сильное сопротивление при ходьбе, а потом всегда слышите два аргумента: что это пропорционально и что это не проблема.

посягательство на физическую неприкосновенность. Эти два аспекта также связаны между собой, и я бы сказал, что, во-первых, что касается физической неприкосновенности, каждый, кто выступает против обязательной вакцинации, должен понимать, что ущерб для организма, если вы заболеете или если заболеют другие, будет значительно больше. Вся серьезная наука говорит о том, что остаточные риски явно минимальны, а польза значительно выше.

Другое дело, что физическая неприкосновенность никогда не должна быть абсолютом с точки зрения фундаментальных прав, но должна быть приведена в практическое соответствие с другими фундаментальными правами, и если свобода всех остальных массово ограничивается из-за того, что небольшая группа обеспечивает дальнейшее распространение вируса таким образом, то физическая неприкосновенность, которую я могу понять на первый взгляд, не должна быть абсолютом.

• Ведущий, Тим Дайсингер:

Мнение Петера Дабока, бывшего председателя Немецкого совета по этике. А теперь мы хотели бы услышать доктора Штеффена Раабе, педиатра и подросткового врача, представителя правления Ассоциации врачей за индивидуальные решения о вакцинации, господин Рабе. Можете ли вы понять аргументацию господина Дарброка?

• Доктор Штеффен Рабе

Нет, аргументы в пользу обязательной вакцинации для меня совершенно непонятны, особенно в случае с вакцинами "Ковид". И когда я слушаю мистера Дарброка, а он аргументирует это косвенной защитой других людей, то это, конечно, является решающим камнем преткновения. Только такой аргумент может оправдать рассмотрение вопроса об обязательной вакцинации, и именно этот аспект вакцины "Ковид" не охватывают. Вакцины "Ковид" обеспечивают тем, кто хочет защитить себя, временную защиту от тяжелых случаев. Однако они не обеспечивают никакой соответствующей внешней защиты.

Это сводит на нет все аргументы в пользу обязательной вакцинации. А если он говорит о низком и минимальном риске, связанном с вакцинацией, то это просто неверно. Как педиатр, я сталкиваюсь с молодыми людьми в возрасте 16-18 лет, которым мне приходится говорить, что если они будут привиты "Бионтехом", единственной вакциной, которая в настоящее время рекомендована и одобрена для них, то риск развития миокардита как прямого следствия этой прививки составляет как минимум 1:5000. Мистер Дайсингер, мы не знаем другого препарата. За последние 30 лет я не видел ни одной другой вакцины, которая сочетала бы в себе такое серьезное заболевание, как миокардит, с таким резко высоким риском. Эта обязательная вакцинация не является ни юридически, ни морально, ни медицински разумной, но, как справедливо сказал господин Ханс-Юрген Папе, является выражением беспомощности и безволия.

• Ведущий, Тим Дайсингер:

Если мы посмотрим на ситуацию в отделениях интенсивной терапии или в больницах в целом, то в качестве дополнительного аргумента приводится беспомощность: у вас чрезвычайная ситуация, и нет другого выхода из нее, кроме обязательной вакцинации.

• Доктор Штеффен Рабе

Но, господин Дайсингер, обязательная вакцинация - это не срочная мера. Юридическая подготовка, политическая реализация и медицинская эффективность - мы обманываем себя, если увидим какой-либо эффект в отделениях интенсивной терапии в течение двух-трех недель. Мы должны наконец прекратить сокращение отделений интенсивной терапии и уменьшение числа коек интенсивной терапии. Вместо того чтобы вытеснять медсестер из профессии, делая вакцинацию обязательной, мы должны наконец дать им необходимую благодарность, чтобы они остались в своей профессии. И именно здесь политики потерпели полное фиаско за два года. Эта катастрофа - катастрофа с объявлением, мистер Дайсингер. Мы знали, что эта осень станет еще одним испытанием, в том числе для больниц и отделений интенсивной терапии, и мы с открытыми глазами сократили тысячи коек интенсивной терапии. И это теперь должно использоваться как аргумент для вмешательства в одно из основных фундаментальных прав, и здесь я категорически не согласен с г-ном Даброком, право на физическую неприкосновенность, особенно в такой стране, как Германия, которая имеет такое печальное прошлое, в том числе в медицинской сфере с этими вмешательствами, мы должны быть очень, очень осторожны и очень, очень осторожны с этим мышлением.

Вспомогательные вещества ALC-0315 и ALC-0159 "только для исследовательского использования"

Вспомогательные вещества, содержащиеся в Pfizer/BioNTech Comirnaty ALC-0315  [(4-гидроксибутил)азанедиил]ди(гексан-6,1-диил)бис(2-гексилдеканоат) (CAS 2036272-55-4) и ALC-0159 2-[(полиэтиленгликоль)-2000]-N,N-дитетрадецилацетамид (CAS 1849616-42-7) в соответствии с производителем ABP Biosciences предназначенные исключительно для использования в исследовательских целях.

В настоящее время имеются исследования, посвященные этим вспомогательным веществам:

• http://www.eurannallergyimm.com/cont/journals-articles/1043/volume-potential-culprits-immediate-hypersensitivity-reactions-4579allasp1.pdf (PDF-.скачать) 29.04.2021

• https://www.cell.com/molecular-therapy-family/molecular-therapy/fulltext/S1525-0016(21)00064-2?_returnURL=https%3A%2F%2Flinkinghub.elsevier.com%2Fretrieve%2Fpii%2FS1525001621000642%3Fshowall%3Dtrue (PDF-.скачать) 04.02.2021
  
  
  
  

Веб-сайт Федерального правительства - Удаление утверждения "Будет ли введена обязательная вакцинация - НЕТ".

Версия от 17.11.2021 00:39:55 всё ещё

Версия от 19.11.2021 16:44:31 сейчас (здесь имеется в оригинале):

Вышеуказанные ссылки доступны через WayBackMachine (https://web.archive.org) защищенных архивных страниц.

Поразительно, что "вакцины продолжают контролироваться и тестироваться даже после получения разрешения...". Эти "разрешения" являются всего лишь условными разрешениями и должны ежегодно продлеваться до окончательного утверждения (см. ниже).

Продление условных разрешений на вакцины Covid-19

Соответствующие документы, упомянутые ниже и доступные для скачивания, можно найти в разделе "Процедуры Европейской комиссии" по соответствующей ссылке "Исполнительное решение Комиссии" в виде ZIP-файла, нажав на соответствующую ссылку Значок документа в правой колонке.

Первый символ означает "Решения" (ZIP-файл начинается с "дек", второй - для "Приложения", что соответствует "anx". Окончание имени файла распакованных файлов представляет собой сокращение языка (de - немецкий)

Во (второй) колонке "Тип процедуры", например, есть записи, касающиеся "Ежемесячное обновление" (обновленная информация от производителя о препарате, побочных эффектах и т.д.), "Исправление" (исправления перевода), "Ректификационное решение" (решения о защите коммерциализации, продлении срока действия), и "Ежегодное продление" (продление условного разрешения).

Комирнаты - БионТех/Пфайзер

Европейская комиссия в Брюсселе объявила 3 ноября 2021 года с документом C(2021) 7992 (окончательный вариант)сайт Выполнение решения Комиссии с 03.11.2021, "относительно ежегодного продления условного разрешения на маркетинг лекарственного препарата для применения у человека "Комирнаты - Тозинамеран, мРНК-вакцина COVID-19 (нуклеозид-модифицированная)", выданного решением C(2020) 9598(окончательное), и внесения изменений в это решение", с: "Условное разрешение, предоставленное решением C(2020) 9598(окончательное) от 21 декабря 2020 года, продлевается.“

Spikevax - Moderna

Европейская комиссия в Брюсселе объявила 4 октября 2021 года с документом C(2021) 7305 (окончательный вариант)сайт Выполнение решения Комиссии с 04.10.2021, "относительно ежегодного продления условного разрешения на маркетинг лекарственного препарата для применения у человека "Спайвакс - мРНК-вакцина COVID-19 (нуклеозид-модифицированная)", выданного решением C(2020) 94(final), и внесения изменений в это решение", с: "Условное разрешение, предоставленное решением C(2021) 94(final) от 6 января 2021 года, продлевается.“

Вакшевира - АстраЗенека

Европейская комиссия в Брюсселе объявила 9 ноября 2021 года, опубликовав документ C(2021) 8206 (окончательный вариант)сайт Выполнение решения Комиссии с 09.11.2021, "относительно ежегодного продления условного разрешения на маркетинг лекарственного препарата для применения у человека "Вакшевира - мРНК-вакцина COVID-19 (нуклеозид-модифицированная)", выданного решением C(2020) 698(final), и внесения изменений в это решение", с: "Условное разрешение, предоставленное решением C(2021) 698(final) от 29 января 2021 года, продлевается.“

Вакцина Ковид-19 - Янссен

В настоящее время с документом C(2021) 1763 (окончательный вариант) только Выполнение решения Комиссии для условного разрешения вакцины с 11 марта 2021 года.

На сайте Статья 4 гласит: "Разрешение действует в течение одного года с даты уведомления о настоящем решении".

Определения Института Пауля Эрлиха (PEI) по вакцинам COVID-19

Ссылки на версии от 15/08/2021 и 07/09/2021 доступны через WayBackMachine (https://web.archive.org) сохранены архивные страницы, а текущая версия от 23/09/2021 * по ссылке на Оригинальная страница PEI. Там же публикуются "Письма красной руки", выпускаемые фармацевтическими компаниями, а также здесь доступны для скачивания.

Все перечисленные сайты доступны здесь в формате PDF.

15.08.2021 - "Вакцины COVID-19 защищают от "инфекций, вызванных вирусом SARS-CoV-2." (Сайт как Скачать в формате PDF)

07.09.2021 - "Вакцины COVID-19 защищают от тяжелого течения инфекции, вызванной вирусом SARS-CoV-2.“ (Сайт как Скачать в формате PDF)

23.09.2021 * - "Вакцины COVID-19 показаны для активной иммунизации с целью профилактики заболевания COVID-19, вызванного вирусом SARS-CoV-2.“ (Сайт как Скачать в формате PDF)

Наш мир в данных - Ковид-19, прививки, смертность

На сайте Наш мир в данных Университета Джона Хопкинса предоставляет официально собранные данные по различным темам по всему миру, включая следующую статистику по Германии:

Ссылка на статистику - Доля людей, получивших хотя бы одну дозу вакцины COVID-19

Ссылка на статистику - Кумулятивные подтвержденные случаи заболевания COVID-19 на миллион человек

Ссылка на статистику - Кумулятивная смертность от COVID-19 на миллион человек

Совет Европы - Резолюция 2361/2021

В своей резолюции, озаглавленной Вакцины Covid-19: этические, юридические и практические соображения рекомендации, в которых, в частности, говорится о справедливом распределении вакцин, добровольности вакцинации и недопущении дискриминации людей, которые по каким-либо причинам не хотят проходить вакцинацию.

"7.3.1. обеспечить информирование граждан о том, что вакцинация не является обязательной
и чтобы никто не подвергался политическому, социальному или иному давлению в отношении вакцинации.
если он не желает делать это сам".

"7.3.2 обеспечить, чтобы никто не подвергался дискриминации из-за того, что он не был вакцинирован, из-за возможного риска для здоровья или из-за того, что он не хочет быть вакцинированным".

Поскольку Совет Европы не обладает законодательными полномочиями, эти рекомендации не являются юридически обязательными ни для одной из стран-членов.

Из этих рекомендаций нельзя вывести ни запрет на обязательную вакцинацию, ни дискриминацию - даже если это было бы желательно в интересах ответственных граждан...

вирус Марбург

С начала 2021 года появляется все больше и больше статей о вирусе Марбург. Например, 25 февраля 2021 года была опубликована статья Публикация от Elsevier Inc. в Национальная библиотека медицины.

Чуть менее двух месяцев спустя, 22 апреля 2021 года, в заголовке ГАВИ Альянс по вакцинам „Следующая пандемия: Марбург?“

Уже в 2018 году Primerdesign Ltd. тест ПЦР "Вирусный белок 35 (VP35) гена Марбургвируса genesig Standard Kit„.

Хотя вирус Марбург, который был впервые В 1967 году описаныn - родственник вируса Эбола, но 376 смертей в то время и только 16 с 2005 года были очень ограниченными.

На этом фоне чрезмерное стремление разработать вакцину против вируса Марбург кажется непонятным. RiVax® через Солигеникс Инк.. Поспешное решение обойти обычные фазы испытаний 1, 2 и 3 в соответствии с рекомендациями FDA по тестированию на животных дает пищу для размышлений.

22 сентября 2021 года Киран Моррисси, Дублин, Ирландия, подводит итог своим размышлениям на эту тему здесь вместе.

Юридическое заключение о непрямой обязательной вакцинации

В 111-страничном Юридическое заключение от 4 октября 2021 года профессор д-р Дитрих Мурсвик, взвесив все аспекты, подлежащие рассмотрению, приходит к следующему краткому выводу: "Дискриминация невакцинированных лиц в рамках правил доступа к общественной жизни и в рамках карантинных правил нарушает основные права пострадавших и является неконституционной".

Статья_Ли
Больницы должны нанимать, а не увольнять медсестер с естественным иммунитетом

Немецкий перевод

ПО АДРЕСУ МАРТИН КУЛЛЬДОРФ   1 ОКТЯБРЯ 2021 ГОДА   ИСТОРИЯ, ПОЛИТИКА, ОБЩЕСТВЕННОЕ ЗДОРОВЬЕ, ОБЩЕСТВО   4 МИНУТЫ

Среди множества удивительных событий, произошедших во время пандемии, самым потрясающим стал вопрос о наличии естественного приобретенного иммунитета после того, как человек переболел болезнью Ковида. 

Мы понимаем, что такое естественный иммунитет, по крайней мере, со времен Афинская чума в 430 году до нашей эры. Вот Фукидид:

И все же больше всего сочувствия больные и умирающие находили у тех, кто оправился от болезни. Они знали, что это такое, на собственном опыте и не боялись за себя; ведь на одного и того же человека никогда не нападали дважды - по крайней мере, со смертельным исходом. - Фукидид

Мы живем с эндемичными коронавирусами по меньшей мере сто лет, и к ним у нас есть длительный естественный иммунитет. Как и ожидалось, мы также обладаем естественным иммунитетом после болезни Ковид-19, поскольку, несмотря на широкую циркуляцию вируса, случаев повторного заражения с тяжелыми заболеваниями или смертью было крайне мало. 

Для большинства вирусов естественный иммунитет лучше, чем иммунитет, вызванный вакциной, и это справедливо и для Ковида. В лучшее исследование на сегодняшний деньВероятность симптоматического заболевания у вакцинированных была примерно в 27 раз выше, чем у людей с естественным иммунитетом, при этом диапазон колебаний составил от 13 до 57. При отсутствии смертей от Ковида в обеих группах, естественный и вакцинальный иммунитет хорошо защищает от смерти. 

В последнее десятилетие я тесно сотрудничаю с больничными эпидемиологами. Если роль врачей заключается в лечении пациентов и их оздоровлении, то задача больничного эпидемиолога - следить за тем, чтобы пациенты не заболели во время пребывания в больнице, например, не подхватили смертельный вирус от другого пациента или обслуживающего персонала. 

Для этого в больницах применяются различные меры, от частого мытья рук до полного Регалии инфекционного контроля при уходе за пациентом с лихорадкой Эбола. Вакцинация является ключевым компонентом этих усилий по контролю. Например, за две недели до операции на селезенке пациентам вводят пневмококковая вакцина для минимизации послеоперационных инфекций, а большинство клинического персонала ежегодно вакцинируется против гриппа.

Меры инфекционного контроля особенно важны для пожилых немощных пациентов больниц с ослабленной иммунной системой. Они могут заразиться и умереть от вируса, который большинство людей легко перенесет. Основная причина иммунизации медсестер и врачей против гриппа заключается в том, чтобы они не заражали таких пациентов.  

Как больницы могут наилучшим образом защитить своих пациентов от болезни Ковида? Это чрезвычайно важный вопрос, актуальный и для домов престарелых. Есть несколько очевидных стандартных решений, таких как разделение пациентов с болезнью Ковида и других пациентов, минимизация ротации персонала и предоставление большого отпуска по болезни для сотрудников с симптомами, похожими на болезнь Ковида. 

Еще одной целью должно стать привлечение персонала с максимально сильным иммунитетом против Covid, так как у них меньше шансов заразиться и распространить болезнь среди пациентов. Это означает, что больницы и дома престарелых должны активно стремиться нанимать персонал с естественным иммунитетом от предыдущего заболевания Covid и использовать таких сотрудников для работы с наиболее уязвимыми пациентами. 

