Lymská borelióza - Huaier prístup pre pacientov ARLA (Antibiotiká rezistentné Lyme artritída)

Čas čítania 17 zápisnice

Aktualizované - 2. február 2026

Lymskú boreliózu spôsobuje Borrelia burgdorferi, špirálovitá baktéria, ktorá môže Lymská borelióza (známa aj ako borelióza).

Je to jeden z mála patogénov, ktoré sú vedecky fascinujúce a zároveň predstavujú najťažšie bakteriálne infekcie v imunológii a klinickej praxi:

• Nezvyčajná genetika: Lineárny chromozóm a komplexný plazmidový systém
• Majster imunitnej invázie: VlsE antigénna variácia, inhibícia komplementu, biofilm
• Multiorgánové patogény: Môže ovplyvniť takmer všetky orgánové systémy
• Špecialista na vytrvalosť: Môže spôsobiť chronické infekcie, ktoré trvajú roky
• TLR2 dominancia: Spúšťa masívny zápal (viac ako Toll-like receptor 4)
• Autoimunitný potenciál: Vedie k postinfekčnej autoimunite (ARLA)

Väčšina ľudí s lymskou artritídou sa vylieči po liečbe antibiotikami. Približne 10% však na túto liečbu nereaguje a vyvinie sa u nich tzv. boreliová artritída. Lymská artritída rezistentná na antibiotiká (ARLA).

Tieto 10% sa delia na

• 50% so spontánnou remisiou (dočasný alebo trvalý ústup príznakov ochorenia) za x rokov
• 30% do DMARD (lieky modifikujúce ochorenie) / Biologické lieky (pôsobiť proti špecifickým cieľovým štruktúram imunitného systému)
• 20% chronický a rezistentný na liečbu

Najprv sa vysvetľuje patogenéza (príčina ochorenia), konvenčné možnosti liečby a potom prístup k liečbe pomocou účinných látok huby Huaier.

Patogenéza

Priama invázia:

• Väzba kolagénu/dekorínu prostredníctvom DbpA/B - (umožňuje patogénu prichytiť sa na štruktúry bohaté na kolagén, čo je dôležité pre samotnú inváziu do hostiteľa a kolonizáciu patogénu v hostiteľovi)
• Väzba fibronektínu prostredníctvom BBK32 - (umožňuje dynamické posilnenie väzobnej kapacity patogénu prostredníctvom tvorby polymerizovaného fibronektínu v závislosti od mechanickej záťaže (napr. v krvnom riečisku): čím vyššia, tým silnejšia)
• Nepriame poškodenie tkaniva v dôsledku vyvolanej imunitnej reakcie

Spúšťanie imunitného systému (dominantný TLR2):

• Povrchové lipoproteíny (OspA, OspC, OspE) → aktivácia TLR2/6 (včasná imunitná odpoveď, ale aj patogenéza, pretože môžu spustiť nadmerné zápalové reakcie)
• Peptidoglykány → aktivácia TLR2 (vedie k silnej zápalovej reakcii a aktivácii vrodeného a adaptívneho imunitného systému)
• Vedie k masívnemu Aktivácia NF-κB/MAPK (vedie k silnému uvoľneniu prozápalové cytokíny ako TNF-α, IL-6 a IL-1β, ktorý zintenzívňuje zápalovú reakciu pri borelióze)
• Masívne produkcia prozápalových cytokínov

Imunitná invázia:

• Inhibícia komplementu (OspE, OspF - Povrchové proteíny baktérie sa viažu na regulačný proteín H komplementového systému, a tým zabraňujú aktivácii komplementu, ktorý by inak baktériu zničil.
  Zdá sa, že OspF zohráva úlohu v sebaochrane proti vlastnému patogénu u kliešťov: myši imunizované OspF vykazovali zníženie počtu spirochét až o 90%. Zdroj: Čiastočná deštrukcia Borrelia burgdorferi v kliešťoch, ktoré sa prisali na myši imunizované OspE alebo OspF)
• Antigénová variabilita (VlsE - variabilná hlavná sekvencia podobná proteínu Expresia - zabraňuje rozpoznaniu imunitným systémom)
• Tvorba biofilmu (vlastná produkcia) extracelulárna polymérna látka na vlastnú ochranu patogénu)
• Vnútrobunková perzistencia (možné vo forme spirochét (skupina gramnegatívnych, špirálovitých, anaeróbnych alebo fakultatívne anaeróbnych baktérií, vrátane pôvodcov syfilisu a leptospirózy) - ukrývajú sa vo vnútri infikovanej bunky a môžu tam zostať bez príznakov celé mesiace a roky)

Autoimunita (postinfekčná):

• Krížová reaktivita medzi OspA a ľudskými proteínmi (napr. LFA-1) - (molekulárna mimikry: vedie k autoimunitne udržiavanému zápalu, aj keď patogén už bol odstránený.
  Silná odpoveď T-buniek u geneticky predisponovaných pacientov je spojená s nadmernou produkciou prozápalových cytokínov (napr. TNFα, IFNγ), ktorý udržiava zápalový proces)
• Šírenie epitopov (Po počiatočnej imunitnej reakcii proti antigénom borélií, ako napr. OspA pretrvávajúci zápal vedie k rozpadu tkaniva a uvoľňovaniu telu vlastných proteínov.
  Tie sú potom tiež rozpoznané a prezentované imunitným systémom, pričom imunitná odpoveď sa rozšíri na nové, pôvodne cudzie epitopy nezávislé od antigénu. Tento proces je charakterizovaný nedostatkom regulačných IL-10 čo môže viesť k nekontrolovanej autoimunite).
• Perzistentné peptidoglykány spúšťajú autoreaktívne T-bunky (Zložky bakteriálnej bunkovej steny patogénu môžu zostať v tkanivách, ako je pečeň alebo kĺby, aj po úspešnej antibiotickej liečbe a naďalej stimulovať imunitný systém. Ovplyvňujú tiež energetický metabolizmus imunitných buniek a podporujú tvorbu prozápalových proteínov, čo následne zvyšuje autoimunitu)

Konvenčné formy liečby

NSAIDS

Nesteroidné protizápalové lieky (NSAID) sú lieky, ktoré zmierňujú zápal, zmierňujú bolesť a znižujú horúčku, ale na rozdiel od kortikosteroidov nie sú steroidy.
Na rozdiel od steroidov NSAID nezvyšujú mieru infekcie.

