Μικροσκοπία σκοτεινού πεδίου (DFM)

Χρόνος ανάγνωσης 4 λεπτά

Η DFM είναι μια τεχνική ανάλυσης συστατικών του αίματος και μικροοργανισμών που είναι γνωστή από τον 17ο αιώνα.

Χρησιμοποιείται κλινικά για τη διάγνωση Spirochetes (αρνητικό κατά Gram, σπειροειδούς σχήματος, ενεργά κινούμενο Βακτήρια, πώς Leptospires, Treponemas) και είδη Plasmodium (Παράσιτα ελονοσίας), καθώς και για την ανίχνευση E.coli σε δείγματα νερού και το παθογόνο της ελονοσίας.

Μια άλλη εφαρμογή, η οποία δεν είναι επιστημονικά τεκμηριωμένη, είναι η λεγόμενη. Ανάλυση ζωτικού αίματος / μικροσκοπία σκοτεινού πεδίου κατά Enderlein.

Στη συνέχεια, θα παρουσιαστεί η ιστορία της DFM, οι τομείς εφαρμογής που έχουν αποδειχθεί επιστημονικά από μελέτες, καθώς και η θεωρία του Enderlein για την Πλεομορφισμός και σχετικές πληροφορίες.

Ιστορία

Antoni van Leeuwenhoek (1632 - 1723, Ολλανδός φυσικός επιστήμονας και σημαντικότερος μικροσκοπιστής), Robert Hooke (1635 - 1703, Άγγλος πολυμαθής) και Christiaan Huygens (1629 - 1695, Ολλανδός αστρονόμος, μαθηματικός και φυσικός) χρησιμοποιούσαν ήδη το DFM.

Με την πάροδο του χρόνου, τα οπτικά και οι τεχνικές αναπτύχθηκαν περαιτέρω, έτσι ώστε η DFM να είναι πλέον διαθέσιμη και για στερεοσκοπική και ηλεκτρονική μικροσκοπία σάρωσης.

Σε σύγκριση με την κανονική μικροσκοπία (Φωτεινό πεδίομικροσκοπία), όπου το προς εξέταση αντικείμενο βρίσκεται μπροστά από ένα ανοιχτόχρωμο φόντο, η DFM χρησιμοποιείται για την απεικόνιση διαφανών αντικειμένων, συμπεριλαμβανομένων των ζωντανών αντικειμένων, με ενισχυμένη αντίθεση (χωρίς τη χρήση τεχνικών χρωματισμού) μπροστά από ένα σκούρο φόντο.

Εδώ, μόνο το φως που εκτρέπεται ή διασκορπίζεται από το αντικείμενο κατευθύνεται μέσω του φακού στο μάτι του θεατή, επιτρέποντας ακόμη και στα μικρότερα σωματίδια να γίνουν ορατά. Απαραίτητη προϋπόθεση είναι μια απολύτως καθαρή αντικειμενοφόρος πλάκα, ώστε να αποφευχθεί η σκέδαση του φωτός λόγω ακαθαρσιών και, συνεπώς, η παραμόρφωση του αντικειμένου που πραγματικά εξετάζεται.

Μελέτες για την επιστημονικά αναγνωρισμένη χρήση της μικροσκοπίας σκοτεινού πεδίου

Διαγνωστικά για τη σύφιλη (πρωτογενής σύφιλη)

Είναι η μικροσκοπία σκοτεινού πεδίου ακόμη χρήσιμη για την πρωτογενή διάγνωση της σύφιλης στον 21ο αιώνα;

Από 806 δείγματα, 53,2% (429) ήταν θετικά για DFM. 48% από τους 429 ασθενείς είχαν αρνητικές ορολογικές εξετάσεις, υποδεικνύοντας ότι DFM ένα Έγκαιρη ανίχνευση εξακολουθεί να επιτρέπει πριν οι ορολογικές εξετάσεις γίνουν θετικές.