Поэтому сейчас мы наблюдаем жесткую конкуренцию, когда больницы и дома престарелых отчаянно пытаются нанять людей с естественным иммунитетом. Хорошо, на самом деле, не. 

Вместо этого больницы увольняют медсестер и других сотрудников с более сильным естественным иммунитетом, оставляя на работе тех, у кого иммунитет слабее вызванного вакциной. Тем самым они предают своих пациентов, повышая риск внутрибольничных инфекций. 

Продвигая требования о вакцинации, главный медицинский советник Белого дома доктор Энтони Фаучи ставит под сомнение существование естественного иммунитета после болезни Ковида. При этом он следует примеру директора Центра по контролю и профилактике заболеваний Рошель Валенски, которая поставила под сомнение существование естественного иммунитета в публикации 2020 года Меморандум Опубликовано издательством "The Lancet. Введя обязательные вакцины, университетские больницы теперь также ставят под сомнение существование естественного иммунитета после болезни Ковида. 

Это поразительно. 

Я работаю в больнице Brigham and Women's Hospital в Бостоне, которая объявила, что все медсестры, врачи и другие медицинские работники будут уволены, если не сделают прививку Covid. На прошлой неделе я разговаривала с одной из наших медсестер. Она упорно трудилась, ухаживая за пациентами с "Ковидом", даже когда некоторые ее коллеги в страхе покинули больницу в начале пандемии. 

Неудивительно, что она заразилась, но потом выздоровела. Теперь у нее более сильный и длительный иммунитет, чем у вакцинированных администраторов больницы, которые увольняют ее за отсутствие прививок. 

Если университетские клиники не могут получить медицинские данные по фундаментальной науке об иммунитете, как мы можем доверять им другие аспекты нашего здоровья? 

Что дальше? Университеты, в которых будут задаваться вопросом, круглая Земля или плоская? Это, по крайней мере, принесет меньше вреда.

Мартин КулльдорфСтарший научный сотрудник Института Браунстоун, профессор медицины Гарвардской медицинской школы.
ku*******@********ne.org

Уголовные обвинения и уголовное преследование в комплексе BioNTech

Федеральному генеральному прокурору при Федеральном Верховном суде д-ру Питеру Франку

10.06.2021 г. г-н Тобиас Ульбрих, адвокат юридической фирмы Robert & Ulbrich, Otto Str. 12, 50859 Cologne, подал вышеупомянутое уголовное заявление и уголовный иск против "всех лиц, которые разработали ... экспериментальное вещество мРНК от BioNTech/Pfizer под названием "вакцина", произвели его, распространили, одобрили его для вакцинации и ввели его несведущим людям. Особенно против:

1-я Александра Кнауэр, Управляющий директор компании Knauer Wissenschaftliche Geräte GmbH, Hegauer Weg 38, 14163 Berlin, (производитель оборудования для производства липидных наночастиц)
2-й Васант Насасимхан, Генеральный директор компании Novartis AG, (обладатель патентов на липидные наночастицы AC - 0135 и AC 0159)
3 Джеймс Брэднер, Доктор медицинских наук, президент Института биомедицинских исследований "Новартис" (NIBR), разработчик липидов
4 Томас Д. Мэдден, доктор философии. Генеральный директор Acuitas Therapeutics, производителя липидов для Biontech 5 Йинг К. Там, Главный научный сотрудник Acuitas Therapeutics,
6-й Шон Семпл, Senio Директор предварительных клинических исследований
7 Д-р Дитмар Катингер, генеральный директор Donaustraße 99, 3400 Klosterneuburg, Австрия, (производитель и разработчик продукции в Biontech SE)
8 Профессор д-р Угур Сахин, генеральный директор компании BioNTech SE, An der Goldgrube 12, 55131 Майнц
9 Шон Маретт, генеральный директор и главный управляющий директор, BioNTech SE, Там же.
10 Д-р Серк Поэттинг, финансовый директор и главный операционный директор, BioNTech SE, Там же.
11 PD Dr Özlem Türeci, CMO, BioNTech SE, Там же.
12 Райан Ричардсон, генеральный директор, BioNTech SE, Там же.
13 Карин Самуш, Дермафарм АГ, Лиль-Даговер-Ринг 7, 82031 Грюнвальд (производитель)
14-й Хильде Ноймайер, Дермафарм АГ, Лиль-Даговер-Ринг 7, 82031 Грюнвальд (производитель) 15 Доктор Ханс-Георг Фельдмайер, Дермафарм АГ, Лиль-Даговер-Ринг 7, 82031 Грюнвальд (производитель)
16 Д-р Юрген Отт Дермафарм АГ, Лиль-Даговер-Ринг 7, 82031 Грюнвальд (производитель) 17 Марк Пфистер, Менеджер по производству Biontech в Novartis AG в Марбурге (производитель) 18 Доктор Сабина Бранд, Зигфрид Хамельн, Лангс Фельд 13, 31789 Хамельн, Германия (производитель)
19 Доктор Свен Реммербах, Бакстер Онкология ГмбХ, Кантштрассе 2, 33790 Галле/Вестфалия (производитель)
20 Доктор Фабрицио Гуиди, Председатель; Санофи-Авентис Дойчланд ГмбХ, Индустрипарк Хёхст, K703, Брюнингстр. 50, 65926 Франкфурт (производитель)
21 Доктор Маттиас БраунСанофи-Авентис Дойчланд ГмбХ
22-й Оливер Коененберг, Санофи-Авентис Дойчланд ГмбХ,
23 Эвелина Фрейтаг, Санофи-Авентис Дойчланд ГмбХ,
24 Профессор д-р Йохен Маас, Санофи-Авентис Дойчланд ГмбХ,
25 Профессор д-р ЧичутекПрезидент Института Пола Эрлиха, (нарушение обязанности контролировать и предупреждать, неспособность отозвать разрешение)
26 Профессор д-р ВиетсВице-президент Института Пола Эрлиха,
27 Доктор Келлер-СтаниславскиОтдел безопасности лекарственных препаратов и медицинских изделий Института Пауля Эрлиха.
28 Профессор д-р Хильдт, Руководитель отдела вирусологии Института Пауля Эрлиха
29 Профессор д-р ван ЗандбергенРуководитель отдела иммунологии Института Пауля Эрлиха
30. Доктор ХинцРуководитель отдела 3 и 4, терапевтические вакцины Института Пауля Эрлиха 31 Матиас Грооте, Представитель EMA в Европейском парламенте, Бергманнштрассе 37, 26789 Леер,
32-й Карл Бройх, Президент Федерального института лекарственных средств и медицинских изделий и представитель EMA в Германии, Kurt-Georg-Kiesinger-Alle 3, 53175 Bonn,
33. Миссис Эмер Кук, Президент EMA, Domenico Scarlattilaaan 6, 1083 HS Amsterdam,
34. Федеральный министр здравоохранения Йенс Шпан, Рохусштрассе 1, 53123 Бонн,
35. Профессор д-р Лотар Х. ВилерМожно загрузить из Института Роберта Коха,
36. Профессор д-р Кристиан Дростен, скачать через Институт Роберта Коха,
37 Билл и Мелинда Гейтс,
и др.

Кроме того, есть все неинформативные вакцинаторы в центрах вакцинации, которые вводили "вакцину" без указания статуса одобрения и последствий вакцинации, которые неизвестны нижеподписавшимся.

За геноцид, попытку геноцида, нарушение § 20 KrWKG и государственную измену федеральному правительству и т.д.„

Очень интересный полный текст (194 страницы). здесь и цитирует, в частности, историка доктора Пола Шрайера, который был указан в качестве свидетеля и "обобщил события последних 20 лет и описал влияние НПО (неправительственных организаций) на подготовку к пандемии".

Любекавакс - проф. д-р Винфрид Штокер, Любек

Статус 31 августа 2021 г.

Винфрид Штёкер родился в 1947 году в Верхней Лужице. Изучал медицину с 1967 по 1973 год в Вюрцбурге, получил докторскую степень в 1976 году, профессор Медицинского университета Тунцзи в Ухане с 1999 года, почетный профессор Университета Любека с 2011 года, основатель компании EUROIMMUN Medizinische Labordiagnostika AG 1987, специализируется на диагностике аутоиммунных заболеваний и аллергии, а также инфекционной серологии и молекулярной генетике.

Профессор д-р Штокер участвовал в разработке эффективной вакцины против SARS CoV2 на ранней стадии, сначала испытав ее на себе, затем сделав прививки членам своей семьи и, наконец, предоставив полученную вакцину своим сотрудникам.

Он описывает способ действия на своем Блог следующим образом (Цитировать):

Мы предполагаем, что коревая инфекция может быть эффективно предотвращена с помощью вакцинации. Сайт Любекская вакцинация Используется небольшой, индивидуальный, генетически сконструированный тривиальный антиген, который организму не нужно синтезировать самостоятельно, как в случае с методами, основанными на генном шаттле. Он вызывает образование в организме реципиента антител именно против тех структур вируса, с помощью которых он связывается с рецепторами ангиотензина-2 эндотелиальных клеток невакцинированных людей. Благодаря этой блокаде антитела предотвращают инфицирование клеток, и вирус не может закрепиться в организме.

Вакцинацию обычно проводят три раза: в первый день, затем через 14 дней и еще раз через четыре недели или около того. Концентрация антител измеряется через 14 дней, поскольку у нас нет официально установленной уверенности в том, что к этому времени иммунная защита уже сформировалась. Более 95% пациентов показывают высокую концентрацию антител класса иммуноглобулинов IgG против белков коронного шипа в конце, так что они, вероятно, невосприимчивы к короне. Пациентов с ослабленным иммунитетом ревакцинируют один или два раза двойной дозой - это можно определить только при исследовании сыворотки - и половина из них все равно достигает высоких титров. Кроме того, измерения показали, что антитела способны нейтрализовать (инактивировать) коронавирусы и что в трех четвертях случаев развивается Т-клеточный иммунитет.

Он также освещает тему производства и применения вакцин врачами в целом (Цитировать):

Это означает, что любой врач в Германии может смешать антиген с адьювантом (только теперь это вакцина) и на законных основаниях делать инъекции или вводить их индивидуально своим пациентам. Адьювант удерживает антиген и представляет его иммунной системе. Без адьюванта антиген распространился бы по всему организму и, таким образом, был бы разбавлен до неэффективности. По функциональным соображениям эти два компонента должны храниться отдельно и только что смешанными. Однако, согласно закону, врач не имеет права передавать (продавать) приготовленную им вакцину третьим лицам.

Источник поставки указан в его блоге:

medidoc GmbH
Якоб-Харингер-Штрассе 1
5020 Зальцбург
АВСТРИЯ

Электронная почта: в**@*****oc.uk
Номер телефона: +43 59333 2000

medidoc.uk
medidoc.us
medidoc.gmbh

UID: ATU33905904
Налоговое управление Зальцбурга 114/8583
Реестр компании: 45971F
Суд торгового реестра: Зальцбургский региональный суд

То, что эта вакцина еще не признана ЕС (по сравнению с экстренным одобрением мРНК и векторных препаратов), компенсируется тем, что она приводит к Т-клеточному иммунитету, аналогичному иммунитету выздоравливающих.

Т-клеточный иммунитет определяется и подтверждается соответствующим образом оборудованными лабораториями. Этот сертификат служит юридически обязательным доказательством иммунитета.

Пока выздоровевшие находятся в равных условиях с теми, кто прошел вакцинацию, с точки зрения различных ограничений и послаблений, эта вакцина является - теперь уже хорошо проверенной - альтернативой без сопоставимых побочных эффектов мРНК или векторных препаратов.

Вакцина BNT162b2: возможное неправильное прочтение кодонов, ошибки синтеза белка и аномалии альтернативного сплайсинга

Кира Смит

В научном Комментарий от 25 марта 2021 года, опубликована как препринт в AUTHOREA, загрузить можно по адресу PDF На английском языке освещаются возможные побочные эффекты вакцины BioNTec/Pfizer BNT162b2 и рассказывается об общем действии мРНК-вакцин. Перевод на немецкий язык приводится здесь:

Аннотация

Вакцина BNT162b2 против Covid-19 состоит из РНК, состоящей из 4284 нуклеотидов, разделенных на 6 участков, которые содержат информацию для создания фабрики S-образных белков, используемых Sars-CoV-2 (Covid-19) в качестве хозяина. Эти белки затем выводятся за пределы клетки и запускают иммунный ответ и выработку антител.

Проблема заключается в сильной модификации мРНК: урацил заменяется на Ψ (псевдоуридин), чтобы обмануть иммунную систему; буквы всех кодоновых триплетов заменяются на C или G, чтобы чрезвычайно увеличить скорость синтеза белка; замена некоторых аминокислот на пролин; добавление последовательности (3′-UTR) с неизвестной модификацией.

Эти нарушения могут вызвать серьезные сомнения в наличии ошибок в использовании кодонов. Возможная неправильная трансляция влияет на патофизиологию целого ряда заболеваний. Кроме того, вводимая мРНК - это пре-мРНК, которая может привести к образованию нескольких зрелых мРНК; это нарушения альтернативного сплайсинга, которые являются прямым источником серьезного долгосрочного ущерба для здоровья человека.

По сути, то, что получается, может быть не идентично белку S spike: просто ошибка в трансляционном декодировании, неправильное прочтение кодонов, производство разных аминокислот, а затем и белков наносит серьезный долгосрочный ущерб здоровью человека, хотя ДНК не изменяется, но в ядре, а не в цитоплазме, куда поступает измененная мРНК.

Однако в этом случае корреляция между скоростью синтеза и экспрессией белка с ошибками синтеза, а также механизм, который может влиять на трансляцию последовательности, остаются неясными, и многие исследования еще не проведены.

Введение

Информация о способе действия вакцины

Вакцина Sars-CoV-2 (Covid-19) компании BioNTec/Pfizer под названием BNT162b2, но также называемая Tozinameran или Comirnaty, содержит около 30 мкг РНК, которая вводится в виде липидной сферы в организм человека, в частности в цитоплазму клеток, но вне ядра (где находится ДНК); Эта РНК содержит модифицированную генетическую информацию (отсюда modRNA), то есть мРНК (мессенджерную РНК), которая содержит инструкции по созданию белковой фабрики, клоны белка S spike, то есть белка (и только белка, а не всего вируса), используемого Covid-19 для проникновения и заражения хозяина. После серийного производства рибосом они выводятся из клетки через липидную оболочку; таким образом, иммунная система идентифицирует эти белки как клеточных захватчиков и атакует их, вырабатывая антитела. Поэтому невозможно представить, что вакцина индуцирует Covid-19 или изменяет ДНК человека.

Заметки о синтезе белка

Перевод обычно делится на три этапа: Начало, продолжение и конец.

1. Рибосома связывается с мРНК на стартовом кодоне;
2. Полипептидная цепь удлиняется в одном направлении движения рибосомы путем последовательного добавления аминокислот;
3. Если найден стоп-кодон, полипептид высвобождается, и рибосома распадается.

Ошибки сборки и трансляции последовательностей

Преобразование последовательности мРНК в полипептид зависит от трансферной РНК (тРНК), которая переносит аминокислоты на рибосому. На рибосомах тРНК соединяется с мРНК посредством комплементарного сопряжения оснований между нуклеотидами кодонов мРНК и нуклеотидами антикодонов тРНК. Как только нужная тРНК связывается с кодоном, она переносит его аминокислоту на конец растущей полипептидной цепи.

Декодирование кодонов мРНК трансферными РНК (тРНК) в рибосоме происходит с помощью пары оснований Уотсон-Крик.

Общий уровень ошибок при репликации генома (примерно 10-8), по оценкам, примерно в 10 000 раз ниже, чем при синтезе белка (примерно 10-4), поэтому в большинстве случаев трансляция мРНК является ключевым процессом, вносящим погрешность в клеточный протеом. Несоответствие между частотой ошибок при репликации ДНК и трансляции мРНК может быть отчасти связано с тем, что репликация ДНК происходит на уровне отдельных нуклеотидов (с 41 = 4 возможными перестановками), в то время как механизм трансляции интерпретирует кодоны мРНК в триплеты (с 43 = 64 возможными перестановками)(1).

Эффективность механизма декодирования мРНК также в значительной степени регулируется смещением использования кодонов, которое характеризуется избыточным или недостаточным количеством синонимичных кодонов. Соответственно, оптимизация колебаний тРНК и использования кодонов в мРНК может значительно повысить эффективность и точность трансляции(1).

Пре- или посттрансляция мРНК может косвенно приводить к ошибкам синтеза белка во время транскрипции и посттрансляционного процессинга. Однако трансляционный механизм может напрямую способствовать неправильной трансляции через декодирование миссенс тРНК (приводящее к неправильной инкорпорации или считыванию стоп-кодона), неправильное лацилирование тРНК (приводящее к неправильному соединению тРНК с аминокислотами), перестановку кодонов или сдвиги кадров, вызванные рибосомной транслокацией(1).