Neselektívne inhibujú enzýmy COX (cyklooxygenáza)-1 a COX-2 produkujúce prostaglandíny a tromboxán.
Zatiaľ čo COX-1 je vždy aktívny (ak je neaktívny alebo inhibovaný, spôsobuje napr. žalúdočné vredy, problémy s obličkami a sklon ku krvácaniu), COX-2 je počas zápalu regulovaný.
Blokovanie COX-2 vedie k požadovaným účinkom, napr. k zníženiu zápalu a bolesti, zníženiu horúčky.

Keďže neselektívne NSAID inhibujú oba enzýmy rovnako, majú aj vyššie uvedené nežiaduce (vedľajšie) účinky.

NSAID majú len symptomatický účinok. Patogén je stále prítomný a aktívny, zápalové mediátory (prozápalové cytokíny) sa naďalej nerušene produkujú a erózia chrupavky pokračuje.

Najbežnejšie účinné látky neselektívnych NSAID sú

• Kyselina acetysalicylová
• Diklofenak
• Ibuprofén
• Indometacín
• Ketoprofén
• Meloxikam
• Naproxen
• Piroxicam

Najbežnejšie selektívne účinné látky inhibítorov (COX-2) sú

• Celekoxib
• Etorikoxib

Rofekoxib (z dôvodu zvýšeného rizika srdcového infarktu) a valdekoxib boli stiahnuté z trhu.

COX-2 selektívne NSAID sa nesmú podávať pacientom s ischemickou chorobou srdca (ICHS) alebo po infarkte, pretože tieto ochorenia zvýhodňujú.

DMARD

Kategória DMARD zahŕňa látky, ktoré nielen zmierňujú príznaky (napríklad NSAID), ale aj aktívne spomaliť alebo zastaviť progresiu ochorenia a imunitný systém z dlhodobého hľadiska.

Príklad pacienta ARLA - NSAID a DMARDs

Pacient: 42-ročný muž s ARLA (monartritída kolena po borelióze)

Počiatočné:

• Naproxen 500 mg 2x denne
• Omeprazol 20 mg raz denne (ochrana žalúdka)

Bolesť 7/10
Kĺbový výpotok 200 ml

Po 2 týždňoch:

Bolesť 4/10 (lepšia „pohoda“)
Kĺbový výpotok stále 180 ml
Opuchy sa sotva zlepšia

Eskalácia na DMARD:

• + metotrexát 15 mg/týždeň

alebo

• + biologiká (TNFi alebo JAKi)

Po 8-12 týždňoch kombinovanej liečby:

Bolesť 0-1/10
Kĺbový výpotok < 50 ml
Obnovenie mobility
Remisia dosiahnutá!

Biologické lieky

Biologické lieky sú biotechnologicky vyrábané väčšie molekuly podľa vzoru ľudských proteínov, nukleových kyselín alebo protilátok, ktoré sa nemôžu podávať vo forme tabliet z dôvodu predčasného rozkladu žalúdočnou kyselinou, ale len vo forme podkožných injekcií alebo infúzií. Perorálne sa užívajú iba inhibítory JAK.
Môžu mať regulačný účinok na cytokíny, receptory alebo imunitné bunky. Inzulín je tiež (1982 prvý) biologický liek.

V kontexte ARLA sú rozdelené do štyroch hierarchií

1. voľba - Inhibítory TNF-α (TNFi) - Odpoveď s 50-70% po 4-8 týždňoch

• Adalimumab
• Infliximab
• Etanercept

2. voľba - Inhibítory IL-6 (IL-6i) - Odpoveď pri 50-60% po 4-12 týždňoch

• Tocilizumab
• Sarilumab

Účinný aj u pacientov, ktorí nereagujú na TNFi (~30-50% pacientov)

3. voľba - Inhibítory JAK (JAKi) - Reakcia už po 2-4 týždňoch - stále vo vývoji
Blokujú JAK1 (primárny, silný), JAK2 (sekundárny, slabý) a TYK2 (sekundárny, slabý), preto sa STAT3 nemôže fosforylovať, a preto zostáva neaktívny a gény závislé od IL-6 sa neprepisujú. Na druhej strane JAK3 nie je blokovaný, čo je pozitívne pre lepšiu obranu proti infekcii (zdroj - plný text s nákladmi): Chronická lymská artritída. Klinické a imunogenetické odlíšenie od reumatoidnej artritídy).

• Upadacitinib
• Baricitinib
• Tofacitinib

4. voľba - Depletory B-buniek - Odpoveď pri 40-50% - len pre non-respondérov TNFi + IL-6i + JAKi

• Rituximab

Huba Huaier - alternatíva?

Stránka Štúdia Tanaka objasňuje účinok účinných látok spoločnosti Huaier predovšetkým vo vzťahu k rakovine všetkého pôvodu (s výnimkou nádorov mozgu, pretože veľké molekuly účinných látok nie sú schopné prejsť cez hematoencefalickú bariéru).
K dispozícii je samostatná Príspevok, aj s Pokyny na dávkovanie a Zdroj dodávok granúl použitých v štúdii s 32 polysacharidmi %.

Štúdie ukázali, že účinné zložky huby Huaier majú širokú škálu čisto regulačných a programových vlastností. Sú schopné obnoviť nesprávne nasmerované gény do ich pôvodného rozsahu funkcií a dokonca ich preprogramovať smerom k normálnej funkcii.

Gény sa môžu zapínať alebo vypínať a regulovať alebo znižovať. Všetky stavy, ktoré nie sú v normálnom rozsahu, majú za následok zodpovedajúco nadmerné alebo inhibované reakcie na signály. Účinné látky Huaier dokážu selektívne obnoviť individuálne správne regulačné správanie.