Μικροσκοπία μοριακού έναντι σκοτεινού πεδίου στη σύφιλη

Δοκιμές μοριακής και άμεσης ανίχνευσης για το Treponema pallidum υποείδος pallidum: Trepalmeundia: Ανασκόπηση της βιβλιογραφίας, 1964-2017

Σε ασθενείς με πρωτοπαθή σύφιλη, η ευαισθησία και η ειδικότητα της DFM σε σύγκριση με τις κλινικές διαγνώσεις και τα εργαστηριακά ευρήματα ήταν 75-100% και 94-100% αντίστοιχα. Στη δευτερογενή σύφιλη, η ευαισθησία ήταν 58-71% με ειδικότητα 100%.

Ανίχνευση ελονοσίας με χρήση μικροσκοπίας σκοτεινού πεδίου

Μικροσκοπία σκοτεινού πεδίου για την ανίχνευση της ελονοσίας σε μη χρωματισμένα φιλμ αίματος

Το σε διάφορα Είδη Plasmodium η χρωστική ουσία παρουσιάζει σκέδαση του φωτός όταν τα επιχρίσματα αίματος εξετάζονται με τη χρήση DFM. Η τεχνική προσφέρει Πλεονεκτήματα ταχείας διάγνωσης, αυξημένη ευαισθησία και Προσαρμοστικότητα για εργασίες πεδίου.

Διαγνωστικά της λεπτοσπείρωσης

Αξιολόγηση της μικροσκοπίας σκοτεινού πεδίου, της καλλιέργειας και των ορολογικών κιτ του εμπορίου στη διάγνωση της λεπτοσπείρωσης

Κανένα από τα κλινικά δείγματα δεν παρουσίασε θετικότητα με DFM. Η μελέτη καταλήγει στο συμπέρασμα ότι η DFM και η καλλιέργεια έχουν περιορισμένο όφελος με το Διάγνωση της λεπτοσπείρωσης με την ορολογική εξέταση να παραμένει ο βασικός πυλώνας.

Διαγνωστικά διαγνωστικά εντερικής καμπυλοβακτηρίτιδας

Μικροσκοπία σκοτεινού πεδίου ανθρώπινων κοπράνων για την πιθανή διάγνωση της εντερίτιδας Campylobacter fetus subsp. jejuni

Σε 1.377 δείγματα κοπράνων, η ευαισθησία, η ειδικότητα και η προγνωστική αξία της παρατήρησης της κινητικότητας του Campylobacter ήταν 36%, 99% και 62%, αντίστοιχα. Το Ευαισθησία ήταν υψηλότερο, όταν τα δείγματα εντός 2 ωρών (50%) σε σύγκριση με μετά από 2 ώρες (28%).

Οπτικοποίηση βακτηριακών σημαιών

Εξέταση της βακτηριακής μαστίγωσης με μικροσκοπία σκοτεινού πεδίου

Μέθοδος για την οπτικοποίηση μη χρωματισμένων βακτηριακών Flagella περιγράφεται από την DFM. Δεδομένου ότι μπορούν να φανούν μεμονωμένα νήματα, ένα γένος όπως το Σαλμονέλα (περιτριχοειδώς αιωρημένα) διακρίνονται εύκολα από τα πολικά αιωρημένα γένη, όπως τα Pseudomonas μπορούν να διακριθούν.

Απεικόνιση αιμοφόρων αγγείων στην παθολογία

Η μικροσκοπία σκοτεινού πεδίου ενισχύει την ορατότητα της ενδοθηλιακής χρώσης CD31

Η ορατότητα του Καθιζήσεις πρωτεϊνών DAB που προκαλούνται από υπεροξειδάση μπορεί να ενισχυθεί με την τεχνική DFM λόγω της ικανότητάς του να σκεδάζει το φως, καθιστώντας εύκολη την ανίχνευσή του.