Метод обследования

Анализ генетических последовательностей

Вакцина состоит из 4284 нуклеотидов, разделенных на 6 участков: cap - начало последовательности, начинающееся с двух нуклеотидов GA, ложно указывающих на то, что мРНК происходит из человеческой клетки и поэтому принимается; 5′ указывает направление трансляции, а UTR - область, где рибосома должна отдыхать, чтобы производить белки. В этом участке U урацил заменен молекулой 1-метил-3′-псевдоуридина, помеченной знаком Ψ, чтобы обойти иммунную систему и предотвратить деградацию только что вошедшей мРНК; однако этот фактор может привести к ошибкам в производстве белка. Несколько Ψ-синтаз участвуют в модификации определенных позиций, и дефекты некоторых из них связаны с заболеваниями человека(2).

Затем идет участок sig, известный как удлиненная стартовая последовательность сигнального пептида S-гликопротеина, информация которого необходима для того, чтобы вывести новообразованный белок из клетки через эндоплазматический ретикулум; опять же, чтобы РНК была воспринята иммунной системой, в триплеты нуклеотидов вносятся изменения: некоторые буквы, составляющие информацию, "виляют" другими (обычно третьей позиции), по-видимому, "безобидными синонимами" (в основном за счет увеличения количества букв C и G, которые кодируют скорость синтеза белка). Хотя они указывают на идентичные аминокислоты, эти два синонима не совсем одинаковы, по крайней мере с точки зрения перевода. Механические исследования показывают, что существуют тонкие, но существенные различия во взаимодействии каждого из них с соответствующей трансферной РНК (тРНК), различия, которые влияют как на скорость, так и на точность перевода.3 Хотя верно, что три буквы образуют кодон и более одного кодона кодируют одну и ту же аминокислоту, также верно, что непропорциональное увеличение скорости производства белка может привести к серьезным ошибкам перевода.

Кроме того, символы, составляющие последовательность, относящуюся к конструированию настоящего белка шипа S protein_mut, были изменены на большее количество C и G, которые можно добавить, соблюдая синонимы в стандартной таблице генетического кода, с заменой аминокислот лизина (AAA) и валина (GUU) на пролин (CUU), чтобы предотвратить разрушение сконструированного белка. В конце этой последовательности находятся 2 стоп-кодона. Не было полностью доказано, что при такой замене образуются те же самые элементы и что не возникает никаких ошибок в интерпретации.

3′-UTR (нетранслируемая область 3 First): Он должен указывать направление трансляции последовательности и усиливать синтез белка, однако многие его функции остаются неизвестными, поэтому проверить его безопасность невозможно. То, что известно, указано ВОЗ в следующем предложении: 3′ UTR для вакцины BioNTech/Pfizer был взят из "аминоконцевого усилителя расщепления (AES) мРНК и митохондриальной кодированной 12S рибосомальной РНК".

поли(А): Дойдя до конца последовательности, мы встречаем 30 А, затем 10-нуклеотидную связь GCAUAUGACU, за которой следуют еще 70 А, поскольку каждая мРНК может быть использована организмом многократно.
Когда А израсходован, мРНК деградирует.

Все это - запатентованные модификации для увеличения экспрессии белка, о которых ничего не известно о фактической трансляции, осуществляемой организмом.

Аномалии и другие ошибки при альтернативном сплайсинге

Другая связанная с этим проблема заключается в том, что одна и та же пре-мРНК может приводить к разным зрелым мРНК и, следовательно, к немного разным белкам (аномалии альтернативного сплайсинга). Было установлено, что изменение процесса синтеза белка является причиной развития и роста некоторых видов рака и других заболеваний без каких-либо изменений в ДНК.
Все сплайсинговые события, идентифицированные в трех генах серии PHT, связаны с потерей рамки считывания мессенджерной последовательности и введением кодона преждевременной терминации (PTC), который всегда расположен более чем на 50-55 нуклеотидов выше по течению от последнего экзон-экзонного соединения альтернативных транскриптов системы наблюдения за нонсенс-опосредованным распадом мРНК (NMD). Для slc15a4/PHT1 человека и крысы это было показано в экспериментах по ингибированию NMD в различных клеточных линиях, в которых экспрессия альтернативных вариантов канонических транскриптов всегда стабилизировалась после ингибирования(4).

Выводы

Возможные долгосрочные риски для здоровья человека

Можно сказать, что последовательность, помимо того, что она не оптимизирована, вызывает сильные сомнения в наличии ошибок в использовании кодонов. Можно предположить, что источником ошибки при сборке генной последовательности мРНК может быть чрезмерная модификация, направленная на экстремальное увеличение экспрессии белка.

Изменение доступности тРНК может приводить к нейродегенеративным заболеваниям (Ishimura et al., 2014), а повышение уровня специфических тРНК способствует метастазированию, повышая стабильность транскриптов, обогащенных их когнатными кодонами(5).

Неправильные транслокации имеют очень серьезные последствия для патофизиологии целого ряда заболеваний, включая рассеянный склероз, нейродегенерацию, митохондриальную миопатию, энцефалопатию, молочнокислый ацидоз, инсультоподобные эпизоды, болезнь Паркинсона и рак (генез, ускорение роста и метастазирование)(6).

Корреляция между повышенной скоростью синтеза белка на 100 % и ошибками трансляции последовательности, а также механизм, влияющий на производство аминокислот, пока остаются в тени, поскольку многие эксперименты еще не проведены.

В принципе, можно сказать, что код общей последовательности внутренне несбалансирован, слишком сильно по сравнению с естественным вирусным аналогом, и слишком сильно, чтобы сказать, что человеческий организм воспроизводит именно белки S-шипа, как точную копию, рискуя нанести серьезный долгосрочный ущерб здоровью человека, в дополнение к неадекватной иммунизации.

То, что получается из этой последовательности, далеко не точно определено, но это записано в генах каждого человека, через рибосомный профиль, как он переводится и что производится, таким образом, принося пользу или вред.

Ссылки

1. Ou X, Cao J, Cheng A, Peppelenbosch MP, Pan Q (2019) Ошибки при трансляционном декодировании: шатание тРНК или неправильная инкорпорация? PLoS Genet 15(3): e1008017. https://doi.org/10.1371/journal.pgen.1008017
2 Биомолекулы 2020, 10(5),729; https://doi.org/10.3390/biom10050729
3 Робинсон Р. (2014) Какой синоним кодона лучше? Это может зависеть от того, что входит в меню. PLoS Biol 12(12): e1002014. doi:10.1371/journal.pbio.1002014
4. андрис, О. (2015). модификация мРНК и стратегии доставки для создания платформы безопасной и эффективной генной терапии. Университет Гента. Факультет ветеринарной медицины, Мерельбеке, Бельгия.
5. eLife 2019;8:e45396 DOI: 10.7554/eLife.45396
6 Мафалда Сантос, Патрисия М. Перейра, А. София Варанда, Джоана Карвальо, Мафалда Азеведо, Дениза Д. Mateus, Nuno Mendes, Patricia Oliveira, Fábio Trindade, Marta Teixeira Pinto, Renata Bordeira-Carriço, Fátima Carneiro, Carl Rui Vitira .ino, Olive & Manuel AS Santos (2018) Codon misreading tRNAs promote tumour growth in mice, RNA Biology, 15:6, 773-786, DOI: 10.1080/15476286.2018.1454244

Исследования подтверждают перепрограммирование иммунной системы с помощью мРНК и векторных вакцин

Стефани Сенефф из Массачусетского технологического института и Грег Най из отделения натуропатической онкологии в Портленде, группа исследователей из Центра изучения инфекций имени Гельмгольца, Медицинской школы Ганновера, Боннского университета, а также врачи и исследователи из Медицинского центра Эразма в Роттердаме пришли к тем же выводам.

Суть исследований заключается в снижении иммунной системы человека, индуцированной веществами мРНК, в отношении так называемых инструментальных рецепторов. Они отвечают за распознавание структур бактериальных и вирусных патогенов.
Исследование, проведенное Стефани Сенефф и.а. и Исследовательские группы в Институте Гельмгольца доступны для скачивания здесь.

Также PEI (Paul-Ehrlich-Institut) уже указывает на антитела, которые увеличивают вирусную нагрузку по состоянию на 30.07.2020(!) (веб-сайт Скачать в формате PDF):

"Антитела, усиливающие инфекцию, не уничтожают или нейтрализуют вирус, а позволяют ему связываться с так называемыми Fcγ-рецепторами, которые находятся, в частности, на специализированных иммунных клетках (так называемых фагоцитах). Это, в свою очередь, позволяет захватить вирус этими клетками, где вирусы могут размножаться. Этот процесс может привести к увеличению вирусной нагрузки".

Дополнительным осложнением является повышенный риск тромбоза, вызванный введением мРНК и векторных веществ. Вероятность повышенного риска тромбоза можно оценить и определить микроскопически с помощью теста на D-димер.
Контрольное значение для взрослых - 4,0 мг/л - как сильно повышенные.

Исследование Массачусетского технологического института

- Аннотация (DE-перевод)

"В рамках операции Warp Speed в США были запущены две мРНК-вакцины от компаний Pfizer и Moderna. Предварительные данные показали высокую эффективность этих двух вакцин, что помогло узаконить разрешение на экстренное использование (EUA), выданное FDA.
EUA (разрешение на экстренное использование) от FDA. Однако исключительно быстрая разработка этих вакцин в ходе контролируемых испытаний и их массовое применение вызывают многочисленные сомнения в безопасности. В этом обзоре мы сначала подробно описываем технологию, лежащую в основе этих вакцин. Затем мы обсудим компоненты этих вакцин и предполагаемый биологический ответ на них, включая производство самого белка spike, а также их потенциальную связь с широким спектром острых и долгосрочных патологий, таких как заболевания крови, нейродегенеративные заболевания и аутоиммунные заболевания. В контексте этих потенциально вызываемых патологий мы обсуждаем важность аминокислотных последовательностей в белке спайк, которые связаны с прионным белком. Мы также даем краткий обзор
Исследования, показавшие возможность "пролития" белка шипицы - переноса белка от вакцинированного к невакцинированному человеку
невакцинированного человека, что вызывает симптомы у последнего. Наконец, мы затронули часто обсуждаемый вопрос, а именно: могут ли эти вакцины изменять ДНК вакцинированных. Хотя исследований, которые бы окончательно доказали это, не существует, мы представляем правдоподобный сценарий, подкрепленный уже установленными путями трансформации и переноса генетического материала, согласно которому введенная мРНК может в конечном итоге быть включена в ДНК половых клеток и передаваться из поколения в поколение. В заключение мы приводим наши рекомендации по мониторингу, чтобы уточнить долгосрочное воздействие этих экспериментальных препаратов и лучше оценить истинное соотношение риска и пользы этих новых технологий.„

…

- Заключение (перевод DE)

„Экспериментальные мРНК-вакцины, как говорят, обладают огромными преимуществами, но они также несут в себе риск трагических и даже катастрофических непредвиденных последствий. МРНК-вакцины против SARS-CoV-2 были представлены с большой помпой, но многие аспекты их широкого применения вызывают опасения. Мы рассмотрели некоторые, но не все из них, и хотели бы подчеркнуть, что эти опасения потенциально серьезны и могут не проявиться в течение многих лет или даже поколений. Чтобы избежать негативных рисков, описанных в этой статье, мы рекомендуем, как минимум, рассмотреть следующие результаты исследований и рекомендации по мониторингу:

• Национальное исследование подробных данных о побочных явлениях, связанных с мРНК-вакцинами, при широкой финансовой поддержке и далеко за пределами первых недель после вакцинации.
• Повторные тесты на аутоантитела в вакцинированной популяции. Исследуемые аутоантитела
  может быть стандартизирован и должен быть основан на ранее зарегистрированных антителах и аутоантителах, которые могут быть вызваны белком-шипом. К ним относятся аутоантитела против фосфолипидов, коллагена, актина, тиреопероксидазы (ТПО), основного белка миелина, тканевой трансглутаминазы, трансглутаминазы и, возможно, других.
• Иммунологическое профилирование, связанное с балансом цитокинов и сопутствующими биологическими эффектами. Тесты должны включать как минимум ИЛ-6, ИНФ-α, D-димеры, фибриноген и С-реактивный белок.
• Исследования, сравнивающие популяции, вакцинированные мРНК-вакцинами и не вакцинированные, чтобы подтвердить ожидаемый более низкий уровень инфицирования и более легкие симптомы в группе вакцинированных, а также сравнить показатели аутоиммунных заболеваний, которые были зарегистрированы.
• Исследования, направленные на оценку возможности заражения невакцинированного человека вакциноспецифическими формами белков шипинга от вакцинированного человека, находящегося в непосредственной близости от него.
• Исследования in vitro для выяснения возможности поглощения наночастиц мРНК сперматозоидами и превращения их в плазмиды кДНК.„
  
  

Исследование Института Гельмгольца

- Резюме (перевод DE)

„Вакцина BNT162b2 компании Pfizer/BioNTech на основе мРНК была первой зарегистрированной вакциной COVID-19 и показала свою эффективность в профилактике инфекций SARS-CoV-2 до 95 %.
Мало что известно о широком действии нового класса мРНК-вакцин, в частности о том, оказывают ли они комбинированное воздействие на врожденные и адаптивные иммунные реакции. Здесь мы подтвердили, что вакцинация здоровых людей вакциной BNT162b2 вызывает эффективный гуморальный и клеточный иммунитет против нескольких вариантов SARS-CoV-2. Интересно, что вакцина BNT162b2 также модулировала выработку воспалительных цитокинов клетками врожденного иммунитета после выработки воспалительных цитокинов клетками врожденного иммунитета как при стимуляции специфическими (SARS-CoV-2), так и неспецифическими (вирусными, микотическими и бактериальными) стимулами.
Ответ клеток врожденного иммунитета на лиганды TLR4 и TLR7/8 был ниже после вакцинации BNT162b2, а цитокиновый ответ, вызванный грибами, был сильнее. В заключение следует отметить, что мРНК-вакцина BNT162b2 приводит к сложному функциональному перепрограммированию врожденных иммунных реакций, что необходимо учитывать при разработке и использовании этого нового класса вакцин.

…

В целом, наши данные показывают, что вакцина BNT162b2 оказывает влияние как на адаптивную, так и на врожденную ветви иммунитета, и что это влияние различно для разных штаммов SARS-CoV-2.
Интересно, что вакцина BNT162b2 также вызывает перепрограммирование врожденного иммунного ответа. Это следует принимать во внимание: В сочетании с сильным адаптивным иммунным ответом это может способствовать более сбалансированному воспалительному ответу во время инфекции COVID-19, или же это может способствовать снижению врожденного иммунного ответа на вирус. Вакцина BNT162b2, безусловно, защищает от COVID-19, но продолжительность этой защиты пока неизвестна, и можно предположить, что эти знания могут быть включены в будущие поколения вакцины для улучшения диапазона и продолжительности защиты. Полученные нами результаты необходимо подтвердить путем проведения более масштабных когортных исследований с использованием популяций различного происхождения, а также изучить возможные взаимодействия между BNT162b2 и другими вакцинами.„

Буквы красной руки

Красные письма" выпускаются фармацевтическими компаниями, в частности, в случае возникновения ранее неизвестных рисков, связанных с лекарствами, или отзыва партий лекарств по соображениям безопасности.

Это относится и ко всем фармацевтическим препаратам (вакцинам) COVID-19:

БионТех/Пфайзер

• 19.07.2021 – https://csiag.de/wp-content/uploads/2021/09/Rote-Hand-Moderna-BioNTech-19.07.2021.pdf

Янссен

• 26.04.2021 – https://csiag.de/wp-content/uploads/2021/09/Rote-Hand-Janssen-26.042021.pdf
• 19.07.2021 – https://csiag.de/wp-content/uploads/2021/09/Rote-Hand-Janssen-19.07.2021.pdf

Астра Зенека

• 24.03.2021 – https://csiag.de/wp-content/uploads/2021/09/Rote-Hand-AstraZeneca-24.03.2021.pdf
• 02.06.2021 – https://csiag.de/wp-content/uploads/2021/09/Rote-Hand-AstraZeneca-02.06.2021.pdf
• 23.06.2021 – https://csiag.de/wp-content/uploads/2021/09/Rote-Hand-AstraZeneca-23.06.2021.pdf

Медицинская информация / памятка для вакцин COVID

Каждая партия вакцин поставляется с вкладышем в упаковку и медицинским информационным листком. Они должны стать основой информации перед проведением вакцинации.

Медицинская информация производителя представлена здесь в виде ссылки на EMA и ссылки для скачивания в формате PDF. Листовки с упаковкой в настоящее время не доступны или больше не доступны онлайн.