Existujú mechanistické paralely s ARLA, a preto existujú štyri kritické molekulárne intervenčné body, v ktorých môže Huaier uplatniť svoj účinok v patogenéze ARLA:

Inhibícia dráhy NF-κB (signalizácia plazmatickej membrány)

Pri postinfekčnej lymskej artritíde sa po úspešnej antibiotickej liečbe borélií tzv. perzistentné peptidoglykány, zložky bunkovej steny mŕtvych borélií, v synoviálnej tekutine a v tkanive kĺbu. Tieto peptidoglykány sú neustále rozpoznávané imunitným systémom, najmä Toll-like receptor 2 (TLR2), ktorý je lokalizovaný na povrchu makrofágov, dendritických buniek a iných buniek vrodenej imunity.

Keď TLR2 rozpozná perzistentné peptidoglykány, spustí sa signalizačná kaskáda, ktorá vedie k aktivácii klasického NF-κB signálna dráha vedie. K tomu dochádza prostredníctvom náboru adaptorových proteínov, ako sú napr. TIRAP a MyD88 na aktivovaný receptor TLR2.
Tieto adaptorové proteíny potom naberajú komplex kináz vrátane Komplex IKK (inhibítor κB kinázy), ktorý je inhibičným proteínom IκBα fosforylované, a teda označené na proteazomálnu degradáciu. Pri degradácii IκBα sa Dimér transkripčného faktora p50/p65 sa uvoľňuje z NF-κB a môže sa premiestňovať do bunkového jadra.

Hneď ako je NF-κB prítomný v bunkovom jadre, viaže sa na väzobné miesta κB DNA v promótorových oblastiach prozápalových cytokínov a iniciuje ich masívnu transkripciu. To vedie k nepretržitej, trvalej produkcii TNF-α, IL-6, IL-1β, IL-8 a ďalšie chemokíny, ako napr. MCP-1 a KC.
U pacientov s ARLA nie je tento proces samoúčelný. Pokračuje týždne, mesiace a roky, pokiaľ sú prítomné peptidoglykány. To je hlavný problém: neexistuje nová infekcia, s ktorou by bolo potrebné bojovať, ale imunitný systém zostáva zaseknutý v zápalovom režime.

Ako môže Huaier tento proces prerušiť:

Huaier je bohatý na β-glukány a ďalšie Polysacharidy, ktoré sa viažu na iný receptor ako TLR2, konkrétne na tzv. Receptor dektínu-1 (Dektín-1 je Receptor pre lektín typu C, ktorý je exprimovaný predovšetkým na makrofágoch a dendritických bunkách). Keď sa β-glukány z Huaier naviažu na Dectin-1, tiež aktivujú NF-κB, ale alternatívnou, menej prozápalovou signálnou cestou.
Namiesto klasického Trasa TIRAP/MyD88 Podobne ako pri signalizácii TLR2 sa signalizácia uskutočňuje prostredníctvom Syk kináza a Karta9, čo vedie k „regulovanému“ signálu NF-κB.

Okrem toho spoločnosť Huaier pracuje prostredníctvom miRNA sprostredkovaná Mechanizmy, ktoré vedú k zníženiu samotných zložiek NF-κB. Špecifické mikroRNA, ktoré sú regulované Huaierom (ako napr. miRNA-223, miRNA-146a a iné), môžu priamo degradovať mRNA podjednotiek IKK a RelA (podjednotka p65 NF-κB). To znamená, že v bunkách je menej celkového komplexu NF-κB, ktorý sa môže aktivovať, aj keď sú stále prítomné perzistentné peptidoglykány a stimulujú TLR2.

Praktickým výsledkom tohto Huaierovho dvojitého zásahu je, že sa výrazne znižuje nepretržitá aktivácia NF-κB peptidoglykánmi. Zníži sa produkcia TNF-α, zníži sa produkcia IL-6 a zníži sa produkcia IL-1β. Klinicky to vedie k rýchlemu zníženiu C-reaktívneho proteínu (CRP), ktorý je proteínom akútnej fázy indukovaným NF-κB.
Pri menšom množstve TNF-α a IL-6, ktoré pôsobia ako chemokíny, sa kĺbový výpotok vstrebáva rýchlejšie, pretože sa znižuje nábor leukocytov do kĺbu. Pacienti uvádzajú rýchle zníženie opuchu a bolesti v prvých 1 - 2 týždňoch po začatí liečby liekom Huaier. To je v súlade s potlačením NF-κB.

Modulácia dráhy JAK/STAT (endozomálna signalizácia + spätná väzba IL-6)

ARLA je nadprodukcia Interferóny typu I (interferón-α a interferón-β), ktorý je známy ako „Amplifikačná slučka IFN“ je označený. Toto nie je klasická signalizácia TLR2, o ktorej sme práve hovorili v súvislosti s NF-κB. Namiesto toho sa to deje prostredníctvom inej cesty: perzistentné borélie sú signalizované Makrofágy a dendritické bunky fagocytované. Keď sa dostanú do fagozómu, sú rozpoznávané endozomálnymi receptormi podobnými Toll, najmä TLR7, TLR8 a TLR9. Tieto receptory sa nachádzajú na vnútornom povrchu endozomálne/fagozomálne vezikuly a rozpoznať RNA a DNA borélií.

Keď sú TLR7/8/9 stimulované bakteriálnymi nukleovými kyselinami, získavajú adaptorový proteín MyD88 a/alebo TRIF a vedú k aktivácii interferón-regulujúcich faktorov, najmä IRF3 a IRF7. Tieto transkripčné faktory IRF potom vstupujú do jadra a iniciujú transkripciu génov interferónu typu I: spočiatku Interferón-β a po nej nasleduje sekundárna vlna Interferón-α.

Po uvoľnení IFN-α a IFN-β do synoviálnej tekutiny a krvi sa viažu na receptor interferónu-α/β (IFNAR), ktorý je prítomný prakticky na všetkých bunkách vrátane T-bunky, makrofágy a synoviálne fibroblasty.
Väzbou IFNAR sa k receptoru pripoja dve kinázy: JAK1 a TYK2. Tieto kinázy potom fosforylujú proteíny STAT STAT1 a STAT2 (nie STAT3 v tejto konkrétnej ceste). Fosforylovaný STAT1/STAT2 spolu s IRF9 komplex transkripčných faktorov, ktorý ISGF3 a prechádza do bunkového jadra.