Μικροκυκλοφορία του δέρματος με απεικόνιση σκοτεινού πεδίου Sidestream

Απεικόνιση του σκοτεινού πεδίου με τη βοήθεια του ρεύματος: η εξέλιξη της απεικόνισης της δερματικής μικροκυκλοφορίας σε πραγματικό χρόνο και η πιθανή εφαρμογή της στη δερματολογία

Σκοτεινό πεδίο Sidestream (SDF) Imaging είναι το πιο πρόσφατο εργαλείο για την Έρευνα μικροκυκλοφορίας. Αποτελεί μια απλή και μη επεμβατική τεχνική απεικόνισης με χαμηλό κόστος, καλή φορητότητα και υψηλή ευαισθησία που αποδίδει λεπτές, καλά καθορισμένες εικόνες

Μικροσκοπία σκοτεινού πεδίου κατά Enderlein

Η υπόθεση ...

Günther Enderlein (1872 - 1968, Γερμανός ζωολόγος και εντομολόγος) δημοσίευσε πάνω από 500 άρθρα για την έρευνα των εντόμων και απέκτησε διεθνή αναγνώριση.

Ο Antoine Béchamp (1816 - 1908, Γάλλος χημικός, γιατρός και φαρμακοποιός) είχε προηγουμένως αναπτύξει την υπόθεση της Φλεομορφισμός(πολυμορφία). Είχε την ιδέα ότι όλα τα ζωικά και φυτικά κύτταρα περιείχαν μικροσκοπικούς κόκκους (μικροένζυμα) από τους οποίους θα μπορούσαν να αναπτυχθούν παθογόνα βακτήρια υπό ορισμένες συνθήκες

Κατά τη διάρκεια του Πρώτου Παγκοσμίου Πολέμου, ο Enderlein υιοθέτησε αυτή την υπόθεση. Οι συγκριτικές μορφολογικές μελέτες σε βακτήρια οδήγησαν στη δημοσίευση του κύριου βακτηριολογικού του έργου το 1925. Bactieria cyclogeny ως μια προσπάθεια να καθοριστεί μια νέα βακτηριακή ταξινόμηση με βάση αυτό.

Με βάση την ιδέα του Enderlein ότι τα παράσιτα, οι ιοί και τα βακτήρια, καθώς και η περαιτέρω ανάπτυξή τους, εξαρτώνται από την τιμή του pH του αίματος, ίδρυσε το λεγόμενο Κυκλογένεση των βακτηρίων (αλλαγή του σχήματος των βακτηρίων που εξαρτάται από το pH). Χαρακτήρισε ολόκληρη τη διαδικασία ανάπτυξης με τον όρο „κύκλος“.

και η αντίφαση

Η υπόθεση του Enderlein είχε ήδη διαψευστεί κατά τη διάρκεια της ζωής του. Έτσι, το 1931 από τον Emmy Klieneberger (1892 - 1985, Γερμανοβρετανός μικροβιολόγος - συν-ανακαλύπτης του Μυκόπλασμα) .
Έγραψε:

„Ο G. Enderlein κατασκεύασε ένα συστηματικό μοντέλο του κύκλου ανάπτυξης ενός βακτηρίου, το οποίο δεν βασίζεται σε πραγματικές παρατηρήσεις αλλά σε θεωρητικές εικασίες. Οι εικασίες του Enderlein πρέπει επομένως να απορριφθούν πλήρως, καθώς στερούνται κάθε βάσης στην πραγματικότητα.„.

Ferdinand Cohn (1828 - 1898, Γερμανός βακτηριολόγος και βοτανολόγος - ανακάλυψε τα ενδοσπόρια στα βακτήρια) θεωρείται ο θεμελιωτής της σύγχρονης βακτηριολογίας και της συστηματικής ταξινόμησης των βακτηρίων γύρω στο 1870. Μονοφορισμός, το Λουί Παστέρ (1822 - 1895, Γάλλος βιοχημικός, χημικός, μικροβιολόγος και φυσικός) και Ρόμπερτ Κοχ (1843 - 1910, Γερμανός βακτηριολόγος και γιατρός) ισχύουν ακόμη και σήμερα.