• Комирнаты - БиоНТех
  • Вкладыш в упаковку (PDF)
  • Медицинская информация (Приложение I - EMA) - Информация для пользователей – (PDF)
    
• Джонсон и Джонсон / Янссен
  • Вкладыш в упаковку (PDF)
  • Медицинская информация (Приложение I - EMA) - (PDF)
    
• Spikevax - Moderna
  • Вкладыш в упаковку (PDF)
  • Медицинская информация (Приложение I - EMA) - (PDF)
    
• Ваксцеврия - АстраЗенека
  • Вкладыш в упаковку (PDF)
  • Медицинская информация (Приложение I - EMA) - Медицинская информация (Производитель) - (PDF)
    

В информации, предоставленной вышеупомянутыми производителями, цель вакцины преимущественно определяется как "профилактика заболевания COVID". Полная защита от заражения COVID в будущем не гарантируется.

AstraZeneca также ссылается на тему "Религиозные убеждения":

"Каждый должен сам решать, совместимо ли его лечение с его религиозными убеждениями".

Результаты вскрытия человека, умершего вскоре после вакцинации BioNTech

Под названием Первый случай посмертного исследования у пациента, вакцинированного против SARS-CoV-2 16 апреля 2021 года был опубликован результат вскрытия, проведенного в сотрудничестве с Институтом патологии, Университетской клиникой OWL Университета Билефельда, Кампус Липпе, Рентгенстр. 18, D-32756 Детмольд и Институтом патологии, KRH Hospital Nordstadt, Ганновер, Германия. здесь доступна в формате PDF в оригинале.

Полный текст приводится в переводе на немецкий язык:

Резюме

Ранее бессимптомный 86-летний мужчина получил первую дозу вакцины COVID-19 с мРНК BNT162b2. Он умер через 4 недели от острой почечной и дыхательной недостаточности. Хотя у него не было симптомов, характерных для COVID-19, перед смертью он сдал положительный анализ на SARS-CoV-2. Связывание антигена с белком шипа (S1) показало значительную концентрацию иммуноглобулина (Ig) G, в то время как нуклеокапсидные IgG / IgM не были вызваны. Причиной смерти на вскрытии были названы острая бронхопневмония и тубулярная недостаточность, однако мы не обнаружили никаких характерных морфологических признаков COVID-19. Посмертное молекулярное картирование с помощью полимеразной цепной реакции в реальном времени выявило соответствующие пороги циклов SARS-CoV-2 во всех анализируемых органах (ротоглотка, слизистая обоняния, трахея, легкие, сердце, почки и головной мозг), кроме печени и обонятельной луковицы. Эти результаты могут свидетельствовать о том, что первая вакцинация вызывает иммуногенность, но не стерильный иммунитет.

Мы сообщаем о 86-летнем мужчине, проживающем в доме престарелых, который был вакцинирован против SARS-CoV-2. В анамнезе были системная артериальная гипертензия, хроническая венозная недостаточность, деменция и рак предстательной железы. 9 января 2021 года мужчина получил липидную наночастицу в форме нуклеозид-модифицированной РНК-вакцины BNT162b2 в дозе 30 мкг. В этот день и в последующие 2 недели у него не было никаких клинических симптомов (табл. 1). На 18-й день он был госпитализирован в связи с обострением диареи. Поскольку у него не было клинических признаков COVID-19, он не был изолирован в специальном учреждении. Лабораторные анализы выявили гипохромную анемию и повышенный уровень креатинина в сыворотке крови. Тест на антиген и полимеразная цепная реакция (ПЦР) на SARS-CoV-2 были отрицательными.

Для дальнейшего выяснения причины диареи были проведены гастроскопия и колоноскопия. В частности, колоноскопия выявила язвенное поражение левого изгиба толстой кишки, которое гистологически было диагностировано как ишемический колит. ПЦР-анализ биоптатов по ранее описанному методу (Kaltschmidt et al., 2021) показал отрицательный результат на SARS-CoV-2. Лечение было поддерживающим: месалазин и внутривенное введение железа. Впоследствии состояние пациента ухудшилось с развитием почечной недостаточности. На 24-й день у пациента, находившегося в той же больничной палате, что и наш пациент, тест на SARS-CoV-2 оказался положительным. На 25-й день наш пациент получил положительный результат на SARS-CoV-2 с помощью ПЦР в реальном времени (RT-PCR), причем низкий порог цикла (Ct) указывал на высокую вирусную нагрузку. При дальнейшем анализе образца мазка не было обнаружено мутантных вариантов SARS-CoV-2 - B.1.1.7, B.1.351 или B.1.1.28.1. В совокупности это говорит о том, что пациент был инфицирован от пациента в его больничной палате. У нашего пациента появились лихорадка и дыхательная недостаточность, а при аускультации легких были обнаружены трещины. Несмотря на введение дополнительного кислорода (2 литра в минуту) и антибиотикотерапию цефтриаксоном, пациент умер от острой почечной и дыхательной недостаточности на следующий день.

Оценка иммуногенности путем измерения антигенсвязывающего глобулина (Ig) G белка шипа (S1) в образцах сыворотки, полученных на 25-й день, показала наличие антительного ответа (8,7 Ед/мл, референсное значение 1,0 Ед/мл; Roche ECLIA™). Эти результаты указывают на то, что у пациента уже развилась соответствующая иммуногенность в результате вакцинации.

Вскрытие показало острую двустороннюю бронхопневмонию с абсцессами, иногда окруженными бактериальными кокками (рис. 1). Общепринятых проявлений COVID-19-ассоциированного пневмонита обнаружено не было. В сердце обнаружена гипертрофия бивентрикуляров (вес 580 г), гистологически диагностирована ишемическая кардиомиопатия. В сердце и в меньшей степени в легких выявлен амилоидоз транстиретинового типа. В почках выявлено хроническое поражение с артериолосклерозом и интерстициальным фиброзом, а также острая почечная недостаточность с гидропической тубулярной дегенерацией. При обследовании головного мозга был выявлен псевдокистозный некроз ткани левой теменной области, который был диагностирован как старый инфарктный очаг.

Приведенная выше иллюстрация означает здесь можно скачать в формате PDF с высоким разрешением.

Мы провели молекулярное картирование 9 различных анатомических участков парафинированных тканей, фиксированных в формалине, как описано ранее (Kaltschmidt et al., 2021). РНК выделяли из парафиновых срезов с помощью Maxwell RSC (Promega, Madison, WI, USA). Мультиплексный RT-PCR анализ нацелен на 2 независимых гена генома SARS-CoV-2 (набор Fluorotype SARS-CoV-2 plus; HAIN/Bruker, Nehren, Германия): РНК-зависимой РНК-полимеразы (мишень 1) и нуклеопептида (мишень 2). Отрицательное значение отсечения составляло Ct >45. Мы проанализировали 9 различных образцов тканей на предмет известных и значимых путей распространения вируса в организме человека (рис. 1). Чтобы избежать перекрестного загрязнения, каждый образец непосредственно встраивали в отдельные тканевые кассеты и фиксировали отдельно в фосфатно-солевом буферном формалине 4%. Мы обнаружили вирусную РНК почти во всех анализируемых органах, кроме печени и обонятельной луковицы (рис. 1).

Насколько известно авторам, подробное исследование вскрытия, включающее молекулярное картирование вируса у пациента, вакцинированного против SARS-CoV-2, с положительным тестом на SARS-CoV-2 после вакцинации, не проводилось. Мы предполагаем, что однократная вакцинация РНК-вакциной BNT162b2b2 вызвала значительную иммуногенность, что нашло отражение в зарегистрированных уровнях нейтрализующих IgG в сыворотке крови на основе белка шипа. За несколько недель до вакцинации, во время вакцинации (день 1) и незадолго до смерти (день 24) у пациента не было клинических симптомов, обычно приписываемых COVID-19. Кроме того, анализ крови не выявил титра IgM, который обычно наблюдается через 7-14 дней после появления симптомов (Kim et al., 2020). Однако тест на SARS-CoV-2 у пациента оказался положительным. Как значение ct, измеренное в мазках из носоглотки, так и значения, измеренные в образцах аутопсии с парафиновой фиксацией в формалине, указывают на вирусную нагрузку и предполагают трансмиссивность. Поскольку наш пациент умер примерно через 2 дня после первого положительного результата теста на SARS-CoV-2, мы предполагаем, что данные молекулярного картирования отражают раннюю стадию вирусной инфекции. Ранняя стадия инфекции также может объяснить, почему различные регионы, такие как обонятельная луковица и печень, не были (пока) затронуты системным распространением вируса.

Мы пока не наблюдали характерных морфологических признаков COVID-19, о которых сообщалось в обширных морфологических исследованиях аутопсий (Schaller et al., 2020, Edler et al., 2020, Ackermann et al., 2020). Мы не обнаружили типичных признаков диффузного альвеолярного повреждения легких, но выявили обширную острую бронхопневмонию, возможно, бактериального происхождения. Мы пришли к выводу, что пациент умер от бронхопневмонии и острой почечной недостаточности.

Наши результаты согласуются с предыдущими данными, полученными на животных моделях, согласно которым иммунизация против SARS-CoV-2 путем вакцинации, по-видимому, снижала тяжесть патогенеза, особенно в отношении тяжелого заболевания легких, в то время как вирусная РНК сохранялась в назальных мазках (Van Doremalen et al., 2020, Vogel et al., 2021). Недавно Амит и др. (2021) опубликовали результаты клинического исследования среди медицинских работников с использованием вакцины BNT162b2, которые показали значительное раннее снижение уровня инфицирования SARS-CoV-2 и частоты симптоматических COVID-19 после введения первой дозы вакцины.

Среди наиболее важных побочных эффектов у пациентов, вакцинированных против SARS-CoV-2, преобладают местные эффекты, а тяжелые системные реакции описываются редко (Yuan et al., 2020). Однако недавние сообщения о повышенном риске образования тромбов, в частности тромбоза церебрального венозного синуса в случае вакцины Oxford-AstraZeneca (Mahase, 2021), вызвали дискуссию о безопасности вакцины COVID-19 в целом. Необходимо провести всесторонний анализ данных вскрытий, чтобы получить более подробную информацию о фатальных побочных эффектах и смертях, связанных с вакцинацией.

Таким образом, результаты нашего исследования аутопсии пациента с мРНК-вакциной подтверждают мнение о том, что иммуногенность может быть вызвана уже первой вакцинацией против SARS-CoV-2, в то время как стерильный иммунитет развит недостаточно.

Благодарности

Мы благодарим Ральфа Боде и Надин Вебер (Университетская клиника OWL Билефельдского университета, кампус Липпе, Детмольд) за квалифицированную техническую поддержку.

Ссылки

1. Ackermann M., Verleden S.E., Kuehnel M., Haverich A., Welte T., Laenger F. Эндотелиалит легочных сосудов, тромбоз и ангиогенез в Covid-19. N Engl J Med. 2020;383:120-128. doi: 10.1056/NEJMoa2015432. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
2. Амит С., Регев-Йохай Г., Афек А., Крейсс Й., Лешем Э. Раннее снижение частоты SARS-CoV2-инфекции и COVID-19 у реципиентов вакцины BNT162b2. Ланцет. 2021;397(10277):875-877. doi: 10.1016/S0140-6736(21)00448-7. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
3. Эдлер К., Шредер А.С., Аепфельбахер М., Фитцек А., Хайнеманн А., Хайнрих Ф. Умершие от инфекции SARS-CoV2 - аутопсийное исследование первых последовательных 80 случаев в Гамбурге, Германия. Int J Legal Med. 2020;134:1275-1284. doi: 10.1007/s00414-020-02336-7. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
4. Кальтшмидт Б., Фитцек А.Д.Е., Шедлер Й., Фёрстер К., Кальтшмидт К., Хансен Т. Печеночная васкулопатия и восстановительные реакции печени в фатальных случаях COVID-19. Clin Gastroenterol Hepatol. 2021 doi: 10.1016/j.cgh.2021.01.044. In press. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
5. Kim D.S., Rowland-Jones S., Gea-Mallorqui E. Вызовет ли инфицирование SARS-CoV-2 длительный защитный или стерилизующий иммунитет? Последствия для стратегий вакцинации. Front Immunol. 2020;11:571481. doi: 10.3389/fimmu.2020.571481.eCollection2020. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
6. Махазе Е. Ковид-19: вакцина AstraZeneca не связана с повышенным риском образования тромбов, считает Европейское медицинское агентство. BMJ. 2021;372:n774. doi: 10.1136/bmj.n774. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
7. Шаллер Т., Хиршбюль К., Буркхардт К., Браун Г., Трепель М., Мэркл Б. Посмертные исследования пациентов с COVID19. JAMA. 2020;323:2518-2520. doi: 10.1001/jama.2020.8907.Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
8. Ван Доремален Н., Ламбе Т., Спенсер А., Белидж-Раммерсдорфер С., Пурушотам Дж.Н., Порт Дж.Р. Вакцина ChAdOx1 nCoV-19 предотвращает SARS-CoV-2 пневмонию у макак-резусов. Природа. 2020;586:578-582. doi: 10.1101/2020.05.13.093195. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
9. Фогель А.Б., Каневский И., Че Й., Свонсон К.А., Муик А., Вормер М. Иммуногенные вакцины BNT162b защищают макак-резусов от SARS-CoV-2. Природа. 2021;592(7853):283-289. doi: 10.1101/2020.12.11.421008. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
10. Юань П., Ай П., Лю Ю., Ай З., Ван Ю., Цао В. Безопасность, переносимость и иммуногенность вакцин COVID19: систематический обзор и мета-анализ. medRxiv. 2020 doi: 10.1101/2020.11.03.20224998. Preprint. [CrossRef] [Google Scholar]
    
    
    

Результаты исследований экстракта одуванчика - препятствует связыванию белков спайков

Выдержка из текста / перевод из статьи "ИССЛЕДОВАНИЕ: Экстракт листьев одуванчика блокирует связывание белков шипов с рецептором на поверхности клеток ACE2„:

Шиповидные белки вируса SARS-CoV-2 могут быть обезврежены обычным "сорняком", который каждый год запрещают выращивать на газонах. Немецкий Университетское исследование показали, что одуванчик (Taraxacum officinale) способен блокировать связывание белков-шипиков с рецепторами клеточной поверхности ACE2 в клетках легких и почек человека. Водный экстракт одуванчика, получаемый из высушенных листьев растения, был эффективен в отношении шиповатого белка D614 и различных мутантных штаммов, включая D614G, N501Y, K417N и E484K.

Вот немецкий перевод оригинального исследования (PDF - Английский язык) :

Резюме:

11 марта 2020 года Всемирная организация здравоохранения (ВОЗ) объявила коронавирусную болезнь 2019 (COVID-19), вызванную вирусом SARS-CoV-2, глобальной пандемией. На сегодняшний день быстро распространяются новые "проблемные варианты" SARS-CoV-2 - британский (B.1.1.7), южноафриканский (B.1.351) и бразильский (P.1). Все они содержат множественные мутации в месте распознавания рецептора ACE2 в белке spike по сравнению с оригинальной последовательностью Wuhan, что имеет большое значение из-за его потенциала для иммунной защиты. Здесь мы сообщаем об эффективности одуванчика (Taraxacum officinale) для блокирования белково-белкового взаимодействия spike S1 с рецептором клеточной поверхности человека ACE2. Это было показано как для исходного шипа D614, так и для его мутированных форм (D614G, N501Y и смеси K417N, E484K, N501Y) в клетках почек человека HEK293-hACE2 и легких A549-hACE2-TMPRSS2. За этот эффект отвечают высокомолекулярные соединения в водном экстракте. Экстракт эффективно предотвращал заражение клеток легких псевдотипированными лентивирусными частицами SARS-CoV-2 spike, а также индуцированное вирусом выделение провоспалительного интерлейкина-6. Современные монографии по травам считают использование этого лекарственного растения безопасным. Таким образом, представленные здесь результаты in vitro должны стимулировать дальнейшие исследования клинической значимости и применимости экстракта в качестве стратегии профилактики SARS-CoV-2 инфекции.

SARS-CoV-2 постоянно мутирует при передаче вируса от человека к человеку. Это может привести к тому, что вирус обойдет существующие терапевтические и профилактические подходы, направленные на белок spike. Мы обнаружили эффективное ингибирование водным экстрактом одуванчика обыкновенного (Taraxacum officinale) белково-белкового взаимодействия между рецептором входа вируса в клетку человека ACE2 и белком-шипом SARS-CoV-2, включая пять соответствующих мутаций. Это было продемонстрировано in vitro на клетках почек (HEK293) и легких (A549) человека, сверхэкспрессирующих белки ACE2 и ACE2/TMPRSS2, соответственно. Экстракт эффективно предотвращал заражение клеток легких псевдотипированным лентивирусом SARS-CoV-2. Полученные результаты требуют более глубокого анализа эффективности одуванчика в профилактике SARS-CoV-2 и подтверждения клиническими данными.