V bunkovom jadre sa ISGF3 viaže na Prvky odpovede stimulované interferónom (ISRE) v promótorových oblastiach Interferónom stimulované gény (ISG). Tieto ISG zahŕňajú gény, ako napr. OAS (2′,5′-oligoadenylát syntetáza), MxA (Myxovírusový rezistentný proteín A), PBR (proteínkináza R) a mnohé ďalšie. Tieto gény sú masívne regulované a vytvárajú v bunkách „antivírusový stav“. To je normálne a adaptívne pri skutočnej vírusovej infekcii, ale pri ARLA je to maladaptívne, pretože neexistuje aktívna vírusová infekcia. Je to druh „falošného poplachu“.

Problém zhoršuje mechanizmus spätnej väzby: bunky produkujúce interferón produkujú viac interferónu, čo spúšťa ešte silnejšiu signalizáciu IFNAR v iných bunkách, čo zase vedie k väčšej transkripcii ISG, čo zase zvyšuje pravdepodobnosť väčšej produkcie IFN. Toto je tzv.„Amplifikačná slučka IFN„, ktorá je charakteristická pre postinfekčnú ARLA. Táto slučka je samoudržiavacia: aj po usmrtení všetkých živých borélií táto cesta pokračuje, pretože mŕtve baktérie a ich nukleové kyseliny sú stále fagocytované.

Tento stav IFN typu I zároveň vedie k aktivácii a expanzii T-buniek, najmä Bunky Th1 a neskôr aj Bunky Th17. Bunky Th17 sa aktivujú iným mechanizmom: potrebujú IL-6 v kombinácii s TGF-β. IL-6 je tiež produkovaný NF-κB, ale aj génmi stimulovanými interferónom. Existuje teda niekoľko ciest, ktoré vedú k IL-6.

Akonáhle je IL-6 prítomný vo významnom množstve, stane sa niečo zaujímavé: IL-6 sa viaže na svoj receptor (IL-6R) spolu s ko-receptorom nazývaným gp130 na povrchu T-buniek, synoviálnych fibroblastov a iných buniek. Táto väzba priťahuje JAK1 a JAK2 k receptoru. JAK1 a JAK2 potom fosforylujú proteín STAT STAT3. Touto fosforyláciou sa STAT3 aktivuje a vstupuje do bunkového jadra, kde sa viaže na väzobné miesta DNA a iniciuje transkripciu IL-17 a transkripčného faktora RORγt.

To vedie k masívnej expanzii buniek Th17, ktoré následne produkujú viac IL-17. IL-17 je vysoko prozápalový a pôsobí na synoviálne fibroblasty (tzv. FLS - fibroblastom podobné synoviocyty), ktoré produkujú ešte viac IL-6. Vzniká tak druhý systém spätnej väzby: IL-6 → expanzia Th17 → produkcia IL-17 → viac IL-6 z FLS → ešte viac Th17 → ešte viac IL-17. Podobne ako v prípade amplifikačnej slučky IFN, aj táto slučka sa opakuje sama a dáva ARLA jej chronický, ťažko kontrolovateľný charakter.

Ako môže Huaier tento proces prerušiť:

Huaier zasahuje do tejto dráhy JAK/STAT na zásadnejšej úrovni ako priame blokovanie JAK1 alebo JAK2 (keďže Inhibítory JAK ako Upadacitinib robiť). Namiesto toho Huaier pôsobí prostredníctvom transkripčnej regulácie sprostredkovanej miRNA. Špecifické mikroRNA, ktoré sú regulované Huaierovými polysacharidmi, ničia alebo degradujú samotnú mRNA proteínov JAK.

Dochádza k tomu prostredníctvom elegantného regulačného mechanizmu: keď sa Huaierove polysacharidy naviažu na Dectin-1 a stimulujú bunku signálmi, aktivuje sa nielen jedna signálna dráha, ale aj enzýmy spracúvajúce miRNA. Tie vedú k biogenéze viacerých kanonických a nekanonických miRNA. Niektoré z týchto miRNA, ako napr. miR-223, miR-146a a miR-34a, majú väzbové miesta v 3´ nepreloženej oblasti (3′-UTR) od JAK1, JAK2 a STAT3 mRNA.
Keď sa tieto miRNA hybridizujú s týmito sekvenciami, označia mRNA na degradáciu RNA interferenciou Komplex RISC (RNA-indukovaný umlčovací komplex). Výsledkom je, že mRNA je degradovaná a tieto proteíny už nie sú produkované tak efektívne.

V priebehu niekoľkých dní až týždňa po vystavení Huaierovi sa bunky jednoducho menej JAK1-, JAK2- a Proteín STAT3. Je to zásadnejšie ako len blokovanie kinázovej aktivity. Znamená to, že aj keď je receptor aktivovaný a snaží sa fosforylovať JAK, je menej molekúl JAK na fosforyláciu. Na stránke Reakcia na signalizáciu cytokínov závislých od JAK je preto výrazne znížená.

Toto zníženie expresie JAK preruší slučku amplifikácie IFN typu I. Aj keď sa TLR7/8/9 naďalej pokúšajú produkovať interferón, bunky produkujúce IFN-α/β majú menej JAK1/TYK2, takže STAT1/STAT2 môže byť fosforylovaný menej efektívne. To vedie k menšej aktivácii ISGF3, menšej transkripcii ISG, a teda menej „antivírusového stavu“.

Zníženie JAK1 a JAK2 zároveň prerušuje spätnú väzbu IL-6. Aj keď je IL-6 prítomný a viaže sa na IL-6R na T-bunkách, je menej JAK1 a JAK2 na fosforyláciu, preto je STAT3 menej fosforylovaný. Pri menej aktívnom STAT3 sa produkuje menej RORγt a IL-17, a preto sa bunky Th17 nerozširujú tak agresívne. To znamená menšiu produkciu IL-17, menšiu stimuláciu FLS na produkciu IL-6, - a slučka je prerušená.

Z laboratórneho hľadiska to vnímame ako Zníženie hladiny IFN-γ (marker aktivity Th1, ktorý je tiež regulovaný IFN typu I), Zníženie hladiny IL-6 (marker pre systém spätnej väzby IL-6) a Zníženie hladiny IL-17 (marker pre Th17). K tomu dochádza pomalšie ako k potlačeniu NF-κB (ktoré nastáva v priebehu niekoľkých dní) - trvá približne 2 - 4 týždne, kým sa účinky založené na miRNA plne prejavia, ale keď sa tak stane, sú trvalejšie.