Η θεραπευτική προσέγγιση του Enderlein

Ο Enderlein ανέπτυξε θεραπευτικά σκευάσματα ως τα λεγόμενα ισοπαθητικά φάρμακα, παρόμοια με την ομοιοπαθητική „όμοια με όμοια“ (αρχή της ομοιότητας), τα οποία προορίζονται για τη θεραπεία ασθενειών που προκαλούνται από παθογόνους μικροοργανισμούς χρησιμοποιώντας το ίδιο παθογόνο.

Θεραπεία Sanum

Ίδρυσε τη SANUM το 1933, σήμερα γνωστή ως Sanum Kehlbeck εμπορικές συναλλαγές. Αποκάλεσε τη μορφή της θεραπείας του Θεραπεία Sanum.
Η εταιρεία Sanum-Kehlbeck διανέμει σκευάσματα που παρασκευάζονται σύμφωνα με τις ομοιοπαθητικές αρχές σε δραστικότητες D3 - D7 (δεκαδικές αραιώσεις- D7 = 1:10.000.000, που αντιστοιχούν σε 1 μέρος αρχικού υλικού προς 99.999.999 μέρη νερού/αλκοόλης), τα οποία μπορούν να πωλούνται χωρίς απόδειξη της αποτελεσματικότητας σύμφωνα με τη νομοθεσία της ΕΕ, συμπεριλαμβανομένων των αμπούλων για έγχυση, οι οποίες επίσης δεν διαθέτουν άδεια κυκλοφορίας σύμφωνα με τον γερμανικό νόμο περί φαρμάκων (AMG).

Εγγραφή σύμφωνα με την AMG

Όλα τα παρασκευάσματα είναι διαθέσιμα μόνο σύμφωνα με § 38 AMG καταχωρημένα, δηλαδή ο κατασκευαστής δεν απαιτεί ούτε απόδειξη της θεραπευτικής αποτελεσματικότητας ούτε δήλωση των ενδείξεων (τομείς εφαρμογής). Συνεπώς, τα παρασκευάσματα πρέπει να φέρουν την ένδειξη

„Εγγεγραμμένο ομοιοπαθητικό φάρμακο,
επομένως χωρίς ένδειξη θεραπευτικής ένδειξης“

φθορά.

Υποχρέωση ποιοτικού ελέγχου

Ο κατασκευαστής είναι υπεύθυνος για τους ποιοτικούς ελέγχους. Το 2023, η Sanum αναγκάστηκε να διακόψει τη διάθεση διαφόρων διαλυμάτων έγχυσης στις 28 Μαρτίου, 6 Απριλίου και 14 Απριλίου λόγω μόλυνσης με ορατά σωματίδια. ανάκληση. Η δημόσια ανακοίνωση έγινε στις 17.04.2023.

Παρενέργειες

Ωστόσο, δεδομένου ότι δεν υπάρχουν αποδείξεις για θεραπευτικά αποτελέσματα (από 01.2026), έχουν εντοπιστεί διάφορες παρενέργειες:

• Γυναίκα 70 ετών, έλαβε Notakehl D4 (3×1 κάψουλα ημερησίως) για 6 μήνες, εμφάνισε οξεία διάμεση νεφρίτιδα με νεφρική ανεπάρκεια (Πηγή)
• Γυναίκα 39 ετών με λευκωματουρία, αιματουρία και πυρετό μετά την εφαρμογή Notakehl (Πηγή)
• Περαιτέρω περιπτώσεις πιθανολογούμενων πνευμονικών αντιδράσεων μετά τη λήψη Mucokehl D5, Nigersan D5 και Notakehl D7 (πηγή όπως προηγουμένως)