На сегодняшний день известно три быстро распространяющихся новых варианта SARS-CoV-2, впервые зарегистрированных в Великобритании (вариант B.1.1.7), Южной Африке (вариант B.1.351) и Бразилии (вариант P.1). Все они имеют мутацию N501Y в белке спайка (5). В настоящее время во всем мире преобладают варианты SARS-CoV-2 с мутацией D614G в белке шипа. Помимо D614G, B.1.351 содержит и другие мутации спайков, включая три мутации (K417N, E484K и N501Y) в RBD (6). Предварительные данные указывают на возможную связь между наблюдаемой повышенной смертностью и мутацией D614G, и предполагается, что конформационное изменение в белке шипа приводит к повышению инфекционности (7). Расчеты возмущений свободной энергии для взаимодействия мутаций N501Y и K417N, как с рецептором ACE2, так и с антителом, полученным от пациентов COVID-19, поднимают важные вопросы о потенциальном иммунном ответе человека и успешности уже имеющихся вакцин (8). Кроме того, сообщалось о повышенной устойчивости вариантов B.1.351 и B.1.1.7 к нейтрализации антителами; для B.1.351 это было связано главным образом с мутацией E484K в белке spike (9).

Вмешательство в сайт взаимодействия между субъединицей S1 шипа и ACE2 может стать важной мишенью для терапии или профилактики (10). Соединения природного происхождения могут обеспечить определенную защиту от вторжения вирусных клеток, не оказывая при этом практически никаких побочных эффектов. Здесь мы сообщаем об ингибирующем потенциале одуванчика в отношении связывания белка RBD субъединицы S1 шипицы с рецептором клеточной поверхности hACE2 и сравниваем эффект оригинального белка D614 шипицы с его мутациями D614G, N501Y и миксом (K417N, E484K, N501Y).

Одуванчик обыкновенный (Taraxacum officinale) относится к семейству Астровые (Asteraceae), подсемейству Цикориевые (Cichorioideae), имеет множество разновидностей и второстепенных видов. Это многолетнее растение родом из теплых умеренных зон северного полушария, обитает на полях, обочинах дорог и рудеральных участках. T. officinale употребляется как растительная пища, а также используется в европейской фитотерапии при заболеваниях печени, желчного пузыря, пищеварительного тракта и ревматических болезнях. Современные монографии по травам считают применение растения безопасным и оценивают эмпирическое использование T. officinale с положительным результатом. Показания к применению T. officinale перечислены в монографиях Немецкой комиссии E, Европейского научного кооператива по фитотерапии (ESCOP) (11, 12) и Британской ассоциации травяной медицины (13). Растение содержит широкий спектр фитохимических веществ, включая терпены (сесквитерпеновые лактоны, такие как тараксиновая кислота и тритерпены), фенольные соединения (фенольные кислоты, флавоноиды и кумарины) и полисахариды (14). Преобладающим фенольным соединением оказалась цикориновая кислота (дикафеоилтартрат). Среди других - моно- и дикаффеоилхиновые кислоты, производные винной кислоты, флавоны и гликозиды флавонолов. Помимо этих классов соединений, корни содержат большое количество инулина (15). Лекарственные формы - водный отвар и настой, свежий сок, водно-спиртовая настойка и таблетки с покрытием из сухих экстрактов, которые используются как монопрепараты (16), а также как составные компоненты лекарственных средств. В нашем исследовании использовались водные экстракты из листьев растений. Мы обнаружили, что экстракты листьев эффективно блокируют белок spike или его мутантные формы рецептора ACE2, используемые как до, так и после инкубации, и что за этот эффект отвечают высокомолекулярные соединения. Растение того же штамма (Cichorium intybus) может оказывать аналогичное действие, но с меньшей силой. Экстракт эффективно предотвращал заражение клеток легких человека A549-hACE2-TMPRSS2 псевдотипированным лентивирусом SARS-CoV-2.

Результаты

T. officinale ингибирует связывание спайков S1 - ACE2
Сначала мы исследовали ингибирование взаимодействия между белком спайка SARS-CoV-2 RBD и ACE2 с помощью экстрактов листьев T. officinale. На рисунке 1А показано концентрационно-зависимое ингибирование связывания шипа S1-ACE2 при обработке экстрактом T. officinale (EC50=12 мг/мл). Экстракты C. intybus также показали концентрационно-зависимое ингибирование связывания, но с меньшей эффективностью, чем T. officinale (EC50 = 30 мг/мл) ( 1B ). Затем мы приготовили две фракции из высушенных листьев T. officinale и цикория и разделили экстракты на высокомолекулярную (>5 кДа) и низкомолекулярную (<5 кДа) фракции. Как показано на рисунке 1С, биоактивные соединения присутствовали в основном во фракции HMW. Только низкая активность наблюдалась во фракции LMW.

.

Влияние T. officinale и цикория на Sars-CoV-2 spike - ингибирование ACE 2.
A-B) Концентрационно-зависимый эффект экстракта T. officinale (TO) и C. intybus (CI). C-D) Эффект фракций экстракта листьев TO и CI. Экстракты были высушены и затем подвергнуты фракционированию по молекулярной массе. Отсечение было установлено на уровне 5 кДа (HMW > 5 кДа, LMW < 5 кДа). H+L: фракции HMW и LMW; в качестве эталона использовали 50 мг высушенных листьев на 1 мл воды. Использовались количества фракций HMW и LMW, эквивалентные количеству высушенных листьев. Ингибирование связывания оценивали методом ИФА. Столбики - среднее значение + SD. Контроль растворителя: дистиллированная вода (а.д.).

На клетках HEK293, сверхэкспрессирующих hACE2, был дополнительно исследован потенциал экстрактов T. officinale и C. intybus для блокирования связывания шипов с клетками. Как показано на рис. 2, предварительная инкубация клеток с T. officinale в течение 1 мин. эффективно блокировала связывание шипов с клетками на 76,67 % ± 2,9 и их ГМВ-фракции на 62,5 ± 13,4% по сравнению с водным контролем. Через 3 ч ингибирование по-прежнему составляло 50 ± 13,6 % для экстракта и 35,0 ± 20 % для HMW-фракции T. officinale. Экстракт цикория был менее эффективен в этой тест-системе; ингибирование связывания наблюдалось на уровне 37 ± 20 % через 1 мин и 5,6 ± 9,9 %.

Ингибирование связывания белка S1 spike с клетками человека HEK293-hACE2 путем предварительной инкубации с экстрактом.
Клетки предварительно инкубировали в течение указанного времени с экстрактом 10 мг/мл T. officinale (TO), его HMW-фракцией, равной 10 мг/мл экстракта (HMW) и 10 мг/мл C. intybus (CI). или контролем растворителя (ad), а затем обрабатывали HIS-меченым белком S1 spike в течение 1 часа без этапа промывки между ними при 4°C. Ингибирование связывания определяли методом проточной цитометрии. N=3, столбики - среднее значение + SD. Слева вверху: Цитограмма гейтированных клеток HEK-hACE2. Центр: Наложение репрезентативных гистограмм интенсивности флуоресценции для экспрессии ACE2 на поверхности. Справа вверху: наложение репрезентативных гистограмм интенсивности флуоресценции для ингибирования связывания спайков экстрактами или а.д.; положительный контроль: 20 мкг/мл растворимого hACE2. Клетки окрашивали моноклональным антителом Alexa Fluor 647, конъюгированным с анти-His-тегом.

Обработка клеток равными количествами шипицы D614 и ее вариантов D614G и N501Y подтвердила более высокую аффинность связывания белков шипицы D614G (примерно в 1,5 раза) и N501Y (примерно в 3-4 раза), чем D614, с поверхностным рецептором ACE2 клеток HEK293 (рис. 3A). Быстрая предварительная обработка T. officinale (в течение 30 с) блокировала связывание шипов с поверхностным рецептором ACE2 (рис. 3B-C). Через 30 с ингибирование связывания экстрактом T. officinale составило 58,2 ± 28,7% для D614, 88,2 ± 4,6% для D614G и 88 ± 1,3% для N501Y. Хотя ингибирование связывания с шипами наблюдалось и для экстракта C. intybus, оно было ниже примерно на 30-70% по сравнению с T. officinale, в зависимости от тестируемого белка шипов. Когда связывание анализировали при 37 °C вместо 4 °C, результаты были сопоставимы для T. officinale, но еще слабее для экстракта цикория в этой клеточной линии (рис. 3D). Для экстрактов T. officinale и C. intybus ингибирование связывания шипов составило 47,90 ± 14,72 и 13,12 ± 12,37 (D614), 68,42 ± 14,53 и 8,86 ± 15,29 (D614G), 71,66 ± 7,66 и 37,56 ± 16,14 (N501Y), соответственно. Мы также задались вопросом, могут ли экстракты заменить связывание шпиля с поверхностным рецептором ACE2 клеток человека. Для этого мы сначала инкубировали клетки с белком шипа D614, D614G или N501Y, а затем с экстрактами. Как показано на 3D, T. officinale эффективно удалял шип из рецептора (в среднем 50%); цикорий в это время действовал гораздо слабее (в среднем 25 %). Мы распространили наши эксперименты на человеческие клетки A549-hACE2-TMPRSS2 и смогли подтвердить результаты, наблюдаемые в клетках HEK293-hACE2 для T. officinale (Рисунок 3D-G). Эта клеточная линия была стабильно трансфицирована генами ACE2 и TMPRSS2 человека, и, что интересно, экстракт C. intybus оказался более эффективным по сравнению с клетками HEK-hACE2. После предварительной обработки экстрактом ингибирование связывания шипов с клетками варьировалось от 73,5% ± 5,2 (D614) до 86,3% ± 3,23 (N501Y) для экстракта T. officinale и от 56,1% ± 5,28 (D614) до 63,07% ± 14,55 (N501Y) для экстракта C. intybus. Уже при концентрации 0,6 мг/мл T. officinale значительно блокировал связывание с белком шипа D614G примерно на 40% (IC50 = 1,73 мг/мл). Когда клетки предварительно инкубировали со спайк-белком до обработки экстрактом, результаты для D614 и D614G были сопоставимы для экстракта T. officinale, но немного ниже для N501Y (3C - D). Также в этой ситуации была протестирована смесь мутантов шипа N501Y, K417N и E484K, и снова экстракт T. officinale блокировал связывание на 82,97 % ± 6,31 (экстракт до инкубации) и 79,7 % ± 9,15 (экстракт после инкубации).

Ингибирование связывания шипа D614 и его мутантов D614G, N501Y или смеси (N501Y, K417N и E484K) с клетками человека HEK293-hACE2 и A549-hACE2-TMPRSS2 с помощью экстракта до или после инкубации.
Наложение гистограммы интенсивности флуоресценции для A) неокрашенных клеток HEK, контроля окрашивания (анти-His-tag A647) и клеток, инкубированных с His-tag-мечеными шипами D614, D614G или N501Y в течение 1 часа при 4°C. Б) Клетки предварительно инкубировали с контролем растворителя (ad), 10 мг/мл T. officinale (TO) или 10 мг/мл C. intybus (CI) в течение 30-60 секунд, а затем обрабатывали меченным His-tag белком S1 . spike D614, D614G или N501Y в течение 1 ч без промежуточной промывки при 4°C. Г-Г) Влияние инкубации экстракта на клетки HEK или A549 до или после инкубации с His-tag меченым spike D614, D614G, N501Y или смешанным белком (N501Y, K417N и E484K) при 37°C. H) Растительные экстракты инкубировали в слюне 4 человеческих доноров в течение 30 минут при 37 °C. Затем клетки предварительно обрабатывали 5 мг/мл экстрактов в течение 60 сек. при 37 °C, после чего инкубировали с меченным His-tag белком spike D614 в течение 0,5 ч при 37 °C. Ингибирование связывания спайков с клетками человека оценивали с помощью проточной цитометрии клеток, окрашенных конъюгированным с анти-His-tag Alexa Fluor 647 моноклональным антителом. Столбики представляют собой средние значения +SD.

Экстракты, инкубированные в слюне человека в течение 30 минут при 37 °C до обработки клеток, оказывали сопоставимое влияние на ингибирование шипа D614G (рис. 3H), что свидетельствует о хорошей стабильности биологически активных соединений в слюне.

Чтобы выяснить, влияет ли экстракт T. officinale на каталитическую активность рецептора ACE2 или на экспрессию белка ACE2, мы обрабатывали клетки A549-hACE2-TMPRSS2 экстрактом в течение 1-24 ч до лизиса клеток и их обнаружения. После 84 ч воздействия экстракта на клетки не наблюдалось потери жизнеспособности клеток (4A). Снижения активности фермента не было обнаружено ни через 1, ни через 24 ч (4B). Шип значительно снижал уровень белка ACE2 через 6 ч (4C, черные столбики), и это также было справедливо для экстракта, как отдельно (4C, белые столбики), так и в сочетании с шипом (черные столбики). Через 24 ч этот эффект был отменен (4D).

Влияние экстракта T. officinale на активность фермента ACE2 и экспрессию белка.
А) Жизнеспособность клеток A549-hACE2-TMPRSS2 определяли по окрашиванию клеток трипановым синим после 84 часов воздействия экстракта. Б) Клетки инкубировали с экстрактом TO или 500 нг/мл белка S1 и анализировали на активность фермента с помощью флуоресцентного набора. C-D) Клетки подвергали воздействию экстракта без (белые столбики) или с (черные столбики) 500 нг/мл белка S1 в течение 6 или 24 часов и анализировали экспрессию белка ACE2 с помощью набора для ELISA с человеческим ACE2; a. d.: контроль растворителя. Столбики представляют собой средние значения + SD, N ≥ 3 независимых экспериментов.

Используя SARS-CoV-2 spike псевдотип лентивируса, мы исследовали, может ли экстракт блокировать проникновение вируса путем ингибирования спайков. При предварительной обработке экстрактом вирусная трансдукция снижалась примерно на 85% при концентрации 20 мг/мл (рис. 5A). При различных условиях обработки люминесцентный сигнал, генерируемый при трансдукции вируса, подавлялся на 70 % ± 16,7 (A), 58 % ± 9,6 (B) и 53 % ± 8,1 (C) при 10 мг/мл экстракта. Это ингибирование вирусной трансдукции экстрактом сопровождалось значительным подавлением воспалительного ответа, индуцированного вирусом, что определялось снижением секреции провоспалительного цитокина IL-6 в клетках A549-hACE2-TMPRSS2 (рис. 5D).

Ингибирование вирусной трансдукции в клетках A549-hACE2-TMPRSS2 экстрактом T. officinale.
Клетки трансдуцировали 2,5 мкл SARS-CoV-2 spike псевдотипированного лентивируса (репортер Luc) в течение 24 ч. А) после предварительной обработки экстрактом T. officinale (TO) в течение 0,5 ч, Б) за 3 ч до добавления TO или В) без экстракта. Затем среда была заменена на свежую, и клетки инкубировали еще 60 ч вместе с экстрактом. Люминесценцию определяли через 1 ч. (-) Отрицательный контроль: гладкий лентивирусный псевдовирус; (+) положительный контроль: лентивирус светлячка-люциферазы. Г) Анализ секреции провоспалительного цитокина IL-6 проводили через 24 ч после трансдукции вируса вместе с экстрактом (слева), через 24 ч + 60 ч после заражения экстрактом (в центре) или через 60 ч после заражения экстрактом (справа) с помощью мультиплексного проточного цитометрического анализа. Контроль растворителя: дистиллированная вода (а.д.). N ≥ 3 независимых эксперимента.