Porovnanie: JAK1i (ako upadacitinib) vs Huaier:

A Inhibítor JAK1 ako Upadacitinib (obchodný názov Rinvoq) pôsobí úplne odlišným mechanizmom ako Huaier, hoci obe v konečnom dôsledku modulujú signálne dráhy JAK/STAT. Upadacitinib je malá molekula, ktorá môže byť priamo Väzbová kapsa na ATP . JAK1 kináza a fyzicky ich blokuje. Je to druh „mechanického inhibítora“.
Keď je JAK1 zablokovaný, nemôže už fosforylovať aminokyselinu tyrozín na proteínoch STAT bez ohľadu na to, ako veľmi sa receptor snaží aktivovať JAK. Účinok je rýchly: akonáhle sa upadacitinib vstrebe do krvného obehu a dostane sa do buniek, JAK1 je inhibovaný. To je dôvod, prečo majú inhibítory JAK rýchly nástup, zvyčajne 2 - 4 týždne do znateľného klinického zlepšenia.

Táto priama blokáda má však aj nevýhody. Inhibítory JAK1 neinhibujú len JAK1, ale aj ostatné kinázy JAK v rôznej miere, v závislosti od ich selektivity. Dokonca aj „JAK1-selektívne“ inhibítory do určitej miery slabo inhibujú JAK2 a TYK2. To vedie k Nežiaduce účinky, najmä zvýšené riziko Herpes zoster (pásový opar), pretože blokáda JAK3 narúša proliferáciu T-buniek, a tým aj kontrolu latentných vírusov, ako sú napr. Varicella zoster oslabuje. Celkovo vedie blokáda JAK2 k Aktivácia tromboembólie namiesto inhibície (najmä baricitinibu, ktorý blokuje JAK2 silnejšie).

Huaier funguje na úplne inej úrovni. Neblokuje priamo proteín JAK. Namiesto toho znížená to množstvo proteínu JAK, ktoré bunka vôbec produkuje. Dochádza k tomu prostredníctvom degradácie mRNA JAK sprostredkovanej miRNA. Výhodou je, že tento mechanizmus je jemnejší a možno aj fyziologickejší. Bunky jednoducho znižujú množstvo JAK, ktoré produkujú, namiesto toho, aby liek násilne blokoval proteín. Nevýhodou je, že tento proces je pomalší. Trvá niekoľko dní až týždeň, kým sa miRNA reguluje v dostatočnom množstve, a potom trvá ešte niekoľko dní, kým sa rozloží dostatočné množstvo mRNA JAK, aby hladina proteínu JAK výrazne klesla. To je dôvod, prečo má Huaier pomalší nástup, pravdepodobne 4 až 8 týždňov, kým sa dostavia viditeľné účinky na procesy závislé od JAK/STAT.

Ďalším dôležitým rozdielom je reverzibilita. Keď pacient prestane užívať upadacitinib, blokáda JAK sa skončí do 24-48 hodín, pretože polčas upadacitinibu je krátky. JAK1 sa opäť stáva aktívnym a môže fosforylovať STAT. To je užitočné, ak pacient trpí infekciami a potrebuje liek pozastaviť, ale znamená to tiež, že je potrebné neustále denné užívanie. Huaier môže mať dlhodobejší účinok, pretože regulácia na báze miRNA trvá dlhšie. Samotné miRNA majú dlhší polčas rozpadu ako malé molekuly a obnova proteínu JAK trvá dlhšie, keď sa expozícia lieku Huaier zastaví.

Ešte jemnejší rozdiel spočíva v špecifickosti. Upadacitinib je JAK1-selektívny, čo znamená, že silne blokuje JAK1, slabo blokuje JAK2 a sotva blokuje JAK3. To je vlastne cieľom selektivity JAK1, a to vyhnúť sa blokovaniu JAK3, aby sa lepšie zachovali funkcie T-buniek.
Huaier pravdepodobne znižuje JAK1, JAK2 a možno aj TYK2 viac alebo menej proporcionálne, v závislosti od toho, ktoré miRNA sú regulované. To by mohlo znamenať, že Huaier má širšia supresia JAK čo by mohlo byť dobré pre veci, ako je signalizácia IFN typu I (ktorá potrebuje TYK2), ale tiež potenciálne vedie k väčším účinkom JAK2 (teoreticky riziko tromboembólie).

Aktivácia PI3K/AKT (obnovenie mitochondrií + podpora Treg)

Tretím hlavným problémom ARLA je nielen pretrvávajúca produkcia prozápalových cytokínov, ale aj rozpad systémov, ktoré by za normálnych okolností tento zápal obmedzovali. Najdôležitejším systémom, ktorý kontroluje zápal, je populácia regulačných T-buniek (Tregs), najmä CD4+CD25+Foxp3+ Tregs.

U zdravých ľudí sú Tregs neoddeliteľnou súčasťou imunitného systému a pôsobia prostredníctvom produkcie protizápalových cytokínov, ako napr. IL-10 a TGF-β, ako aj priamym kontaktom medzi bunkami s cieľom indukovať prozápalové T-bunky (Efektorové T-bunky), ktoré sa majú potlačiť.
Tregs sú metabolicky veľmi aktívne a spoliehajú sa na oxidačnú fosforyláciu v ich Mitochondrie To znamená, že potrebujú funkčné mitochondrie a neustály prísun ATP. Potrebujú tiež schopnosť syntetizovať bielkoviny, najmä na výrobu Regulačný prepis proteínu Foxp3 a supresívnych cytokínov IL-10 a TGF-β.

U pacientov ARLA sa pokazilo niekoľko vecí. Po prvé, v dôsledku nepretržitej stimulácie TLR2 a TLR7/8 sa Chronicky zaťažené mitochondrie. Nepretržitá výroba ROS (reaktívne formy kyslíka) aktivovanými zápalovými bunkami oxiduje vnútornú mitochondriálnu membránu a poškodzuje komplexy v elektrónovom transportnom reťazci. Mitochondriálna DNA môže byť oxidovaná, čo vedie k chybnej transkripcii. Mitochondrie jednoducho nemôžu produkovať dostatok ATP na zásobovanie všetkých buniek v chronickom zápalovom stave.