Обсуждение

Разработка эффективных стратегий профилактики и лечения инфекции SARS-CoV-2 все еще находится в зачаточном состоянии. Хотя первые вакцины уже получили разрешение на продажу, остаются проблемы, связанные с распространением, устойчивой эффективностью и риском повторного заражения (17, 18). Однако последующие инфекции могут протекать мягче, чем первая. Помимо вакцинации против COVID-19, альтернативной стратегией профилактики COVID-19 является блокирование доступности вируса к мембранно-связанному ACE2, который является основным рецептором для проникновения в клетку-мишень SARS-CoV-2. Здесь существуют различные подходы (19), но, разумеется, каждая из этих стратегий лечения имеет свои фундаментальные и трансляционные проблемы, которые необходимо преодолеть для получения клинического эффекта. К техническим препятствиям относятся потенциал вне мишени, АПФ2-независимые эффекты, стабильность или токсичность (19). Важным ресурсом здесь могут стать соединения природного происхождения, поскольку они были описаны в течение длительного времени и многие из них считаются безопасными. Хотя в экспериментах по докированию in silico несколько распространенных природных соединений были предложены в качестве ингибиторов АПФ2, большинство из них не подавляли связывание с АПФ2, что можно объяснить отсутствием полного покрытия соединениями остатков, связывающих АПФ2 (20). Однако для глицирризина, нобилетина и неогесперидина связывание ACE2 частично попадает в область контакта с RBD, и поэтому было высказано предположение, что они дополнительно блокируют связывание спайков с ACE2 (20). То же самое справедливо и для синтетических ингибиторов ACE2, таких как N-(2-аминоэтил)-1-азиридин-этанамин (NAAE) (21). Напротив, липогликопептидный антибиотик далбаванцин был идентифицирован как связывающий ACE2 и ингибитор ACE2, вызывающий SARS-CoV-2 (22); инфекция SARS-CoV-2 была эффективно подавлена этим соединением как на мышиной, так и на макаках-резус моделях. Было также показано, что спиртовой экстракт кожуры граната блокирует взаимодействие спайк-АСЕ2 с 74 %, его основные компоненты - пуникалагин с 64 % и эллаговая кислота с 36 %. При использовании псевдотипированной лентивирусной инфекции SARS-CoV-2 шипа в клетках почки человека 2 (HK-2) проникновение вируса было эффективно заблокировано экстрактом кожуры (23). В настоящем исследовании мы продемонстрировали мощное ингибирование экстрактами T. officinale белка S1 RBD шипа ACE2 с помощью бесклеточного анализа и подтвердили этот результат, продемонстрировав эффективное ингибирование связывания ACE2 с клеточной поверхностью в двух клеточных линиях человека. Мы наблюдали более сильное связывание вариантов D614G и N501Y с поверхностным рецептором ACE2 человеческих клеток, но все протестированные варианты были чувствительны к ингибированию связывания экстрактом T. officinale, используемым как до, так и после. На сегодняшний день несколько исследований показывают, что вирусная линия D614G более инфекционна, чем вирус D614 (24). Кроме того, наличие характерных мутаций, таких как N501Y, например, в так называемом британском варианте B.1.1.7, приводит к более высокой инфекционности по сравнению с родительским штаммом, что может быть связано с более высокой аффинностью связывания между белком шипа и ACE2 (25). Таким образом, наши результаты исследования экстрактов T. officinale могут иметь важное значение, поскольку по мере развития пандемии будут появляться новые варианты вируса, представляющие потенциальную опасность, что также может снизить эффективность некоторых вакцин или привести к увеличению частоты реинфекции. Как уже упоминалось выше, одной из проблем при разработке препаратов для профилактики инфекции SARS-CoV-2 или замедления системного распространения вируса является избирательность проникновения вирусов с низкой токсичностью для хозяина. Случаев передозировки T. officinale по текущим медицинским показаниям не зарегистрировано (11, 13, 16). Рекомендуемая доза составляет 4-10 г (примерно 20-30 мг на мл горячей воды) до 3 раз в день (Комиссия E и ESCOP). По данным Европейского агентства по лекарственным средствам (EMA), противопоказаниями к применению T. officinale являются повышенная чувствительность к растению семейства Астровые или его активным ингредиентам, заболевания печени и желчевыводящих путей, включая непроходимость желчных протоков, желчные камни и холангит, или активные язвы желудочно-кишечного тракта (16). Растение является значительным источником калия (26, 27), поэтому даются предупреждения из-за возможного риска гиперкалиемии. Применение у детей до 12 лет, во время беременности и грудного вскармливания не установлено из-за отсутствия или недостаточности данных.

Хотя в настоящем исследовании экстракт T. officinale не повлиял на активность фермента ACE2, белок ACE2 был транзиторно снижен в линии клеток легких, экспрессирующих ACE2, что требует более пристального внимания в текущих исследованиях. ACE2 является важной цинк-зависимой монокарбоксипептидазой в ренин-ангиотензиновом сигнальном пути, который имеет решающее значение для воздействия на сердечно-сосудистую и иммунную системы. Нарушение баланса ангиотензина II/ангиотензина (1-7) путем ингибирования активности фермента ACE2 или истощения белка и увеличения количества циркулирующего ангиотензина II в системе, как признано, способствует повреждению легких, связанному с болезнью COVID-19 (28, 29).

Считается, что основной мишенью являются легкие, однако экспрессия мРНК и белка ACE2 была обнаружена в эпителиальных клетках всех тканей ротовой полости, особенно в слизистой оболочке рта, губах и языке (30). Эти данные согласуются с наблюдением очень высокой вирусной нагрузки в слюне у пациентов, инфицированных SARS-CoV-2 (31, 32). Таким образом, считается, что полость рта, являющаяся неотъемлемой частью верхних отделов пищеварительного тракта, играет ключевую роль в передаче и патогенности SARS-CoV-2. Существует большая вероятность того, что предотвращение вирусной колонизации слизистой оболочки полости рта и глотки может иметь решающее значение для предотвращения дальнейшего инфицирования других органов и вспышки COVID-19 (33). Поэтому было предложено использовать коммерческие вирусоцидные ополаскиватели для полости рта, в первую очередь повидон-йод, для потенциального снижения вирусной нагрузки SARS-CoV-2 у инфицированных людей (34-36), однако на сегодняшний день не существует значимых клинических исследований (36). Блокирование связывания вируса SARS-CoV-2 с клетками полости рта с помощью экстрактов T. officinale может быть допустимым для потребителя только в течение ограниченного периода времени (например, применение продукта после контакта с инфицированными людьми или во время инфекции). Дальнейшие физиологически значимые эксперименты in vitro, проведенные нами, показали, что для эффективного блокирования связывания шипиков SARS-CoV-2 или для удаления уже связанных шипиков с поверхности клеток необходимо лишь короткое время контакта с экстрактом T. officinale. Дополнительным подтверждением значимости этого факта стали эксперименты с псевдотипированным вирусом SARS-CoV-2 spike. Хотя использование этих псевдотипированных вирусов не позволяет оценить вклад особенностей вириона, таких как мембранные или оболочечные белки, в клеточный тропизм (37), они считаются полезным инструментом для документирования значимости ACE2 для этапов входа в клетку, опосредованных белком шипа.

Все разрабатываемые вакцины направлены на выработку антител (и Т-клеточных реакций) против белка шипа, и в качестве основы здесь использовались последовательности шипов из раннего штамма Ухань (38). Однако SARS-CoV-2 постоянно мутирует в процессе непрерывной передачи от человека к человеку. Вирусный антигенный дрейф наглядно демонстрируется недавним появлением B.1.1.7, B.1.351 или B.1.1.28 (P.1). Он развивается таким образом, что потенциально может обойти существующие терапевтические и профилактические подходы, направленные на пик вируса. Таким образом, такие факторы, как низкая токсичность для человека и эффективное ингибирование связывания пяти соответствующих мутаций спайков на рецепторе ACE2 человека, как сообщается здесь in vitro, способствуют более глубокому анализу эффективности T. officinales в профилактике SARS-CoV-2, и теперь требуется дальнейшее подтверждение клинических данных.

Материалы и методология

Растительный материал

Для исследования использовались высушенные листья T. officinale (vom Achterhof, Упленген, Германия; № партий 37259, B370244 и P351756). Положительный результат был получен в трех разных местах в регионе Фрайбург-и-Гебр. (Германия) 12 июля 2020 года, а также в бесклеточном анализе связывания S1-ACE2 (данные не показаны). C. intybus был получен от Naturideen (Германия).

Клеточные линии и культуры

Клетки эмбриональной почки человека 293 (HEK293), стабильно экспрессирующие hACE2, были щедро предоставлены профессором Штефаном Пёльманом (Гёттинген, Германия). Клетки поддерживали в модифицированной орлиной среде Дульбекко (DMEM) с высоким содержанием глюкозы, дополненной 10 % фетальной телячьей сыворотки (FCS), 100 Е/мл пенициллина/стрептомицина и 50 мкг/мл цеоцина (Life Technologies, Darmstadt, Germany). Клетки человека A549-hACE2-TMPRSS2, полученные из клеточной линии легких человека A549, были приобретены у InvivoGen SAS (Toulouse Cedex 4, Франция) и поддерживались в DMEM, дополненной 10 % термоинактивированной FCS, 100 Е/мл пенициллина/стрептомицина, 100 мкг/мл нормоцина, 0,5 мкг/мл пуромицина и 300 мкг/мл гигромицина. Для субкультивирования все клетки сначала промывали фосфатно-буферным солевым раствором (PBS), затем инкубировали с 0,25% трипсина-EDTA до отслоения. Все клетки культивировали при 37 °C в увлажненном инкубаторе с атмосферой 5 % CO2/95 % воздуха.

Растительные экстракты

Высушенный растительный материал взвешивали в янтарном стеклянном флаконе (Carl Roth GmbH, Германия) и смешивали с водой для ВЭЖХ (a.d.) при комнатной температуре (RT). Экстракты инкубировали в течение 1 ч и центрифугировали при 16 000 g (3 мин, RT). Надосадочную жидкость фильтровали (0,22 мкм) перед использованием в экспериментах.

Анализ ингибирования взаимодействия SARS-COV2 и ACE2 с помощью ИФА и проточной цитометрии

Для бесклеточного выявления ингибирования взаимодействия SARS-CoV-2 spike и ACE2 использовали коммерчески доступный набор для скрининга ингибиторов SARS-CoV-2 (Kat#: 16605302, Fisher Scientific GmbH, Schwerte, Германия). Этот колориметрический ИФА-анализ измеряет связывание между иммобилизованным SARS-CoV-2 спайковым белком RBD и биотинилированным человеческим белком ACE2. Колориметрическая детекция осуществляется с помощью стрептавидина-HRP с последующей инкубацией TMB. Ингибитор SARS-CoV-2 (hACE2) служил в качестве методологически проверенного эталона.

Экспрессию ACE2 на поверхности клеток определяли с помощью человеческого ACE2 PE-конъюгированного антитела (Bio-Techne GmbH, Висбаден-Норденштадт, Германия) и проточного цитометрического анализа. Для анализа связывания SARS-CoV-2 S1 spike RBD -ACE2, 2 x 105 клеток (5 x 106 клеток/мл) предварительно обрабатывали растительными экстрактами в разные моменты времени. Затем в каждый образец добавляли 500 нг/мл SARS-CoV-2 Spike S1 (Trenzyme GmbH, Konstanz, Германия), Spike S1 D614G, N50Y или смесь K417N, E484K и N501Y (Sino Biological Europe GmbH, Eschborn, Германия) -His рекомбинантного белка и далее образцы инкубировали в течение 30-60 мин. В другом варианте клетки предварительно обрабатывали 500 нг/мл рекомбинантного белка SARS-CoV-2 Spike-His в течение 30 мин перед инкубацией с растительным экстрактом в течение 30-60 сек при 4 °C или 37 °C. Образцы инкубировали в буфере PBS, содержащем 5% FCS. Затем клетки промывали один раз буфером PBS, содержащим 1% FCS, при 500 x g, 5 мин перед окрашиванием His-tag A647 mAb (Bio-Techne GmbH, Wiesbaden-Nordenstadt, Германия) в течение 30 мин при RT. Затем клетки дважды промывали, как описано выше. Клетки анализировали на приборе FACSCalibur (BD Biosciences, Хайдельберг, Германия), регистрировали 10 000 событий. Среднюю интенсивность флуоресценции (MFI) каждого образца определяли с помощью программного обеспечения FlowJo (Ashland, Oregon, США).

Активность фермента ACE2 человека и количественное определение белка

Клетки A549-hACE2-TMPRSS2 (2 × 105) высевали в 24-луночный планшет в среду DMEM с высоким содержанием глюкозы, содержащую 10 % термоинактивированной FCS при 37 °C, 5 % CO2. Затем клетки обрабатывали экстрактом T. officinale с/без 500 нг/мл SARS-CoV-2 S1 spike RBD белка в течение 1-24 часов. Затем клетки промывали PBS и лизировали. 25 мкг белка использовали для количественного определения белка ACE2 (ACE2 ELISA Kit), 5 мкг - для определения активности фермента ACE2 (ACE2 Activity Assay Kit, Abcam, Cambridge, UK) в соответствии с инструкциями производителя.

Инфицирование клеток A549-hACE2-TMPRSS2 псевдотипированным лентивирусом SARS-CoV-2

Псевдотипированные лентивирусные частицы SARS-CoV-2 spike, полученные с использованием SARS-CoV-2 spike (Genbank Accession #QHD43416.1) в качестве оболочечного гликопротеина вместо обычно используемого VSV-G, были приобретены у BPS Bioscience (Catalogue#: 7994299). Biomol, Hamburg). Эти псевдовирионы также содержат ген люциферазы светлячка, управляемый промотором CMV. Таким образом, вход в клетку, опосредованный шипами, может быть количественно оценен с помощью репортерной активности люциферазы. В качестве отрицательного контроля использовали гладкий лентивирусный псевдовирион (BPS Bioscience #79943), в котором не экспрессируется оболочечный гликопротеин. В качестве положительного контроля трансдукции использовали люциферазный лентивирус Firefly (пуромицин) от BPS Bioscience (каталог #: 79692-P). Эти вирусы конститутивно экспрессируют люциферазу светлячка под промотором CMV. Клетки легких высевали в количестве 0,1 × 106 клеток/см2 в 96-луночные планшеты в среду DMEM, содержащую 10 % термоинактивированной FCS, 100 Е/мл пенициллина/стрептомицина, 100 мкг/мл нормоцина, 0,5 мкг/мл пуромицина и 300 мкг/мл гигромицина на ночь. Среду заменяли на DMEM + 10 % термоинактивированной FCS и инкубировали клетки с экстрактом а.д. или T. officinale за 30 мин до или через 3 ч после добавления 2,5 мкл лентивирусных частиц. Через 24 ч инкубации с вирусными частицами среду удаляли путем промывания PBS, добавляли свежую среду и инкубировали клетки еще 60 ч с добавлением экстракта а.д. или T. officinale. Люминесценцию определяли в течение 1 ч с помощью одностадийного люциферазного реагента от BPS в соответствии с протоколом производителя в мультипланшетном ридере Tecan (Tecan Group Ltd, Crailsheim, Германия).

Количественное определение высвобождения цитокинов с помощью мультиплексного метода с использованием бусин

Количественное определение высвобождения цитокинов с помощью мультиплексного метода с использованием бусинПосле 24 ч трансдукции SARS-CoV-2 spike псевдотипированного лентивируса и 60 ч после инфицирования клеток A549-hACE2-TMPRSS2 супернатанты собирали и хранили при -80 °C до анализа секреции цитокинов с помощью набора Human MACSplex . cytokine 12 (Miltenyi Biotec GmbH, Bergisch Gladbach, Германия) в соответствии с протоколом производителя.

Фракционирование молекулярной массы растительных экстрактов

Экстракты из высушенных листьев растений готовили путем добавления двойной дистиллированной воды (5 мл) к растительному материалу (по 500 мг). Образцы инкубировали в темноте при комнатной температуре (RT) в течение 60 минут, затем центрифугировали при 16 000 g в течение 3 минут. Надосадочную жидкость собирали и фильтровали через мембрану (0,45 мкм), получая экстракты. Аликвоты высушивали в течение 48 часов, чтобы определить их весовой выход. Затем экстракты разделяли на высокомолекулярную (HMW) и низкомолекулярную (LMW) фракции с помощью центрифужной пробирки со вставкой, содержащей фильтр для отсечения молекулярной массы (5 кДа, Sartorius Stedim Biotech, Геттинген, Германия). . Каждая фракция ГМВ очищалась путем промывания 20 мл воды с получением фракций ГМВ и ЛМВ. Фракции высушивали, определяли их выход по весу и хранили при -20°C до использования.

Определение жизнеспособности клеток с помощью окрашивания трипановым синим

Определение жизнеспособности клеток с помощью трипанового синего Жизнеспособность клеток оценивали с помощью анализа исключения красителя трипанового синего, как описано ранее (Odongo et al., 2017). Вкратце, клетки A549-hACE2-TMPRSS2 культивировали в течение 24 ч, а затем подвергали воздействию экстрактов или контроля растворителя в течение 84 ч (а. д.).

Статистический анализ

Результаты анализировали с помощью программного обеспечения GraphPad Prism 6.0 (La Jolla, Калифорния, США). Данные представлены как среднее значение + SD. Статистическую значимость определяли с помощью одностороннего теста ANOVA с последующей поправкой Бонферрони. P-значения < 0,05 () оказались статистически значимыми и составили < 0,01 (*) считается высоко статистически значимым.

Авторский вклад

Дизайн и концепция исследования: E.L.; экспериментальный дизайн, сбор данных, анализ данных: H.T.T., E.L., N.P.K.L.; подготовка фракций экстракта: C.D., M.G.; написание первой редакции рукописи: Е.Л.. Все авторы прокомментировали предыдущие версии рукописи.

Благодарности

Авторы благодарят проф. д-ра Штефана Пёльмана (Немецкий центр приматов, Геттинген, Германия) за предоставление клеток эмбриональной почки человека 293 (HEK293), стабильно экспрессирующих hACE2.

Ссылки

1. 1.↵Lu R, et al. (2020) Геномная характеристика и эпидемиология нового коронавируса 2019 года: последствия для происхождения вируса и связывания рецепторов. Lancet 395(10224):565-574.CrossRefPubMedGoogle Scholar
2. 2.↵Paules CI, Marston HD, & Fauci AS (2020) Coronavirus Infections-More Than Just the Common Cold. JAMA 323(8):707-708.CrossRefPubMedGoogle Scholar
3. 3.↵Berlin DA, Gulick RM, & Martinez FJ (2020) Severe Covid-19. N Engl J Med 383(25):2451-2460.CrossRefPubMedGoogle Scholar
4. 4.↵Huang Y, Yang C, Xu XF, Xu W, & Liu SW (2020) Структурные и функциональные свойства SARS-CoV-2 spike protein: потенциальная разработка противовирусного препарата COVID-19. Acta Pharmacol Sin 41(9):1141-1149.CrossRefPubMedGoogle Scholar
5. 5.↵Grubaugh ND, Hodcroft EB, Fauver JR, Phelan AL, & Cevik M (2021) Меры общественного здравоохранения по борьбе с новыми вариантами SARS-CoV-2. Cell.Google Scholar
6. 6.↵Zhou D, et al. (2021) Доказательства выделения варианта SARS-CoV-2 B.1.351 из естественной и вакциноиндуцированной сывороток. Cell.Google Scholar
7. 7.↵Becerra-Flores M & Cardozo T (2020) Мутация G614 вирусного шипа SARS-CoV-2 демонстрирует более высокий уровень смертности. Международный журнал клинической практики 74(8):e13525.Google Scholar
8. 8.↵Fratev F (2020) Мутации N501Y и K417N в белке spike вируса SARS-CoV-2 изменяют взаимодействие с hACE2 и человеческим антителом: исследование свободной энергии возмущения. bioRxiv:2020.2012.2023.424283.Google Scholar
9. 9.↵Ho D, et al. (2021) Повышенная устойчивость вариантов SARS-CoV-2 B.1.351 и B.1.1.7 к нейтрализации антителами. Res Sq.Google Scholar
10. 10.↵Perrotta F, Matera MG, Cazzola M, & Bianco A (2020) Тяжелая респираторная инфекция SARS-CoV2: имеет ли значение рецептор ACE2? Respir Med 168:105996.CrossRefGoogle Scholar
11. 11.↵ESCOP (2003) "Taraxaci folium" и "Taraxaci radix". Монографии по медицинскому использованию растительных препаратов. (Thieme, Stuttgart) второе издание, изд. стр. 499-504.Google Scholar
12. 12.↵Blumenthal M, Busse WR, Goldberg A, Gruenwald J, Hall T, Riggins CW, Rister RS. (ред.) "Трава одуванчика" и "Корень одуванчика с травой" In: The Complete German Commission E Monographs. Терапевтическое руководство по травяным лекарствам. American Botanical Council, Austin, Texas 1998; 118-120.13 Association BHM (1990) "Лист одуванчика" и "Корень одуванчика". Британская травяная фармакопея 1:37-39.Google Scholar
13. 14.↵Gonzalez-Castejon M, Visioli F, & Rodriguez-Casado A (2012) Разнообразная биологическая активность одуванчика. Nutr Rev 70(9):534-547.PubMedGoogle Scholar
14. 15.↵Schutz K, Carle R, & Schieber A (2006) Taraxacum - обзор его фитохимического и фармакологического профиля. J Ethnopharmacol 107(3):313-323.CrossRefPubMedWeb of ScienceGoogle Scholar
15. 16.↵Европейское медицинское агентство (EMA) CoHMPH (2009) Отчет об оценке Taraxacum officinale Weber ex Wigg., folium. HMPC/579634/2008.Google Scholar
16. 17.↵To KK, et al. (2020) Повторное заражение COVID-19 филогенетически отличным штаммом SARS-коронавируса-2, подтвержденное секвенированием всего генома. Clin Infect Dis. Aug 25:ciaa1275. doi: 10.1093/cid/ciaa1275.CrossRefPubMedGoogle Scholar
17. 18.↵Edridge AWD, et al. (2020) Защитный иммунитет коронавируса недолговечен. medRxiv:2020.2005.2011.20086439.Google Scholar
18. 19.↵Jia H, Neptune E, & Cui H (2020) Таргетинг ACE2 для терапии COVID-19: возможности и проблемы. Американский журнал респираторной клеточной и молекулярной биологии. Dec 9. doi: 10.1165/rcmb.2020-0322PS.CrossRefGoogle Scholar
19. 20.↵Zhou J & Huang J (2020) Current Findings Regards Regards Natural Components With Potential Anti-2019-nCoV Activity. Frontiers in Cell and Developmental Biology 8:589.Google Scholar
20. 21.↵Huentelman MJ, et al. (2004) Открытие на основе структуры нового ингибитора ангиотензин-превращающего фермента 2. Hypertension 44(6):903-906.CrossRefGoogle Scholar
21. 22.↵Wang G, et al. (2021) Дальбаванцин связывает ACE2, блокируя его взаимодействие со спайковым белком SARS-CoV-2, и эффективно ингибирует инфекцию SARS-CoV-2 в животных моделях. Cell Res 31(1):17-24.Google Scholar
22. 23.↵Tito A, et al. (2020) Экстракт кожуры граната как ингибитор связывания шипа SARS-CoV-2 с человеческим ACE2: перспективный источник новых противовирусных препаратов. bioRxiv:2020.2012.2001.406116.Google Scholar
23. 24.↵Korber B, et al. (2020) Отслеживание изменений в SARS-CoV-2 Spike: доказательства того, что D614G увеличивает инфекционность вируса COVID-19. Cell 182(4):812-827 e819.CrossRefPubMedGoogle Scholar
24. 25.↵Santos JC & Passos GA (2021) Высокая инфекционность SARS-CoV-2 B.1.1.7 связана с увеличением силы взаимодействия между Spike-ACE2, вызванным вирусной мутацией N501Y. bioRxiv:2020.2012.2029.424708.Google Scholar
25. 26.↵Hook I, McGee A, & Henman M (1993) Оценка одуванчика на диуретическую активность и вариации в содержании калия. Международный журнал фармакогнозии 31(1):29-34.Google Scholar
26. 27.↵Escudero NL, De Arellano ML, Fernández S, Albarracín G, & Mucciarelli S (2003) Taraxacum officinale как источник пищи. Растительные продукты для питания человека 58(3):1-10.PubMedWeb of ScienceGoogle Scholar
27. 28.↵Imai Y, et al. (2005) Ангиотензин-превращающий фермент 2 защищает от тяжелой острой легочной недостаточности. Nature 436(7047):112-116.CrossRefPubMedWeb of ScienceGoogle Scholar
28. 29.↵Kuba K, et al. (2005) Решающая роль ангиотензинпревращающего фермента 2 (ACE2) в повреждении легких, вызванном коронавирусом SARS. Nat Med 11(8):875-879.CrossRefPubMedWeb of ScienceGoogle Scholar
29. 30.↵Zhong M, et al. (2020) Экспрессия ACE2 и фурина в эпителиальных клетках полости рта, возможно, способствует заражению COVID-19 респираторным и фекально-оральным путями. Front Med (Lausanne) 7:580796.Google Scholar
30. 31.↵ To KK-W, et al. (2020) Последовательное обнаружение нового коронавируса 2019 года в слюне. Clinical infectious diseases: an official publication of the Infectious Diseases Society of America 71(15):841-843.CrossRefPubMedGoogle Scholar
31. 32.↵Yoon JG, et al. (2020) Клиническая значимость высокой вирусной нагрузки SARS-CoV-2 в слюне. J Korean Med Sci 35(20):e195-e195.CrossRefGoogle Scholar
32. 33.↵Wolfel R, et al. (2020) Вирусологическая оценка госпитализированных пациентов с COVID-2019. Nature 581(7809):465-469.CrossRefPubMedGoogle Scholar
33. 34.↵Seneviratne CJ, et al. (2020) Эффективность коммерческих ополаскивателей для полости рта на вирусную нагрузку SARS-CoV-2 в слюне: рандомизированное контрольное исследование в Сингапуре. Инфекция:1-7.Google Scholar
34. 35.↵ de Toledo Telles-Araujo G, Caminha RDG, Kallas MS, Sipahi AM, & da Silva Santos PS (2020) Потенциальные ополаскиватели для рта и назальные спреи, снижающие вирусную нагрузку SARS-CoV-2: Что мы знаем на сегодняшний день? Clinics (Sao Paulo) 75:e2328.Google Scholar
35. 36.Carrouel F, et al. (2021) Противовирусная активность реагентов в ополаскивателях для рта против SARS-CoV-2. Журнал стоматологических исследований 100(2):124-132.Google Scholar
36. 37.↵Joglekar AV & Sandoval S (2017) Pseudotyped Lentiviral Vectors: One Vector, Many Guises. Hum Gene Ther Methods 28(6):291-301.CrossRefGoogle Scholar
37. 38.↵Краммер Ф (2020) Вакцины против SARS-CoV-2 в разработке. Nature 586(7830):516-527.CrossRefPubMedGoogle Scholar

Совет Европы - Резолюция 2361 (2021) - Нет обязательной вакцинации

Название: Вакцины Covid-19: этические, юридические и практические соображения

В этой резолюции пункт 7.1.1 гласит: "обеспечить высококачественные испытания, которые являются обоснованными и проводятся в соответствии с этическими нормами согласно соответствующим положениям Конвенции о защите прав и достоинства человека в связи с применением достижений биологии и медицины: Конвенции о правах человека и биомедицине (ETS № 164, Овьедская конвенция) и Дополнительного протокола к ней, касающегося биомедицинских исследований (CETS № 195), и которые постепенно охватывают детей, беременных женщин и кормящих матерей;".

Раздел 7.1.1 требует обеспечения высококачественных и этически обоснованных исследований согласно соответствующим положениям Конвенции о защите прав и достоинства человека в связи с применением достижений биологии и медицины, в соответствии с Конвенцией о защите прав человека и биомедицины (ИТС № 164, Овьедская конвенция (Ссылка) - PDF) и Дополнительный протокол по биомедицинским исследованиям (SEV No. 195 (Ссылка) - PDF), к которым относятся дети, беременные женщины и кормящие матери.

Соглашение Овьедо CETS 164 (SEV 1164) от 4 апреля 1997 года требует в Главе IV, Статья 13: "Вмешательство в геном человека - Вмешательство, направленное на изменение генома человека, может быть предпринято только в профилактических целях,
диагностических или терапевтических целях и только в том случае, если его целью не является внесение каких-либо изменений в геном потомков".

Это четко определяет, что вмешательство в геном человека разрешено только в профилактических целях,
в диагностических или терапевтических целях и только в том случае, если они не предназначены для изменения генома потомства.

Статья 13 - Вмешательство в геном человека
Вмешательство, направленное на изменение генома человека, может быть предпринято только в профилактических целях,
диагностических или терапевтических целях и только в том случае, если его целью не является внесение каких-либо изменений в
геном всех потомков.

Пункт 7.3.1 гласит: "Обеспечить информирование граждан о том, что вакцинация не является обязательной и что никто не подвергается политическому, социальному или иному давлению с целью заставить их пройти вакцинацию, если они этого не хотят".

Другими словами, цель состоит в том, чтобы граждане были проинформированы о том, что вакцинация НЕ является обязательной, и чтобы ни на кого не оказывалось политического, социального или иного давления с целью заставить его пройти вакцинацию, если он этого не хочет.

Пункт 7.5.1 гласит: "Ввести в действие независимые программы компенсации вакцин для обеспечения компенсации за неправомерный ущерб и вред, причиненный вакцинацией"; должны быть установлены независимые программы компенсации, из которых будет выплачиваться компенсация за неправомерный ущерб и вред, причиненный вакцинацией.

Пункт 7.5.2 гласит: "Использовать сертификаты вакцинации только по назначению - для мониторинга эффективности вакцины, потенциальных побочных эффектов и нежелательных явлений;".

Единственная цель сертификатов вакцинации - мониторинг эффективности вакцин, а также их побочных эффектов и нежелательных явлений.

Кроме того, другие материалы также заслуживают внимания и прочтения.

Португалия - 0,9 % Covid-19 смертей вместо официальных 17 000

Благодаря петиции португальского населения, суд в Португалии должен был решить вопрос о том, сколько людей, зарегистрированных как умершие в Ковиде-19 и официально признанных умершими от около 17.000 действительно умер от Ковида-19.

Суд принял доказательства и пришел к следующему выводу Суждение от 19 мая 2021 года заключили, что от Covid-19 умерло всего 152 человека.

Согласно обычной интерпретации, каждый умерший человек, у которого был положительный тест ПЦР в течение последних 28 дней или который был зарегистрирован как контактное лицо, должен быть учтен как умерший Covid-19.

11 ноября 2020 года Апелляционный суд Лиссабона рассмотрел апелляцию на карантинные меры, которые были предписаны на основании результатов ПЦР-теста. В 34-страничном решении СуждениеВ отчете, основанном на ряде научных источников, критикуется карантинный режим в связи с сомнительной достоверностью процедуры ПЦР-теста.

Центр отчетности для уточнения случаев смерти после вакцинации CORONA 

Ассоциация Врачи и ученые за здоровье, свободу и демократию e.V. предлагает на своем сайте широкий спектр информации, советов и предложений, касающихся вскрытия умерших после коронной вакцинации. Здесь же можно скачать PDF Опубликовано. Среди прочего, прямо указывается на то, что вскрытие должно проводиться в соответствии с рекомендациями

Профессор д-р Арне Буркхардт
Патологическая лаборатория Ройтлинген
Obere Wässere 3-7
72764 Ройтлинген

должны быть выполнены.

В совет ассоциации входят профессор Сухарит Бхакди, доктор медицины, специалист в области микробиологии и эпидемиологии инфекций, почетный профессор Университета Иоганна Гутенберга в Майнце, руководитель Института медицинской микробиологии и гигиены с 1991 по 2012 год, доктор Рональд Вайкль, доктор медицины, гинеколог, профессор Штефан Хомбург, профессор государственных финансов Университета Лейбница в Ганновере и Даниэла Фолькингер, психологический консультант, учитель, Thurmansbang.

Остеопатия и коронная вакцинация

Йенс Оскамп*, остеопат из Кельна, написал следующую информацию для пациентов, в которой говорится о рисках, связанных с применением векторных и мРНК-вакцин в связи с остеопатическим лечением, и, следовательно, причинно исключает вакцинированных людей.

„С сожалением сообщаю вам, что люди, получившие так называемые мРНК- и векторные вакцины против SARS CoV2, не могут лечиться у меня. В отличие от традиционной вакцинации, это методы генной инженерии, которые манипулируют собственными клетками организма для производства частей вируса с целью вызвать иммунный ответ организма. Такие "вакцины" разрешены только в чрезвычайных ситуациях. Исследования перекрестных реакций с другими лекарствами и методами лечения практически не проводились. (Видео - проф. д-р Хокертц, 2020 г.)

В связи с этим при остеопатическом лечении возникают следующие проблемы:

Пока неясно, на какие области тела влияет образование тромбоза. Хорошо известный церебральный венозный тромбоз как побочный эффект возникает потому, что кровь в этой области тела течет относительно медленно (Чен и др. 2021). Однако медленно текущая кровь встречается и в других частях тела. Там также могут образовываться тромбы. (Кадхода, 2021). Если, например, кровеносные сосуды венозной системы ног становятся более проницаемыми в результате применения остеопатических техник, то первоначально образовавшиеся тромбы могут вырваться наружу и, в худшем случае, привести к тромбоэмболии легочной артерии. Образование тромбов часто протекает бессимптомно.

Кроме того, нельзя исключать, что могут возникнуть и другие неконтролируемые иммунные реакции, как только патогенные микроорганизмы выйдут из тканей во время остеопатического лечения. В норме иммунная система справляется с этим без проблем. Однако чрезмерная реакция иммунной системы может привести к серьезным осложнениям и разрушению собственных тканей организма (Войданья и Харразянб, 2020), (Талотта, 2021).

Хорошее остеопатическое лечение устраняет застои в лимфатической системе. Однако в результате манипуляций с мРНК там накапливается неестественное количество специфических антител (Номер 2020). Не исключено, что будут иметь место значительные реакции (Хотес и др. 2020), как только эти ткани изменяются во время остеопатического лечения. Нервная система также может быть затронута, как, например, в случае лицевого паралича (Шемер и др. 2021),(Реноулд и др., 2021) или проблемы с глазами из-за Застойный сосочек (Немецкое офтальмологическое общество, 2021 г.) показывают.