Po druhé, prostredníctvom chronický Stresová situácia ER (pretože zápalové bunky neustále produkujú veľké množstvo cytokínov a Kapacita skladania proteínov z endoplazmatické retikulum je preťažená), je Kapacita syntézy bielkovín buniek sa globálne znižuje.
Ribozómy sú nástrojom na výrobu bielkovín, a keď je ER v strese, sú v strese aj ribozómy. V dôsledku toho sa nemôžu optimálne produkovať dôležité proteíny, ako sú Foxp3, IL-10 a TGF-β.

Po tretie, prostredníctvom všetkých týchto metabolických problémov sú Tregs jednoduchý nefunkčné. Hoci Tregs možno stále detegovať (ich počet je často dokonca zvýšený), ich schopnosť pôsobiť supresívne je výrazne znížená. Nemôžu produkovať dostatočné množstvo IL-10. Tregs preto nie sú schopné adekvátne potlačiť bunky Th17 a Th1. Pri menšom množstve IL-10 v prostredí nemôže dochádzať k protizápalovému „brzdeniu“ imunitného systému a Prozápalová „akcelerácia“ zostáva aktivovaná.

Ako Huaier aktivuje/obnovuje tento proces:

Huaier rieši tento problém prostredníctvom Signalizačná cesta PI3K/AKT na. Keď sa Huaierove polysacharidy naviažu na receptor Dectin-1, aktivujú nielen dráhy NF-κB a interferónu, ale aj PI3K (fosfoinozitid 3-kinázu). PI3K katalyzuje fosforyláciu fosfatidylinozitol-(4,5)-bisfosfátu (PIP2) na fosfatidylinozitol-(3,4,5)-trisfosfát (PIP3). PIP3 je „druhý posol“ - intracelulárna signálna molekula, ktorá priťahuje iné proteíny.

Proteín, ktorý je priťahovaný PIP3, je ACT (nazývaná aj proteínkináza B). AKT je produkovaná 3-fosfoinozitid-dependentnou proteínkinázou 1 (PDK1) je fosforylovaný a aktivovaný. Po aktivácii je AKT „hlavným regulátorom“ mnohých bunkových procesov. V súvislosti s ARLA sú obzvlášť dôležité dve funkcie AKT:

Po prvé, AKT aktivuje mTOR (mechanistic Target Of Rapamycin), veľký proteínový komplex, ktorý riadi transláciu mRNA a biogenézu ribozómov.
Keď AKT aktivuje mTOR, dochádza k dvom veciam: (1) mTOR fosforyluje S6K (ribozomálna S6 kináza), ktorá fosforyluje proteíny S6 v ribozómoch, čo vedie k zvýšeniu účinnosti translácie. (2) mTOR tiež fosforyluje 4E-BP1 (4E-Binding Protein 1), ktorý umožňuje väzbu 4E-BP1 na eIF4E a tým zvyšuje transláciu mRNA závislých od eIF4E.
Výsledkom je, že bunka môže produkovať viac proteínov za kratší čas. Pre Tregs to znamená, že teraz môžu môžu optimálne produkovať IL-10 a Foxp3, proteíny, ktoré potrebujú, mať tlmivý účinok.

Po druhé, AKT aktivuje biogenézu nových mitochondrií. Čiastočne je to spôsobené aktiváciou génu PGC1α prostredníctvom AKT.
PGC1α je takzvaný „hlavný regulátor“ biogenézy mitochondrií. Je to koaktivátor, ktorý spolupracuje s niekoľkými transkripčnými faktormi pri aktivácii génov, ktoré kódujú mitochondriálne proteíny.
S aktívnym PGC1α v bunkách sa vytvárajú nové mitochondrie. V priebehu niekoľkých týždňov to znamená, že Tregs môžu obnoviť svoje mitochondriálne populácie, staré, poškodené mitochondrie sú nahradené novými, funkčnými a schopnosť Tregs produkovať ATP je obnovená.

Zlepšením funkcie mitochondrií a lepšou syntézou proteínov získajú Tregs schopnosť efektívne pracovať. Môžu opäť produkovať významné množstvo IL-10. Vďaka IL-10 v synoviálnej tekutine možno potlačiť bunky Th17, inhibovať bunky Th1 a vyriešiť chronickú autoimunitu.

Ide o pomalý proces, biogenéza nových mitochondrií trvá týždne, ale je udržateľná. Zatiaľ čo potlačenie NF-κB Huaierom má rýchly účinok (dni) a modulácia JAK/STAT má strednodobý účinok (týždne), pri Aktivácia PI3K/AKT dlhý zásah, ktorý nezmení základné obnovuje metabolické podmienky pre imunitnú toleranciu.

Špecifické účinky so spoločnosťou ARLA:

U pacienta s ARLA v základnom stave pred Huaierovou terapiou sa vyskytuje niekoľko patologických znakov. Po prvé, mitochondrie v synoviálnych bunkách, makrofágoch a T-bunkách sú chronicky napadnuté. Elektrónový transportný reťazec nefunguje optimálne a syntéza ATP je znížená. To možno preukázať metabolickými testami, ako napr. Analýzy morských koníkov (ktoré merajú skutočnú mieru produkcie ATP). Pacienti s ARLA mali nižšiu mieru OXPHOS ako kontrolné osoby.

Po druhé, regulačné T-bunky (Tregs) sú početné. Možno ich identifikovať pomocou Prietoková cytometria sledovaním CD4+CD25+Foxp3+ markerov. Pacienti s ARLA majú často zvýšený absolútny počet Tregs, niekedy dokonca vyšší ako u zdravých jedincov. Dalo by sa očakávať, že viac Tregs povedie k lepšej supresii, ale opak je pravdou, pretože tieto Tregs sú dysfunkčné. Produkujú menej IL-10 na bunku, ich supresívna aktivita je nízka, a preto nedokážu účinne kontrolovať autoreaktívne T-lymfocyty.

Po tretie, pomer IL-10/IFN-γ je veľmi nevyvážený. U zdravých ľudí je IL-10 zvyčajne minimálne rovnako vysoký ako IFN-γ, ak nie vyšší. U pacientov s ARLA je IFN-γ vysoko zvýšený (stokrát vyšší v synoviálnej tekutine ako u zdravých ľudí) a IL-10 je nízky. Táto nerovnováha je pravdepodobne jedným z najlepších biologických markerov závažnosti ARLA.

Po štvrté, titre autoprotilátok sú zvýšené. Tie môžu byť Protilátky proti OspA (proti antigénu borélie, ale reakcia pretrváva), protilátky proti telu vlastným proteínom chrupavky, ako napr. Kolagén typu II a Aggrecan, niekedy aj Reumatoidný faktor a Protilátky anti-CCP.

Po začatí liečby Huaierom s dávkou 20 g/deň a niekoľkých týždňoch až mesiacoch pozorujeme nasledujúce zmeny:

Stránka normalizuje sa mitochondriálne dýchanie. To sa dá zmerať pomocou analýzy morských koníkov. Na stránke . Základné dýchanie a rýchlosť produkcie ATP sa zvýši na normálne hodnoty. Je to merateľné a reprodukovateľné. Mechanizmom je PI3K/AKT sprostredkovaná mitochondriálna biogenéza prostredníctvom indukcie PGC1α, ako je opísané vyššie.

Stránka Tregs sa stávajú funkčnými. Meranie je jemnejšie, ale existuje niekoľko ciest: zvyšuje sa produkcia IL-10 na Treg (možno merať pomocou intracelulárneho farbenia cytokínov a prietokovej cytometrie). Zvyšuje sa expresia Foxp3 (viac proteínu Foxp3 na bunku). Supresívna funkcia in vitro sa dá merať pomocou testov supresie. Keď sa Tregs pacientov s ARLA kultivujú spoločne s autoreaktívnymi T bunkami, Tregs lepšie potláčajú proliferáciu T buniek po Huaierovej terapii.

Stránka Pomer IL-10/IFN-γ sa výrazne normalizuje. Hladina IFN-γ sa často znižuje o 50-70% a hladina IL-10 sa zvyšuje o 100-200%. To vedie k pomeru, ktorý opäť vyzerá normálne, už nie je patologický pomer 1:100, ale bližšie k pomeru 1:1 alebo dokonca IL-10 prevláda.

Stránka Zníženie titrov autoprotilátok. Trvá to dlhšie, často 8 až 12 týždňov, ale titre neustále klesajú. Anti-OspA klesá ako prvá, protilátky proti telu vlastným proteínom chrupavky klesajú neskôr. Je to znak toho, že B-bunková odpoveď klesá v dôsledku normalizácie kontroly T-buniek (Tregs inhibujú B-bunkovú odpoveď).

Stránka Kĺbový výpotok je znížený. Je to najviditeľnejší znak a dá sa zmerať klinickým vyšetrením, obvodovým meraním alebo ultrazvukom. Pri väčšom množstve IL-10 a menšom množstve TNF-α/IL-6 sa znižuje chemotaxia leukocytov do kĺbu a existujúci výpotok sa reabsorbuje. Výpotok s objemom 200 - 300 ml sa môže znížiť na 50 - 100 ml alebo úplne vymiznúť.

Stránka klinické príznaky sa zodpovedajúcim spôsobom zlepšujúBolesť sa znižuje, pohyblivosť sa zvyšuje, pacienti môžu opäť používať svoje kĺby. Kvalita života sa výrazne zlepšuje. Mnohí pacienti ARLA opisujú, že po prvýkrát po rokoch môžu opäť vykonávať bežné každodenné činnosti (chodiť po schodoch, nakupovať, športovať).

Homeostáza ribozómov (hlavné zistenie Tanaka)

Štvrtý bod intervencie je nenápadný, ale potenciálne kritický, založený na Tanakových štúdiách o ribozomálnej dysfunkcii. Tu je hypotéza: pri ARLA vedie chronická, pretrvávajúca signalizácia TLR2 a TLR7/8 k chronickému stresu ER. Endoplazmatické retikulum (ER) musí neustále skladať a uvoľňovať veľké množstvá nových cytokínov a chemokínov, takže jeho proteostatázové systémy sú neustále preťažené.

Keď je ER vystavená chronickému stresu, bunka reaguje tzv. „odpoveďou na rozložené bielkoviny“ (UPR). UPR je mechanizmus prežitia, ale ak je chronicky aktivovaný, môže sa stať problematickým.
Jednou zo súčastí UPR je fosforylácia eIF2α (eukaryotický iniciačný faktor 2 alfa) HRI (Hemom regulovaná inhibičná kináza) alebo iné kinázy. Keď je eIF2α fosforylovaný, globálna rýchlosť syntézy proteínov sa znižuje. Je to adaptívne, pretože bunka by nemala skladať ešte viac proteínov, ak je ER už preťažená.

Keď sa Rýchlosť syntézy bielkovín je celkovo znížená, proteíny, ktoré sa za normálnych okolností musia produkovať nepretržite, aby sa udržala imunitná tolerancia, sa tiež neprodukujú optimálne. Patria medzi ne IL-10, TGF-β a Foxp3. Ide o pomerne veľké a štrukturálne zložité proteíny, ktoré si vyžadujú špeciálnu kvalitu ribozómov, aby sa optimálne zložili.

Okrem toho sa pri ER strese môžu poškodiť aj samotné ribozómy. Veľké ribozomálne podjednotky (60S) a malé ribozomálne podjednotky (40S) majú zložitú štruktúru a zloženie.
Keď je ER vystavená stresu a bunka produkuje príliš veľa nesprávne zložených proteínov, nesprávne zložené proteíny môžu interagovať s ribozomálnymi proteínmi a poškodiť ich, čo následne vedie k abnormálnej štruktúre ribozomálnej RNA, ako to Tanaka opísal vo svojej štúdii o očkovaní mRNA.

Ak sú ribozómy poškodené na štrukturálnej úrovni, môžu stále fungovať, ale nie optimálne. To môže mať za následok

• Chyby v preklade
• neefektívna syntéza bielkovín
• defektné proteíny, najmä štruktúrne zložité proteíny, ako je IL-10

Problém sa tak sám opakuje: slabé ribozómy → slabá syntéza IL-10 → menej IL-10 v prostredí → menšia imunitná tolerancia → viac zápalu.