Дополнительные проблемы возникают из-за наночастиц, используемых в мРНК-вакцинах (Чен и др. 2021). Помимо прочего, они приводят к вакуолизации (практически образованию отека на клеточном уровне) некоторых видов тканей, особенно печени. Это признак того, что соответствующие клетки погибли в результате реакции с наночастицами (Видео - доктор Ванесса Шмидт-Крюгер, 2021 г.*). Здесь также неясно, что происходит, когда жидкость из этих "отеков" или мертвые ткани попадают в кровоток в результате применения остеопатических техник.

*Локальные ссылки на скачивание видеороликов доктора Ванессы Шмидт-Крюгер следующие здесь (Видео 1_2) и здесь (Видео 2_2) доступно.

Если вы уже подверглись генетическим изменениям в результате применения мРНК/векторных вакцин, я бы попросил вас снова записаться ко мне на прием не ранее чем через 10 месяцев после проведения этих мероприятий. Тогда мы обсудим, какие лабораторные анализы и процедуры визуализации необходимы для исключения осложнений. (например, обследование на наличие застойного сосочка - Немецкое офтальмологическое общество, 2021 г.)
Многократные инъекции увеличивают интенсивность и вероятность описанных выше корреляций. Поэтому я оставляю за собой право отказаться от лечения даже по истечении 10 месяцев.

Сильная иммунная система как альтернатива вакцинации требует знаний!!! Я рекомендую следующие видеоматериалы:

• Д-р нат. Маркус Штарк - Укрепление иммунной системы и защитных сил организма
• Доктор Матиас Рат - Покончить с нынешней пандемией - предотвратить будущие пандемии!
• Профессор д-р Йорг Шпиц - Витамин D - шутка или надежда„

• Сайт Йенса Оскампа (в настоящее время обновляется)*

Поправка к Основному закону о защите от инфекций

В соответствии с резолюцией, опубликованной немецким Бундестагом 22 июня 2021 года Печатная продукция 19/30938 становится к 23.07.2023 ОТСУТСТВИЕ гарантированного Конституцией права на физическую неприкосновенность!

' Статья 9
Поправка к Закону о защите от инфекций
§ 36 (12) Закона о защите от инфекций от 20 июля 2000 года (BGBl.
I p. 1045), который был в последний раз изменен статьей 1 Закона от 28 мая 2021 года
(BGBl. I p. 1174) изменен следующим образом:
" (12) Лицензия, выданная на основании предложения 1 параграфа 8 или предложения 1 параграфа 10
Постановление вступает в силу не позднее чем через год после отмены
Определение эпидемиологической ситуации национального значения по
Бундестаг Германии в соответствии с § 5 абзац 1 предложение 2. До
Постановление, изданное на основании пункта 8 предложение 1 или пункта 10 предложение 1, может быть также изменено после снятия эпидемиологической ситуации государственного значения".

Статья 10
Ограничение основных прав
Через статью 9 основные права на физическую неприкосновенность (статья 2 параграф 2 предложение 1 Основного закона), свобода личности
(Статья 2 (2) предложение 2 Основного закона), свобода передвижения (Статья 11
пункт 1 Основного закона) и неприкосновенность жилища (статья 13 пункт 1 Основного закона) ограниченный.

7. бывшая статья 9 становится статьей 11, а пункт 2 излагается в следующей редакции:
(2) "Статьи 1, 2, 6, 7 под номерами 1, 2 и 4 и статья 8 вступают в силу в июле 2023 года".

Оценка 109 исследований, посвященных ношению масок

20 апреля 2021 года была опубликована оценка 109 исследований, посвященных медицинским аспектам ношения масок во время пандемии. Международный журнал экологических исследований и общественного здравоохранения опубликованный, который здесь в формате PDF в оригинале (на английском языке) и здесь доступны для скачивания в немецкой версии.

Исследователи пришли к выводу, который они сами не считали возможным при таком объеме повреждений.

В дополнение к уже известным негативным эффектам следует обратить внимание на синдром истощения, вызванный маской (MIES).

Последствия МИЭС могут включать нарушение концентрации внимания, мышления и речи, снижение частоты сердечных сокращений и дыхания, глубины дыхания, что, в свою очередь, может привести к повреждению кровеносных сосудов и коронарных артерий, а впоследствии к неврологическим и сердечным заболеваниям. Долгосрочные последствия все еще являются предметом постоянных исследований.

ВОЗ - Изменение рекомендаций по вакцинации детей

В Версия от 3 июня 2021 года, рекомендация не вакцинировать детей в настоящее время, так как все еще нет надежных доказательств вакцинации детей против Ковид-19, тем более что у них, как и у подростков, обычно более легкое течение болезни по сравнению со взрослыми. Обычные рекомендованные прививки для детей следует продолжать.

В текущая версияопубликованном 20 июня 2021 года, в вышеприведенный отрывок были внесены изменения, согласно которым, несмотря на то, что упоминаются более легкие формы заболевания и вакцинация не обязательно должна проводиться, если дети не входят в группу риска, для составления общей рекомендации по вакцинации необходимо больше информации.
Тем не менее, Pfizer BioNTech определена как подходящая для детей старше 12 лет. Детям в возрасте от 12 до 15 лет, входящим в группы риска, также будет предложена эта вакцина, наряду с другими приоритетными группами.
Как и в старой версии, указывается, что пока нет достаточных данных об исследованиях с участием детей. Соответствующие рекомендации будут выпущены, как только появятся новые данные.

Измененные фрагменты выделены желтым цветом в вышеуказанных документах.

Согласно Решение СТИКО о 6-м обновлении рекомендаций по вакцинации против COVID-19 и соответствующем научном обосновании в Эпидемиологический бюллетень 23/2021 рекомендуется (в соответствии с текущими рекомендациями ВОЗ) "вакцинировать детей и подростков с уже имеющимися заболеваниями мРНК-вакциной "Комирнаты" (BioNTech/Pfizer) в связи с предполагаемым повышенным риском тяжелого течения заболевания COVID-19". должно быть выполнено. "Применение "Комирнаты" у детей и подростков 12-17 лет без предсуществующих заболеваний в настоящее время в целом не рекомендуется, но возможно после медицинского освидетельствования и при наличии индивидуального желания и принятия риска."

PEI - Отчет о безопасности

Статус 10.06.2021

PEI (Paul-Ehrlich-Institut), федеральный орган Министерства здравоохранения, обязанный соблюдать инструкции, публикует так называемые отчеты о безопасности используемых вакцин и их побочных эффектах с интервалом в несколько недель.

RKI (Институт Роберта Коха), независимый высший федеральный орган, обязанный выполнять директивы в соответствии с Ст. 87 п. 3 предложение 1 GG. В его состав входит "несколько научных комиссий, например, Постоянная комиссия по вакцинации, которая разрабатывает рекомендации по вакцинации. Она также отвечает за обработку и координацию содержания федеральных отчетов по здравоохранению и за разрешение импорта и использования эмбриональных стволовых клеток человека".

Краткое описание дел:

Дополнительную информацию об этих органах можно найти на сайте Федеральное министерство здравоохранения.

База данных США VAERS приводит следующие цифры для США:

Для сравнения: с момента начала вакцинации против дифтерии, кори, паротита, краснухи, полиомиелита и столбняка в США умерло 4050 человек. Первая вакцина от дифтерии была впервые разрешена в Германии в 1936 году, вакцина от кори - в США в 1963 году, вакцина от паротита и краснухи - в 1969 году, вакцина от полиомиелита - в 1955 году, вакцина от столбняка - в 1930 году.

То есть, правительственное определение "Безопасный" и "высокоэффективный" Заявленные вакцины Covid-19, по имеющимся в США данным, привели к 150 % таких смертей в течение шести месяцев(!), чего все вышеперечисленные вакцины вместе взятые не достигли за шесть-восемь десятилетий!

Эффективность вакцин Covid-19

Начиная с 1 июня 2021 года, RKI указывает в своем FAQ, касающемся мРНК-вакцин: "Как долго сохраняется защита от вакцинации, пока неизвестно. Защита начинается не сразу после вакцинации, и некоторые привитые люди остаются незащищенными".

Что касается вакцин на основе переносчиков, то сообщается: "Как долго сохраняется защита от вакцинации, пока неизвестно. Защита начинается не сразу после вакцинации, и некоторые привитые люди остаются незащищенными".

В связи с этим возникает вопрос о том, насколько оправданы "побочные реакции" и "смерти", зафиксированные в отчетах о безопасности PEI или других базах данных, если открыто признается, что нет ни немедленной защиты, ни защиты после нескольких вакцинаций, и нет никакой информации о продолжительности возможной защиты.

Архивные взносы:

Часто задаваемые вопросы - тесты Corona

Сообщение от 31 марта 2021 08:43

Тестирование" - это почти ежедневный спутник в наши дни. И часто возникает вопрос, какие тесты, как и с какой значимостью проводить. Ниже приведен список доступных методов и свойств тестов:

ПЦР-тест

... используется для обнаружения РНК SARS-CoV-2, то есть части генетического материала вируса Covid-19, но не для обнаружения активного, то есть реплицирующегося вируса.

Чтобы обнаружить специфическую флуоресцентную линию, генетический материал, содержащийся в образце, должен быть амплифицирован. Частота прохождения амплификации представлена так называемым значением Ct (cycle-threshold value).

В идеале это значение Ct документируется в отчете о результатах лабораторных исследований.

Положительный ПЦР-тест со значением Ct 30 ... 35 указывает на низкую вирусную нагрузку, а значение Ct >35 - на очень низкую вирусную нагрузку.

Например, значение Ct, равное 25, указывает на значительную вирусную нагрузку. (Источник: ПЦР-тест - значение Ct Актуальность)

Однако, поскольку значения Ct не документированы и не стандартизированы в практике различных лабораторий, а некоторые работают со значениями Ct 40 и выше (вплоть до 50), результаты ПЦР-тестов не являются ни сопоставимыми, ни значимыми. Риск увеличения числа ложноположительных результатов теста возрастает с увеличением значений Ct, что влечет за собой все негативные последствия, такие как Ланцет сообщается в связи с расследованием в Великобритании.

Недаром рекомендации ВОЗ всегда оценивать результат ПЦР-теста в контексте имеющихся симптомов заболевания и клинической диагностики.

Тест на антиген

...предназначен для выявления острой инфекции (белковые структуры коронавируса), но требует высокой вирусной нагрузки. Поэтому требуется подтверждение последующим ПЦР-тестом (с низким значением Ct).

Список автомобилей со специальным разрешением в Германии (Срок действия истекает в середине мая 2021 года) можно найти на сайте Федерального института лекарственных средств и медицинских изделий (BfArM) по адресу BfArM - Тесты на антигены со специальным разрешением.

Тест может привести к ложноположительным результатам, если тестовое оборудование хранилось при температуре ниже рекомендованной, а затем было использовано.

Анализ на антитела (анализ крови - Elisa-тест / экспресс-тест)

... обнаруживают специфические антитела, вырабатываемые организмом в ответ на коронавирус.
При этом не имеет значения, был ли иммунный ответ (образование выявленных антител) вызван предшествующей инфекцией Covid-19 или вакцинацией против Covd-19.

Интервью с доктором Грайнером, лабораторная диагностика, Вена

Covid-19 - Что могут рассказать антитела.

Искоренить Covid-19?

Сообщение от 31 марта 2021 09:06

Можно ли уничтожить вирус?

- Сколько времени прошло, прежде чем вирус кори был (наполовину) "побежден"?

Первая вакцина против кори с инактивированной расщепленной вакциной была разрешена в США в 1963 году и в дальнейшем постоянно совершенствовалась. Тем не менее, спустя почти 60 лет корь все еще не искоренена (источник: Вирус кори).

- Сколько времени потребовалось, чтобы искоренить вирус полиомиелита?

Первая прививка от полиомиелита с использованием инактивированного вируса была сделана в 1955 году (источник: Вакцинация против полиомиелитаВ 2015 году, спустя 60 лет(!), ВОЗ объявила полиомиелит искорененным.

И сегодня считается, что разработанные всего за несколько месяцев вакцины, использующие новые векторные или мРНК-технологии, которые не были успешно протестированы на животных или людях в рамках традиционных испытаний I... III, о побочных эффектах и долгосрочных побочных эффектах которых не сообщалось, и которые были выпущены на рынок только с чрезвычайным разрешением, о котором не упоминается в формах согласия, способны победить или даже уничтожить вирус - и это за несколько месяцев!

Как и в случае с вирусами полиомиелита и краснухи, можно предположить, что для искоренения или хотя бы установления контроля над вирусом Covid-19 потребуется не менее двух поколений.

Хотим ли мы ввести изоляцию, обязательную вакцинацию (пока только косвенную), карантин, изоляцию, обязательные маски и т. д., и даже цифровую карту прививок?

Поэтому единственным гарантированно эффективным способом уничтожения вируса является либо блокировка, длящаяся почти 60 лет, либо удаление носителя вируса, то есть уничтожение каждого человека. Тогда выживание вируса также будет исключено.

B.t.w.: это также объясняет, почему вирус всегда старается не убивать своего хозяина, чтобы продолжать размножаться. Поэтому мутации всегда будут стремиться к оптимальному размножению, не становясь более опасными для хозяина. Однако, несомненно, вирусы могут стать смертельно опасными для людей, которые уже больны.

Как мы можем понять, что правительство делает?

Сообщение от03. Апрель 2021 22:11

Прежде чем попытаться ответить на этот вопрос, чтобы выработать один из возможных ответов, полезно взглянуть на 2012 год.

В 2012 году немецкий Бундестаг заказал исследование "Анализ рисков в сфере гражданской защиты", отчет о котором был опубликован 3 января 2013 года в виде печатного издания 17/12051, с которым можно ознакомиться по адресу Отчет об анализе рисков - Печатная продукция 17/12051 от 03.01.2013 можно вызвать и загрузить в формате PDF.

Глава 2.3 на странице 5 содержит тему "Анализ риска "Пандемия, вызванная вирусом Modi-SARS"".

Затем последовал 17-страничный документ под названием "Как мы берем COVID-19 под контроль", который был засекречен только для служебного пользования и опубликован на сайте Федерального министерства внутренних дел 20 мая 2020 года. Как мы контролируем COVID-19 была доступна и скачивалась. Сегодня он больше не доступен там, но доступен по этой резервной ссылке Засекреченный документ о месте происшествия COVID-19 из Федерального министерства внутренних дел.

Все предыдущие, текущие и будущие действия федерального правительства в связи с COVID-a9 вытекают из этого.

Нынешние попытки правительства постепенно ограничить влияние всех вышестоящих институтов на решения канцлера, исключить их, лишить законодательную власть ее гарантированной Конституцией функции, структурные кадровые изменения в судах ФРГ - все это идет в том же направлении, что и в 1933 году. Однако на этот раз нет союзников, способных установить новый Основной закон, который положил бы конец этим усилиям!

EMA - Фоны

Сообщение от 20 апреля 2021 02:43

Здесь представлены связи между функциями EMA (Европейского агентства по лекарственным средствам) и карьерой и возникшим конфликтом интересов президента EMA Эмера Кука, о чем сообщает epochtimes.de 7 апреля 2021 года: Президент EMA Эмер Кук в течение многих лет был лоббистом крупнейшей европейской фармацевтической организации

Избыточная смертность

Сообщение от 20 апреля 2021 08:09

Проблема избыточной смертности - постоянная тема. Помимо нехватки коек интенсивной терапии, аргумент о чрезмерной смертности является постоянным спутником для оправдания мер, предписанных правительством.

Можно подумать, что собственные цифры Федерального статистического управления должны быть известны на федеральных пресс-конференциях (см: Число смертей в марте 2021 года: 11 % ниже среднего показателя за предыдущие годы).

Тем не менее, господин Ханно Каутц, пресс-секретарь министра здравоохранения Йенса Шпана, знает о том. Федеральная пресс-конференция от 19.04.2021 ничего не сказал об этих цифрах. На вопрос господина Райтшустера: "Господин Каутц, согласно данным Федерального статистического управления, в прошлом месяце у нас был низкий уровень смертности. В марте умерло на 11 процентов меньше людей, чем в среднем за 2017-2020 годы. Как вы это объясните?", он просто отвечает: "Я не комментирую цифры, которых я раньше не видел" и "Вы приводите очень конкретную цифру, которую я не знаю, контекст которой мне неизвестен. Я не могу комментировать это в данный момент".

В связи с этим возникает вопрос: если эти цифры настолько неинтересны, если они даже не признаны или не известны, почему они постоянно приводятся в качестве обоснования для принятия все более жестких мер?