Ako Huaier tento proces opravuje:

Huaier sa zaoberá homeostázou ribozómov prostredníctvom regulácie sprostredkovanej miRNA. Tanaka opísal, že Huaier prostredníctvom regulácie špecifických miRNA normalizované zloženie a štruktúra ribozomálnej RNA. Funguje to prostredníctvom týchto mechanizmov:

Po prvé, Huaier indukuje špecifické miRNA, ktoré inhibujú expresiu proteínov podieľajúcich sa na dysfunkcii ribozómov. Napríklad miRNA môžu znížiť expresiu proteínov, ktoré akumulujú nesprávne zložené proteíny v ribozómoch.

Po druhé, Huaier aktivuje autofágiu a proteazóm, na rozklad poškodených ribozomálnych proteínov a starých ribozómov. Čiastočne sa to uskutočňuje reguláciou miRNA génov autofágie. Pri aktivovanej autofágii sa z buniek odstraňujú staré, poškodené ribozómy.

Po tretie, aktivácia PI3K/AKT Huaierom (o ktorej sme hovorili v poslednom bode) Aktivuje mTOR, ktorá nielen stimuluje transláciu, ale aj biogenézu nových ribozómov. To znamená, že zatiaľ čo staré ribozómy sú odstraňované autofágiou, nové, funkčné ribozómy prostredníctvom syntézy rRNA závislej od mTOR a expresie ribozomálnych proteínov sa vyrába.

Výsledkom po niekoľkých týždňoch je Normalizácia populácie ribozómov. Bunky majú teraz funkčné ribozómy so správnou štruktúrou. To znamená, že IL-10, TGF-β a Foxp3 sa môžu opäť optimálne syntetizovať. Na stránke Proteíny, ktoré sa vyrábajú, sú Štrukturálne správne a funkčne efektívne.

Ide o Huaierov najjemnejší a pravdepodobne najpomalší zásah. Úplné obnovenie kvality ribozómov trvá 4 až 8 týždňov alebo dlhšie. Je to zásadné, pretože sa obnovuje schopnosť buniek produkovať práve tie proteíny, ktoré sú nevyhnutné pre imunitnú toleranciu.

Mechanistické porovnanie Huaiera s biologickými látkami

Aspekt	TNFi	IL-6i	JAK1i	HUAIER
NF-κB zablokovaný	Nepriamy (↓TNF)	Nepriamy (↓IL-6)	Nepriamy (↓JAK1)	Priame (potlačenie NF-κB)
JAK/STAT zablokovaný	Nie	Čiastočné (cesta IL-6)	ÁNO (veľmi silné)	JA (prostredníctvom miRNA, slabšie)
Aktivácia PI3K/AKT	Nie	Nie	Nie	ÁNO (SILNÉ!)
Kvalita ribozómov	Nie	Nie	Nie	JA (regulácia miRNA)
Podpora Treg	Slabé	Slabé	Slabý (JAK3 nie je blokovaný)	STARK (prostredníctvom PI3K/AKT + ribozómov)
Zvýšenie IL-10	Minimálne	Minimálne	Nízka	STARK (prostredníctvom ribozómov + podpora Treg)
Nástup	4-8 Wo	4-12 Wo	2-4 Wo	4-8 Wo (odhad)
Riziko infekcie	Zvýšený počet	Mierne	Mierne	NÍZKA (bez imunosupresie!)

Odporúčanie dávkovania pre ARLA v pokročilom štádiu

ARLA v pokročilom štádiu s napadnutím viacerých orgánov svojou závažnosťou a systémovou záťažou zodpovedá najťažším prípadom rakoviny:

• Chronický zápal viacerých orgánov
• Autoimunitná zložka
• Viaceré samopodporujúce sa spätné väzby
• Mitochondriálna dysfunkcia
• Poškodenie ribozómov

Návrh na dávkovanie ARLA

Odporúčanie: 50-60 g/deň
Rozdelené na 3 účty, každý s odstupom 8 hodín
Tak ako pri všetkých prípravkoch, koncentrácia účinných látok je nevyhnutná na dosiahnutie zamýšľaného účinku. Keďže sa účinné látky v priebehu času v tele viac či menej rýchlo odbúravajú, je nevyhnutné presne dodržiavať časové intervaly medzi jednotlivými dávkami, aby sa udržala konštantná hladina účinných látok počas celého dňa!

Prečo 50 - 60 g/d namiesto napr. 40 g/d:

1. Závažnosť: Postihnutie viacerých orgánov zodpovedá štádiu IV rakoviny v štúdii Tanaka
2. Viaceré mechanizmy účinku: Všetky 4 mechanizmy sa musia riešiť súčasne
3. Závislosť od dávkyTanaka vykazuje jasnú závislosť od dávky bez toxicity
4. Časový faktor: Vyššie dávky by mohli umožniť rýchlejší nástup

Dávkovací režim (návrh):

• Fáza 1 (týždne 1-4)
  60 g/deň (rozdelené na 3x20 g)
  Zameranie: potlačenie NF-κB, začiatok modulácie JAK/STAT
  Náklady / mesiac (cca) 568,- Euro
• Fáza 2 (týždne 5-12)
  50 g/deň (3×16-17 g)
  Zameranie: Úplne preukázané účinky JAK/STAT, aktivácia PI3K/AKT
  Náklady / mesiac (cca) 473,- Euro
• Fáza 3 (mesiace 4-6)
  40 g/deň (3x13 g)
  Zachovanie, obnovenie ribozómov
  Náklady / mesiac (cca) 379,- Euro
• Dlhodobé uchovávanie
  20-30 g/deň (3x 7 .. 3x 10 g)
  Náklady / mesiac (približne) 189 ... 284,- Euro

Ďalšie relevantné články o rozsahu uplatňovania huby Huaier

• Základy a liečba rakoviny -> https://csiag.de/huaier-pilz-in-der-krebstherapie/
• Chronické ochorenia -> https://csiag.de/huaier-pilz-bei-chronischen-erkrankungen/